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淫羊藿苷促进胶原水凝胶三维立体培养成骨细胞的成熟分化
被引量：
5
1
作者
谢艳芳
王鸣刚
+3 位作者
陈克明
石文贵
周建
高玉海
《浙江大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第3期301-307,共7页
目的：研究淫羊藿苷对胶原水凝胶三维立体培养的新生大鼠颅骨成骨细胞（ ROB）分化和成熟的影响。方法：取新生SD 大鼠颅骨，酶消化法培养ROB，将传代1次的ROB包埋于2 mg／mL的Ⅰ型鼠尾胶原中进行三维立体培养，48 h后进行双乙酸荧光素...
目的：研究淫羊藿苷对胶原水凝胶三维立体培养的新生大鼠颅骨成骨细胞（ ROB）分化和成熟的影响。方法：取新生SD 大鼠颅骨，酶消化法培养ROB，将传代1次的ROB包埋于2 mg／mL的Ⅰ型鼠尾胶原中进行三维立体培养，48 h后进行双乙酸荧光素／碘化丙啶（ FDA／PI ）细胞染色、苏木素－伊红（ HE ）染色，并用扫描电镜观察细胞生长状态。分别采用终浓度为1×10^-4、1×10^-5、1×10^-6和1×10^-7 mol／L的淫羊藿苷进行干预，培养3、6、9 d后分别检测细胞内碱性磷酸酶活性，筛选最佳药物浓度；以最佳浓度淫羊藿苷干预三维凝胶中的ROB 12、24、36、48 h后，用实时定量PCR和蛋白质印迹法分别检测骨形态发生蛋白2（ BMP－2）、Runt相关转录因子2（RUNX－2）、Osterix mRNA及其蛋白表达情况。结果：胶原水凝胶三维立体培养的ROB 采用FDA／PI染色、HE染色以及扫描电镜结构显示， ROB在胶原水凝胶中分布均匀，生长状态良好。终浓度为1×10^-5、1×10^-6、1×10^-7 mol／L的淫羊藿苷可显著提高三维凝胶中ROB的碱性磷酸酶活性，其中以1×10^-6 mol／L浓度淫羊藿苷干预后ROB 的碱性磷酸酶活性最高。 1×10^-6 mol／L 淫羊藿苷能显著提高BMP－2、RUNX－2、Osterix mRNA及其蛋白表达量。结论：淫羊藿苷可显著促进三维立体培养的ROB成骨性相关因子的表达，提示淫羊藿苷对胶原水凝胶三维立体培养的ROB具有较强的促骨形成活性。
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关键词
细胞外基质
淫羊藿/投药和剂量
淫
羊
藿
甙
水凝胶
胶原
成骨细胞/药物作用
细胞
培养的
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题名
淫羊藿苷促进胶原水凝胶三维立体培养成骨细胞的成熟分化
被引量：
5
1
作者
谢艳芳
王鸣刚
陈克明
石文贵
周建
高玉海
机构
兰州理工大学生命科学与工程学院
兰州军区兰州总医院骨科研究所
出处
《浙江大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第3期301-307,共7页
基金
国家自然科学基金(81270963,81471090)
文摘
目的：研究淫羊藿苷对胶原水凝胶三维立体培养的新生大鼠颅骨成骨细胞（ ROB）分化和成熟的影响。方法：取新生SD 大鼠颅骨，酶消化法培养ROB，将传代1次的ROB包埋于2 mg／mL的Ⅰ型鼠尾胶原中进行三维立体培养，48 h后进行双乙酸荧光素／碘化丙啶（ FDA／PI ）细胞染色、苏木素－伊红（ HE ）染色，并用扫描电镜观察细胞生长状态。分别采用终浓度为1×10^-4、1×10^-5、1×10^-6和1×10^-7 mol／L的淫羊藿苷进行干预，培养3、6、9 d后分别检测细胞内碱性磷酸酶活性，筛选最佳药物浓度；以最佳浓度淫羊藿苷干预三维凝胶中的ROB 12、24、36、48 h后，用实时定量PCR和蛋白质印迹法分别检测骨形态发生蛋白2（ BMP－2）、Runt相关转录因子2（RUNX－2）、Osterix mRNA及其蛋白表达情况。结果：胶原水凝胶三维立体培养的ROB 采用FDA／PI染色、HE染色以及扫描电镜结构显示， ROB在胶原水凝胶中分布均匀，生长状态良好。终浓度为1×10^-5、1×10^-6、1×10^-7 mol／L的淫羊藿苷可显著提高三维凝胶中ROB的碱性磷酸酶活性，其中以1×10^-6 mol／L浓度淫羊藿苷干预后ROB 的碱性磷酸酶活性最高。 1×10^-6 mol／L 淫羊藿苷能显著提高BMP－2、RUNX－2、Osterix mRNA及其蛋白表达量。结论：淫羊藿苷可显著促进三维立体培养的ROB成骨性相关因子的表达，提示淫羊藿苷对胶原水凝胶三维立体培养的ROB具有较强的促骨形成活性。
关键词
细胞外基质
淫羊藿/投药和剂量
淫
羊
藿
甙
水凝胶
胶原
成骨细胞/药物作用
细胞
培养的
Keywords
Extracellular matrix
Epimedium brevicornum/administration ＆ dosage
Icariin
Hydrogel
Collagen
Osteoblasts/drug effects
Cells,cultured
分类号
R285.5 [医药卫生—中药学]
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1
淫羊藿苷促进胶原水凝胶三维立体培养成骨细胞的成熟分化
谢艳芳
王鸣刚
陈克明
石文贵
周建
高玉海
《浙江大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2015
5
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