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淫羊藿次苷Ⅰ及淫羊藿次苷Ⅱ通过BMP/Runx2/Osx信号通路促进大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化的实验研究 被引量:35
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作者 訾慧 范颖 +2 位作者 蒋宁 谷丽艳 董秀 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期690-695,共6页
目的观察淫羊藿次苷Ⅰ及淫羊藿次苷Ⅱ对大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)成骨分化过程中BMP-2/Runx2/Osx信号通路的影响,探讨其可能的作用机制。方法贴壁筛选法体外培养BMSCs,随机分为空白对照组、阳性转化液组... 目的观察淫羊藿次苷Ⅰ及淫羊藿次苷Ⅱ对大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)成骨分化过程中BMP-2/Runx2/Osx信号通路的影响,探讨其可能的作用机制。方法贴壁筛选法体外培养BMSCs,随机分为空白对照组、阳性转化液组、抑制剂组、淫羊藿次苷Ⅰ组及淫羊藿次苷Ⅰ+抑制剂组、淫羊藿次苷Ⅱ组及淫羊藿次苷Ⅱ+抑制剂组。通过茜素红染色,对各组促进骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化作用进行药效学评价; ELISA法检测各组ALP活性、BGP、COL-Ⅰ、BMP2蛋白分泌量;RTReal-TimePCR法检测各组ALP、BGP、Osterix和Runx-2 mRNA基因表达。结果茜素红染色结果表明,淫羊藿次苷Ⅰ组及淫羊藿次苷Ⅱ组均可明显观察到大量的矿化结节的形成;ELISA实验结果表明,与空白对照组比较,淫羊藿次苷Ⅰ及淫羊藿次苷Ⅱ均能明显促进ALP细胞活性及BGP、COL-Ⅰ、BMP-2蛋白分泌量,并且差异具有统计学意义(P<0.05);两组药物作用强度均已达到阳性转化液组的80%以上。同时,淫羊藿次苷Ⅰ对ALP活性、 BGP蛋白表达均明显强于淫羊藿次苷Ⅱ,并且差异具有统计学意义(P<0.05);对COL-Ⅰ、BMP-2的蛋白表达量,两者差异无统计学意义(P>0.05)。RT-PCR实验结果表明,与空白对照组相比,淫羊藿次苷Ⅰ及淫羊藿次苷Ⅱ均可显著上调成骨相关转录因子ALP、BGP、RunX2,并进一步调节其下游基因Osterix的转录表达,差异具有统计学意义(P<0.05);与阳性对照液组比较,淫羊藿次苷Ⅱ对ALP、Osterix的mRNA表达无明显差异(P>0.05);淫羊藿次苷Ⅰ与淫羊藿次苷Ⅱ组比较,淫羊藿次苷Ⅱ对Osterix mRNA的表达明显强于淫羊藿次苷Ⅰ,并且差异具有统计学意义(P<0.05)。对ALP、BGP、RunX2 mRNA的表达二者无显著性差异(P>0.05)。结论淫羊藿次苷Ⅰ和淫羊藿次苷Ⅱ均能促进BMSCs定向成骨转化,其作用机制可能与激活BMP/Runx2/Osx信号通路有关。淫羊藿次苷Ⅰ和淫羊藿次苷Ⅱ作用差异可能与淫羊藿次苷Ⅰ在体内生物转化为淫羊藿次苷Ⅱ有关。 展开更多
关键词 淫羊藿次苷 淫羊藿次苷 成骨分化 BMP-2/Runx2/OSX信号通路 骨髓间充质干细胞 大鼠 动物实验
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淫羊藿次苷Ⅱ通过激活雌激素信号通路促进骨髓间充质干细胞的成骨性分化 被引量:26
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作者 翟远坤 陈克明 +3 位作者 葛宝丰 马慧萍 明磊国 程国政 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期1451-1457,共7页
目的研究淫羊藿次苷Ⅱ(icarisideⅡ,ICSⅡ)对大鼠体外培养骨髓间充质干细胞(rat bone marrow stromal cells,rBMSCs)成骨性分化过程中雌激素信号通路的影响。方法贴壁筛选法体外培养rBMSCs,采用1×10-5 mol.L-1的ICSⅡ进行药物干预... 目的研究淫羊藿次苷Ⅱ(icarisideⅡ,ICSⅡ)对大鼠体外培养骨髓间充质干细胞(rat bone marrow stromal cells,rBMSCs)成骨性分化过程中雌激素信号通路的影响。方法贴壁筛选法体外培养rBMSCs,采用1×10-5 mol.L-1的ICSⅡ进行药物干预,比较ICSⅡ组、ICI组(ICI 182.78)、ICSⅡ+ICI组、Estrogen组、Esreogen+ICI组和不加药的对照组之间雌激素通路相关因子(包括ERα、PR和PS-2)的表达量,同时对比各组之间的成骨性指标,包括碱性磷酸酶活性、骨钙素和Ⅰ型胶原分泌量及钙盐沉积量。提取TotalRNA,Real Time RT-PCR检测Runx-2、Osterix(OSX)、ERα、PR、及PS-2 mRNA的表达情况,同时提取总蛋白,Westernblot法检测Ⅰ型胶原蛋白、ERα、PR和PS-2的分泌量。结果 ICSⅡ可明显增强碱性磷酸酶(ALP)活性,促进骨钙素、Ⅰ型胶原蛋白的分泌和钙盐沉积,与成骨性分化相关的因子OSX和Runx-2的基因表达量也升高,但这些效应均可被雌激素通路的特异性阻断剂ICI 182.780所抑制。结论 ICSⅡ可促进rBMSCs的成骨性分化,但采用ICI 182.780阻断雌激素信号通路后,成骨性分化的指标随之降低,提示ICSⅡ是通过激活雌激素信号通路来促进rBMSCs成骨性分化的。 展开更多
关键词 淫羊藿次苷 骨髓间充质干细胞 成骨性分化 I型胶原 雌激素信号通路 雌激素受体Α ICI182.780
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淫羊藿苷和淫羊藿次苷Ⅱ对内皮细胞eNOS表达和NOS活性的影响 被引量:15
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作者 刘涛 覃新程 +5 位作者 李维仁 周峰 李广永 辛华 巩艳青 辛钟成 《北京大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期500-504,共5页
目的:用过表达表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)的猪动脉内皮细胞(porcineaorta endothelial,PAE)作为研究对象,探讨淫羊藿苷(icariin)和淫羊藿次苷Ⅱ(icarisideⅡ)对PAE中内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitr... 目的:用过表达表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)的猪动脉内皮细胞(porcineaorta endothelial,PAE)作为研究对象,探讨淫羊藿苷(icariin)和淫羊藿次苷Ⅱ(icarisideⅡ)对PAE中内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)表达和一氧化氮合酶(nitric oxide sythase,NOS)活性的影响及其可能机制。方法:利用PAE中转染EGFR并筛选稳定株,分别用12.5μmol/L的淫羊藿苷和淫羊藿次苷Ⅱ处理PAE和PAE-EGFR细胞48 h,观察各组细胞eNOS的表达变化;另在淫羊藿苷或淫羊藿次苷Ⅱ处理PAE和PAE-EGFR细胞时,分别加入表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)共同处理细胞,观察各组细胞eNOS的表达变化;检测淫羊藿苷和淫羊藿次苷Ⅱ处理前后PAE和PAE-EGFR细胞NOS的酶活性改变,并以西地那非作为对照。结果:Western blot显示PAE-EGFR细胞表达eNOS的基础值要比PAE细胞高,淫羊藿苷和淫羊藿次苷Ⅱ处理时PAE和PAE-EGFR细胞株中都能引起eNOS表达增加,并且在PAE-EGFR稳定株中eNOS的表达量比PAE细胞明显提高(P<0.01);在表达EGFR的PAE-EGFR细胞中,当淫羊藿次苷Ⅱ的浓度达到10-8 mol/L时,NOS活性增加到(15.37±1.49)u/mg,比PAE细胞高4.66 u/mg。在药物浓度达到10-7,10-6和10-5 mol/L时,淫羊藿次苷Ⅱ对PAE-EGFR细胞NOS活性的影响较PAE细胞显著增加(P<0.01);淫羊藿苷也能增加PAE和PAE-EGFR细胞的NOS酶活性,但是其效果比较淫羊藿次苷Ⅱ组平均低20%,而西地那非没有显著影响NOS酶活性。结论:淫羊藿苷和淫羊藿次苷Ⅱ可上调PAE和PAE-EGFR细胞eNOS的表达和提高NOS活性,对血管内皮细胞功能可能具有改善作用,而且淫羊藿次苷Ⅱ的效果优于淫羊藿苷,其作用机制可能与激活PAE细胞的EGF-EGFR信号通路有关。 展开更多
关键词 淫羊藿次苷 一氧化氮合酶 内皮细胞 受体 表皮生长因子
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淫羊藿次苷Ⅰ与其原型药物淫羊藿苷对rBMSCs成骨性分化的影响比较 被引量:16
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作者 訾慧 孙丽 +2 位作者 蒋宁 林庶茹 郑洪新 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第8期1011-1016,共6页
目的观察淫羊藿次苷Ⅰ(IcarisideⅠ)与其原型药物淫羊藿苷(Icariin,ICA)对大鼠骨髓间充质干细胞(rat bone marrow stromal cells,r BMSCs)成骨分化过程中碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素(BGP)蛋白表达量及ALP、BGP、Osterix和Runx-2 mRNA表达... 目的观察淫羊藿次苷Ⅰ(IcarisideⅠ)与其原型药物淫羊藿苷(Icariin,ICA)对大鼠骨髓间充质干细胞(rat bone marrow stromal cells,r BMSCs)成骨分化过程中碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素(BGP)蛋白表达量及ALP、BGP、Osterix和Runx-2 mRNA表达的影响。方法贴壁筛选法体外培养r BMSCs,以1×10-5mol/L的ICA和IcarisideⅠ对r BMSCs的成骨性分化进行药物干预。ELISA法检测ICA组、IcarisideⅠ组和空白对照组及转化液组之间ALP活性、BGP分泌量;RT Real-Time PCR法检测ALP、BGP、Osterix和Runx-2 mRNA基因表达。结果与空白对照组相比,IcarisideⅠ与其原型药物ICA均可显著增强r BMSCs的ALP活性,促进BGP的分泌,提高ALP、BGP、Osterix和Runx-2的mRNA水平(P<0.01)。IcarisideⅠ与ICA组比较,其ALP、BGP蛋白表达量及基因表达明显高于ICA组(P<0.01),Osterix和Runx-2的基因表达两组无显著性差异。结论 IcarisideⅠ也能促进r BMSCs成骨性分化,并且其活性高于原型药物ICA,也是淫羊藿发挥抗骨质疏松活性的主要成分。(2)提示补肾中药淫羊藿其补肾壮骨作用与促进ALP、BGP蛋白分泌量,上调ALP、BGP、Osterix和Runx-2的mRNA水平有关。 展开更多
关键词 中医中药:淫羊藿次苷 成骨性分化
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淫羊藿苷与淫羊藿次苷Ⅱ的体外抗氧化作用 被引量:19
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作者 包宇 杨建雄 孙润广 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期423-428,共6页
目的:检测淫羊藿苷和淫羊藿次苷Ⅱ的体外抗氧化活性,阐明淫羊藿黄酮类化合物的抗氧化机制。方法:以抗坏血酸(Vc)、二丁基羟基甲苯(BHT)为阳性对照,测定淫羊藿苷、淫羊藿次苷Ⅱ和BHT对1,1-二苯基-2-苦苯肼自由基(DPPH.)的清除率;铁氰化... 目的:检测淫羊藿苷和淫羊藿次苷Ⅱ的体外抗氧化活性,阐明淫羊藿黄酮类化合物的抗氧化机制。方法:以抗坏血酸(Vc)、二丁基羟基甲苯(BHT)为阳性对照,测定淫羊藿苷、淫羊藿次苷Ⅱ和BHT对1,1-二苯基-2-苦苯肼自由基(DPPH.)的清除率;铁氰化钾还原法测定其还原力;利用NADH-NBT-PMS系统测定其对超氧阴离子(O2-.)的清除率;2-脱氧-D-核糖降解法测定淫羊藿苷和淫羊藿次苷Ⅱ对羟自由基(OH.)的清除率,硫代巴比妥酸法测定其对脂质过氧化的抑制率,β-胡萝卜素-亚油酸自氧化体系测定其总抗氧化能力。结果:不同样品对DPPH.均有一定的清除作用,淫羊藿次苷Ⅱ清除DPPH.的能力较淫羊藿苷强(P<0.05)。淫羊藿苷和淫羊藿次苷Ⅱ在浓度梯度范围内对O2-.有一定的清除作用,均表现出一定的浓度依赖性,与同浓度的BHT比较,淫羊藿苷和淫羊藿次苷Ⅱ对O2-.的清除率较低,且淫羊藿苷的清除能力略低于淫羊藿次苷Ⅱ。淫羊藿苷和淫羊藿次苷Ⅱ在浓度为0.1~0.5g.L-1时对OH.清除率分别为(16.76±0.35)%~(40.56±1.46)%和(15.65±0.72)%~(28.51±0.91)%。当浓度为0.9g.L-1时,淫羊藿苷、Vc和淫羊藿次苷Ⅱ对脂质过氧化的抑制率为(58.79±1.56)%、(75.05±2.12)%和(37.82±1.43)%。随着浓度的增加,抑制率不再有显著的增加。随着样品浓度的增加,淫羊藿苷、淫羊藿次苷Ⅱ和标准品Vc还原力均表现出浓度依赖性。30~120min内淫羊藿次苷Ⅱ的抗氧化活性均低于淫羊藿苷和BHT(P<0.05或P<0.01)。淫羊藿苷和淫羊藿次苷Ⅱ在体外抗氧化的各项指标中表现出的抗氧化活性均弱于Vc和BHT。结论:淫羊藿苷和淫羊藿次苷Ⅱ在清除DPPH.、O2-.、OH.和抑制脂质过氧化、总抗氧化能力和还原力方面,均具有明显的抗氧化能力。 展开更多
关键词 淫羊藿次苷 自由基 脂质过氧化
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淫羊藿次苷Ⅱ对小鼠脾淋巴细胞体外增殖的影响及其机制研究 被引量:7
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作者 程坚 张新民 +3 位作者 陈伟华 应健 蔡外娇 刘闰红 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期323-327,共5页
目的:研究淫羊藿次苷Ⅱ对正常小鼠脾淋巴细胞体外增殖的影响,并初步探讨其机制。方法:不同浓度的淫羊藿次苷Ⅱ与刀豆素A(Concanavalin A,ConA)体外处理小鼠脾淋巴细胞,观察淫羊藿次苷Ⅱ对细胞增殖的影响,初步确定其发挥作用的最佳浓度;... 目的:研究淫羊藿次苷Ⅱ对正常小鼠脾淋巴细胞体外增殖的影响,并初步探讨其机制。方法:不同浓度的淫羊藿次苷Ⅱ与刀豆素A(Concanavalin A,ConA)体外处理小鼠脾淋巴细胞,观察淫羊藿次苷Ⅱ对细胞增殖的影响,初步确定其发挥作用的最佳浓度;然后以最佳浓度淫羊藿次苷Ⅱ在不同时间点与ConA协同处理细胞,采用细胞增殖-毒性检测试剂盒检测增殖能力;运用流式细胞仪检测细胞周期分布;用荧光定量分析仪检测细胞内游离Ca2+浓度的变化。结果:淫羊藿次苷Ⅱ在10-12~10-9mol/L的浓度范围作用48小时,对细胞增殖有一定的促进作用,呈浓度依赖性。在10-7~10-4mol/L范围出现抑制作用。以10-9mol/L的淫羊藿次苷Ⅱ处理细胞,发现其与ConA在不同时间点促进细胞增殖作用显著优于ConA单独应用;并且促进细胞由G0/G1期进入S与G2/M期,并以第24小时效果更明显;促进细胞内Ca2+浓度升高,效果以第12小时最明显。结论:不同浓度的淫羊藿次苷Ⅱ对小鼠脾淋巴细胞增殖具有促进作用,有浓度、时间依赖性,这种促增殖作用的机制可能与升高细胞内Ca2+浓度,进而加快细胞由G0/G1期进入S与G2/M期有关。 展开更多
关键词 淫羊藿次苷 脾淋巴细胞 增殖 细胞周期 细胞内CA2+
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LC-MS/MS测定家兔胆汁中淫羊藿次苷Ⅱ 被引量:6
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作者 张依 姚志红 +3 位作者 秦子飞 李凯宇 戴毅 姚新生 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期305-310,共6页
建立能定量分析家兔胆汁中淫羊藿次苷Ⅱ的液相色谱-串联质谱联用法(LC-MS/MS).以水饱和乙酸乙酯萃取为家兔胆汁样本前处理方法,采用OSD柱(150×4.6 mm,i.d.,5μm),以乙腈-水(各含0.1%的甲酸)为流动相进行梯度洗脱,采用电喷雾离子源(... 建立能定量分析家兔胆汁中淫羊藿次苷Ⅱ的液相色谱-串联质谱联用法(LC-MS/MS).以水饱和乙酸乙酯萃取为家兔胆汁样本前处理方法,采用OSD柱(150×4.6 mm,i.d.,5μm),以乙腈-水(各含0.1%的甲酸)为流动相进行梯度洗脱,采用电喷雾离子源(ESI),二级质谱全扫描,负离子方式下检测.方法学考察结果显示,该方法专属性良好;日内精密度(RSD)不大于10.6%,日间精密度(RSD)不大于8.3%,准确度(RE)在-4.4%~+5.0%范围以内;胆汁样本稳定性良好;基质效应对测定影响可以忽略不计且提取率较高并稳定.该方法快速而灵敏,可用于家兔灌胃给以淫羊藿总黄酮后胆汁中的活性代谢物淫羊藿次苷Ⅱ的动态变化研究. 展开更多
关键词 淫羊藿次苷 液相色谱-串联质谱联用法 定量分析 活性代谢物 总黄酮 家兔胆汁
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淫羊藿次苷Ⅱ通过调节MMP-2、MMP-9和TIMP-1的表达抗自发性高血压大鼠心肌纤维化 被引量:19
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作者 付舒 李叶丽 +3 位作者 吴雨婷 岳云 高杨 杨丹莉 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第9期1253-1257,共5页
目的观察淫羊藿次苷Ⅱ(icarisidⅡ,ICSⅡ)对自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rat,SHR)心肌纤维化的干预作用,并探讨其对基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase,MMP-2)、MMP-9及质金属蛋白酶抑制剂(tissue inhibitor o... 目的观察淫羊藿次苷Ⅱ(icarisidⅡ,ICSⅡ)对自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rat,SHR)心肌纤维化的干预作用,并探讨其对基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase,MMP-2)、MMP-9及质金属蛋白酶抑制剂(tissue inhibitor of metalloproteinases,TIMPs)的影响。方法将20只♂SHR大鼠随机分为模型(SHR)组、ICSⅡ低、中、高剂量组(ICSⅡ-L、ICSⅡ-M、ICSⅡ-H),♂WKY大鼠为阴性对照(WKY)组。ICSⅡ各剂量处理组持续灌胃12周后,检测大鼠收缩血压,处死大鼠分离左心室计算左心质量指数,Masson染色观察心肌胶原含量变化;real time PCR检测左心室组织中MMP-2、MMP-9、TIMP-1 mRNA的表达;Western blot检测左心室组织中MMP-2、MMP-9、TIMP-1、CollagenⅠ、CollagenⅢ蛋白的表达。结果 ICSⅡ(8、16 mg·kg^(-1))处理组胶原蛋白沉积明显减轻,收缩压和左心质量指数明显下降(P<0.05),左心室组织中MMP-2、MMP-9、CollagenⅠ和CollagenⅢ表达量明显减少(P<0.05),TIMP-1的表达量明显增加(P<0.05)。结论 ICSⅡ可改善SHR大鼠心肌纤维化,其机制可能与降低血压,下调MMP-2、MMP-9,上调TIMP-1的表达有关。 展开更多
关键词 淫羊藿次苷 心肌纤维化 自发性高血压大鼠 MMP-2 MMP-9 TIMP-1 细胞外基质
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荧光光谱法研究淫羊藿苷和淫羊藿次苷Ⅰ与牛血清白蛋白的相互作用(英文) 被引量:1
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作者 要晓静 赵伟 +1 位作者 阚鸿 刘忠英 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期666-670,共5页
在模拟生理条件下应用荧光光谱学方法分别研究了淫羊藿苷和淫羊藿次苷Ⅰ与牛血清白蛋白(BSA)间的结合作用.根据荧光强度数据,计算出了结合常数KA,结合位点数n和热力学参数(△G,△H和△S).实验结果表明,淫羊藿苷和淫羊藿次苷Ⅰ都能显著猝... 在模拟生理条件下应用荧光光谱学方法分别研究了淫羊藿苷和淫羊藿次苷Ⅰ与牛血清白蛋白(BSA)间的结合作用.根据荧光强度数据,计算出了结合常数KA,结合位点数n和热力学参数(△G,△H和△S).实验结果表明,淫羊藿苷和淫羊藿次苷Ⅰ都能显著猝灭BSA的内源荧光,猝灭机制均为形成基态复合物的单一静态猝灭过程.不同温度下(17℃,27℃,37℃)得到的KA和n值,表明淫羊藿次苷Ⅰ与BSA的结合强于淫羊藿苷.从得到的热力学参数判断,淫羊藿苷与BSA间的主要作用力是氢键作用和范德华力,而疏水作用和静电引力在淫羊藿次苷Ⅰ与BSA形成复合物过程中起主导作用.而且同步荧光光谱显示,淫羊藿苷和淫羊藿次苷Ⅰ与BSA的结合导致BSA构象发生了变化. 展开更多
关键词 淫羊藿次苷 牛血清白蛋白 相互作用 荧光光谱法
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淫羊藿次苷Ⅱ对舌鳞状细胞癌上皮⁃间质转化的抑制作用 被引量:3
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作者 莫志洋 李英 +2 位作者 韩晓东 王虹霞 翁巧凤 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2020年第22期3069-3073,共5页
目的观察淫羊藿次苷Ⅱ(icariinⅡ,ICSⅡ)对舌鳞状细胞癌(tongue squamous cell carcinoma,TSCC)上皮⁃间质转化(epithelial⁃mesenchymal transition,EMT)的抑制作用,及其通过Notch1/PTEN/FAK通路的调控机制。方法取对数期Tca⁃8113细胞,... 目的观察淫羊藿次苷Ⅱ(icariinⅡ,ICSⅡ)对舌鳞状细胞癌(tongue squamous cell carcinoma,TSCC)上皮⁃间质转化(epithelial⁃mesenchymal transition,EMT)的抑制作用,及其通过Notch1/PTEN/FAK通路的调控机制。方法取对数期Tca⁃8113细胞,随机分为空白组,ICSⅡ低、中、高剂量组。测定各组增殖抑制率,迁移、侵袭能力,Notch1、PTEN、FAK、p⁃FAK蛋白相对表达量。结果ICSⅡ低、中、高剂量组24、48、72 h增殖抑制率均呈上升趋势(P<0.05);空白组,ICSⅡ低、中、高剂量组迁移率呈降低趋势(P<0.05),每个视野穿膜细胞数呈减少趋势(P<0.05),Notch1蛋白相对表达量及p⁃FAK/FAK呈降低趋势(P<0.05),PTEN蛋白相对表达量呈升高趋势(P<0.05)。结论ICSⅡ可抑制TSCC EMT,且呈剂量依赖性,推测与该药物可下调Notch1表达、上调PTEN表达、抑制FAK磷酸化有关。 展开更多
关键词 淫羊藿次苷 舌鳞状细胞癌 抑制 上皮⁃间质转化 Notch1/PTEN/FAK通路
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淫羊藿苷和淫羊藿次苷Ⅱ对气管切开大鼠T细胞亚群及细胞因子的影响 被引量:1
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作者 鞠静 谭人千 +4 位作者 姚金茜 彭玲玲 黄宗轩 潘宇政 韦进新 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第15期1829-1834,共6页
目的:探讨淫羊藿苷(ICA)和淫羊藿次苷Ⅱ(ICS-Ⅱ)对气管切开插管留置大鼠免疫功能与炎性反应的影响。方法:将72只SPF级雄性SD大鼠随机分成4组,正常对照组(A)、模型对照组(B)及模型治疗组(C、D),每组18只。制备大鼠气管切开插管留置模型... 目的:探讨淫羊藿苷(ICA)和淫羊藿次苷Ⅱ(ICS-Ⅱ)对气管切开插管留置大鼠免疫功能与炎性反应的影响。方法:将72只SPF级雄性SD大鼠随机分成4组,正常对照组(A)、模型对照组(B)及模型治疗组(C、D),每组18只。制备大鼠气管切开插管留置模型。模型成功6 h后给予C组ICS-Ⅱ4 mg/(kg·d)、D组ICA 30 mg/(kg·d)灌胃,A、B组灌胃等量0.9%生理盐水。分别在24、72、168 h取外周血及肺泡灌洗液。应用流式细胞仪检测外周血T细胞亚群(CD4+、CD8+、CD4+/CD8+)水平,酶联免疫吸附法(ELISA)检测肺泡灌洗液sIgA、IL-6及外周血血清IL-6含量。结果:气管切开大鼠分别用ICA和ICS-Ⅱ干预后:C组CD4+T细胞数量在168 h明显高于B组(P<0.05),D组在72 h、168 h明显高于B组(均P<0.05);D组在168 h明显高于C组(P<0.05)。C组CD8+T细胞数量在72 h、168 h明显低于B组(均P<0.05);D组与B组相比无明显差异(P>0.05);D组在72 h明显高于C组(P<0.05)。C组CD4+/CD8+与B组相比无明显差异(P>0.05);D组在168 h明显高于A、B、C 3组(均P<0.05)。C、D两组外周血IL-6含量在3个时段均明显低于A、B组(均P<0.05);且D组在168 h明显低于C组(P<0.05)。C、D两组肺泡灌洗液IL-6含量在72 h、168 h明显低于B组,且呈逐渐降低趋势(均P<0.05)。C、D两组sIgA含量在72 h、168 h明显高于B组(均P<0.05);D组在24 h、168 h明显高于C组(均P<0.05)。结论:ICA和ICS-Ⅱ能够提高肺泡灌洗液sIgA含量,抑制肺泡灌洗液及外周血IL-6表达和改善外周血T细胞亚群失衡,对气管切开大鼠起到减轻炎症及提高免疫的作用,且ICA效果优于ICS-Ⅱ,尤以168 h显著。 展开更多
关键词 淫羊藿次苷 气管切开 T细胞亚群 IL-6 SIGA
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重组地衣芽胞杆菌全细胞催化合成淫羊藿次苷D2 被引量:1
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作者 肖源 张同 +3 位作者 杨之帆 陈守文 占杨扬 陈俊 《武汉科技大学学报》 CAS 北大核心 2021年第6期438-444,共7页
分别利用糖基转移酶YjiC、YdhE、YojK的过表达载体电转化地衣芽胞杆菌DW2,相应获得重组菌株ID02、ID03和ID04,并借助pgcA和gtaB基因强化菌株ID02中的UDP-葡萄糖代谢途径来获得重组菌株ID05,研究了基因改造及发酵条件对淫羊藿次苷D2产量... 分别利用糖基转移酶YjiC、YdhE、YojK的过表达载体电转化地衣芽胞杆菌DW2,相应获得重组菌株ID02、ID03和ID04,并借助pgcA和gtaB基因强化菌株ID02中的UDP-葡萄糖代谢途径来获得重组菌株ID05,研究了基因改造及发酵条件对淫羊藿次苷D2产量的影响。结果表明,YjiC、YdhE、YojK均可糖基化酪醇合成淫羊藿次苷D2,且三者酶催化活性依次减弱;强化UDP-葡萄糖代谢途径并不能促进淫羊藿次苷D2的合成;经正交试验优化后的发酵培养基中NH 4Cl为3 g/L、磷酸缓冲盐为75 mmol/L,菌株ID02在此条件下发酵48 h时相应的淫羊藿次苷D2的产量可达到4010 mg/L。 展开更多
关键词 淫羊藿次苷D2 糖基转移酶 地衣芽胞杆菌 UDP-葡萄糖 酪醇 催化合成
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淫羊藿次苷Ⅱ通过p38MAPK调控成骨细胞护骨素表达的体外研究 被引量:18
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作者 龚一昕 刘尚全 +1 位作者 袁媛 张维娜 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2016年第12期1790-1794,共5页
目的观察淫羊藿次苷Ⅱ(ICAⅡ)对大鼠成骨细胞(OBs)护骨素(OPG)和p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)表达水平的影响,探讨ICAⅡ治疗骨质疏松症的相关机制。方法原代培养OBs,分为对照组、ICA Ⅱ组、混合组(ICAⅡ+p38MAPK特异性抑制剂SB203580... 目的观察淫羊藿次苷Ⅱ(ICAⅡ)对大鼠成骨细胞(OBs)护骨素(OPG)和p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)表达水平的影响,探讨ICAⅡ治疗骨质疏松症的相关机制。方法原代培养OBs,分为对照组、ICA Ⅱ组、混合组(ICAⅡ+p38MAPK特异性抑制剂SB203580)、抑制剂组(SB203580)组。PNPP法检测各组OBs碱性磷酸酶(ALP)活性,Western blot法检测p38MAPK蛋白、磷酸化p38MAPK(p-p38MAPK)、OPG蛋白水平,RT-PCR法检测各组OPG mRNA水平。结果与对照组比较,ICAⅡ组ALP活性显著上调(P<0.01),混合组ALP活性较ICAⅡ组下降(P<0.05);ICAⅡ组p-p38MAPK水平较对照组显著升高(P<0.01),混合组p-p38MAPK水平较ICAⅡ组明显降低(P<0.01);各组间总p38MAPK表达量无明显差异;ICAⅡ组OPG分泌水平较对照组明显上调(P<0.01),混合组OPG蛋白分泌与ICAⅡ组相比明显受抑制(P<0.01);ICAⅡ组OPG mRNA水平较对照组明显升高(P<0.01),混合组OPG mRNA水平较ICAⅡ组下降(P<0.05)。结论 ICAⅡ可促进成骨细胞分化和上调成骨细胞OPG表达,p38MAPK信号通路可能参与这一过程。 展开更多
关键词 淫羊藿次苷 成骨细胞 护骨素 P38MAPK 骨质疏松
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淫羊藿次苷Ⅱ改善自发性高血压大鼠左心室心肌细胞凋亡 被引量:13
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作者 吴雨婷 付舒 +3 位作者 岳云 钱志强 李叶丽 杨丹莉 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期1744-1749,共6页
目的观察淫羊藿次苷Ⅱ(icarisideⅡ,ICSⅡ)对自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rats,SHR)心肌细胞凋亡的干预作用,并探讨其可能的机制。方法 30只13周龄♂SHR随机分为模型组、ICSⅡ低、中、高剂量组及阳性药组(n=6);同时,... 目的观察淫羊藿次苷Ⅱ(icarisideⅡ,ICSⅡ)对自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rats,SHR)心肌细胞凋亡的干预作用,并探讨其可能的机制。方法 30只13周龄♂SHR随机分为模型组、ICSⅡ低、中、高剂量组及阳性药组(n=6);同时,同源♂京都大鼠(WKY)作为对照组(n=6)。所有大鼠适应性饲养1周后,ICSⅡ低、中、高剂量组分别给予ICSⅡ4、8、16 mg·kg^(-1)(ig,qd),阳性药组给予氯沙坦20 mg·kg^(-1)至26周龄,WKY和SHR组给予等体积双蒸水。给药12周后,测量大鼠血压,处死大鼠并分离左心室,计算左心质量指数;HE染色观察左心室病理变化;TUNEL染色观察左心室心肌细胞凋亡情况;real time RTPCR检测左心室Bcl-2、Bax mRNA水平;Western blot检测左心室Bcl-2、Bax和cleaved-caspase-3蛋白表达。结果相较于WKY组,SHR组大鼠血压升高,左心质量指数增加(P<0.05);心肌细胞排列紊乱、细胞肥大明显并伴有肌丝断裂;左室心肌细胞凋亡明显,Bax mRNA水平和蛋白表达上调,Bcl-2 mRNA水平和蛋白表达下调,Bax/Bcl-2比值升高,cleaved-caspase-3蛋白表达上调(P<0.05)。与SHR组相比,ICSⅡ中、高剂量组和阳性药组血压和左心质量指数下降(P<0.05);心肌细胞排列趋于整齐、细胞肥大及心肌细胞凋亡情况均得以改善;Bax mRNA水平和蛋白表达下调,而Bcl-2 mRNA水平和蛋白表达上调,Bax/Bcl-2比值降低,cleaved-caspase-3蛋白下调(P<0.05)。结论 ICSⅡ可减轻SHR左心室心肌细胞凋亡,其机制与其降低血压和抑制线粒体凋亡途径相关。 展开更多
关键词 淫羊藿次苷 自发性高血压大鼠 左室重构 心肌细胞凋亡 BCL2 BAX cleavedcaspase3
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淫羊藿次苷Ⅱ通过改善内质网应激和caspase-12信号改善SHR大鼠左心室功能 被引量:8
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作者 吴雨婷 李叶丽 +3 位作者 付舒 岳云 孙瑞敏 杨丹莉 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期571-575,共5页
目的基于内质网应激与caspase-12信号,探索淫羊藿次苷Ⅱ(icarisideⅡ, ICSⅡ)改善自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rats, SHRs)左心室功能的机制。方法 30只14周龄♂SHRs分为模型组、ICSⅡ低、中、高剂量(4、8、16 mg·... 目的基于内质网应激与caspase-12信号,探索淫羊藿次苷Ⅱ(icarisideⅡ, ICSⅡ)改善自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rats, SHRs)左心室功能的机制。方法 30只14周龄♂SHRs分为模型组、ICSⅡ低、中、高剂量(4、8、16 mg·kg^(-1))组及阳性药氯沙坦(20 mg·kg^(-1))组(n=6);同时,WKY作为空白对照组(n=6)。在第26周给药结束后,麻醉大鼠,用小动物超声检测大鼠左心室功能;RT-PCR检测左心室GRP78 mRNA水平;Western blot检测左心室GRP78、cleaved-caspase-12/9/3蛋白水平。结果与WKY组相比,SHR组大鼠左心室舒张末期的内径和后壁厚度增加,射血分数和短轴缩短率降低;GRP78 mRNA和蛋白水平上调,cleaved-caspase-12/9/3蛋白水平增加(P <0. 05)。与SHR组相比,ICSⅡ中、高剂量组及阳性药组左心室舒张末期的内径和后壁厚度降低(P <0. 05),射血分数和短轴缩短率增加(P <0. 05); GRP78 mRNA和蛋白水平下调,cleaved-caspase-12/9/3蛋白水平降低(P <0. 05)。结论ICSⅡ可改善SHRs左心室功能,其作用机制可能与改善内质网应激、下调升高的caspase-12信号有关。 展开更多
关键词 淫羊藿次苷 自发性高血压大鼠 左心室功能 内质网应激 GRP78 CASPASE-12
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淫羊藿次苷Ⅱ通过调节IKK/IκB/NF-κB信号通路抑制脂多糖诱导的星形胶质细胞炎症反应 被引量:5
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作者 郑勇 高健美 龚其海 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS 北大核心 2019年第6期459-460,共2页
目的研究ICSⅡ对脂多糖(LPS)诱导的星形胶质细胞炎症反应的作用。方法体外分离新生SD大鼠脑皮质组织提取原代星形胶质细胞并进行培养。将星形胶质细胞分为空白组、空白+ICSⅡ高浓度组、模型组、模型+ICSⅡ低浓度组、模型+ICSⅡ中浓度组... 目的研究ICSⅡ对脂多糖(LPS)诱导的星形胶质细胞炎症反应的作用。方法体外分离新生SD大鼠脑皮质组织提取原代星形胶质细胞并进行培养。将星形胶质细胞分为空白组、空白+ICSⅡ高浓度组、模型组、模型+ICSⅡ低浓度组、模型+ICSⅡ中浓度组、模型+ICSⅡ高浓度组、模型+地塞米松组。ICSⅡ(5,10,20μmol·L-1)或DSMX(1μmol·L-1)预处理星形胶质细胞1 h后,继续与LPS共同作用24 h。采用MTT法检测ICSⅡ作用于星形胶质细胞的安全浓度范围,确定安全浓度后再观察ICSⅡ对LPS诱导的星形胶质细胞炎症反应的影响;采用ELISA法检测星形胶质细胞中TNF-α,IL-1β,NO,Aβ1-40和Aβ1-42的水平;采用Western蛋白免疫印迹技术检测COX-2,i NOS,IκB-α,NF-κB(p65)(胞核),NF-κB(p65)(胞质)和BACE1的蛋白表达,以及NF-κB(p65)、IKK-α和IKK-β磷酸化水平;采用分子对接技术模拟ICSⅡ与BACE1蛋白的结合。结果 ICSⅡ(0~50μmol·L-1)对星形胶质细胞无毒性作用。模型组较空白组星形胶质细胞中TNF-α,IL-1β和NO水平均显著上升(P<0.05);细胞炎症通路蛋白COX-2,i NOS,NF-κB(p65)(胞核)及BACE1表达升高(P<0.05);IκB-α和NF-κB(p65)(胞质)表达显著降低(P<0.05);NF-κB(p65),IKK-α和IKK-β的磷酸化水平明显上升(P<0.05)。给予ICSⅡ能够明显降低TNF-α,IL-1β和NO水平(P<0.05)。此外,ICSⅡ显著下调炎症相关蛋白COX-2,i NOS,NF-κB(胞核)及BACE1的表达(P<0.05),明显上调NF-κB(胞质)和IκB-α蛋白表达(P<0.05)。同时,明显降低NF-κB(p65),IKK-α和IKK-β的磷酸化水平(P<0.05),对LPS诱导的IκB-α降解、NF-κB活化及细胞核易位均具有显著的抑制作用。结论本研究条件下,ICSⅡ通过调节IKK/IκB/NF-κB信号通路发挥其对LPS诱导的星形胶质细胞炎症损伤的保护作用。 展开更多
关键词 淫羊藿次苷 NF-κB 淀粉样蛋白 星形胶质细胞 神经炎症
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淫羊藿次苷Ⅱ对野百合碱所致肺动脉重构大鼠凋亡相关蛋白的影响 被引量:1
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作者 李叶丽 廖娅 +3 位作者 钱志强 朱玲 李意奇 杨丹莉 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期1736-1740,共5页
目的研究淫羊藿次苷Ⅱ(ICSⅡ)对野百合碱(MCT)所致大鼠肺动脉平滑肌细胞凋亡的影响,并初步探讨其机制。方法 SD大鼠随机分为对照组、模型组、ICSⅡ低、中、高剂量组(4、8、16 mg·kg^(-1))。模型组和ICSⅡ组大鼠经皮下注射MCT诱导... 目的研究淫羊藿次苷Ⅱ(ICSⅡ)对野百合碱(MCT)所致大鼠肺动脉平滑肌细胞凋亡的影响,并初步探讨其机制。方法 SD大鼠随机分为对照组、模型组、ICSⅡ低、中、高剂量组(4、8、16 mg·kg^(-1))。模型组和ICSⅡ组大鼠经皮下注射MCT诱导肺动脉重构模型,ICSⅡ组于MCT注射后d 1开始给药至d 28结束,模型组和对照组给予等量溶媒。HE染色观察肺小动脉形态学变化;TUNEL染色观察肺动脉平滑肌细胞凋亡情况;蛋白免疫印迹法检测肺组织Bax、Bcl-2和活化的caspase-3蛋白的表达。结果与对照组比,模型组肺小动脉中膜明显增厚;肺动脉平滑肌细胞发生凋亡,TUNEL阳性细胞比率升高(P<0.05);肺组织Bax、Bcl-2、活化的caspase-3的表达上调(P<0.05)。与模型组比,ICSⅡ中、高剂量组肺小动脉中膜变薄;细胞凋亡数均明显增加,TUNEL阳性细胞比率升高(P<0.05);肺组织Bcl-2的表达明显下调(P<0.05),Bax、活化的caspase-3的表达均上调(P<0.05)。结论 ICSⅡ具有促进MCT所致大鼠肺动脉平滑肌细胞凋亡的作用,其机制可能与下调Bcl-2,上调Bax和活化的caspase-3的表达有关。 展开更多
关键词 淫羊藿次苷 肺动脉重构 凋亡 BAX BCL-2 活化的caspase-3
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磷酸二酯酶5抑制剂淫羊藿次苷Ⅱ通过激活BDNF/TrkB/CREB信号通路抗原代海马神经元氧糖剥夺/复氧复糖损伤作用
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作者 徐凡 吕纯 +4 位作者 邓艳 刘远贵 龚其海 石京山 高健美 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS 北大核心 2019年第6期454-454,共1页
目的研究PDE5抑制剂淫羊藿次苷Ⅱ(ICSⅡ)对氧糖剥夺/复氧复糖(OGD/R)诱导的原代大鼠海马及皮质神经元损伤作用及其机制。方法通过OGD/R诱导原代大鼠海马及皮质神经元损伤,在体外模拟脑缺血再灌注损伤,西地那非(SIL)作为阳性药。将原代... 目的研究PDE5抑制剂淫羊藿次苷Ⅱ(ICSⅡ)对氧糖剥夺/复氧复糖(OGD/R)诱导的原代大鼠海马及皮质神经元损伤作用及其机制。方法通过OGD/R诱导原代大鼠海马及皮质神经元损伤,在体外模拟脑缺血再灌注损伤,西地那非(SIL)作为阳性药。将原代海马神经元随机分为7组:空白组、空白+ICSⅡ高浓度组、OGD/R组、OGD/R+ICSⅡ低浓度组、OGD/R+ICSⅡ中浓度组、OGD/R+ICSⅡ高浓度组和OGD/R+SIL组。采用MTT法检测细胞活力,乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测细胞损伤,TUNEL染色法及Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡。采用计算机分子虚拟对接检测ICSⅡ与磷酸二酯酶5(PDE5)蛋白催化区域结合能力。采用Western蛋白印迹法检测细胞凋亡及认知通路相关的蛋白表达情况。结果 ICSⅡ能够显著提升OGD/R诱导的原代海马神经元损伤后的细胞存活率,并降低LDH的漏出率。同时,ICSⅡ不仅能够增加环磷酸鸟苷(c GMP)水平及蛋白激酶G(PKG)活性,还能够上调脑源性营养因子(BDNF)、酪氨酸蛋白激酶B(Trk B)、c AMP反应元件结合蛋白(CREB)的蛋白表达,降低Bax/Bcl-2比值和抑制胱天蛋白酶3的活化。此外,PKG抑制剂Rp-8-Br-c GMPS以及Trk B抑制剂ANA-12可几乎完全阻遏ICSⅡ的作用。ICSⅡ不仅可同时抑制PDE5的表达及活性,还可直接结合PDE5蛋白。结论在本实验条件下,ICSⅡ作为PDE5抑制剂能够抗OGD/R诱导的原代海马神经元凋亡,其作用机制可能与调控BDNF/Trk B/CREB通路有关。 展开更多
关键词 淫羊藿次苷 氧糖剥夺 复氧复糖 原代海马神经元 凋亡 磷酸二酯酶5
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淫羊藿次苷Ⅱ抑制慢性脑低灌注大鼠海马PDE4和PDE5蛋白表达及TGF-β1/Smad2信号通路
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作者 邓艳 尹彩霞 +1 位作者 高健美 龚其海 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS 北大核心 2019年第6期430-430,共1页
目的探究淫羊藿次苷Ⅱ(ICSⅡ)抑制慢性脑低灌注大鼠学习记忆减退的机制。方法雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠36只简单随机分为6组:假手术组、假手术+ICSⅡ高剂量组(16 mg·kg-1)、模型组、模型组+ICS II低剂量组(4 mg·kg-1)、模型... 目的探究淫羊藿次苷Ⅱ(ICSⅡ)抑制慢性脑低灌注大鼠学习记忆减退的机制。方法雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠36只简单随机分为6组:假手术组、假手术+ICSⅡ高剂量组(16 mg·kg-1)、模型组、模型组+ICS II低剂量组(4 mg·kg-1)、模型组+ICSⅡ中剂量组(8 mg·kg-1)、模型组+ICSⅡ高剂量组(16 mg·kg-1)。双侧颈总动脉永久结扎诱导大鼠慢性脑低灌注。造模10 d后给药,ICSⅡ低、中、高剂量组每日分别灌胃ICS II 4,8和16 mg·kg-1,假手术组和模型组灌胃等体积蒸馏水,连续给药28 d。ELISA法测定海马PDE 4及PDE 5水平;Western蛋白印迹实验检测TGF-β1的蛋白表达及Smad2的磷酸化水平。结果模型组较假手术组大鼠海马PDE 4及PDE 5水平增加,TGF-β1蛋白表达增加,Smad2磷酸化水平增加,而ICSⅡ8和16 mg·kg-1明显降低PDE4,PDE5和TGF-β1蛋白表达以及Smad2磷酸化水平。结论 ICSⅡ抑制双侧颈总动脉永久结扎诱导的慢性脑低灌注大鼠学习记忆减退的作用机制可能与其降低PDE4和PDE5蛋白表达,阻断TGF-β1/Smad2信号传导有关。 展开更多
关键词 淫羊藿次苷 慢性脑低灌注 磷酸二酯酶 转化生长因子β1 SMAD2
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3种淫羊藿苷次生产物的制备及HPLC测定 被引量:4
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作者 杨轶舜 张彤 +5 位作者 丁越 陈嘉雯 周奕嘉 赵日吉 吴华燕 宋泽家 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期779-782,共4页
目的研究淫羊藿苷次生产物淫羊藿次苷Ⅰ,宝藿苷Ⅰ和脱水淫羊藿素的制备及HPLC含量测定法。方法通过酸解法、酶解法或酸解-酶解结合法制备淫羊藿苷次生产物。建立HPLC法同时检测3种淫羊藿苷次生产物的含有量,采用Diamonsil C18色谱柱(250... 目的研究淫羊藿苷次生产物淫羊藿次苷Ⅰ,宝藿苷Ⅰ和脱水淫羊藿素的制备及HPLC含量测定法。方法通过酸解法、酶解法或酸解-酶解结合法制备淫羊藿苷次生产物。建立HPLC法同时检测3种淫羊藿苷次生产物的含有量,采用Diamonsil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相乙腈-0.1%磷酸(70∶30);体积流量1 mL/min;柱温30℃;检测波长270 nm。结果硫酸水解淫羊藿苷可获得淫羊藿次苷Ⅰ,β-葡萄糖苷酶水解法可获得宝藿苷Ⅰ,酶解-酸解结合法可制备脱水淫羊藿素。该含量测定法线性关系良好,平均回收率大于98%,RSD在1%以下。结论该制备方法操作简便、得率高,产物分离纯化步骤较简便,纯化产物纯度高。HPLC法简便准确,重复性好,可用于淫羊藿苷次生产物的含量测定。 展开更多
关键词 淫羊藿次苷 脱水 HPLC
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