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细胞凋亡过程中细胞骨架改变的激光共聚焦显微镜观察 被引量:10
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作者 吴波 高清 +2 位作者 刘琦 石群立 孟奎 《电子显微学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期361-366,共6页
目的:了解细胞凋亡过程中细胞骨架的形态学改变。方法:应用高浓度全反式维甲酸诱导卵巢癌细胞凋亡,激光共聚焦显微镜观察经荧光染色的细胞微管蛋白的形态学变化。结果:凋亡早期,微管蛋白在荧光相由正常按一定方向分布的丝网状结构变成... 目的:了解细胞凋亡过程中细胞骨架的形态学改变。方法:应用高浓度全反式维甲酸诱导卵巢癌细胞凋亡,激光共聚焦显微镜观察经荧光染色的细胞微管蛋白的形态学变化。结果:凋亡早期,微管蛋白在荧光相由正常按一定方向分布的丝网状结构变成杂乱分布的网状结构,晚期呈细颗粒状分布,荧光强度随凋亡发展而逐渐变弱。讨论:在凋亡过程中,细胞骨架随凋亡发展出现相应的形态学改变,凋亡早期,细胞骨架在分布上出现变化,伴随细胞形态出现变化,凋亡晚期,细胞骨架蛋白发生降解,此时的细胞形态改变是不可逆的。 展开更多
关键词 细胞凋亡 微管蛋白 激光共聚焦显微镜 免疫荧光染色
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蔡司LSM 7DUO NLO激光共聚焦显微镜的应用和管理 被引量:7
2
作者 许佳玲 王晓红 +3 位作者 罗剑文 龙钊 陈云凤 张以顺 《实验室研究与探索》 CAS 北大核心 2017年第6期281-285,共5页
介绍了蔡司LSM7DUO NLO激光扫描共聚焦显微镜三个组成部分单光子、双光子和快速扫描的硬件配置和软件功能以及成像和图像分析的应用,例如单、双光子图像叠加,多视野拼接拍摄、三维重构等功能在生命科学研究中的应用。介绍管理该仪器的... 介绍了蔡司LSM7DUO NLO激光扫描共聚焦显微镜三个组成部分单光子、双光子和快速扫描的硬件配置和软件功能以及成像和图像分析的应用,例如单、双光子图像叠加,多视野拼接拍摄、三维重构等功能在生命科学研究中的应用。介绍管理该仪器的一些方法和心得,保障仪器为教学和科研工作提供更好的服务。 展开更多
关键词 激光共聚焦显微镜 双光子 图象采集
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激光共聚焦显微镜和改良微孔板法观察细菌生物膜形成 被引量:17
3
作者 宋菲 向军 陆树良 《中国感染与化疗杂志》 CAS 2010年第5期368-372,共5页
目的利用激光共聚焦显微镜(CLSM)和改良微孔板法观察细菌生物膜形成,探索细菌生物膜检测的有效手段。方法烧伤患者植入性导管分离的金葡菌、鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌,经体外分别培育24、48、72h和5d后,先后用CLSM和改良微孔板法,观... 目的利用激光共聚焦显微镜(CLSM)和改良微孔板法观察细菌生物膜形成,探索细菌生物膜检测的有效手段。方法烧伤患者植入性导管分离的金葡菌、鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌,经体外分别培育24、48、72h和5d后,先后用CLSM和改良微孔板法,观察细菌生物膜形成和黏附的过程与特点。结果鲍曼不动杆菌、金葡菌、铜绿假单胞菌形成生物膜的时间、生物膜的形态与特点都有显著的差异。结论 CLSM和改良微孔板法是观察和检测细菌生物膜形成过程的有效手段。 展开更多
关键词 细菌生物膜 激光共聚焦显微镜 改良微孔板法
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激光共聚焦显微镜技术进展 被引量:11
4
作者 马亢 周庆峰 +2 位作者 施传信 裴冬丽 闫永峰 《农学学报》 2016年第6期30-35,共6页
激光共聚焦显微镜技术发展迅速,新技术主要集中于从提高分辨率、降低光毒性、提高扫描速度、活体观察等方面提升激光共聚焦显微镜的功能,各种新技术带来更多的生物学应用潜力,因此有必要梳理分析各项新技术的原理。本研究归纳分析了光... 激光共聚焦显微镜技术发展迅速,新技术主要集中于从提高分辨率、降低光毒性、提高扫描速度、活体观察等方面提升激光共聚焦显微镜的功能,各种新技术带来更多的生物学应用潜力,因此有必要梳理分析各项新技术的原理。本研究归纳分析了光门控、白激光、Ga As P光谱检测器、超高分辨率、活细胞工作站、光片成像系统、多光子、相干反斯托克斯拉曼散射、激光捕获显微切割等技术的原理和应用潜力。并指出了现有技术在扫描速度、兼容性、样品适用性等方面的不足,展望了下一步的研究方向。该论文供研究人员在熟悉和了解新技术的基础上更加清晰的获知"基于什么样的技术能够达到什么样的生物学功能",进而获得更多的实验思路。 展开更多
关键词 激光共聚焦显微镜 实验室管理 大型精密仪器 超高分辨率
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利用激光共聚焦显微镜观察骨骼肌肌纤维中的钙火花现象 被引量:3
5
作者 杨勇骥 汤莹 +2 位作者 王慧娥 肖强 黄洁 《电子显微学报》 CAS CSCD 2005年第1期57-60,共4页
钙火花(Ca2+sparks)现象是近年来在骨骼肌、心肌兴奋收缩偶联研究中发现的重要生理现象,但目前确切的机制还不清楚。我们利用激光扫描共聚焦显微镜对经Flou 3AM染色的人工剥离的蟾蜍骨骼肌肌纤维进行连续扫描分析,在骨骼肌肌纤维中捕获... 钙火花(Ca2+sparks)现象是近年来在骨骼肌、心肌兴奋收缩偶联研究中发现的重要生理现象,但目前确切的机制还不清楚。我们利用激光扫描共聚焦显微镜对经Flou 3AM染色的人工剥离的蟾蜍骨骼肌肌纤维进行连续扫描分析,在骨骼肌肌纤维中捕获到钙火花现象,并对钙火花现象的发生进行了初步探讨。 展开更多
关键词 骨骼肌 肌纤维 钙火花 激光共聚焦显微镜 观察 生理现象 激光扫描聚焦显微镜 CA^2+ 发现 捕获
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激光共聚焦显微镜及其在肉瘤研究中的应用 被引量:4
6
作者 张红英 步宏 杨光华 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 2000年第4期321-323,共3页
关键词 肉瘤 激光共聚焦显微镜 LSM 间叶组织
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激光共聚焦显微镜的样品前处理技术研究 被引量:5
7
作者 王志颖 饶玉春 刘敏 《安徽农业科学》 CAS 2013年第26期10602-10603,10621,共3页
激光共聚焦显微镜是近代生物医学图像应用中最重要的仪器之一,在定量共聚焦图像分析、定量荧光测量、三维重组分析生物结构等方面具有重要的作用。该研究主要介绍了实验室中最常用的激光共聚焦显微镜的几种样品前处理技术,即FM4-64染色... 激光共聚焦显微镜是近代生物医学图像应用中最重要的仪器之一,在定量共聚焦图像分析、定量荧光测量、三维重组分析生物结构等方面具有重要的作用。该研究主要介绍了实验室中最常用的激光共聚焦显微镜的几种样品前处理技术,即FM4-64染色法、BFA处理、双分子荧光互补技术(BiFC)等,同时介绍这些方法的原理、使用范围以及在相关领域中的应用情况等,以期更好地将激光共聚焦显微镜技术应用于科研实践中。 展开更多
关键词 激光共聚焦显微镜 样品 前处理
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利用激光共聚焦显微镜对茉莉酸甲酯诱导后细胞形态学检测 被引量:3
8
作者 齐凤慧 詹亚光 《实验技术与管理》 CAS 北大核心 2010年第8期54-55,62,共3页
通过PI-Hoechst两种荧光染料染色,利用激光共聚焦显微镜观察茉莉酸甲酯诱导后茶条槭细胞膜的通透性,通过红色和蓝色荧光颜色观察细胞核的变化。该方法在悬浮细胞培养后,直接用于实验,不受去除细胞壁、固定等的限制。叙述了具体的实验方... 通过PI-Hoechst两种荧光染料染色,利用激光共聚焦显微镜观察茉莉酸甲酯诱导后茶条槭细胞膜的通透性,通过红色和蓝色荧光颜色观察细胞核的变化。该方法在悬浮细胞培养后,直接用于实验,不受去除细胞壁、固定等的限制。叙述了具体的实验方法和实验结果。 展开更多
关键词 茉莉酸甲酯 悬浮细胞 激光共聚焦显微镜
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激光共聚焦显微镜观察光敏剂ALA和HMME在肿瘤细胞的胞内分布 被引量:1
9
作者 肖卫东 陈炜 +1 位作者 葛海燕 陈祖林 《激光杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期95-95,共1页
目的:研究不同光敏剂在肿瘤细胞的胞内分布,观察光敏剂的亚细胞光化学作用位点。方法:使用激光共聚焦显微镜观察光敏剂5一ALA和HMME在结肠癌SW480细胞及红白血病K562细胞的胞内分布。结果:5一ALA及HMME在进入肿瘤细胞早期主要分布于胞膜... 目的:研究不同光敏剂在肿瘤细胞的胞内分布,观察光敏剂的亚细胞光化学作用位点。方法:使用激光共聚焦显微镜观察光敏剂5一ALA和HMME在结肠癌SW480细胞及红白血病K562细胞的胞内分布。结果:5一ALA及HMME在进入肿瘤细胞早期主要分布于胞膜,而在后期主要以颗粒状荧光分布于胞质,5一ALA分布相对弥散,HMME分布相对集中,核内分布极少。结论:光敏剂5一ALA和HMME主要分布于肿瘤细胞的胞质,这表明它们的光化学作用位点首先在胞质内细胞器,而不是细胞核。 展开更多
关键词 激光共聚焦显微镜 光敏剂 分布 肿瘤
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激光共聚焦显微镜研究人胚胎视网膜发育过程中波形纤维蛋白表达的差异 被引量:1
10
作者 张卉颖 李永平 +3 位作者 武正清 张文忻 蔡裕 张波 《眼科研究》 CSCD 北大核心 2006年第5期457-460,共4页
目的 研究波形纤维蛋白在人胚胎视网膜发育过程中表达的动态变化。方法 收集25例8~39孕周胎龄的胎儿眼球标本,5例正常成人眼球标本。冰冻连续切片,波形纤维蛋白抗体孵育,普通光镜及激光共聚焦显微镜观察视网膜。结果 25~28周波形... 目的 研究波形纤维蛋白在人胚胎视网膜发育过程中表达的动态变化。方法 收集25例8~39孕周胎龄的胎儿眼球标本,5例正常成人眼球标本。冰冻连续切片,波形纤维蛋白抗体孵育,普通光镜及激光共聚焦显微镜观察视网膜。结果 25~28周波形纤维蛋白在人胚视网膜Müller细胞上的表达上调。25周在视网膜神经节细胞层、内丛状层和内核层出现了长丝状阳性表达;28周附着于内界膜的锥状突起在神经节细胞层部位,与长丝状的阳性表达突起交错排列。部分阳性突起由附着点的内界膜直达外界膜,贯穿视网膜大部分区域,外界膜亦呈阳性反应。结论 波形纤维蛋白为观察Müller细胞在视网膜发育过程中分化和迁移的一个良好标记物。人视网膜Müller细胞基本发育成熟的时间为胚胎25~28周。 展开更多
关键词 波形纤维蛋白 视网膜 胚胎 激光共聚焦显微镜
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利用荧光探针和激光共聚焦显微镜显示玉米根冠细胞微丝分布与变化 被引量:1
11
作者 陈颖 郝秋娟 +1 位作者 杨虹 王立安 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2007年第3期101-104,共4页
利用罗丹明标记的鬼笔环肽为荧光探针,通过激光共聚焦荧光显微镜,观察了玉米根冠细胞中微丝的分布与变化。结果显示:脱落的玉米根冠细胞中存在微丝网络,纤细的微丝相互交织,并与荧光颗粒交叉相连,其中在细胞核、质体等细胞器周围较密集... 利用罗丹明标记的鬼笔环肽为荧光探针,通过激光共聚焦荧光显微镜,观察了玉米根冠细胞中微丝的分布与变化。结果显示:脱落的玉米根冠细胞中存在微丝网络,纤细的微丝相互交织,并与荧光颗粒交叉相连,其中在细胞核、质体等细胞器周围较密集,可见放射状微丝束,暗示微丝的功能与细胞核、细胞器的活动相关。细胞松弛素B可破坏微丝分布;来自玉米小斑病菌C小种的致病毒素对微丝网络也有专化破坏作用,并且它们对微丝的破坏作用随着浓度的增大而加强。 展开更多
关键词 根冠细胞 微丝 玉米小斑病菌C小种致病毒素(HMC) 激光共聚焦显微镜
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激光共聚焦显微镜样品制备方法(一)——细胞培养样品 被引量:10
12
作者 余礼厚 《电子显微学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期185-188,共4页
随着激光共聚焦显微镜在生物学研究中的广泛应用,绿色荧光融合蛋白能够提供蛋白质在细胞体内的精确时空信息。因此免疫荧光样品的制备也成为基本的细胞生物学实验方法。本文主要介绍在培养细胞中表达绿色荧光融合蛋白及免疫荧光样品的... 随着激光共聚焦显微镜在生物学研究中的广泛应用,绿色荧光融合蛋白能够提供蛋白质在细胞体内的精确时空信息。因此免疫荧光样品的制备也成为基本的细胞生物学实验方法。本文主要介绍在培养细胞中表达绿色荧光融合蛋白及免疫荧光样品的制备过程。 展开更多
关键词 绿色荧光蛋白 细胞培养 免疫荧光 激光共聚焦显微镜
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口腔移植材料与成骨细胞相容性的激光共聚焦显微镜观察 被引量:1
13
作者 李剑 龚苏俊 李瑞元 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期812-815,共4页
目的:观察不同处理的钛金属表面与成骨细胞的生物相容性。方法:利用共聚焦显微镜荧光信号通过物镜返回光电倍增管成像的原理,获取不透光的钛金属表面图像,对钛金属表面(打磨、喷砂、喷砂酸蚀表面)接种的成骨细胞骨架进行荧光标记,并用... 目的:观察不同处理的钛金属表面与成骨细胞的生物相容性。方法:利用共聚焦显微镜荧光信号通过物镜返回光电倍增管成像的原理,获取不透光的钛金属表面图像,对钛金属表面(打磨、喷砂、喷砂酸蚀表面)接种的成骨细胞骨架进行荧光标记,并用共聚焦显微镜获取荧光图像,观察细胞和钛金属表面的生物相容性,并且通过逐渐深入的多层扫描,探索细胞和移植材料结合的进一步信息。结果:喷砂表面适合成骨细胞的贴附和生长。结论:钛金属与成骨细胞的结合情况主要与金属表面的物理形态有关。 展开更多
关键词 激光共聚焦显微镜 成骨细胞
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激光共聚焦显微镜样品制备方法(二)——组织切片样品 被引量:9
14
作者 边玮 《电子显微学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期399-402,共4页
应用激光共聚焦显微镜技术对荧光标记的组织切片样品进行三维观察成像是生物学研究的常规手段。本文主要介绍实验室制备用于激光共聚焦显微镜成像的冷冻组织切片及免疫荧光标记过程。
关键词 冷冻组织切片 免疫荧光 激光共聚焦显微镜成像
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激光共聚焦显微镜对结冷胶微观结构的观察研究 被引量:1
15
作者 程小华 孟岳成 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期149-151,共3页
应用激光共聚焦显微镜研究了结冷胶的微观结构,阳离子、pH对结冷胶微观结构的影响。研究表明,含10mmol/LCaCl2,0.006%~0.01%浓度的低酰基结冷胶体系呈现弱凝胶网络结构,高酰基结冷胶不能形成类似的网络结构;Ca2+、K+对结冷胶的微观结... 应用激光共聚焦显微镜研究了结冷胶的微观结构,阳离子、pH对结冷胶微观结构的影响。研究表明,含10mmol/LCaCl2,0.006%~0.01%浓度的低酰基结冷胶体系呈现弱凝胶网络结构,高酰基结冷胶不能形成类似的网络结构;Ca2+、K+对结冷胶的微观结构影响类似,但是要达到最大的网络密集度,所需的K+浓度是Ca2+的25倍;加酸改变pH会对结冷胶的微观结构产生影响。 展开更多
关键词 激光共聚焦显微镜 结冷胶 微观结构
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激光共聚焦显微镜观察三磷酸肌醇对大鼠逼尿肌细胞内钙的影响
16
作者 王军 宋波 +1 位作者 金锡御 熊恩庆 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期78-80,共3页
目的探讨IP3/Ca2+信号转导过程与逼尿肌细胞内游离Ca2+浓度[Ca2+]i的关系。方法建立逼尿肌过度活动大鼠模型,利用激光共聚焦显微镜观察原代培养的逼尿肌稳定及逼尿肌过度活动大鼠逼尿肌培养细胞内钙荧光强度的变化以及10-5mol/L IP3及... 目的探讨IP3/Ca2+信号转导过程与逼尿肌细胞内游离Ca2+浓度[Ca2+]i的关系。方法建立逼尿肌过度活动大鼠模型,利用激光共聚焦显微镜观察原代培养的逼尿肌稳定及逼尿肌过度活动大鼠逼尿肌培养细胞内钙荧光强度的变化以及10-5mol/L IP3及其抑制剂肝素影响逼尿肌稳定大鼠逼尿肌培养细胞后细胞内钙荧光强度在有钙液及无钙液中的变化。结果逼尿肌过度活动鼠逼尿肌培养细胞内钙荧光强度较逼尿肌稳定鼠显著增强(P<0.01),经10-5mol/LIP3处理后,逼尿肌稳定大鼠逼尿肌培养细胞内钙荧光强度较处理前显著增强(P<0.01),且有钙液中细胞内钙荧光强度显著高于无钙液中细胞(P<0.01)。肝素能显著抑制由IP3引起的逼尿肌培养细胞内钙荧光强度的增强。结论由IP3激活引起的逼尿肌细胞内游离钙浓度的升高可能是逼尿肌过度活动发生的重要原因之一。 展开更多
关键词 三磷酸肌醇 激光共聚焦显微镜 逼尿肌过度活动
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大鼠肝组织细胞核基质的激光共聚焦显微镜观察
17
作者 温博贵 吴健宜 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 2000年第5期458-460,共3页
目的 观察大鼠肝组织细胞核基质的分布,并进行细胞核基质的三维重建。方法 应用间接免疫荧光染色显示核基质的基本形态,在激光共聚劁为微镜下观察,并进行细胞偌质的三维生建。结果 大鼠肝组织细胞核基质仍保持细胞核的形态,呈粗... 目的 观察大鼠肝组织细胞核基质的分布,并进行细胞核基质的三维重建。方法 应用间接免疫荧光染色显示核基质的基本形态,在激光共聚劁为微镜下观察,并进行细胞偌质的三维生建。结果 大鼠肝组织细胞核基质仍保持细胞核的形态,呈粗大的黄绿色点片状 光,细胞核基质的三维重建图显示核基质出现在分裂晚期的肝细胞胞浆中,结论 成功地显示了大鼠肝组织细胞核基质的图像,并进行了核基质的三维重建。 展开更多
关键词 肝组织细胞 核基质 激光共聚焦显微镜
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用激光共聚焦显微镜表征涂层厚度对油墨渗透的影响
18
作者 李莹 何北海 《中国印刷与包装研究》 CAS 2010年第S1期316-320,327,共6页
涂布纸的涂层结构对纸张的光学性能、物理性能和印刷质量有很大的影响。油墨转移到纸张上并在涂层表面固着渗透,其固着渗透情况最终影响印刷品的质量和油墨的使用。目前有关油墨渗透的研究报道中较为精确的是切割法,但切割的过程对于纸... 涂布纸的涂层结构对纸张的光学性能、物理性能和印刷质量有很大的影响。油墨转移到纸张上并在涂层表面固着渗透,其固着渗透情况最终影响印刷品的质量和油墨的使用。目前有关油墨渗透的研究报道中较为精确的是切割法,但切割的过程对于纸张有一定的损伤性,使测量结果的可靠性大大降低。本实验的主要目的是用激光共聚焦显微镜表征涂布纸的涂层厚度对油墨渗透的影响,并对其渗透深度和渗透轨迹进行定量化研究。在实验中选用荧光油墨作为激光共聚焦显微镜观察描绘油墨的渗透深度和分布的印刷油墨,将所有的XY平面图像进行重构得到油墨颜料渗透的三维图像。实验研究表明用激光共聚焦显微镜表征油墨颜料的渗透深度和分布的均匀程度是有效和可靠的,这种方法对实验对象无损伤性,利用荧光油墨中的荧光颜料作为示踪剂,省去了荧光着色等步骤,减小了人工操作的误差。实验结果证实纸张的印刷质量可以通过增加涂布时涂层厚度的方法来调整和改善。 展开更多
关键词 荧光油墨 油墨渗透 涂层厚度 激光共聚焦显微镜
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激光共聚焦显微镜的Overview功能应用于古气候纹层学的扫描技巧 被引量:2
19
作者 曲晓丽 朱楠 +2 位作者 王鑫垚 赵景耀 董西瑀 《电子显微学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期265-269,共5页
激光扫描共聚焦显微镜(laser scanning confocal microscope,LSCM)的Overview功能,即对大视野的总览扫描,可以对视野的不同位置进行分别定焦,在扫描大图像过程中实现对焦面变化的平滑过渡,得到聚焦准确、亮度均衡的完整大图像。为了推广... 激光扫描共聚焦显微镜(laser scanning confocal microscope,LSCM)的Overview功能,即对大视野的总览扫描,可以对视野的不同位置进行分别定焦,在扫描大图像过程中实现对焦面变化的平滑过渡,得到聚焦准确、亮度均衡的完整大图像。为了推广LSCM在古气候纹层学的应用,本文以古气候学研究载体-石笋为例,使用Nikon A1的Overview功能,通过LSCM软件功能的灵活运用,实现了其荧光微层的大视野扫描成像,为古气候纹层学的进一步发展提供支持。 展开更多
关键词 激光共聚焦显微镜 Overview功能 古气候纹层学 大图像
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激光共聚焦显微镜观测体内回植的GFP标记的3D打印组织工程颌骨 被引量:1
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作者 韩祥祯 周琦琪 +2 位作者 胡杨 宋艳艳 何惠宇 《口腔医学研究》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期1020-1023,共4页
目的:激光共聚焦显微镜观察绿色荧光蛋白(Green Fluorescent Protins,GFP)标记的3D打印组织工程颌骨回植后体内移植情况,为筛选组织工程颌骨并为其后续功能研究提供技术基础。方法:采用羊椎骨煅烧制备陶瓷化骨粉,结合聚乙烯醇制备组织... 目的:激光共聚焦显微镜观察绿色荧光蛋白(Green Fluorescent Protins,GFP)标记的3D打印组织工程颌骨回植后体内移植情况,为筛选组织工程颌骨并为其后续功能研究提供技术基础。方法:采用羊椎骨煅烧制备陶瓷化骨粉,结合聚乙烯醇制备组织工程颌骨支架,复合GFP慢病毒转染的羊骨髓间充质干细胞(Bone Marrow mesenchymal Stem Cells,BMSCs),回植羊颌骨缺损动物模型,使用激光共聚焦显微镜观察不同时间点其体内分布及存活情况。结果:GFP慢病毒转染的BMSCs,流式细胞仪检测转染率为95.4%,基因测序结果与GFP基因一致。回植后使用激光共聚焦显微镜三维立体成像技术观察到GFP标记的BMSCs在组织工程骨支架上存活3个月以上。结论:激光共聚焦显微镜三维重建技术可很好地观察GFP标记的3D打印组织工程颌骨支架上的细胞移植情况,为组织工程骨的动物实验研究提供了很好的观察方法。 展开更多
关键词 绿色荧光蛋白 慢病毒 组织工程颌骨 激光共聚焦显微镜
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