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溶瘤流感病毒联合吉西他滨提升对胰腺癌细胞的杀伤效果
1
作者
孟子鹤
徐永茹
+3 位作者
邓肇达
张雨欣
杨鹏辉
扈瑞平
《陆军军医大学学报》
北大核心
2025年第2期141-150,共10页
目的 探究基于反向遗传学(reversed genetics,RG)技术构建的重组溶瘤流感病毒OvFluGM-CSF联合化疗药吉西他滨(gemcitabine,GEM)杀伤胰腺癌细胞的效果。方法 前期利用RG技术成功拯救重组溶瘤病毒OvFlu-GM-CSF,通过鸡红细胞凝集实验、透...
目的 探究基于反向遗传学(reversed genetics,RG)技术构建的重组溶瘤流感病毒OvFluGM-CSF联合化疗药吉西他滨(gemcitabine,GEM)杀伤胰腺癌细胞的效果。方法 前期利用RG技术成功拯救重组溶瘤病毒OvFlu-GM-CSF,通过鸡红细胞凝集实验、透射电镜、病毒复制等对OvFlu-GM-CSF进行全面鉴定,CCK-8法检测OvFlu-GM-CSF在不同时间(24、48、72 h)、不同感染复数(MOI=0、0.1、1.0、3.0)条件下,对胰腺癌细胞系(Panc02、PANC-1、SW1990、BxPC-3)及正常胰腺导管上皮细胞(HPDE6-C7)存活率的影响。利用胰腺癌小鼠皮下荷瘤模型,按照完全随机法将6周龄雌性C57BL/6小鼠分为4组(n=9):PBS组、重组溶瘤病毒组(OvFlu-GM-CSF组)、吉西他滨组(GEM组)以及重组溶瘤病毒与吉西他滨联合治疗组(OvFlu-GM-CSF+GEM组),并分别给予PBS、OvFlu-GM-CSF、GEM、OvFlu-GMCSF+GEM治疗,监测小鼠肿瘤体积及存活率等指标的变化。采用多重免疫荧光染色技术分析肿瘤组织中T细胞浸润及增殖情况。通过HE染色检测小鼠主要器官(心脏、肝脏、肺脏、肾脏、脑组织)的病理变化,小鼠血清肝功能实验检测谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)酶活性水平,以评估重组溶瘤病毒的安全性。结果 重组溶瘤流感病毒OvFlu-GM-CSF的血凝效价为28,其病毒形态符合流感病毒典型特征,且病毒在胰腺癌细胞内可选择性复制。在细胞水平,OvFlu-GM-CSF在感染时间为48 h、MOI=3.0的条件下,与感染时间为48 h、MOI=0比较,对Panc02、PANC-1、SW1990、BxPC-3具有显著的选择性杀伤作用(P<0.01),且细胞存活率随着MOI值的增加以及感染时间的延长而逐渐降低(P<0.01),但对HPDE6-C7无明显影响。在胰腺癌荷瘤小鼠体内,与PBS组的肿瘤体积比较,OvFlu-GM-CSF组、OvFlu-GM-CSF+GEM组显著减小(P<0.01)。多重免疫荧光检测结果显示在OvFlu-GM-CSF+GEM组小鼠的肿瘤组织中T淋巴细胞浸润显著增加;在小鼠心脏、肝脏、肺脏、肾脏、脑组织中未观察到明显病理变化;与PBS组比较,OvFlu-GM-CSF组、GEM组、OvFlu-GM-CSF+GEM组小鼠血清中ALT及AST酶活性水平无明显差异。结论 通过反向遗传学技术构建的重组溶瘤流感病毒OvFlu-GM-CSF与化疗药GEM联合应用,提升了对胰腺癌细胞的杀伤效能,并有效激活了机体的抗肿瘤免疫应答。
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关键词
溶瘤流感病毒
吉西他滨
胰腺癌
联合治疗
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题名
溶瘤流感病毒联合吉西他滨提升对胰腺癌细胞的杀伤效果
1
作者
孟子鹤
徐永茹
邓肇达
张雨欣
杨鹏辉
扈瑞平
机构
内蒙古医科大学基础医学院
中国人民解放军总医院第一医学中心肝胆胰外科医学部研究所
出处
《陆军军医大学学报》
北大核心
2025年第2期141-150,共10页
文摘
目的 探究基于反向遗传学(reversed genetics,RG)技术构建的重组溶瘤流感病毒OvFluGM-CSF联合化疗药吉西他滨(gemcitabine,GEM)杀伤胰腺癌细胞的效果。方法 前期利用RG技术成功拯救重组溶瘤病毒OvFlu-GM-CSF,通过鸡红细胞凝集实验、透射电镜、病毒复制等对OvFlu-GM-CSF进行全面鉴定,CCK-8法检测OvFlu-GM-CSF在不同时间(24、48、72 h)、不同感染复数(MOI=0、0.1、1.0、3.0)条件下,对胰腺癌细胞系(Panc02、PANC-1、SW1990、BxPC-3)及正常胰腺导管上皮细胞(HPDE6-C7)存活率的影响。利用胰腺癌小鼠皮下荷瘤模型,按照完全随机法将6周龄雌性C57BL/6小鼠分为4组(n=9):PBS组、重组溶瘤病毒组(OvFlu-GM-CSF组)、吉西他滨组(GEM组)以及重组溶瘤病毒与吉西他滨联合治疗组(OvFlu-GM-CSF+GEM组),并分别给予PBS、OvFlu-GM-CSF、GEM、OvFlu-GMCSF+GEM治疗,监测小鼠肿瘤体积及存活率等指标的变化。采用多重免疫荧光染色技术分析肿瘤组织中T细胞浸润及增殖情况。通过HE染色检测小鼠主要器官(心脏、肝脏、肺脏、肾脏、脑组织)的病理变化,小鼠血清肝功能实验检测谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)酶活性水平,以评估重组溶瘤病毒的安全性。结果 重组溶瘤流感病毒OvFlu-GM-CSF的血凝效价为28,其病毒形态符合流感病毒典型特征,且病毒在胰腺癌细胞内可选择性复制。在细胞水平,OvFlu-GM-CSF在感染时间为48 h、MOI=3.0的条件下,与感染时间为48 h、MOI=0比较,对Panc02、PANC-1、SW1990、BxPC-3具有显著的选择性杀伤作用(P<0.01),且细胞存活率随着MOI值的增加以及感染时间的延长而逐渐降低(P<0.01),但对HPDE6-C7无明显影响。在胰腺癌荷瘤小鼠体内,与PBS组的肿瘤体积比较,OvFlu-GM-CSF组、OvFlu-GM-CSF+GEM组显著减小(P<0.01)。多重免疫荧光检测结果显示在OvFlu-GM-CSF+GEM组小鼠的肿瘤组织中T淋巴细胞浸润显著增加;在小鼠心脏、肝脏、肺脏、肾脏、脑组织中未观察到明显病理变化;与PBS组比较,OvFlu-GM-CSF组、GEM组、OvFlu-GM-CSF+GEM组小鼠血清中ALT及AST酶活性水平无明显差异。结论 通过反向遗传学技术构建的重组溶瘤流感病毒OvFlu-GM-CSF与化疗药GEM联合应用,提升了对胰腺癌细胞的杀伤效能,并有效激活了机体的抗肿瘤免疫应答。
关键词
溶瘤流感病毒
吉西他滨
胰腺癌
联合治疗
Keywords
oncolytic influenza virus
gemcitabine
pancreatic cancer
combination therapy
分类号
R73-36 [医药卫生—肿瘤]
R730.51 [医药卫生—肿瘤]
R735.9 [医药卫生—肿瘤]
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被引量
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1
溶瘤流感病毒联合吉西他滨提升对胰腺癌细胞的杀伤效果
孟子鹤
徐永茹
邓肇达
张雨欣
杨鹏辉
扈瑞平
《陆军军医大学学报》
北大核心
2025
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