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卡波济肉瘤相关疱疹病毒潜伏相关核抗原编码基因的克隆及表达 被引量:1
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作者 黄丽 卢春 曾怡 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期292-296,共5页
目的:分离卡波济肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)潜伏相关核心抗原(LANA)羧基端基因(ORF73C),并在大肠杆菌中克隆和表达。方法:设计一对PCR引物,在引物的5′端分别引入BamH I和EcoR I酶切位点,提取稳定状态的BCBL-1细胞的总DNA作模板,通过PCR扩... 目的:分离卡波济肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)潜伏相关核心抗原(LANA)羧基端基因(ORF73C),并在大肠杆菌中克隆和表达。方法:设计一对PCR引物,在引物的5′端分别引入BamH I和EcoR I酶切位点,提取稳定状态的BCBL-1细胞的总DNA作模板,通过PCR扩增KSHV ORF73C,PCR产物经双酶切后按正确的读码框克隆进原核表达质粒pGEX-6p-1中,并转化大肠杆菌感受态细胞BL21,以异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达融合蛋白。结果:经核酸序列测定及分析,分离、克隆的ORF73C基因与基因数据库中登记的ORF73基因的羧基端的621bp的序列有99%同源性。经IPTG诱导的重组质粒转化菌体SDS-聚丙烯酰胺凝胶(PAGE)电泳显示有大小约为46ku的融合蛋白表达。结论:初步表明ORF73C基因在大肠杆菌中获得正确表达。 展开更多
关键词 卡波济肉瘤相关疱疹病毒 潜伏相关核抗原(LANA) ORF73C 表达
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潜伏相关核抗原在卡波氏肉瘤相关疱疹病毒感染过程中的作用 被引量:1
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作者 路正东 晏巍振(综述) +1 位作者 王林定 周畅(审校) 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2023年第12期2150-2154,共5页
卡波氏肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)是卡波氏肉瘤(KS)的致病因素。在潜伏相关核抗原(LANA)影响下,KSHV侵入宿主细胞后早期便会出现一系列病理性活动,但目前尚无有效的早期治疗方案。该文对LANA在KSHV感染过程中的相关机制进行综述,有助于阐明... 卡波氏肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)是卡波氏肉瘤(KS)的致病因素。在潜伏相关核抗原(LANA)影响下,KSHV侵入宿主细胞后早期便会出现一系列病理性活动,但目前尚无有效的早期治疗方案。该文对LANA在KSHV感染过程中的相关机制进行综述,有助于阐明LANA蛋白在KS发病机制中的具体过程,为KS潜伏期治疗提供参考。 展开更多
关键词 卡波氏肉瘤相关疱疹病毒 潜伏相关核抗原 发病机制 信号通路 裂解复制 免疫逃逸
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潜伏期相关核抗原在卡波西肉瘤发生及靶向治疗中的研究进展 被引量:1
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作者 张盼盼(综述) 王鹏 康晓静(审阅) 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第12期1136-1141,共6页
潜伏期相关核抗原(LANA)是卡波西肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)关键致癌蛋白,在卡波西肉瘤(KS)的多种致病途径中发挥重要作用,包括参与KSHV与宿主基因共复制、协助建立KSHV基因组表观遗传修饰、调节KSHV潜伏和裂解生命周期、协助宿主细胞逃避... 潜伏期相关核抗原(LANA)是卡波西肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)关键致癌蛋白,在卡波西肉瘤(KS)的多种致病途径中发挥重要作用,包括参与KSHV与宿主基因共复制、协助建立KSHV基因组表观遗传修饰、调节KSHV潜伏和裂解生命周期、协助宿主细胞逃避免疫监视、促进肿瘤血管生成、调节宿主细胞代谢等,通过影响KSHV和宿主细胞重编程促进KS的发生发展。LANA不仅可作为临床检测KSHV感染的免疫组织化学标志物,更有作为治疗靶点的潜在价值,目前已开展多项靶向LANA的研究,其中利用CRISPR/Cas9技术靶向编码LANA的ORF73基因、以结构为基础筛选及合成的LANA结合位点小分子抑制剂和LANA调节因子抑制剂在相关细胞和动物实验中显示出对KSHV相关恶性肿瘤的治疗潜力,针对LANA的靶点干预可能为及KSHV相关恶性肿瘤抗病毒治疗的新策略。 展开更多
关键词 卡波西肉瘤 潜伏相关抗原 卡波西肉瘤相关疱疹病毒 CRISPR/Cas9 靶向治疗 小分子抑制剂
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卡波氏肉瘤相关疱疹病毒感染神经元细胞SH-SY5Y的特点研究 被引量:5
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作者 曹冬冬 李英 +4 位作者 张慧 谭晓华 杨磊 潘泽民 李冬妹 《石河子大学学报(自然科学版)》 CAS 2017年第6期732-737,共6页
为检测卡波氏肉瘤相关疱疹病毒(Kaposi's sarcoma associated herpesvirus,KSHV)是否能够直接感染神经元SH-SY5Y细胞,分析病毒相关基因的表达水平和细胞增殖情况等特点,为进一步研究KSHV感染在中枢神经系统疾病中的作用提供依据。... 为检测卡波氏肉瘤相关疱疹病毒(Kaposi's sarcoma associated herpesvirus,KSHV)是否能够直接感染神经元SH-SY5Y细胞,分析病毒相关基因的表达水平和细胞增殖情况等特点,为进一步研究KSHV感染在中枢神经系统疾病中的作用提供依据。采用佛波酯(12-O-Tetradecanoylphorbol 13-acetate,TPA)从BCBL1细胞中诱导并提取有感染性的KSHV病毒,感染神经元细胞SH-SY5Y,48 h后显微镜下观察细胞形态变化。提取感染细胞的RNA,通过RT-PCR技术检测裂解态的ORF26和潜伏态的潜伏相关核抗原(Latency Associated Nuclear Antigen,LANA)的m RNA表达水平,通过免疫荧光检测LANA蛋白的表达水平,验证KSHV的成功感染,并在感染后1、3、5、7 d进行细胞计数,与未感染的细胞做比较,以检测KSHV感染对细胞增殖能力的影响。结果显示,显微镜下观察KSHV感染与未感染的SH-SY5Y细胞形态,见未感染的SH-SY5Y细胞呈梭形聚团生长,感染KSHV后,细胞变大,形态变圆,倾向于分散生长。RT-PCR检测发现ORF26和LANA在KSHV感染的SH-SY5Y细胞中均有表达。由此可知,免疫荧光检测到LANA蛋白在细胞中也有表达,这些结果确定了KSHV可以成功感染SH-SY5Y细胞,并可同时表达潜伏态和裂解态的病毒基因。细胞计数结果表明KSHV感染促进了SH-SY5Y细胞的增殖能力。 展开更多
关键词 卡波氏肉瘤相关疱疹病毒 神经元细胞 潜伏相关核抗原 ORF26
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实体器官移植术后卡波西肉瘤研究进展
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作者 方翊灵 苗芸 《器官移植》 北大核心 2025年第1期169-173,共5页
卡波西肉瘤是一种由人类疱疹病毒8型(HHV-8)潜伏感染并在宿主免疫抑制状态下再激活引起的内皮细胞来源恶性肿瘤。实体器官移植受者是卡波西肉瘤的高危人群,且相较于非器官移植受者,移植后卡波西肉瘤往往更具有侵袭性,内脏受累更为普遍... 卡波西肉瘤是一种由人类疱疹病毒8型(HHV-8)潜伏感染并在宿主免疫抑制状态下再激活引起的内皮细胞来源恶性肿瘤。实体器官移植受者是卡波西肉瘤的高危人群,且相较于非器官移植受者,移植后卡波西肉瘤往往更具有侵袭性,内脏受累更为普遍。然而,由于移植后卡波西肉瘤相对罕见,目前尚未常规开展移植前供受者HHV-8血清抗体筛查和移植后高危人群预防,亦缺乏移植后卡波西肉瘤的诊治经验。本文就近年来实体器官移植受者卡波西肉瘤的流行病学、临床表现、发病机制和诊治经验做一综述,旨在引起移植医师的重视,并为该疾病的诊疗提供参考。 展开更多
关键词 卡波西肉瘤 实体器官移植 人类疱疹病毒8型 卡波西肉瘤相关疱疹病毒 潜伏相关抗原 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白抑制剂 紫杉醇 多柔比星
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