人肿瘤浸润的淋巴细胞的分离及培养 被引量：11

1

作者 李莉 李先兴 孔宪涛 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1991年第5期294-297,共4页

用机械解聚、酶消化和非连续密度梯度离心的方法分离了37例人实体瘤中浸润的淋巴细胞和17例肿瘤引流区域淋巴结淋巴细胞,所得淋巴细胞分别占61.1%和82.5%。在含rIL-2的培养液中培养一月左右70.3%的TIL和全部RNL达到了10^(10)数量级,扩... 用机械解聚、酶消化和非连续密度梯度离心的方法分离了37例人实体瘤中浸润的淋巴细胞和17例肿瘤引流区域淋巴结淋巴细胞,所得淋巴细胞分别占61.1%和82.5%。在含rIL-2的培养液中培养一月左右70.3%的TIL和全部RNL达到了10^(10)数量级,扩增能力明显高于PBL和脾细胞。 展开更多

关键词 肿瘤 淋巴细胞 分离 培养

在线阅读 下载PDF 职称材料

FTY720对体外混合培养淋巴细胞增殖和凋亡的影响 被引量：6

2

作者 施国海 周佩军 +3 位作者 王祥慧 徐达 施敏敏 陈皓 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期380-383,共4页

目的观察FTY720对体外混合培养小鼠脾脏淋巴细胞的增殖、分化和凋亡的影响。方法将C57BL/6J小鼠与BALB/c小鼠的脾脏淋巴细胞体外混合培养5 d,培养液中加入不同浓度的FTY720。分别运用MTT法和流式细胞仪检测在不同浓度FTY720作用下,混合... 目的观察FTY720对体外混合培养小鼠脾脏淋巴细胞的增殖、分化和凋亡的影响。方法将C57BL/6J小鼠与BALB/c小鼠的脾脏淋巴细胞体外混合培养5 d,培养液中加入不同浓度的FTY720。分别运用MTT法和流式细胞仪检测在不同浓度FTY720作用下,混合培养淋巴细胞的增殖状况、细胞表型和凋亡率。结果当FTY720为400 ng/mL时,体外混合培养淋巴细胞的增殖即受到明显抑制,抑制率为47.6%(P<0.05);当FTY720为3 200 ng/mL时,其抑制率达到为51.6%,呈剂量依赖性。FTY720为1 600 ng/mL时,混合培养淋巴细胞中的CD4+CD25+T细胞比例显著增加(P<0.05)。FTY720在200 ng/mL时,混合培养淋巴细胞的细胞凋亡率即显著增加(P<0.05)。结论在小鼠混合淋巴细胞培养体系中加入高浓度的FTY720,能显著抑制淋巴细胞增殖能力,增加调节性细胞的比例并促进细胞凋亡。 展开更多

关键词 FTY720 增殖 调节性T细胞 凋亡 混合淋巴细胞培养

在线阅读 下载PDF 职称材料

曲古抑菌素A对小鼠混合淋巴细胞培养中淋巴细胞增殖和IL-2表达的影响 被引量：4

3

作者 魏强 于立新 +1 位作者 邓文锋 叶俊生 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期467-469,共3页

目的研究曲古抑菌素A(TSA)对小鼠体外混合淋巴细胞培养中淋巴细胞增殖及IL-2表达的影响,探讨TSA对T细胞免疫功能的影响。方法采用0.16、0.8、4、20、100、500nmol/L倍比浓度TSA作用于BALB/c及C57BL小鼠混合淋巴细胞培养体系,根据不同的O... 目的研究曲古抑菌素A(TSA)对小鼠体外混合淋巴细胞培养中淋巴细胞增殖及IL-2表达的影响,探讨TSA对T细胞免疫功能的影响。方法采用0.16、0.8、4、20、100、500nmol/L倍比浓度TSA作用于BALB/c及C57BL小鼠混合淋巴细胞培养体系,根据不同的OD值测定12、24、48h各浓度TSA对T淋巴细胞增殖的抑制率;相同浓度梯度TSA再作用于经丝裂霉素处理过的BALB/c淋巴细胞与C57BL淋巴细胞单向混合淋巴细胞培养体系,以环磷酰胺作对照,应用流式细胞技术观察其对IL-2表达的影响。结果TSA可以抑制小鼠混合淋巴细胞培养中T淋巴细胞的增殖,这种抑制能力表现出明显的量效及时效依赖性;TSA也显著抑制经刺激激活的小鼠T淋巴细胞的IL-2的表达,并且随着TSA浓度的升高,IL-2表达逐步下降,但与CTX比较有显著性差异(P<0.01)。结论TSA能抑制混合淋巴细胞培养中淋巴细胞的增殖,减少激活T淋巴细胞IL-2的表达,降低T细胞的免疫活性,能够减弱对外来抗原刺激的免疫应答。 展开更多

关键词 曲古抑菌素A 混合淋巴细胞培养 去乙酰化酶抑制剂 白细胞介素-2

在线阅读 下载PDF 职称材料

自体胸腔积液上清作为培养液对肿瘤浸润淋巴细胞生长的影响 被引量：2

4

作者 邹征云 刘宝瑞 《医学研究生学报》 CAS 2005年第7期585-587,共3页

目的:观察自体胸腔积液上清作为培养液对肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)生长的影响.方法:恶性胸腔积液中的TIL经贴壁法分离后,分别采用含有细胞因子白细胞介素2(IL2)、CD3单克隆抗体(OKT3)及植物血球凝集素(PHA)的自体胸腔积液上清及含10%人AB... 目的:观察自体胸腔积液上清作为培养液对肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)生长的影响.方法:恶性胸腔积液中的TIL经贴壁法分离后,分别采用含有细胞因子白细胞介素2(IL2)、CD3单克隆抗体(OKT3)及植物血球凝集素(PHA)的自体胸腔积液上清及含10%人AB型血清的RPMI1640进行培养,比较两种培养液对TIL的增殖速度、培养前后免疫表型变化和对自体肿瘤细胞的杀伤活性。结果:培养2周,经统计学比较发现,自体胸腔积液上清作为培养液对TIL的生长速度、免疫表型和对自体肿瘤细胞杀伤活性的影响与应用含10%人AB型血清的RPMI1640培养液培养无差异。结论:自体胸腔积液上清作为培养液培养TIL是可行的。为自体TIL疗法治疗恶性胸腔积液提供理论基础。 展开更多

关键词 培养液 恶性胸腔积液 肿瘤浸润淋巴细胞 肿瘤免疫治疗

在线阅读 下载PDF 职称材料

胚胎组织浸液降低无关个体混合淋巴细胞培养中的HLA基因表达

5

作者 李丹 张萍 +5 位作者 刘海燕 于妍 郗斌 刘方 王申五 陆道培 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 1996年第2期172-176,共5页

用3—4月龄的治疗性引产胎儿的肝、胸腺制成二种组织浸液,分别加入无关个体混合淋巴细胞培养(MLC)体系中,培养120小时后掺入~3H-TdR,测CPM值,计算刺激指数(SI);用经PCR生物素掺入的HLA-Ⅰ、Ⅱ类特异性探针进行细胞原位杂交,图像扫描定... 用3—4月龄的治疗性引产胎儿的肝、胸腺制成二种组织浸液,分别加入无关个体混合淋巴细胞培养(MLC)体系中,培养120小时后掺入~3H-TdR,测CPM值,计算刺激指数(SI);用经PCR生物素掺入的HLA-Ⅰ、Ⅱ类特异性探针进行细胞原位杂交,图像扫描定量。与不含胚胎组织浸液的对照组相比,胎肝、胸腺浸液组MLC的SI明显降低,混合淋巴细胞培养的细胞HLA-Ⅰ、Ⅱ类基因mRNA表达均有显著降低,胎肝浸液作用更明显。 展开更多

关键词 胚胎组织浸液 混合淋巴细胞培养 HLA基因 基因表达

在线阅读 下载PDF 职称材料

小鼠骨髓来源树突状细胞培养鉴定和诱导T淋巴细胞增殖 被引量：8

6

作者 吴昆 拜合提亚.阿扎提 +2 位作者 王文光 安尼瓦尔.牙生 王玉杰 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期1128-1133,共6页

目的:建立一种体外诱导培养小鼠树突状细胞(DCs)的方法,并观察其不同生长阶段生物学形态及刺激淋巴细胞增殖的能力。方法:联合应用粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、白细胞介素-4(IL-4)诱导培养小鼠骨髓单个核细胞向DCs分化,并从... 目的:建立一种体外诱导培养小鼠树突状细胞(DCs)的方法,并观察其不同生长阶段生物学形态及刺激淋巴细胞增殖的能力。方法:联合应用粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、白细胞介素-4(IL-4)诱导培养小鼠骨髓单个核细胞向DCs分化,并从形态学、表型及功能方面对其加以检测。结果:用GM-CSF和IL-4诱导培养小鼠骨髓来源的单核细胞,3 d后可见细胞形态改变,并呈集簇生长,培养至5 d可见典型的树突状突起,体外诱导培养8 d后获得大量成熟的DCs,扫描电镜可见典型的树突状细胞形态,高表达骨髓来源DCs特异性标记CD11c和共刺激分子CD40、CD80、CD86和MHC-Ⅱ,成熟DC具有很强的刺激同基因型和同种异基因型T淋巴细胞增殖的能力。结论:小鼠骨髓来源的单个核细胞体外诱导培养可生成大量成熟的DCs,为进一步抗肿瘤疫苗的实验研究奠定了基础。 展开更多

关键词 树突状细胞 细胞培养 混合淋巴细胞反应 肿瘤疫苗

在线阅读 下载PDF 职称材料

间充质干细胞对混合淋巴细胞反应体系中T淋巴细胞的免疫调节作用 被引量：7

7

作者 宣旻 邱国强 谢晓宝 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期433-435,共3页

目的:探讨间充质干细胞(MSC)在体外对T淋巴细胞免疫调节作用的特点。方法:通过Ficoll梯度密度离心法分离出正常人骨髓单个核细胞,体外培养扩增MSC,获取第3代细胞。将其按照不同的比例加入双向混合淋巴细胞培养(MLC)体系中,在第3、5天,采... 目的:探讨间充质干细胞(MSC)在体外对T淋巴细胞免疫调节作用的特点。方法:通过Ficoll梯度密度离心法分离出正常人骨髓单个核细胞,体外培养扩增MSC,获取第3代细胞。将其按照不同的比例加入双向混合淋巴细胞培养(MLC)体系中,在第3、5天,采用MTT比色法检测各组MLC中的T淋巴细胞的增殖情况,再用流式细胞术分析其与MSC共孵育前后细胞表面标记的变化情况。结果:加入了MSC的MLC体系中,MSC对T淋巴细胞的增殖抑制具有剂量依赖性,且随着时间延长,抑制程度增强;其中,CD4+T细胞亚群受抑不如CD8+T细胞亚群显著;另外,T淋巴细胞表面CD25的表达虽然较对照组有所下降,但是CD4、CD25共表达的细胞却较对照组有明显的上升趋势。T淋巴细胞表面活化抗原HLA-DR的表达较对照组有轻度减低。结论:MSC在体外能够明显抑制T淋巴细胞的增殖,其主要是针对CD8+T细胞(CTL)。另外,它还能下调活化T淋巴细胞上一些较特异的表面标记CD25和HLA-DR的表达。 展开更多

关键词 间充质干细胞(MSC) 混合淋巴细胞培养 表面标记

在线阅读 下载PDF 职称材料

肺腺癌恶性胸水中肿瘤浸润T淋巴细胞成分及其对自体肿瘤细胞的杀伤活性 被引量：1

8

作者 夏振坤 刘嘉苗 +3 位作者 卿蓓 王巍 陈名久 袁运长 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期1107-1112,共6页

目的:分析恶性胸水中的肿瘤浸润T淋巴细胞(tumor infiltrating T lymphocyte,TIL)的细胞成分,探究其对自体肿瘤细胞的杀伤活性。方法:收集17例肺腺癌患者的胸水,采用Ficoll密度梯度离心法分离恶性胸水中的单个核细胞,流式细胞检测仪分析... 目的:分析恶性胸水中的肿瘤浸润T淋巴细胞(tumor infiltrating T lymphocyte,TIL)的细胞成分,探究其对自体肿瘤细胞的杀伤活性。方法:收集17例肺腺癌患者的胸水,采用Ficoll密度梯度离心法分离恶性胸水中的单个核细胞,流式细胞检测仪分析TIL细胞成分,贴壁培养法分离肿瘤细胞和TIL,裸鼠成瘤实验明确贴壁细胞为肿瘤细胞,MTT法检测培养的TIL对自体肿瘤细胞的杀伤活性。结果:恶性胸水TIL中T细胞占60.6%~79.3%,辅助性T细胞占比显著高于细胞毒性T细胞(36.63%±1.90%vs 24.64%±2.32%,P<0.001),同时还含有少量自然杀伤(natural killer,NK)细胞和NK T细胞;采用贴壁培养法成功分离培养肿瘤细胞,体外培养增殖的TIL对自体肿瘤细胞杀伤活性为39.14%±12.04%,且体外高增殖组的TIL对自体肿瘤细胞的杀伤活性高于低增殖组(50.51%±3.80%vs 29.04%±5.77%,P<0.001)。结论:肺腺癌恶性胸水中TIL主要以T细胞为主,辅助性T细胞多于细胞毒性T细胞,体外增殖能力强的TIL对自体肿瘤细胞的杀伤活性高于增殖能力弱者,恶性胸水可能为肿瘤细胞免疫治疗提供细胞来源。 展开更多

关键词 肿瘤浸润淋巴细胞 恶性胸水 肿瘤细胞 细胞培养

在线阅读 下载PDF 职称材料

肿瘤疫苗(Lipostn)诱导肿瘤引流区淋巴结淋巴细胞的体外溶瘤作用

9

作者 李力 费丽华 +1 位作者 马运国 袁玖 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 1995年第4期316-316,共1页

从12例胃癌患者，6例结肠癌患者引流区淋巴结中分离淋巴细胞，与肿瘤疫苗(Lipostn)中非佐剂部分在体外共培养扩增．借助MTT比色法及^61Cr释放实验研究了淋巴结淋巴细胞在Lipostn的刺激后对抗原表达阳性和阴性的传代肿瘤细胞系的杀伤效... 从12例胃癌患者，6例结肠癌患者引流区淋巴结中分离淋巴细胞，与肿瘤疫苗(Lipostn)中非佐剂部分在体外共培养扩增．借助MTT比色法及^61Cr释放实验研究了淋巴结淋巴细胞在Lipostn的刺激后对抗原表达阳性和阴性的传代肿瘤细胞系的杀伤效应。实验结果表明：(1)．肿瘤引流区淋巴细胞与在无分裂原的刺激下被Lipostn刺激， 展开更多

关键词 淋巴细胞 引流 淋巴结 体外 肿瘤疫苗 诱导 刺激 共培养 传代 中非

在线阅读 下载PDF 职称材料

MG132诱导HL-60细胞表达共刺激分子CD86及其对混合淋巴细胞反应的影响(英文)

10

作者 余美霞 刘迅 +6 位作者 周咏明 程艳香 程静 邱宇珍 邢晓磊 姚春红 白如君 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期1251-1255,共5页

本研究探讨蛋白酶体抑制剂MG132诱导HL-60细胞表达共刺激分子CD80、CD86及其对混合淋巴细胞反应的作用。流式细胞仪检测MG132诱导HL-60细胞表达共刺激分子CD80、CD86及细胞活力;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)分析CD80和CD86 mRNA表达情况;... 本研究探讨蛋白酶体抑制剂MG132诱导HL-60细胞表达共刺激分子CD80、CD86及其对混合淋巴细胞反应的作用。流式细胞仪检测MG132诱导HL-60细胞表达共刺激分子CD80、CD86及细胞活力;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)分析CD80和CD86 mRNA表达情况;MG132诱导HL-60细胞表达共刺激分子CD86后,用75 Gy Co-60照射HL-60细胞,杀死HL-60细胞,保留抗原性作为刺激细胞,用健康人外周血单个核细胞作为反应细胞,用不同浓度HL-60细胞刺激健康人单个核细胞,HL-60细胞对健康人单个核细胞的增殖作用。结果表明:MG132上调HL-60细胞表达CD86,MG132诱导HL-60细胞的凋亡率呈浓度依耐性和时间依耐性。结论:高浓度的MG132对HL-60细胞有直接杀灭作用,低浓度MG132诱导HL-60细胞表达共刺激分子CD86,对健康人单个核细胞有增殖作用。MG132诱导HL-60细胞表达共刺激分子CD86,能促进健康人单个核细胞的增殖。 展开更多

关键词 蛋白酶体抑制剂 共刺激分子 抗原 CD86 混合淋巴细胞培养试验

在线阅读 下载PDF 职称材料

混合性热休克蛋白/肽疫苗与白细胞介素-12联合诱导特异性细胞毒T淋巴细胞产生的实验研究

11

作者 宋舸 袁玫 +3 位作者 崔雪梅 眭翔 赵斌 卢世璧 《中国康复理论与实践》 CSCD 2007年第3期252-254,共3页

目的研究肿瘤组织来源混合热休克蛋白(mHSPs)/肽疫苗诱导产生特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)的作用及其抗肿瘤免疫效应,为应用其治疗人类恶性肿瘤提供实验依据。方法利用细胞培养、流式细胞技术、蛋白质的分离纯化技术、电泳技术、Wester... 目的研究肿瘤组织来源混合热休克蛋白(mHSPs)/肽疫苗诱导产生特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)的作用及其抗肿瘤免疫效应,为应用其治疗人类恶性肿瘤提供实验依据。方法利用细胞培养、流式细胞技术、蛋白质的分离纯化技术、电泳技术、Westernblot检测方法、T淋巴细胞的诱导及体外扩增、乳酸脱氢酶法等,测定肿瘤多肽复合物诱导活化小鼠体内CTL杀伤效应。结果mHSPS免疫组和mHSPs+Cy+IL-12免疫组体外诱生的CTL反应活性均比对照组的CTL活性有所升高,尤其mH-SPs+Cy+IL-12免疫组升高明显,且随效靶比的上升而上升;与正常小鼠(CD4+46%、CD8+18%)比较,对照组、mHSPs免疫组及mHSPs+Cy+IL-12免疫组小鼠CD4+亚群的比例分别为38%、46%、54%。CD8+亚群的比例分别为26%、22%、16%。结论混合热休克蛋白/肽可诱发强大的抗肿瘤免疫效应,当与IL-12、低剂量Cy者联合应用后免疫功能增强最为明显。 展开更多

关键词 S180肉瘤 肿瘤 免疫治疗 混合热休克蛋白/肽 细胞毒T淋巴细胞 疫苗

在线阅读 下载PDF 职称材料

舒林酸对结肠癌细胞SW480FasL蛋白表达及诱导淋巴细胞凋亡的影响 被引量：4

12

作者 吴志刚 马庆久 +5 位作者 何显力 赖大年 李金茂 武永忠 包国强 吴涛 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期374-376,共3页

目的在体外通过细胞培养,探讨舒林酸对结、直肠癌发生、发展的化学预防机制。方法应用Western blot法检测舒林酸作用前后SW480细胞FasL蛋白表达的变化;应用流式细胞术检测舒林酸作用前后SW480细胞诱导淋巴细胞凋亡率的变化。结果舒林酸... 目的在体外通过细胞培养,探讨舒林酸对结、直肠癌发生、发展的化学预防机制。方法应用Western blot法检测舒林酸作用前后SW480细胞FasL蛋白表达的变化;应用流式细胞术检测舒林酸作用前后SW480细胞诱导淋巴细胞凋亡率的变化。结果舒林酸处理后较处理前SW480细胞FasL蛋白表达明显降低,而且FasL蛋白表达随舒林酸作用浓度增加显著降低;随舒林酸作用浓度升高,SW480细胞诱导淋巴细胞凋亡率明显降低,不同浓度组比较均有显著性差异(P<0.01)。结论舒林酸降低结肠癌SW480细胞FasL蛋白表达,使SW480细胞诱导Jurkat细胞凋亡率降低,可能是其对结、直肠癌发生、发展的化学预防机制。 展开更多

关键词 舒林酸 培养的肿瘤细胞 JURKAT细胞 FAS配体 凋亡 淋巴细胞凋亡率 蛋白表达 结肠癌细胞 SW480细胞 流式细胞术检测

在线阅读 下载PDF 职称材料

CHA4Ig修饰的树突状细胞在体外对淋巴细胞增殖及胞毒效应的影响 被引量：2

13

作者 邱文洪 郭凯文 +4 位作者 张悦 杨敬 王国华 廖雯君 沈关心 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期546-548,共3页

目的:探讨CTLA4Ig修饰的树突状细胞(DC)对T细胞增殖和细胞毒性T细胞(CTL)细胞毒活性的影响。方法:采用脂质体转染法,将质粒pG/CTLA4Ig转入DC。采用ELISA和SDS-PAGE鉴定转染质粒pG/CTLA4Ig的DC培养上清。以C57BL/6小鼠的单个核细胞作为... 目的:探讨CTLA4Ig修饰的树突状细胞(DC)对T细胞增殖和细胞毒性T细胞(CTL)细胞毒活性的影响。方法:采用脂质体转染法,将质粒pG/CTLA4Ig转入DC。采用ELISA和SDS-PAGE鉴定转染质粒pG/CTLA4Ig的DC培养上清。以C57BL/6小鼠的单个核细胞作为反应细胞,以未修饰的DC及修饰的DC作为刺激细胞,共培养6 d,用MTT比色法检测细胞的增殖。用乳酸脱氢酶法和ELISA法,分别测定细胞毒活性及T细胞凋亡。结果:CTLA4Ig融合蛋白和修饰的DC,对同种细胞刺激的增殖反应有明显地抑制作用;而未修饰的DC可显著诱导淋巴细胞增殖反应。CTLA4Ig融合蛋白和修饰的DC,对特异性CTL的细胞毒活性有明显地抑制作用,且可诱导T细胞凋亡。结论:稳定表达CTLA4Ig融合蛋白的DC,对T细胞增殖和对CTL的细胞毒活性具有明显地抑制作用,并可诱导T细胞凋亡。 展开更多

关键词 树突状细胞 CTLA4IG 单向混合淋巴细胞培养 乳酸脱氢酶 凋亡

在线阅读 下载PDF 职称材料

CTLA4Ig修饰树突状细胞对实验动物淋巴细胞增殖及胞毒效应的影响 被引量：1

14

作者 邱文洪 郭凯文 +5 位作者 朱慧芬 邵静芳 杨敬 张悦 龚非力 沈关心 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第11期765-767,共3页

目的 :探讨CTLA4Ig修饰的DC对实验动物免疫功能的影响。方法 :将经CTLA4Ig基因修饰或未修饰DC腹腔注射C5 7BL 6致敏小鼠 ,以致敏或未致敏C5 7BL 6单个核细胞作为反应细胞 ,以未修饰DC细胞及修饰DC为刺激细胞 ,共培养6天 ,采用MTT比色法... 目的 :探讨CTLA4Ig修饰的DC对实验动物免疫功能的影响。方法 :将经CTLA4Ig基因修饰或未修饰DC腹腔注射C5 7BL 6致敏小鼠 ,以致敏或未致敏C5 7BL 6单个核细胞作为反应细胞 ,以未修饰DC细胞及修饰DC为刺激细胞 ,共培养6天 ,采用MTT比色法检测细胞增殖 ,乳酸脱氢酶法测定细胞毒活性。结果 :CTLA4Ig融合蛋白对未修饰DC致敏或未致敏小鼠的同种细胞刺激的增殖反应有明显的抑制作用。CTLA4Ig修饰DC诱导不同组小鼠淋巴细胞增殖反应均明显降低 ,CTLA4Ig融合蛋白对CTL细胞毒活性有显著抑制作用。CTLA4Ig修饰DC对不同组小鼠CTL细胞毒活性均具有抵抗作用 ,未修饰DC细胞对未致敏小鼠以及未修饰DC对致敏小鼠CTL细胞毒活性敏感。结论 展开更多

关键词 树突状细胞 CTLA4IG 单向混合淋巴细胞培养 乳酸脱氢酶法

在线阅读 下载PDF 职称材料

OX40L在小鼠B16黑素瘤细胞中表达及对活化淋巴细胞凋亡影响

15

作者 高琦 徐丽慧 +3 位作者 郭贺 欧阳东云 王笑迎 何贤辉 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期585-589,共5页

目的:构建OX40L的真核表达载体,分析其在B16细胞中的表达,研究OX40L对活化T淋巴细胞凋亡的影响。方法:以小鼠C57BL/6脾脏的cDNA为模板,PCR扩增小鼠OX40L基因,构建真核表达载体pVAX1-OX40L,转染B16细胞后,荧光染色检测OX40L的表达;利用An... 目的:构建OX40L的真核表达载体,分析其在B16细胞中的表达,研究OX40L对活化T淋巴细胞凋亡的影响。方法:以小鼠C57BL/6脾脏的cDNA为模板,PCR扩增小鼠OX40L基因,构建真核表达载体pVAX1-OX40L,转染B16细胞后,荧光染色检测OX40L的表达;利用AnnexinV-PE凋亡试剂盒,检测B16黑素瘤细胞-淋巴细胞体外混合培养中对活化淋巴细胞凋亡的影响。结果:成功构建OX40L的真核表达载体,并转染B16细胞中,流式细胞术和激光共聚焦显微术均可检测到OX40L表达于B16细胞表面。淋巴细胞体外混合培养显示,表达OX40L的B16细胞组活化淋巴细胞的凋亡率为6.57%,而空质粒转染组为17.24%。结论:OX40L能表达于B16细胞表面,并能显著抑制活化淋巴细胞凋亡。 展开更多

关键词 OX40L 黑素瘤 淋巴细胞 混合淋巴细胞培养 细胞凋亡

在线阅读 下载PDF 职称材料

重组免疫毒素hIL-2-LuffinP1对淋巴细胞体外增殖的影响

16

作者 王儒鹏 何威 +3 位作者 刘树雷 贺伟峰 张小容 吴军 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期253-255,共3页

目的检测基因工程免疫毒素hIL-2-LuffinP1的体外生物学活性。方法采用分离的C57和BALB/c小鼠脾细胞进行混合淋巴细胞反应,刀豆球蛋白A(ConA)刺激BALB/c小鼠脾细胞进行淋巴细胞增殖实验,以LuffinP1毒素分子作为对照。3H-TdR核素掺入法检... 目的检测基因工程免疫毒素hIL-2-LuffinP1的体外生物学活性。方法采用分离的C57和BALB/c小鼠脾细胞进行混合淋巴细胞反应,刀豆球蛋白A(ConA)刺激BALB/c小鼠脾细胞进行淋巴细胞增殖实验,以LuffinP1毒素分子作为对照。3H-TdR核素掺入法检测hIL-2-LuffinP1对淋巴细胞增殖的抑制作用。以CTLL-2细胞检测hIL-2-LuffinP1对IL-2依赖细胞株的杀伤作用,实验共设6组:PBS、IL-2、LuffinP1、LuffinP1+IL-2、hIL-2-LuffinP1、hIL-2-LuffinP1+IL-2,CTLL-2细胞加入各组试剂培养12h,台盼蓝染色,计数每100个细胞中的死亡细胞数。结果随剂量增加,hIL-2-LuffinP1对淋巴细胞增殖的抑制作用逐渐增强,在10-6mol/L浓度时,抑制率可达到97%,而LuffinP1对淋巴细胞增殖无明显抑制作用。hIL-2-LuffinP1对Con A刺激的脾细胞活化也有抑制作用,与在混合淋巴细胞体系中一致,而LuffinP1对上述两个反应体系中的淋巴细胞增殖均无明显抑制作用。加入hIL-2-LuffinP1+IL-2和hIL-2-LuffinP1后CTLL-2细胞的死亡率分别为29.6%和47.4%,明显高于IL-2组(5.6%,P<0.01)。结论重组免疫毒素hIL-2-LuffinP1在体外能够抑制淋巴细胞增殖,对表达IL-2R的活化淋巴细胞产生定向杀伤作用。 展开更多

关键词 免疫毒素类 淋巴细胞培养试验 混合 hIL-2-LuffinP1

在线阅读 下载PDF 职称材料

低温对人脐血淋巴细胞免疫活性的影响 被引量：3

17

作者 韩颖 谭汉君 +1 位作者 刘作斌 张晓飞 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 1995年第2期210-211,共2页

本实验通过超低温冷冻的方法来研究冻存对脐血淋巴细胞功能的影响,同时观察了脐血与成人外周血淋巴细胞免疫活性的差异。 材料与方法 标本采集 脐带血20份,分别取自正常分娩的足月儿脐带血。成人外周血17份,分别取自正常成人静脉血。 ... 本实验通过超低温冷冻的方法来研究冻存对脐血淋巴细胞功能的影响,同时观察了脐血与成人外周血淋巴细胞免疫活性的差异。 材料与方法 标本采集 脐带血20份,分别取自正常分娩的足月儿脐带血。成人外周血17份,分别取自正常成人静脉血。 单个核细胞悬液的制备 脐血和外周血分别用淋巴细胞分层液分出单个核细胞,取少量合20％人AB型血清的RPMI 1640培养液,配制出5ml细胞浓度为1×10~6/ml的细胞悬液,放置操作台内作为新鲜待测标本,余量送低温冻存。 展开更多

关键词 人脐血淋巴细胞 免疫活性 单个核细胞 单向混合淋巴细胞培养 T淋巴细胞 成人外周血淋巴细胞 低温冻存 脐带血 超低温冷冻 培养液

在线阅读 下载PDF 职称材料

自身LAK和肿瘤细胞在TIL大量扩增中的作用 被引量：4

18

作者 李先兴 李莉 +2 位作者 孔宪涛 张玲珍 王元和 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1994年第1期32-34,共3页

将肿瘤浸润淋巴细胞（ＴＩＬ）分别与自身ＬＡＫ细胞、肿瘤细胞以及后二者共同混合培养，结果均使ＴＩＬ的体外扩增能力和细胞毒活性大为提高，体外扩增有效期和高细胞毒活性持续时间均较单纯ＩＬ－２培养的ＴＩＬ延长。以与自身ＬＡＫ... 将肿瘤浸润淋巴细胞（ＴＩＬ）分别与自身ＬＡＫ细胞、肿瘤细胞以及后二者共同混合培养，结果均使ＴＩＬ的体外扩增能力和细胞毒活性大为提高，体外扩增有效期和高细胞毒活性持续时间均较单纯ＩＬ－２培养的ＴＩＬ延长。以与自身ＬＡＫ和肿瘤细胞混合培养的ＴＩＬ对自身肿瘤的杀伤活性提高最明显。 展开更多

关键词 混合培养 肿瘤 淋巴细胞 杀伤细胞

在线阅读 下载PDF 职称材料

自体树突状细胞疫苗诱导胃癌患者术后肿瘤特异性免疫反应的作用 被引量：7

19

作者 汪灏 余佩武 +4 位作者 赵永亮 石彦 吴淼 曾冬竹 蔡志民 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期408-410,共3页

目的探讨胃癌术后患者应用树突状细胞(dendriticcells,DCs)疫苗治疗后机体肿瘤特异性免疫反应的变化。方法采用外周血单个核细胞及自体肿瘤抗原在体外制备DCs疫苗,皮下注射胃癌术后患者,每周1次,共治疗4次。在治疗前后相应各时相点检测... 目的探讨胃癌术后患者应用树突状细胞(dendriticcells,DCs)疫苗治疗后机体肿瘤特异性免疫反应的变化。方法采用外周血单个核细胞及自体肿瘤抗原在体外制备DCs疫苗,皮下注射胃癌术后患者,每周1次,共治疗4次。在治疗前后相应各时相点检测针对自体肿瘤抗原的迟发性超敏反应(delayedtypehypersensitivity,DTH),外周血单个核细胞混合淋巴细胞反应(mixedlymphocytereacion,MLR)及细胞上清IFNγ及IL4的水平。结果疫苗治疗后可以明提高外周血单个核细胞混合淋巴细胞反应的强度。治疗前及治疗后第2、4、8周患者外周血单核细胞(peripheralbloodmonocytecell,PBMC)分泌IFNγ的水平分别为(184±20)、(467±55)、(700±88)、(257±38)pg/ml,各组差异显著;而分泌IL4的水平分别为(66±8)、(69±9)、(66±7)、(61±7)pg/ml。各组之间无明显变化。有16例疫苗注射后患者DTH反应呈阳性。结论树突状细胞疫苗可改善胃癌术后患者免疫功能状态,并诱导出了肿瘤特异性的免疫反应。 展开更多

关键词 树突状细胞 胃肿瘤 混合淋巴细胞反应

在线阅读 下载PDF 职称材料

树突状细胞与血液系统肿瘤免疫治疗研究进展 被引量：4

20

作者 邓旻 窦晓兵 史亦谦 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期185-188,共4页

关键词 树突状细胞 肿瘤免疫治疗 血液系统 混合淋巴细胞反应 抗原提呈细胞 抗肿瘤免疫 cell 小鼠脾脏

在线阅读 下载PDF 职称材料