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人淋巴细胞趋化因子真核表达质粒的构建及体外转染的生物学活性测定 被引量:2
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作者 鲁雄兵 周四维 +4 位作者 杨为民 宋晓东 罗刚 孙凯 曹正国 《医学研究生学报》 CAS 2005年第3期196-199,共4页
目的: 构建人淋巴细胞趋化因子(HLptn)真核表达质粒,在膀胱肿瘤细胞株BIU -87中表达重组质粒,并检测趋化活性。 方法: 用RT- PCR法自活化的人外周血淋巴细胞扩增HLptn含编码区序列的cDNA,克隆至pGM TEasyT载体,测序正确后,将目的片段插... 目的: 构建人淋巴细胞趋化因子(HLptn)真核表达质粒,在膀胱肿瘤细胞株BIU -87中表达重组质粒,并检测趋化活性。 方法: 用RT- PCR法自活化的人外周血淋巴细胞扩增HLptn含编码区序列的cDNA,克隆至pGM TEasyT载体,测序正确后,将目的片段插入pcDNA3. 1( +)载体,获得阳性克隆pcDNA3. 1( +) HLptn;用脂质体介导其转染BIU- 87细胞,用Western -blot检测转染后细胞中HLptn的表达;取转染后的上清液,采用Boyden小室法检测表达的HLptn趋化CD4+、CD8+T淋巴细胞的生物学活性。 结果: 克隆的cDNA序列与GenBank中U23772的序列编码区内第 225位碱基不同,系同义突变,构建了真核重组表达载体pcDNA3. 1 ( +) -HLptn;转染的BIU-87细胞表达HLptn,其培养上清对CD4+、CD8+T淋巴细胞具有趋化活性。 结论: 成功构建的HLptn真核表达系统可在人膀胱肿瘤细胞株BIU- 87中表达。 展开更多
关键词 淋巴细胞趋化因子 克隆 真核表达
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猪淋巴细胞趋化因子XCL1的电子克隆和编码区序列RT-PCR验证 被引量:2
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作者 宋豪 张德礼 《动物医学进展》 CSCD 2008年第12期11-16,共6页
淋巴细胞趋化因子(XCL1)是C族趋化因子的一员,可由CD8+T细胞、NK细胞、γδT细胞、肥大细胞等多种细胞产生,其趋化性主要作用于CD8+T细胞和NK细胞。根据猪的EST数据库中猪XCL1基因序列,设计引物采用RT—PCR的方法从猪胸腺中扩增... 淋巴细胞趋化因子(XCL1)是C族趋化因子的一员,可由CD8+T细胞、NK细胞、γδT细胞、肥大细胞等多种细胞产生,其趋化性主要作用于CD8+T细胞和NK细胞。根据猪的EST数据库中猪XCL1基因序列,设计引物采用RT—PCR的方法从猪胸腺中扩增猪XCL1全基因序列,将其连接到pMD-19T载体上并测序,得到猪XCLl基因(GenBank登录号为EU743945)。猪XCL1cDNA大小为333bp,编码由110个氨基酸残基组成的多肽。该多肽序列含Chemokine-C、Chemokine、Chemokine-CC和SCY等功能域,与羊和人的氨基酸序列相似率分别为81.6%和68.4%。预测分析其为分泌蛋白,信号肽剪切位点在21A和22V。猪XCL1基因定位于猪4号染色体(CU468871),基因结构与人XCL1的相似,都由3个外显子组成。该基因ORF翻译起始处基本符合Kozak规则,ORF起始密码子上游同一相位有终止密码子,ORF后有1个加尾信号,预测得到4个可能的启动子,可能性高达85%~98%。总之,通过电子克隆与试验验证,成功地克隆了猪新基因XCL1。 展开更多
关键词 电子克隆 淋巴细胞趋化因子 XCL1 反转录
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卡介菌多糖核酸注射液辅助ALA-PDT治疗尖锐湿疣疗效及对患者血清LTN TGF-β1免疫功能细胞周期调节通路的影响 被引量:2
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作者 贾雪平 居兴刚 +2 位作者 杨元元 陈琳 姚莹 《临床心身疾病杂志》 CAS 2020年第2期15-20,共6页
目的探讨卡介菌多糖核酸注射液辅助5-盐酸氨酮戊酸光动力疗法治疗尖锐湿疣患者的疗效和安全性,以及对血清淋巴细胞趋化因子、转化生长因子β1水平、免疫功能、细胞周期调节通路有丝分裂抑制因子p16、G1/S-特异性周期蛋白-D1、人视网膜... 目的探讨卡介菌多糖核酸注射液辅助5-盐酸氨酮戊酸光动力疗法治疗尖锐湿疣患者的疗效和安全性,以及对血清淋巴细胞趋化因子、转化生长因子β1水平、免疫功能、细胞周期调节通路有丝分裂抑制因子p16、G1/S-特异性周期蛋白-D1、人视网膜母细胞瘤抑制蛋白pRb表达的影响.方法将60例尖锐湿疣患者按简单随机化分组法分为两组,每组30例,均予以5-盐酸氨酮戊酸光动力疗法治疗,观察组在此基础上予以卡介菌多糖核酸注射液治疗8周,治疗后观察1a.比较两组治愈率、复发率,治疗前后检测两组血清淋巴细胞趋化因子、转化生长因子β、全血CD3^+、CD4^+、CD8^+、CD4^+/CD8^+水平及细胞周期调节通路有丝分裂抑制因子p16、G1/S-特异性周期蛋白-D1、人视网膜母细胞瘤抑制蛋白pRb表达,随时记录治疗后出现的不良反应.结果(1)观察组治愈率(96.7%)显著高于对照组(73.3%),复发率(3.3%)显著低于对照组(26.7%)(P<0.05).(2)治疗后两组血清淋巴细胞趋化因子、转化生长因子β1及CD3^+、CD4^+、CD4^+/CD8^+水平较治疗前显著升高(P<0.01),观察组各项指标显著高于对照组(P<0.05或0.01);两组有丝分裂抑制因子p16、人视网膜母细胞瘤抑制蛋白pRb表达均较治疗前显著升高(P<0.01),观察组显著高于对照组(P<0.01),两组全血CD8^+水平、G1/S-特异性周期蛋白-D1表达均较治疗前显著降低(P<0.01),观察组显著低于对照组(P<0.01).(3)观察组不良反应发生率(6.7%)与对照组(3.3%)比较差异无统计学意义(P>0.05).结论卡介菌多糖核酸注射液辅助5-盐酸氨酮戊酸光动力疗法治疗尖锐湿疣患者具有协同增效作用,可提高治愈率,减少疾病复发,增强患者免疫功能,安全性高,下调G1/S-特异性周期蛋白-D1表达,上调有丝分裂抑制因子p16、人视网膜母细胞瘤抑制蛋白pRb、淋巴细胞趋化因子、转化生长因子β1表达可能是其发挥疗效的作用机制. 展开更多
关键词 尖锐湿疣 卡介菌多糖核酸注射液 5-盐酸氨酮戊酸 光动力疗法 临床疗效 复发率 淋巴细胞趋化因子 转化生长因子Β1 免疫功能 细胞周期调节通路
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免疫遗传学
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《国外科技资料目录(医药卫生)》 CAS 1997年第8期27-28,共2页
9700517 细胞程序死亡的多样性和调节机制[日]/大西芳秋//临免.-1995,27(3).-308~316 哈医图9700518 免疫球蛋白重链生殖细胞启动基因中 IL-4应答区的特征研究:NF-IL-4(-C/EBP 家族成员)及 NF-KB/P50的调控作用/Delphin S//J Exp Med.-... 9700517 细胞程序死亡的多样性和调节机制[日]/大西芳秋//临免.-1995,27(3).-308~316 哈医图9700518 免疫球蛋白重链生殖细胞启动基因中 IL-4应答区的特征研究:NF-IL-4(-C/EBP 家族成员)及 NF-KB/P50的调控作用/Delphin S//J Exp Med.-1995,181(1).-181~192 军医图9700519 糖蛋白 D 基因的基因组识别:Duffy 血型 FyaFyb 同族抗原系统与44位氨基酸残基处的多形性相关/Iwamoto 展开更多
关键词 免疫遗传学 证据 流感病毒 淋巴细胞趋化因子 同合子 蛋白合成 细胞反应 组氨酸 特异性 组成型
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