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题名鱿鱼肌肉组织细菌基因组DNA提取方法的优化
被引量:7
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作者
王建玲
赵鹏程
邓弘毅
金杨
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机构
台州出入境检验检疫局
浙江师范大学
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出处
《浙江农业科学》
2013年第6期737-740,共4页
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基金
浙江省公益技术研究农业项目(2011C32003)
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文摘
采用十二烷基苯磺酸钠(SDS)法结合十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)法、SDS法结合溶菌酶法和CTAB法结合溶菌酶法对鱿鱼肌肉组织中细菌基因组DNA的提取效果进行比较。结果表明,SDS法结合CTAB法和SDS法结合溶菌酶法提取细菌总DNA的效果相近,CTAB法结合溶菌酶法提取细菌总DNA的效果相对较差,3种方法所提取的细菌总DNA纯度均较高,无需纯化即可进行进一步PCR扩增试验。变性梯度凝胶电泳结果说明,SDS法结合CTAB法较另两种方法能更真实地揭示待测样本中微生物的实际组成。
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关键词
鱿鱼
SDS法
CTAB法
溶菌酶法
DGGE
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分类号
S917.1
[农业科学—水产科学]
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题名螺旋藻基因组DNA制备方法的摸索与比较
被引量:5
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作者
邰丽华
于涛
张晓嵘
安伟
栗淑媛
乔辰
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机构
内蒙古师范大学生命科学与技术学院
内蒙古农业大学农学院
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出处
《科学技术与工程》
2007年第22期5755-5758,共4页
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基金
国家自然科学基金项目(30460104)
内蒙古自治区高等学校科学研究项目(NJ04036)
内蒙古自然科学基金项目(200308020310)资助
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文摘
为了得到高质量的螺旋藻基因组DNA,采用超声波法和溶菌酶法两种方法提取基因组DNA,并对实验方法进行了摸索与比较。结果表明:影响螺旋藻基因组DNA制备质量和得率的重要因素之一是螺旋藻细胞壁的破壁程度。本实验中采用两种破壁方法均可得到高质量高得率的螺旋藻基因组DNA,但超声波法破壁不易掌控,而适当浓度的溶菌酶法可获得较理想的结果。
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关键词
螺旋藻基因组DNA
制备
超声波法
溶菌酶法
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Keywords
Spirulina genome DNA 'preparation ultrasonic method lysozyme method
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分类号
Q949.206
[生物学—植物学]
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题名不同裂解方式对微生物DNA提取的影响
被引量:3
- 3
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作者
凌云
王晶
王越菲
彭自然
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机构
上海海洋大学水产与生命学院
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出处
《江苏农业科学》
北大核心
2016年第12期61-64,共4页
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基金
水体污染控制与治理科技重大专项(编号:2014ZX07101-012-04)
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文摘
分子生物学试验中的细胞裂解及DNA提取是试验的第1步,但是由于细胞种类多样、细胞壁成分复杂,DNA提取的效果容易受到提取方法的影响。针对以上问题,主要研究溶菌酶、蛋白酶K、十二烷基磺酸钠(sodium dodecyl sulfate,简称SDS)、十六烷基三甲基溴化铵(hexadecyl trimethyl ammonium bromide,简称CTAB)等4种化学方法对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌以及大肠杆菌3种代表性细菌细胞的裂解效果。结果表明:溶菌酶+SDS法对3种微生物的裂解效果都不错,但可能造成蛋白质污染且DNA碎片较多;溶菌酶+热冻法对于金黄色葡萄球菌、大肠杆菌的裂解效果较好且蛋白质污染较少;蛋白酶K+CTAB法仅对金黄色葡萄球菌的裂解提取效果较好;溶菌酶+蛋白酶K法的提取效果最差。在试验中可以根据需要选择不同的裂解方式,从而达到操作性、重现性及经济性的统一。
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关键词
微生物细胞裂解
DNA提取
溶菌酶法
混合法
热冻法
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分类号
S182
[农业科学—农业基础科学]
Q933
[生物学—微生物学]
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