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MG132诱导HL-60细胞表达共刺激分子CD86及其对混合淋巴细胞反应的影响(英文)
1
作者 余美霞 刘迅 +6 位作者 周咏明 程艳香 程静 邱宇珍 邢晓磊 姚春红 白如君 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期1251-1255,共5页
本研究探讨蛋白酶体抑制剂MG132诱导HL-60细胞表达共刺激分子CD80、CD86及其对混合淋巴细胞反应的作用。流式细胞仪检测MG132诱导HL-60细胞表达共刺激分子CD80、CD86及细胞活力;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)分析CD80和CD86 mRNA表达情况;... 本研究探讨蛋白酶体抑制剂MG132诱导HL-60细胞表达共刺激分子CD80、CD86及其对混合淋巴细胞反应的作用。流式细胞仪检测MG132诱导HL-60细胞表达共刺激分子CD80、CD86及细胞活力;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)分析CD80和CD86 mRNA表达情况;MG132诱导HL-60细胞表达共刺激分子CD86后,用75 Gy Co-60照射HL-60细胞,杀死HL-60细胞,保留抗原性作为刺激细胞,用健康人外周血单个核细胞作为反应细胞,用不同浓度HL-60细胞刺激健康人单个核细胞,HL-60细胞对健康人单个核细胞的增殖作用。结果表明:MG132上调HL-60细胞表达CD86,MG132诱导HL-60细胞的凋亡率呈浓度依耐性和时间依耐性。结论:高浓度的MG132对HL-60细胞有直接杀灭作用,低浓度MG132诱导HL-60细胞表达共刺激分子CD86,对健康人单个核细胞有增殖作用。MG132诱导HL-60细胞表达共刺激分子CD86,能促进健康人单个核细胞的增殖。 展开更多
关键词 蛋白酶体抑制剂 共刺激分子 抗原 CD86 混合淋巴细胞培养试验
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重组免疫毒素hIL-2-LuffinP1对淋巴细胞体外增殖的影响
2
作者 王儒鹏 何威 +3 位作者 刘树雷 贺伟峰 张小容 吴军 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期253-255,共3页
目的检测基因工程免疫毒素hIL-2-LuffinP1的体外生物学活性。方法采用分离的C57和BALB/c小鼠脾细胞进行混合淋巴细胞反应,刀豆球蛋白A(ConA)刺激BALB/c小鼠脾细胞进行淋巴细胞增殖实验,以LuffinP1毒素分子作为对照。3H-TdR核素掺入法检... 目的检测基因工程免疫毒素hIL-2-LuffinP1的体外生物学活性。方法采用分离的C57和BALB/c小鼠脾细胞进行混合淋巴细胞反应,刀豆球蛋白A(ConA)刺激BALB/c小鼠脾细胞进行淋巴细胞增殖实验,以LuffinP1毒素分子作为对照。3H-TdR核素掺入法检测hIL-2-LuffinP1对淋巴细胞增殖的抑制作用。以CTLL-2细胞检测hIL-2-LuffinP1对IL-2依赖细胞株的杀伤作用,实验共设6组:PBS、IL-2、LuffinP1、LuffinP1+IL-2、hIL-2-LuffinP1、hIL-2-LuffinP1+IL-2,CTLL-2细胞加入各组试剂培养12h,台盼蓝染色,计数每100个细胞中的死亡细胞数。结果随剂量增加,hIL-2-LuffinP1对淋巴细胞增殖的抑制作用逐渐增强,在10-6mol/L浓度时,抑制率可达到97%,而LuffinP1对淋巴细胞增殖无明显抑制作用。hIL-2-LuffinP1对Con A刺激的脾细胞活化也有抑制作用,与在混合淋巴细胞体系中一致,而LuffinP1对上述两个反应体系中的淋巴细胞增殖均无明显抑制作用。加入hIL-2-LuffinP1+IL-2和hIL-2-LuffinP1后CTLL-2细胞的死亡率分别为29.6%和47.4%,明显高于IL-2组(5.6%,P<0.01)。结论重组免疫毒素hIL-2-LuffinP1在体外能够抑制淋巴细胞增殖,对表达IL-2R的活化淋巴细胞产生定向杀伤作用。 展开更多
关键词 免疫毒素类 淋巴细胞培养试验 混合 hIL-2-LuffinP1
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射频电磁场对人树突状细胞的表型和功能影响的体外研究 被引量：7
3
作者 周智东 曾群力 +5 位作者 郑云 张建宾 陈海祥 鲁德强 邵传森 夏大静 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 2008年第1期29-33,共5页
目的:研究手机射频电磁辐照对人树突状细胞(DC)的表型和功能的影响,为评价手机射频电磁场对免疫系统功能的影响提供实验依据。方法:用比吸收率(SAR)为4 W/kg的1800 MHzGSM射频电磁场间断(5 min开10 min停模式)辐照DC细胞0 h、1 h、12 h... 目的:研究手机射频电磁辐照对人树突状细胞(DC)的表型和功能的影响,为评价手机射频电磁场对免疫系统功能的影响提供实验依据。方法:用比吸收率(SAR)为4 W/kg的1800 MHzGSM射频电磁场间断(5 min开10 min停模式)辐照DC细胞0 h、1 h、12 h或24 h,以流式细胞仪检测各处理组DC表面HLA-DR和协同刺激分子(CD80、CD86、CD40及CD11c)的变化;以CCK-8试剂检测各组DC的同种混合淋巴细胞反应(MLR)能力的差异;以ELISA双抗体夹心法检测各组DC分泌细胞因子IL-12p70、TNF-α功能的差异。结果:与假辐照组相比,各辐照处理组DC表型分子HLA-DR、CD80、CD86、CD40的阳性细胞百分率均明显下降(P<0.05),但CD11c无明显变化;各辐照处理组DC的同种MLR能力明显降低(P<0.05),尤其以24 h处理组为甚。各辐照处理组DC的IL-12p70、TNF-α的分泌无显著差异。结论:在本实验条件下,射频电磁场辐照对DC表面分子的表达及对同种T细胞的刺激能力具有一定的抑制作用。 展开更多
关键词 树突细胞/免疫学 电磁场/副作用 淋巴细胞培养试验 混合 细胞因子类 细胞 培养的 表型
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人间充质干细胞Stro-1^+和Stro-1^-亚群免疫抑制作用差异的体外研究 被引量：3
4
作者 张翼鷟 达万明 +1 位作者 赵丹丹 唐菊英 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第10期1040-1043,共4页
目的探讨人Stro-1+和Stro-1-间充质干细胞(MSCs)体外免疫抑制作用的差异。方法从骨髓细胞中分离单个核细胞接种于75cm2的培养瓶中,培养体系为Dexter培养液。当细胞在瓶底贴壁生长达50%融合时消化,并与Stro-1抗体共孵育。再将所获Stro-1+... 目的探讨人Stro-1+和Stro-1-间充质干细胞(MSCs)体外免疫抑制作用的差异。方法从骨髓细胞中分离单个核细胞接种于75cm2的培养瓶中,培养体系为Dexter培养液。当细胞在瓶底贴壁生长达50%融合时消化,并与Stro-1抗体共孵育。再将所获Stro-1+和Stro-1-MSCs扩增15天(中位数)后进行流式细胞仪分析。设立单向混合淋巴细胞反应(MLR,于96孔板中加入反应淋巴细胞及刺激淋巴细胞各1×105/孔)及非特异性丝裂原刺激的淋巴细胞增殖反应体系(于96孔板中加入人外周血淋巴细胞1×105/孔、植物血凝素10μg/ml及白介素-2500U/ml)。在两反应体系中分别加入1×103~3×104个经照射的Stro-1+或Stro-1-MSCs,检测其对淋巴增殖反应的影响。结果原代贴壁细胞中含中位数为9%(5%~26%)的Stro-1+MSCs,该细胞亚群表达更高的MSCs表型;在MLR和非特异性丝裂原刺激的淋巴增殖体系中,Stro-1+和Stro-1-MSCs均可引起数量依赖性的增殖抑制效应(单向MLR中,当Stro-1-MSCs的数量为1×103时,该抑制效应消失);各个剂量组中,Stro-1+MSCs的抑制效应均显著高于相同剂量的Stro-1-MSCs(P<0.05)。结论人MSCs中的Stro-1+亚群具有更强的免疫抑制作用,推断该细胞亚群为更原始、均一性更佳的骨髓基质细胞。 展开更多
关键词 间质干细胞 免疫抑制 淋巴细胞培养试验 混合 植物血凝素 白细胞介素2
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MLR中刺激细胞活化状态对应答T细胞CD69表达的影响 被引量：2
5
作者 肇静娴 曾耀英 +3 位作者 何贤辉 狄静芳 曾山 王南 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第8期913-917,共5页
目的 :研究混合淋巴细胞反应 (MLR)中刺激细胞的活化状态对应答T细胞活化的影响 ,为指导临床的组织器官移植提供一定理论依据。方法 :混合淋巴细胞培养 (MLC)前对刺激细胞进行不同预处理以改变其功能状态 ,利用单克隆抗体与流式细胞术 ... 目的 :研究混合淋巴细胞反应 (MLR)中刺激细胞的活化状态对应答T细胞活化的影响 ,为指导临床的组织器官移植提供一定理论依据。方法 :混合淋巴细胞培养 (MLC)前对刺激细胞进行不同预处理以改变其功能状态 ,利用单克隆抗体与流式细胞术 ,在混合培养后不同时点对各组应答T细胞活化表面分子CD69的表达程度进行分析。结果 :在培养 2 4h、48h和 72h后 ,MLCa组 (刺激细胞经预先活化组 )应答T细胞的CD69表达百分率均明显高于MLC组 (刺激细胞未经预先活化组 ) ,分别为 5 2 1 %± 0 2 4 %vs 1 98%± 0 33 % ,2 9 81 %± 0 85 %vs 2 0 65 %±1 0 0 %和 39 61 %± 1 62 %vs 1 3 49%± 0 60 % ,(P <0 0 1 )。结论 展开更多
关键词 刺激细胞 T细胞 混合淋巴细胞培养试验 活化分析 流式细胞术 器官移植 移植免疫
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体外抗体功能修饰抑制性KIR对人NK细胞的影响 被引量：1
6
作者 吴功强 赵妍敏 +1 位作者 黄河 来晓瑜 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期475-481,共7页
目的:检测抗体封闭抑制性受体KIR2DL1和KIR2DL2/2DL3对人NK细胞功能的影响。方法:应用Rosettesep人NK分选试剂盒分选外周血NK细胞,观察抗体封闭KIR2DL1和KIR2DL2/2DL3受体后,NK细胞对不同白血病细胞(人肿瘤细胞株NB4、Raji和K-562)及同... 目的:检测抗体封闭抑制性受体KIR2DL1和KIR2DL2/2DL3对人NK细胞功能的影响。方法:应用Rosettesep人NK分选试剂盒分选外周血NK细胞,观察抗体封闭KIR2DL1和KIR2DL2/2DL3受体后,NK细胞对不同白血病细胞(人肿瘤细胞株NB4、Raji和K-562)及同种异体的成熟树突状细胞(DC)的杀伤活性;检测混合淋巴细胞反应中NK细胞对T淋巴细胞增殖的影响;检测细胞因子TGF-β1的表达水平。结果:任何一个抗体封闭KIR后,NK细胞杀伤NB4细胞活性均增强,并与抗体浓度呈现量效关系(P<0.05),2个抗体联用能增强NK细胞的杀伤活性;对Raji细胞的杀伤活性则改变较小;NK细胞对K-562细胞具有很强的杀伤活性,但经抗体封闭后,这种活性并没有提高。经抗体封闭KIR后,NK细胞对成熟DC的杀伤活性明显增强,并与抗体浓度呈现量效关系(2.20%±1.10%vs 37.59%±5.06%),各组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。经抗体封闭后的NK细胞在混合淋巴细胞反应中能明显提高对T细胞的增殖抑制(77.85%±8.31%vs 43.05%±5.95%,P<0.05),上清液中细胞因子TGF-β1的含量增加。结论:以抗体修饰抑制性KIR受体有助于提高NK细胞杀伤肿瘤及同种异体成熟DC的能力,活化的NK细胞通过分泌TGF-β1,抑制T细胞的增殖、活化。 展开更多
关键词 杀伤细胞 天然 受体 KIR2DL1 受体 KIR2DL2 受体 KIR2DL3 抗体 单克隆 淋巴细胞培养试验 混合 树突细胞 T淋巴细胞
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补中益气汤对封闭抗体缺乏的反复自然流产患者生殖免疫调节研究 被引量：15
7
作者 金丽华 叶平 +1 位作者 张丽 王香桂 《中华中医药学刊》 CAS 2010年第4期827-829,共3页
目的:观察补中益气汤为主方治疗封闭抗体缺乏的母-胎免疫识别低下型反复自然流产(Recurrent Spontaneous Abortion,RSA)患者的临床疗效。方法:以单向混合淋巴细胞反应封闭试验检测封闭抗体,选取封闭抗体缺乏的RSA患者51例,随机分成两组... 目的:观察补中益气汤为主方治疗封闭抗体缺乏的母-胎免疫识别低下型反复自然流产(Recurrent Spontaneous Abortion,RSA)患者的临床疗效。方法:以单向混合淋巴细胞反应封闭试验检测封闭抗体,选取封闭抗体缺乏的RSA患者51例,随机分成两组:一组为中药组(治疗组),共22例,给予补中益气汤治疗;另一组为免疫组(对照组),共29例,以配偶淋巴细胞体外诱生免疫疗法治疗,比较治疗后两组患者的封闭抗体各指标上升情况。结果:经治疗后中药组和免疫组的BE-Ab1、BE-Ab2均较治疗前明显上升(分别为P<0.01,P<0.05);但对流式细胞术分析的抗CD3-BE、抗CD4-BE及抗CD8-BE无明显改善作用(P>0.05)。中药组和免疫组的BE-Ab1、BE-Ab2平均值都随着治疗次数的增加而呈逐渐上升趋势。结论:补中益气汤使可使RSA患者的BE-Ab1、BE-Ab2明显上升,并使BE-Ab1、BE-Ab2随着治疗次数的增加而逐渐上升、封闭抗体正常时妊娠成功率较缺乏时明显上升。由本研究得出:补中益气汤和配偶淋巴细胞体外诱生免疫疗法治疗RSA患者的临床疗效相近。 展开更多
关键词 补中益气汤 流产 习惯性 淋巴细胞培养试验 混合 免疫疗法 主动 流式细胞术
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