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编码1,3-丙二醇氧化还原酶同工酶基因yqhD的克隆与高效表达
被引量：
6
1
作者
张晓梅
唐雪明
+4 位作者
诸葛斌
沈微
饶志明
方慧英
诸葛健
《食品与生物技术学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第4期77-80,共4页
利用PCR技术从大肠杆菌(Escherichia coli)中扩增出1.16 kb的编码1,3-丙二醇氧化还原酶同工酶的基因yqhD,将其连接到温控表达载体pHsh,得到重组载体pHsh-yqhD,重组载体在大肠杆菌JM109中得到高效表达。SDS-PAGE分析显示:融合表达产物的...
利用PCR技术从大肠杆菌(Escherichia coli)中扩增出1.16 kb的编码1,3-丙二醇氧化还原酶同工酶的基因yqhD,将其连接到温控表达载体pHsh,得到重组载体pHsh-yqhD,重组载体在大肠杆菌JM109中得到高效表达。SDS-PAGE分析显示:融合表达产物的相对分子质量均为43 000,同核酸序列测定所推导的值相符。对含有yqhD的基因工程菌进行表达研究表明:42℃诱导4 h,1,3-丙二醇氧化还原酶同工酶的酶活力达到100 IU/mg,而对照菌株的酶活力仅为0.5IU/mg。
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关键词
1
3-丙二醇氧化还原酶同工酶
克隆
表达
基因
温控表达载体
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职称材料
耐热过氧化氢酶基因工程菌的构建及其发酵条件
被引量：
8
2
作者
段绪果
沈微
+5 位作者
李艳丽
饶志明
唐雪明
方慧英
刘吉泉
诸葛健
《食品与生物技术学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第2期74-78,共5页
利用PCR扩增技术以嗜热脂肪芽孢杆菌IAM11001染色体DNA为模板,扩增得到嗜热脂肪芽孢杆菌过氧化氢酶编码基因perA。再与经EcoRⅠ酶切的温控表达载体pBV220连接,构建重组质粒,并转化宿主大肠杆菌JM109,得到耐热过氧化氢酶基因工程菌,然后...
利用PCR扩增技术以嗜热脂肪芽孢杆菌IAM11001染色体DNA为模板,扩增得到嗜热脂肪芽孢杆菌过氧化氢酶编码基因perA。再与经EcoRⅠ酶切的温控表达载体pBV220连接,构建重组质粒,并转化宿主大肠杆菌JM109,得到耐热过氧化氢酶基因工程菌,然后对该工程菌在LB培养基和半合成培养基中的发酵条件进行了优化。结果表明:在LB培养基中,诱导时期和酶合成最佳诱导时间均为5 h,最大产酶量达到72.9 U/mL;在半合成培养基中,于30℃培养4 h,再于42℃诱导培养6 h,产酶量最高达到131 U/mL。
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关键词
耐热过氧化氢酶
基因工程菌
温控表达载体
发酵条件
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职称材料
题名
编码1,3-丙二醇氧化还原酶同工酶基因yqhD的克隆与高效表达
被引量：
6
1
作者
张晓梅
唐雪明
诸葛斌
沈微
饶志明
方慧英
诸葛健
机构
江南大学生物工程学院
出处
《食品与生物技术学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第4期77-80,共4页
文摘
利用PCR技术从大肠杆菌(Escherichia coli)中扩增出1.16 kb的编码1,3-丙二醇氧化还原酶同工酶的基因yqhD,将其连接到温控表达载体pHsh,得到重组载体pHsh-yqhD,重组载体在大肠杆菌JM109中得到高效表达。SDS-PAGE分析显示:融合表达产物的相对分子质量均为43 000,同核酸序列测定所推导的值相符。对含有yqhD的基因工程菌进行表达研究表明:42℃诱导4 h,1,3-丙二醇氧化还原酶同工酶的酶活力达到100 IU/mg,而对照菌株的酶活力仅为0.5IU/mg。
关键词
1
3-丙二醇氧化还原酶同工酶
克隆
表达
基因
温控表达载体
Keywords
1, 3-propanediol oxidoreductase isoenzyme
cloning
expressing
gene
temperature control expression vector
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
耐热过氧化氢酶基因工程菌的构建及其发酵条件
被引量：
8
2
作者
段绪果
沈微
李艳丽
饶志明
唐雪明
方慧英
刘吉泉
诸葛健
机构
江南大学工业生物技术教育部重点实验室
出处
《食品与生物技术学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第2期74-78,共5页
文摘
利用PCR扩增技术以嗜热脂肪芽孢杆菌IAM11001染色体DNA为模板,扩增得到嗜热脂肪芽孢杆菌过氧化氢酶编码基因perA。再与经EcoRⅠ酶切的温控表达载体pBV220连接,构建重组质粒,并转化宿主大肠杆菌JM109,得到耐热过氧化氢酶基因工程菌,然后对该工程菌在LB培养基和半合成培养基中的发酵条件进行了优化。结果表明:在LB培养基中,诱导时期和酶合成最佳诱导时间均为5 h,最大产酶量达到72.9 U/mL;在半合成培养基中,于30℃培养4 h,再于42℃诱导培养6 h,产酶量最高达到131 U/mL。
关键词
耐热过氧化氢酶
基因工程菌
温控表达载体
发酵条件
Keywords
thermo-stable catalase
engineering strain
temperature control expression vector
fermentation condition
分类号
TQ920 [轻工技术与工程—发酵工程]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
编码1,3-丙二醇氧化还原酶同工酶基因yqhD的克隆与高效表达
张晓梅
唐雪明
诸葛斌
沈微
饶志明
方慧英
诸葛健
《食品与生物技术学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006
6
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
耐热过氧化氢酶基因工程菌的构建及其发酵条件
段绪果
沈微
李艳丽
饶志明
唐雪明
方慧英
刘吉泉
诸葛健
《食品与生物技术学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006
8
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职称材料
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参考文献
引证文献
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