基于LncRNA malat-1/miR-133通路调控p-ERK1/2探讨温阳振衰颗粒含药血清对阿霉素诱导H9C2心肌细胞损伤的影响

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作者 王楠 唐燕萍 +3 位作者 蔡虎志 陈新宇 李少东 陈雪靓 《中华中医药学刊》 北大核心 2025年第5期89-93,I0026,共6页

目的基于长链非编码RNA(Long non-coding RNAs,LncRNA)肺腺癌转移相关转录子1(metastasis associated lung adenocarcinoma transcript 1,malat-1)/微小RNA-133(microRNA-133,miR-133)通路调控细胞外调节蛋白激酶1/2磷酸化(p-ERK1/2)探... 目的基于长链非编码RNA(Long non-coding RNAs,LncRNA)肺腺癌转移相关转录子1(metastasis associated lung adenocarcinoma transcript 1,malat-1)/微小RNA-133(microRNA-133,miR-133)通路调控细胞外调节蛋白激酶1/2磷酸化(p-ERK1/2)探讨温阳振衰颗粒含药血清对阿霉素诱导H9C2心肌细胞损伤的影响。方法使用2.67μmol/L阿霉素(adriamycin,ADR)培养液共培养45 h以建立H9C2心肌细胞损伤模型并设置正常对照组、正常+W组(W:温阳振衰颗粒含药血清)、miR-133过表达组、miR-133过表达+W组、ADR组[ADR:阿霉素(adriamycin)]、ADR+W组、ADR+miR-133过表达组、ADR+miR-133过表达+W组共8组。细胞增殖活性采用MTT法检测,N端B型脑钠肽前体(N-terminal B-type brain natriuretic peptide precursor,NT-proBNP)的变化采用ELISA法检测,各组H9C2心肌细胞lncRNA malat-1、miR-133以及ERK1/2 mRNA的含量采用Real-time PCR法检测,ERK1/2及p-ERK1/2的蛋白表达采用Western blot检测。结果ADR组、ADR+miR-133过表达组、ADR+W组、ADR+miR-133过表达+W组、正常对照组、miR-133过表达组、正常+W组、miR-133过表达+W组心肌细胞活性依次增加(P<0.05);NT-proBNP含量依次降低(P<0.05)。实验后各组心肌细胞ERK1/2 mRNA表达差异无统计学意义(P>0.05),ADR组、ADR+miR-133过表达组、ADR+W组、ADR+miR-133过表达+W组、正常对照组、miR-133过表达组、正常+W组、miR-133过表达+W组miR-133表达依次增加(P<0.05);lncRNA malat-1表达依次降低(P<0.05)。实验后各组心肌细胞ERK1/2蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05);ADR组、ADR+W组、ADR+miR-133过表达组、ADR+miR-133过表达+W组、正常对照组、miR-133过表达组、正常+W组、miR-133过表达+W组p-ERK1/2蛋白表达依次降低(P<0.05)。结论温阳振衰颗粒含药血清能够降低心肌细胞p-ERK1/2蛋白表达从而对慢性心力衰竭发挥疗效,其机制可能是通过对心肌细胞中的lncRNA malat-1/miR-133通路进行调控而实现的。 展开更多

关键词 慢性心力衰竭 温阳振衰颗粒含药血清 H9C2心肌细胞 细胞外信号调节激酶1/2 微小RNA-133 肺腺癌转移相关转录子1

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基于mTORC1/SREBP1/SCD1信号通路探讨柴芪益肝颗粒含药血清对肝癌HepG2细胞铁死亡的影响 被引量：1

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作者 马贵萍 刘博文 +5 位作者 李晓斌 李峰 庞旭 冉云 陈文林 胡世平 《中成药》 北大核心 2025年第4期1305-1309,共5页

目的探讨柴芪益肝颗粒对肝癌HepG2细胞铁死亡的调控作用。方法制备柴芪益肝颗粒大鼠含药血清,常规培养HepG2细胞,采用CCK-8法筛选最佳干预浓度及时间。设置空白血清对照组、索拉非尼组、RSL3组(铁死亡诱导剂)、柴芪益肝颗粒含药血清组、... 目的探讨柴芪益肝颗粒对肝癌HepG2细胞铁死亡的调控作用。方法制备柴芪益肝颗粒大鼠含药血清,常规培养HepG2细胞,采用CCK-8法筛选最佳干预浓度及时间。设置空白血清对照组、索拉非尼组、RSL3组(铁死亡诱导剂)、柴芪益肝颗粒含药血清组、RMC-5552组(mTORC1抑制剂)、CCT007093组(mTORC1激动剂)及CCT007093+柴芪益肝颗粒含药血清组,按照分组进行干预后,ELISA法检测细胞内MDA、GSH水平,荧光探针检测细胞Fe^(2+)水平,透射电镜观察细胞线粒体结构,RT-qPCR法检测铁死亡相关基因mTOR、SREBP1、SCD1、GPX 4 mRNA表达,Western blot法检测mTOR、p70S6K磷酸化水平与SREBP1、SCD1、GPX4蛋白表达。结果30%柴芪益肝颗粒含药血清干预细胞48 h时,对HepG2细胞的抑制作用最佳。与空白血清对照组比较,索拉非尼组、RSL3组、柴芪益肝颗粒含药血清组及RMC-5552组HepG2细胞GSH水平降低(P<0.05),MDA、Fe^(2+)水平升高(P<0.05),线粒体结构呈铁死亡改变,mTOR、p70S6K、SREBP1、SCD1、GPX4 mRNA和蛋白表达降低。结论柴芪益肝颗粒含药血清可促进肝癌HepG2细胞铁死亡,其作用机制与抑制mTORC1/SREBP1/SCD1信号通路相关。 展开更多

关键词 柴芪益肝颗粒 含药血清 肝细胞癌 铁死亡 mTORC1/SREBP1/SCD1信号通路

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山仙颗粒含药血清对S180细胞caspase-3及热休克蛋白70表达的影响 被引量：5

3

作者 方艳 应小平 +2 位作者 王小平 赵延红 郭兰生 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期2003-2005,共3页

目的观察大鼠山仙颗粒含药血清对S180细胞caspase-3及热休克蛋白70表达的影响,探讨其抗肿瘤的相关分子机制。方法将不同浓度的山仙颗粒大鼠含药血清及正常大鼠血清分别置入S180细胞悬液中,设对照组、空白血清小剂量组、空白血清大剂量... 目的观察大鼠山仙颗粒含药血清对S180细胞caspase-3及热休克蛋白70表达的影响,探讨其抗肿瘤的相关分子机制。方法将不同浓度的山仙颗粒大鼠含药血清及正常大鼠血清分别置入S180细胞悬液中,设对照组、空白血清小剂量组、空白血清大剂量组、含药血清小剂量组和含药血清大剂量组,分别于培养24 h、48 h、72 h后收集细胞,制成细胞涂片,采用免疫细胞化学法及免疫荧光法检测S180细胞caspase-3及HSP70的表达情况。结果在培养24 h、48 h、72 h各个时间段,含药血清组的HSP70表达水平均低于空白血清组(P<0.05),caspase-3表达水平均高于空白血清组(P<0.05);大剂量组的HSP70表达水平均比小剂量组的低(P<0.05),大剂量组的caspase-3表达水平均比小剂量组的高(P<0.05),且呈时效依赖关系。结论大鼠山仙颗粒含药血清能使体外培养的S180细胞HSP70的表达显著降低、caspase-3的表达升高,并呈时效和量效依赖关系。 展开更多

关键词 山仙颗粒 含药血清 S180细胞 CASPASE-3 热休克蛋白70

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肾衰康灌肠液含药血清对HK-2细胞缺氧/复氧损伤的预防作用 被引量：6

4

作者 邓荣荣 罗芯怡 +3 位作者 叶乃菁 吴新萍 谢灯飘 李明权 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期431-436,共6页

目的考察肾衰康灌肠液含药血清对人肾小管上皮细胞(HK-2)缺氧/复氧损伤的预防作用。方法家兔灌肠给药后采血,离心取血清,分为空白组、PBS组及含药血清高、中、低剂量组。各组血清预培养HK-2细胞24 h后,将细胞随机分为对照组、PBS组及含... 目的考察肾衰康灌肠液含药血清对人肾小管上皮细胞(HK-2)缺氧/复氧损伤的预防作用。方法家兔灌肠给药后采血,离心取血清,分为空白组、PBS组及含药血清高、中、低剂量组。各组血清预培养HK-2细胞24 h后,将细胞随机分为对照组、PBS组及含药血清高、中、低剂量组,二氯化钴(Co Cl2)进行缺氧/复氧造模,CFSE/PI染色、Annexin V-FITC/PI双染色、流式细胞分析检测造模后细胞凋亡/死亡率,ROS荧光探针检测观察含药血清对空白组、模型组、预防组细胞ROS水平的影响,PCR技术测定PBS组、含药血清组细胞AKT、NF-κB、MAPK mRNA表达。结果与对照组、PBS组比较,含药血清组细胞死亡率明显降低,以高剂量组最显著,并表现出明显的凋亡/死亡率抑制作用。造模后,预防组细胞ROS升高水平明显低于模型组,而且恢复至正常水平时间明显缩短。含药血清组AKT、NF-κB、MAPK mRNA表达先下降(0～4 h)再逐渐上升(4～12 h),并对NF-κB、MAPK mRNA表达呈现一定剂量依赖性,与PBS组比较有显著差异(P<0. 05)。结论肾衰康灌肠液含药血清可预防HK-2细胞缺氧/复氧损伤,其机制可能与抑制细胞氧化应激、减少细胞ROS过量聚积有关。 展开更多

关键词 肾衰康灌肠液 含药血清 缺氧/复氧损伤 HK-2细胞

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潜阳育阴颗粒含药血清对AngⅡ诱导人脐静脉内皮细胞凋亡及fas/fasL蛋白表达的影响 被引量：6

5

作者 陈艺 方祝元 +3 位作者 严士海 蒋卫民 严冬 刘志辉 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期1381-1385,共5页

目的研究潜阳育阴颗粒(鬼针草、何首乌、山茱萸、玄参、泽泻、川牛膝)含药血清对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导人脐静脉内皮细胞凋亡及fas/fasL蛋白表达水平的影响。方法将SD大鼠随机分为正常组、缬沙坦组、潜阳育阴颗粒组,每组4只,灌胃给药... 目的研究潜阳育阴颗粒(鬼针草、何首乌、山茱萸、玄参、泽泻、川牛膝)含药血清对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导人脐静脉内皮细胞凋亡及fas/fasL蛋白表达水平的影响。方法将SD大鼠随机分为正常组、缬沙坦组、潜阳育阴颗粒组,每组4只,灌胃给药,制备含药血清。人脐静脉内皮细胞分为5组,每组3个样本。除正常组外,其余组均采用10-6mol/L AngⅡ诱导处于对数生长期的人脐静脉内皮细胞建立细胞凋亡损伤模型。造模后,分别给予相应含药血清DMEM培养液干预:正常组(16%空白血清培养液)、模型组(16%空白血清培养液)、缬沙坦组(16%缬沙坦血清培养液)、潜阳育阴颗粒低剂量组(8%潜阳育阴颗粒血清培养液+8%空白血清培养液)、潜阳育阴颗粒高剂量组(16%潜阳育阴颗粒血清培养液)。采用流式细胞术检测人脐静脉内皮细胞凋亡率,Western Blot检测fas/fasL蛋白表达。结果与正常组比,模型组人脐静脉内皮细胞凋亡率及fas、fasL蛋白表达明显升高;与模型组比,缬沙坦组和潜阳育阴颗粒组均可显著降低人脐静脉内皮细胞凋亡率及fas、fasL蛋白表达。结论潜阳育阴颗粒可以拮抗AngⅡ诱导人脐静脉内皮细胞的凋亡效应,其机制可能与调节fas和fasL蛋白表达有关。 展开更多

关键词 潜阳育阴颗粒 含药血清 血管紧张素Ⅱ 人脐静脉内皮细胞 凋亡 fas fasL蛋白表达

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青光安颗粒大鼠含药血清指纹图谱的研究 被引量：4

6

作者 曾红艳 彭清华 +3 位作者 曾志成 李文娟 彭俊 李建超 《中华中医药学刊》 CAS 2014年第7期1553-1555,I0001,I0002,共5页

目的:研究青光安大鼠含药血清的指纹图谱。方法:按随机的方法将50只SD大鼠分成青光安20倍组、10倍组、5倍组、青光安2.5倍组、空白对照组。按体表面积换算的方法计算出每只大鼠的灌药量,以青光安颗粒剂溶液灌胃。灌药7天后,麻醉处死大... 目的:研究青光安大鼠含药血清的指纹图谱。方法:按随机的方法将50只SD大鼠分成青光安20倍组、10倍组、5倍组、青光安2.5倍组、空白对照组。按体表面积换算的方法计算出每只大鼠的灌药量,以青光安颗粒剂溶液灌胃。灌药7天后,麻醉处死大鼠提取血清。用进样器取20μL供试品,注入高效液相仪进行指纹图谱分析。结果:色谱图的结果表明:青光安各剂量组色谱图共有特征色谱峰的相对保留时间的RSD在1%以内,相对峰面积的RSD也在3%以内,符合指纹图谱的要求。青光安20倍组与青光安2.5倍组、青光安5倍组比较两标示峰具有非常显著性差异,青光安20倍组与青光安10倍组比较两标示峰具有显著性差异;青光安10倍组与青光安2.5倍组比较两标示峰具有非常显著性差异,青光安10倍组与青光安5倍组比较两标示峰具有显著性差异;青光安5倍组与青光安2.5倍组比较两标示峰具有显著性差异。结论:青光安在体内的代谢产物浓度随给药浓度的不同也有所不同。 展开更多

关键词 青光安颗粒剂 含药血清 指纹图谱 大鼠

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透骨消痛颗粒含药血清对兔软骨细胞增殖影响的研究 被引量：10

7

作者 叶蕻芝 李西海 +3 位作者 梁文娜 郑春松 陈文列 刘献祥 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2009年第6期624-628,共5页

目的:探讨透骨消痛颗粒含药血清对兔软骨细胞增殖的影响。方法:取4周龄新西兰兔膝关节关节软骨Ⅱ型胶原酶消化,建立软骨细胞体外培养体系,体外培养第3代软骨细胞随机分为5组,分别加入培养液、空白血清和中药血清低、中、高剂量继续培养2... 目的:探讨透骨消痛颗粒含药血清对兔软骨细胞增殖的影响。方法:取4周龄新西兰兔膝关节关节软骨Ⅱ型胶原酶消化,建立软骨细胞体外培养体系,体外培养第3代软骨细胞随机分为5组,分别加入培养液、空白血清和中药血清低、中、高剂量继续培养24、48、72 h后,采用流式细胞仪检测软骨细胞周期的变化。结果:流式细胞仪细胞周期检测显示中药血清中、高剂量能够刺激软骨细胞由G0/G1期进入S期和G2/M期,并呈现时间的依赖性,干预48 h后G0/G1期细胞比例降低,S期与G2/M期细胞之和增加,与低量组、空白组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论:透骨消痛颗粒含药血清能有效促进软骨细胞的增殖。 展开更多

关键词 透骨消痛颗粒 含药血清 细胞增殖 细胞周期

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抗骨松丹杞颗粒含药血清对成骨-破骨细胞共培养体系中破骨细胞功能的影响 被引量：12

8

作者 武密山 赵素芝 +1 位作者 李恩山 白霞山 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期1635-1636,1639,共3页

目的:观察补肾方抗骨松丹杞颗粒含药血清在成骨-破骨细胞共同培养体系中对大鼠破骨细胞(OC)骨吸收功能的影响。方法:取1 d龄SD大鼠的胎鼠颅骨与四肢骨分别分离、培养成骨细胞和破骨细胞,建立细胞上清相通但细胞间不相互混杂的平面式成骨... 目的:观察补肾方抗骨松丹杞颗粒含药血清在成骨-破骨细胞共同培养体系中对大鼠破骨细胞(OC)骨吸收功能的影响。方法:取1 d龄SD大鼠的胎鼠颅骨与四肢骨分别分离、培养成骨细胞和破骨细胞,建立细胞上清相通但细胞间不相互混杂的平面式成骨-破骨细胞共育体系,实验分为不同浓度(低、中、高)的补肾方含药血清组和对照组进行比较,用重氮盐法检测抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)和光镜观察骨陷窝数。结果:25%的补肾方含药血清组在48 h、72 h、96 h成骨-破骨细胞共育体系中OC分泌TRAP的活性明显降低于对照组;25%的补肾方含药血清组在48 h、72 h、120 h所形成骨吸收陷窝的数目明显低于对照组(P<0.01)。结论:补肾方抗骨松丹杞颗粒含药血清在共育体系中能够抑制OC活性。 展开更多

关键词 抗骨松丹杞颗粒 含药血清 成骨细胞 破骨细胞

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潜阳育阴颗粒含药血清对AngⅡ诱导人脐静脉内皮细胞损伤NADPH氧化酶、AKT、TNF-α、IL-6的影响 被引量：3

9

作者 严冬 方祝元 +1 位作者 严士海 陈艺 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期1809-1813,共5页

目的研究潜阳育阴颗粒(鬼针草、山茱萸、何首乌、玄参、川牛膝和泽泻)含药血清对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导人脐静脉内皮细胞损伤NADPH氧化酶、蛋白激酶(AKT)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)的影响。方法 SD大鼠随机分为正常... 目的研究潜阳育阴颗粒(鬼针草、山茱萸、何首乌、玄参、川牛膝和泽泻)含药血清对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导人脐静脉内皮细胞损伤NADPH氧化酶、蛋白激酶(AKT)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)的影响。方法 SD大鼠随机分为正常组、缬沙坦组、潜阳育阴颗粒组,制备含药血清。人脐静脉内皮细胞分为5组,除正常组外,其余组均采用10-6mol/L AngⅡ干预建立人脐静脉内皮细胞损伤模型。造模后,分别给与空白血清培养液、缬沙坦血清培养液、潜阳育阴颗粒血清培养液。TBA法检测MDA水平;ELISA法检测NADPH氧化酶、TNF-α、IL-6水平;Western-Blot检测磷酸化AKT1与AKT1蛋白表达。结果潜阳育阴颗粒显著降低AngⅡ诱导人脐静脉内皮细胞损伤后NADPH氧化酶的活性水平,降低p-AKT1蛋白表达,降低TNF-α、IL-6的释放。结论潜阳育阴颗粒可以抑制AngⅡ诱导人脐静脉内皮细胞损伤后的炎症反应,推测其机制与抑制NADPH氧化酶、AKT、TNF-α、和IL-6有关。 展开更多

关键词 潜阳育阴颗粒 含药血清 血管紧张素Ⅱ 人脐静脉内皮细胞 炎症

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补心软脉颗粒含药血清对AngⅡ诱导的HUVEC细胞抗氧化作用 被引量：1

10

作者 严冬 钱玉良 +3 位作者 严士海 王宁 周朝伟 唐蜀华 《南京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期461-464,共4页

目的观察补心软脉颗粒含药血清对AngⅡ诱导HUVEC细胞所致氧化损伤的相关指标SOD、NADPH、MDA、p40phox、p47phox、p67phox的影响。方法大鼠被随机分为正常组、缬沙坦组、补心软脉颗粒组,每组10只,灌胃6周,取动脉血制备药物血清。建立10-... 目的观察补心软脉颗粒含药血清对AngⅡ诱导HUVEC细胞所致氧化损伤的相关指标SOD、NADPH、MDA、p40phox、p47phox、p67phox的影响。方法大鼠被随机分为正常组、缬沙坦组、补心软脉颗粒组,每组10只,灌胃6周,取动脉血制备药物血清。建立10-6 mol/L AngⅡ诱导的HUVEC细胞凋亡损伤模型,并予各药物血清干预,采用黄嘌呤氧化酶法检测细胞上清液中总SOD活力,ELISA法检测NADPH氧化酶,TBA法检测MDA含量,Western blot法分别检测细胞膜与细胞质p40phox、p47phox、p67phox蛋白表达。结果 AngⅡ诱导HUVEC细胞损伤,模型组SOD活力下降,NADPH、MDA升高,p40phox、p47phox、p67phox向细胞膜转移,出现氧化损伤;补心软脉颗粒组SOD活力上升,MDA、NADPH下降,抑制p40phox、p47phox、p67phox向细胞膜转移,减轻氧化损伤。结论补心软脉含药血清对AngⅡ诱导体外培养的HUVEC损伤有抑制氧化作用,防止动脉硬化。 展开更多

关键词 补心软脉颗粒 含药血清 AngⅡ HUVEC 氧化抑制

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降糖消渴颗粒含药血清对INS-1细胞凋亡的影响 被引量：1

11

作者 吴瑞 赵丹丹 +1 位作者 方心 高思华 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2016年第9期2090-2092,I0004,共4页

目的:研究降糖消渴颗粒含药血清对胰岛瘤细胞INS-1凋亡的影响并对其作用机制进行初步探讨。方法:应用中药血清药理学方法制备降糖消渴颗粒含药血清及空白血清,以大鼠胰岛瘤细胞INS-1为研究对象,观察降糖消渴颗粒含药血清对INS-1细胞形... 目的:研究降糖消渴颗粒含药血清对胰岛瘤细胞INS-1凋亡的影响并对其作用机制进行初步探讨。方法:应用中药血清药理学方法制备降糖消渴颗粒含药血清及空白血清,以大鼠胰岛瘤细胞INS-1为研究对象,观察降糖消渴颗粒含药血清对INS-1细胞形态的影响,并用流式细胞术检测含药血清对细胞凋亡率的影响,用Western blot的方法检测Bax和Bcl-2蛋白表达水平,初步探讨其抗凋亡机制。结果:与空白血清组比较,降糖消渴颗粒含药血清可保护INS-1细胞形态,并降低细胞凋亡率,同时降糖消渴颗粒含药血清减少了Bax蛋白表达,增加Bcl-2蛋白表达,提高了Bcl-2/Bax蛋白的比值。结论:降糖消渴颗粒含药血清可抑制胰岛瘤细胞的INS-1凋亡,其机制可能与以线粒体为核心的凋亡途径有关。 展开更多

关键词 降糖消渴颗粒 含药血清 胰岛瘤细胞 糖尿病 INS-1细胞

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顺铂诱导颗粒细胞损伤及二仙汤含药血清保护颗粒细胞的作用机制 被引量：2

12

作者 杨蕾 饶晨晨 +6 位作者 孙丽萍 王燕霞 赵丕文 高文雅 牛建昭 陶仕英 杨阳 《世界中医药》 CAS 2019年第7期1668-1671,共4页

目的:探讨顺铂对卵巢颗粒细胞的影响及二仙汤含药血清改善大鼠卵巢颗粒细胞损伤的作用机制。方法:选取大鼠原代卵巢颗粒细胞体外培养及顺铂处理的方法,将顺铂处理后卵巢颗粒细胞随机分为:cDDP组、cDDP+雌二醇组、cDDP+二仙汤组,另设正常... 目的:探讨顺铂对卵巢颗粒细胞的影响及二仙汤含药血清改善大鼠卵巢颗粒细胞损伤的作用机制。方法:选取大鼠原代卵巢颗粒细胞体外培养及顺铂处理的方法,将顺铂处理后卵巢颗粒细胞随机分为:cDDP组、cDDP+雌二醇组、cDDP+二仙汤组,另设正常组,加入相应药理血清连续培养48 h。采用Western Blotting法检测各组大鼠卵巢颗粒细胞bcl-2、bax蛋白表达;RT-PCR法检测各组大鼠卵巢颗粒细胞bcl-2、bax mRNA表达。结果:与正常对照组比较,cDDP组bax mRNA及蛋白表达上调,差异有统计学意义(P<0.05)。与cDDP组比较,CDDP+雌二醇组及cDDP+二仙汤组Bax mRNA及蛋白表达均下调,差异有统计学意义(P<0.05)。与正常组比较,cDDP组bcl-2 mRNA水平及蛋白表达下调,差异有统计学意义(P<0.05)。与cDDP组比较,CDDP+雌二醇组及cDDP+二仙汤组bcl-2 mRNA转录及蛋白表达上调,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:二仙汤能够抑制cDDP诱导的卵巢颗粒细胞损伤,其作用机制可能与调节bcl-2/bax平衡有关。 展开更多

关键词 二仙汤 顺铂 含药血清 卵巢颗粒细胞 卵巢功能低下 不孕 B细胞淋巴瘤2蛋白家族

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降糖消渴颗粒含药血清对INS-1细胞磷酸肌醇-3激酶/AKT/FOXO1通路的影响 被引量：2

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作者 莫芳芳 刘海霞 +2 位作者 华静 赵丹丹 高思华 《世界中医药》 CAS 2019年第2期349-353,共5页

目的:通过研究降糖消渴颗粒含药血清对INS-1细胞PI3K/AKT/FOXO1通路中相关蛋白与基因表达的影响,探讨降糖消渴颗粒含药血清保护胰岛B细胞的分子机制。方法:选取FOXO1高表达INS-1稳定细胞株,分别以1%、5%、10%、15%、20%不同浓度降糖消... 目的:通过研究降糖消渴颗粒含药血清对INS-1细胞PI3K/AKT/FOXO1通路中相关蛋白与基因表达的影响,探讨降糖消渴颗粒含药血清保护胰岛B细胞的分子机制。方法:选取FOXO1高表达INS-1稳定细胞株,分别以1%、5%、10%、15%、20%不同浓度降糖消渴颗粒含药血清干预,用MTT法计算细胞成活率以观察药物毒性,分别检测各组细胞中总FOXO1蛋白水平以确定最佳药物浓度开展后续实验。细胞用或不用PI3K抑制剂LY294002干预后,以Western blotting检测细胞中总FOXO1、p-FOXO1、Akt、p-Akt和细胞核内外的FOXO1、p-FOXO1的蛋白表达,qRT-PCR检测FOXO1mRNA和AktmRNA含量。结果:不同浓度含药血清对细胞均无毒性,其中10%为最佳药物干预浓度。10%含药血清使磷酸化FOXO1和Akt的表达升高;在胞质和胞核中,10%含药血清使FOXO1的表达降低,磷酸化表达升高,抑制剂LY294002使FOXO1和p-FOXO1表达均降低。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)结果显示,Akt mRNA表达升高,FOXO1mRNA表达降低,抑制剂使FOXO1mRNA表达降低,结果与Western blotting结果一致。结论:降糖消渴颗粒含药血清可通过PI3K/AKT/FOXO1通路促进FOXO1磷酸化出核以抑制FOXO核转录实现保护胰岛B细胞的作用。 展开更多

关键词 肝脾肾同调 降糖消渴颗粒 PI3K/AKT/FOXO1通路 FOXO1因子 胰腺 INS-1细胞 2型糖尿病 含药血清

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补骨颗粒含药血清对大鼠软骨细胞凋亡及Trx2信号通路的影响 被引量：4

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作者 余光书 林焱斌 +3 位作者 熊国胜 李杰辉 张寿雄 王海洋 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期753-757,共5页

目的观察补骨颗粒含药血清对体外培养的大鼠膝关节软骨细胞凋亡及对Trx2、ASK1及Caspase3表达的影响,从而探讨补骨颗粒预防骨性关节炎发生发展的作用机制。方法采用两步酶消化法分离培养大鼠软骨细胞,并进行传代培养。应用膜联蛋白V-FIT... 目的观察补骨颗粒含药血清对体外培养的大鼠膝关节软骨细胞凋亡及对Trx2、ASK1及Caspase3表达的影响,从而探讨补骨颗粒预防骨性关节炎发生发展的作用机制。方法采用两步酶消化法分离培养大鼠软骨细胞,并进行传代培养。应用膜联蛋白V-FITC/PI染色后经流式细胞仪检测软骨细胞的凋亡情况。同时,通过电泳分离蛋白并通过蛋白质印迹分析Trx2、ASK1及Caspase3的表达情况。结果软骨细胞培养15 d左右铺满80%~90%的培养皿,大部分细胞呈梭形。流式细胞检测结果显示空白血清组的细胞凋亡率为22.80%,明显高于含药血清组(P<0.05),而20%含药血清组(15.91%)与30%含药血清组(17.93%)的细胞凋亡率又明显低于10%含药血清组(21.58%),各组间比较差异具有统计学意义(P<0.05)。蛋白质印迹分析结果显示含药血清组Trx2的表达量都明显增多,以10%含药血清组的表达量最多;空白组与10%含药血清组的ASK1与Caspase3的表达量比20%与30%含药血清组多。结论补骨颗粒可以通过激活Trx2信号通路而抑制软骨细胞的凋亡,从而起到预防骨性关节炎发生发展的作用。 展开更多

关键词 补骨颗粒 含药血清 软骨细胞 细胞凋亡 Trx2信号通路 大鼠

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基于TLR4/NLRP3通路探讨葛黄颗粒含药血清对乙醇诱导的L-02肝细胞损伤的保护作用及机制研究

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作者 吴莉 李波 +3 位作者 王晓栋 康莉 刘友平 魏嵋 《世界科学技术-中医药现代化》 CSCD 北大核心 2022年第10期3828-3834,共7页

目的探讨葛黄颗粒含药血清对乙醇诱导的L-02肝细胞损伤的影响及其可能机制。方法SD雄性大鼠45只,随机分为三组(15只/组):空白对照组、葛黄颗粒组及美他多辛组。空白对照组予以蒸馏水灌胃、葛黄颗粒组(3.1 g·100 g^(-1)·d^(-1)... 目的探讨葛黄颗粒含药血清对乙醇诱导的L-02肝细胞损伤的影响及其可能机制。方法SD雄性大鼠45只,随机分为三组(15只/组):空白对照组、葛黄颗粒组及美他多辛组。空白对照组予以蒸馏水灌胃、葛黄颗粒组(3.1 g·100 g^(-1)·d^(-1))、美他多辛组(0.1 g·100 g^(-1)·d^(-1))灌胃,连续干预5天,腹主动脉取血制备含药血清。将L-02肝细胞分为六组并按以下方式干预:正常组(加入10%正常大鼠血清)、模型组(在正常组基础上加入3%乙醇)、葛黄颗粒高、中、低剂量组(分别加入不同浓度葛黄颗粒含药血清及正常大鼠血清及3%乙醇)、美他多辛组(加入3%乙醇、美他多辛及正常大鼠血清各5%),将L-02肝细胞培养24 h后进行之后实验部分。ELISA法检测NF-κB、TNF-α、IL-1β、IL-18水平;RT-PCR法检测NLRP3、ASC、Caspase-1 mRNA的表达;Western blot法检测TLR4、NLRP3、ASC、Caspase-1的蛋白表达。结果与正常组比较:模型组NF-κB、TNF-α、IL-1β、IL-18明显升高,NLRP3、ASC、Caspase-1 mRNA表达明显升高,TLR4、NLRP3、ASC、Caspase-1的蛋白表达均亦明显升高(P<0.05);与模型组相比较:以上指标在葛黄颗粒高、中剂量组及美他多辛组表达水平均有所降低(P<0.05);与美他多辛组比较:葛黄颗粒高剂量组中TNF-α、IL-18有统计学意义(P<0.05),而IL-1β、NF-KB差异则不显著(P>0.05);葛黄颗粒低剂量组中NLRP3、ASC、Caspase-1 mRNA差异显著(P<0.05),而在高、中剂量组差异则均无统计学意义(P>0.05);TLR4、NLRP3、ASC、Caspase-1的蛋白表达水平在葛黄颗粒各剂量组均有统计学意义(P<0.05)。结论葛黄颗粒含药血清可能通过TLR4/NLRP3信号通路改善乙醇诱导的肝细胞炎症损伤。 展开更多

关键词 TLR4/NLRP3信号通路 葛黄颗粒 含药血清 L-02 炎症

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芪风固表颗粒含药血清对肺炎克雷伯菌感染A549细胞的保护作用

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作者 王欣 郭雨莹 +3 位作者 刘洋 蒙艳丽 王晓溪 王伟明 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期755-762,共8页

目的观察芪风固表颗粒含药血清对肺炎克雷伯菌(Kp)感染A549细胞的保护作用。方法大鼠灌胃给予芪风固表颗粒以制备含药血清。A549细胞随机分为空白组、模型组、给药组,空白组和模型组用10%大鼠空白血清干预,给药组用10%芪风固表含药血清... 目的观察芪风固表颗粒含药血清对肺炎克雷伯菌(Kp)感染A549细胞的保护作用。方法大鼠灌胃给予芪风固表颗粒以制备含药血清。A549细胞随机分为空白组、模型组、给药组,空白组和模型组用10%大鼠空白血清干预,给药组用10%芪风固表含药血清干预,培养48 h后,模型组和给药组每孔加入1×10^(8)cfu/mL Kp菌液1 mL,感染4 h后,HE染色观察细胞形态,流式细胞仪检测细胞周期及凋亡,平板计数法观察15、30、60、90 min细胞的细菌粘附数,RT-qPCR法检测细胞caspase5、Pannexin-1、P2RX7 mRNA表达,免疫组化法观察细胞caspase5、Pannexin-1、P2RX7蛋白定位,Western blot法检测细胞caspase5、Pannexin-1、P2RX7、IL-1β蛋白表达。结果与模型组比较,给药组细胞数量增多,S期细胞比例增加(P<0.01),G_(0)/G_(1)期细胞比例,细胞凋亡率,细菌粘附数,caspase5、Pannexin-1、P2RX7 mRNA和蛋白表达,IL-1β蛋白表达均降低(P<0.05,P<0.01)。结论芪风固表颗粒含药血清对肺炎克雷伯菌感染A549细胞引起的急性炎症有一定的预防及缓解作用,其机制可能与抑制caspase5细胞焦亡通路及加速A549细胞周期由G_(0)/G_(1)期向S期转换,减轻肺上皮细胞凋亡有关。 展开更多

关键词 芪风固表颗粒含药血清 肺炎克雷伯菌 细胞焦亡 caspase5 细胞周期 细胞凋亡

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参杞强精颗粒对小鼠精原细胞氧化损伤的保护作用及其机制

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作者 甘典辉 夏冰雨 +3 位作者 李鑫 赖克道 宾彬 唐爱存 《医药导报》 北大核心 2025年第3期371-376,共6页

目的观察参杞强精颗粒含药血清对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导的小鼠精原细胞(GC-1spg)氧化损伤以及铁死亡的保护作用及其机制。方法将健康雄性SD大鼠30只随机分为空白组、左卡尼汀阳性组、参杞强精颗粒组,灌胃给药7 d后,采集含药血清。将... 目的观察参杞强精颗粒含药血清对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导的小鼠精原细胞(GC-1spg)氧化损伤以及铁死亡的保护作用及其机制。方法将健康雄性SD大鼠30只随机分为空白组、左卡尼汀阳性组、参杞强精颗粒组,灌胃给药7 d后,采集含药血清。将小鼠精原细胞随机分为正常对照组、模型对照组、空白血清组、左卡尼汀含药血清组、参杞强精颗粒含药血清组,除正常对照组外,其余各组制备细胞氧化应激损伤模型,各组给药干预24 h,细胞计数试剂-8(CCK-8)法检测细胞存活率,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测细胞活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)水平;铁离子比色法检测细胞内铁离子水平;比色法检测细胞内Caspase-3与Caspase-9活性;实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)法测定谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、长链酯酰辅酶A合成酶4(ACSL4)mRNA含量。结果与正常对照组比较,模型对照组细胞增殖活性显著下降,细胞内ROS、MDA和铁离子水平显著升高,CAT、GSH、SOD活性显著降低,Caspase-3和Caspase-9活性显著升高,均差异有统计学意义(P<0.05);与模型对照组比较,参杞强精颗粒含药血清组细胞增殖活性显著提高,细胞内ROS、MDA和铁离子水平降低,CAT、GSH、SOD活性升高,Caspase-3和Caspase-9活性降低,均差异有统计学意义(P<0.05);qRT-PCR结果表明,与模型对照组比较,参杞强精颗粒含药血清组GPX4 mRNA表达上调,ACSL4 mRNA表达降低,均差异有统计学意义(P<0.05)。结论参杞强精颗粒对氧化应激损伤和铁死亡的小鼠精原细胞具有显著保护作用,其机制可能与降低Caspase-3和Caspase-9活性及抑制氧化应激损伤和铁死亡有关。 展开更多

关键词 参杞强精颗粒 含药血清 小鼠精原细胞 氧化应激损伤 铁死亡

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资癸益冲方通过调控SIRT1/PGC-1α信号通路对卵巢颗粒细胞线粒体能量代谢的改善作用 被引量：1

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作者 刘雪平 唐思玲 +5 位作者 宿滋 李荣霞 郗红燕 张新苗 吴忠玉 段彦苍 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期3271-3277,共7页

目的探讨资癸益冲方对早发性卵巢功能不全(POI)体外模型线粒体能量代谢的影响。方法应用丙烯醛(ACR)干预人卵巢颗粒细胞KGN构建POI体外模型,给予资癸益冲方含药血清干预,设置对照组、ACR组、资癸益冲方组、EX527(SIRT1抑制剂)组、EX527... 目的探讨资癸益冲方对早发性卵巢功能不全(POI)体外模型线粒体能量代谢的影响。方法应用丙烯醛(ACR)干预人卵巢颗粒细胞KGN构建POI体外模型,给予资癸益冲方含药血清干预,设置对照组、ACR组、资癸益冲方组、EX527(SIRT1抑制剂)组、EX527+资癸益冲方组。流式细胞术检测细胞凋亡率,DCFH-DA法检测细胞ROS水平,Mito-Trakine荧光标记法检测细胞线粒体数量,Seahorse法检测细胞线粒体氧化磷酸化水平,比色法检测细胞ATP水平,RT-qPCR法检测细胞mtDNA拷贝数和SIRT1、PGC-1α、Nrf1、TFAM mRNA表达,Western blot法检测细胞SIRT1、PGC-1α、Ac-PGC-1α、Nrf1、TFAM蛋白表达。结果与对照组比较,ACR组KGN细胞凋亡率和ROS水平升高(P<0.05,P<0.01),线粒体数量和mtDNA拷贝数减少(P<0.01),线粒体有氧呼吸基础值、呼吸最大值、储备值和ATP水平降低(P<0.05,P<0.01),SIRT1、PGC-1α、Nrf1、TFAM mRNA及蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01),Ac-PGC-1α蛋白表达升高(P<0.01);与ACR组比较,资癸益冲方组以上指标均改善(P<0.05,P<0.01)。资癸益冲方与EX527联用后,逆转了前者对KGN细胞的上述作用(P<0.05,P<0.01)。结论资癸益冲方可能通过激活SIRT1/PGC-1α信号通路增加线粒体生物合成,改善ACR诱导的KGN细胞线粒体能量代谢障碍。 展开更多

关键词 资癸益冲方 含药血清 卵巢颗粒细胞 线粒体生物合成 线粒体能量代谢 SIRT1/PGC-1α信号通路

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仙花活骨丹颗粒对小鼠MSCs激素诱导分化的影响 被引量：9

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作者 史传道 杨晓航 +3 位作者 于远望 贾文鹏 邵威 李文彬 《辽宁中医杂志》 CAS 北大核心 2005年第8期848-849,共2页

目的:通过仙花活骨丹颗粒对BALB/C小鼠骨髓间充质干细胞(简称MSCs)激素诱导分化影响的观察,揭示该药物治疗大量激素导致的股骨头缺血性坏死的药理学机制。方法:采用骨髓间充质干细胞体外培养技术,以不同剂量地塞米松作为诱导剂诱导MSCs... 目的:通过仙花活骨丹颗粒对BALB/C小鼠骨髓间充质干细胞(简称MSCs)激素诱导分化影响的观察,揭示该药物治疗大量激素导致的股骨头缺血性坏死的药理学机制。方法:采用骨髓间充质干细胞体外培养技术,以不同剂量地塞米松作为诱导剂诱导MSCs脂肪分化。用以效应剂量的药物灌胃,采用药后1h、3h、5h血清,与激素诱导的MSCs共培养21日,光镜下脂肪细胞苏丹Ⅲ染色后计数。结果:其中不含药血清各组中脂肪细胞数量最多,不同地塞米松剂量中,1×10-6mol/L组脂肪细胞数量最多。含药血清各组中1h组脂肪细胞数量最少,其次为3h和5h组。检测各组中共培养MSCs细胞内碱性磷酸酶(ALP)活性,含药血清组均有不同程度提高。结论:仙花活骨丹颗粒可有效抑制地塞米松诱导的MSCs脂肪分化进程,提高其成骨细胞分化能力,从而建立了该药治疗股骨头缺血性坏死的药理学机制。 展开更多

关键词 仙花活骨丹颗粒 含药血清 骨髓间充质干细胞 脂肪细胞 动物实验

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麦贞花颗粒对H_9C_2心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用及凋亡的影响 被引量：1

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作者 陈艺 严冬 +2 位作者 方祝元 李育 钱玉良 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期884-888,共5页

目的探讨麦贞花颗粒(麦冬、女贞子、灵芝、水蛭等)含药血清对H9C2心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用及对细胞凋亡的影响。方法将H9C2心肌细胞随机分为正常对照组、缺氧/复氧组和麦贞花颗粒含药血清组。用酶联免疫吸附试验检测超氧化物歧... 目的探讨麦贞花颗粒(麦冬、女贞子、灵芝、水蛭等)含药血清对H9C2心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用及对细胞凋亡的影响。方法将H9C2心肌细胞随机分为正常对照组、缺氧/复氧组和麦贞花颗粒含药血清组。用酶联免疫吸附试验检测超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、环磷酸腺苷(cAMP),定磷法测定Na+-K+-ATP酶活性,RT-PCR测定谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)mRNA表达,电镜检测心肌细胞凋亡。结果麦贞花颗粒血清预处理心肌细胞48 h能明显降低上清液中MDA水平,提高SOD、Na+-K+-ATP酶、cAMP活性,上调GPX mRNA表达,与缺氧/复氧组相比均有显著性差异(均P<0.05～0.01);电镜检测心肌细胞显示麦贞花颗粒含药血清组具有相对完整的细胞膜和细胞器而缺氧/复氧已经出现凋亡小体。结论麦贞花颗粒含药血清对心肌细胞缺氧/复氧损伤具有明显保护作用并能抑制心肌细胞凋亡。 展开更多

关键词 麦贞花颗粒含药血清 缺氧 复氧损伤 细胞凋亡

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