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淀粉液化芽孢杆菌BS5582产蛋白酶的发酵条件优化、酶学性质分析及其在牛皮脱毛中的应用
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作者 任涛 钮成拓 +3 位作者 郑飞云 刘春凤 王金晶 李崎 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2024年第22期106-114,共9页
该研究旨在优化1株高产蛋白酶淀粉液化芽孢杆菌BS5582的产酶条件,分析其酶学性质,并考察其在牛皮脱毛工艺中的应用效果。结果表明,BS5582菌株的较优产酶培养基组成为(g/L):玉米粉50.0,豆饼粉40.0,Na_(2)HPO_(4)·12H_(2)O 6.0,KH_(2... 该研究旨在优化1株高产蛋白酶淀粉液化芽孢杆菌BS5582的产酶条件,分析其酶学性质,并考察其在牛皮脱毛工艺中的应用效果。结果表明,BS5582菌株的较优产酶培养基组成为(g/L):玉米粉50.0,豆饼粉40.0,Na_(2)HPO_(4)·12H_(2)O 6.0,KH_(2)PO_(4)3.0,MgSO_(4)1.8,CaCl_(2)0.75;培养基初始pH 6;较优发酵条件为:发酵温度35℃,接种量10%,装液量15 mL。在较优条件下,该菌株产蛋白酶活力达到(5270.59±19.61)U/mL,是优化前的21倍。BS5582菌株所产蛋白酶的最适温度和最适pH值分别为40℃和8.5,Mn^(2+)对酶有明显激活作用,而Fe^(2+)、Fe^(3+)和苯甲基磺酰氟对酶活力有显著抑制作用。将该酶应用于牛皮脱毛,发现其具有良好的牛皮脱毛能力且胶原损伤小。相比于传统灰碱法脱毛,该蛋白酶脱毛后牛皮毛孔中无发根残留,毛发完整脱落,脱毛废水的污染指标总固体悬浮物、化学需氧量和五日生化需氧量值分别比化学脱毛法降低约87%、39%和45%,这说明BS5582菌株产蛋白酶具有潜在的清洁脱毛应用价值。 展开更多
关键词 蛋白酶 淀粉液化芽孢杆菌 发酵条件优化 酶学性质 牛皮脱毛
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淀粉液化芽孢杆菌对脂多糖刺激肉鸡生长性能、肠道形态及免疫功能的影响 被引量:6
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作者 李悦 张昊 +3 位作者 杨敏馨 张莉莉 陆兆新 王恬 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期624-631,共8页
[目的]本试验通过测定肉鸡生长性能、肠道形态及免疫功能,研究日粮中添加淀粉液化芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens,BA)对大肠杆菌脂多糖(LPS)诱导肉鸡免疫应激的缓解作用。[方法]选用192只1日龄AA雄性肉鸡,采用2×2因子试验设... [目的]本试验通过测定肉鸡生长性能、肠道形态及免疫功能,研究日粮中添加淀粉液化芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens,BA)对大肠杆菌脂多糖(LPS)诱导肉鸡免疫应激的缓解作用。[方法]选用192只1日龄AA雄性肉鸡,采用2×2因子试验设计,主因素为免疫刺激因素(注射生理盐水或LPS溶液)和日粮因素(饲喂基础日粮或添加0.2%BA的试验日粮),每组6个重复,每重复8只,试验期为21 d。分别在16、18和20日龄给LPS组腹腔注射500μg·kg^(-1)的LPS溶液,对照组注射等体积的生理盐水。[结果]LPS刺激导致肉鸡1~21 d平均日增体质量和平均日采食量显著降低(P<0.05),血浆髓过氧化物酶(MPO)活性和白介素1β(IL^(-1)β)含量显著升高,空肠和回肠绒毛高度以及绒毛高度与隐窝深度比值显著降低,隐窝深度显著增加,空肠黏膜TLR4、IL^(-1)β、IL^(-1)0以及回肠黏膜IL^(-1)β、IL-6 mRNA表达水平显著升高(P<0.05)。日粮添加BA显著降低血浆髓过氧化物酶活性,显著降低空肠黏膜TLR4、IL^(-1)βmRNA表达水平,显著提高回肠黏膜IL^(-1)0 mRNA表达水平(P<0.05)。日粮添加BA有效阻止LPS造成的平均日增体质量降低、饲料转化率升高以及回肠隐窝深度增加,并降低了LPS导致的血浆MPO活性和回肠黏膜TLR4 mRNA表达水平升高。[结论]日粮添加BA可缓解LPS对肉鸡生长性能造成的不良影响与LPS刺激引起的炎性反应及肠道损伤,并改善肠道黏膜免疫状态。 展开更多
关键词 淀粉液化芽孢杆菌 免疫应激 肠道 肉鸡
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温度对淀粉液化芽孢杆菌5582产蛋白酶的影响 被引量:10
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作者 郝秋娟 李树立 +1 位作者 陈颖 李崎 《中国酿造》 CAS 北大核心 2008年第6期37-39,共3页
为进一步提高淀粉液化芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)BS5582产蛋白酶的水平,对发酵工艺进行优化,采用了分阶段控温工艺。发现在5L发酵罐装料系数0.6、接种量6.67%、种龄18h、通气量1.0L(/L·min)、搅拌转速500r/min、起始发... 为进一步提高淀粉液化芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)BS5582产蛋白酶的水平,对发酵工艺进行优化,采用了分阶段控温工艺。发现在5L发酵罐装料系数0.6、接种量6.67%、种龄18h、通气量1.0L(/L·min)、搅拌转速500r/min、起始发酵温度35℃,发酵27h(稳定期)后降温至32℃继续发酵至终了,蛋白酶酶活在47.75h达到9838U/mL,比恒温发酵提高101.6%。 展开更多
关键词 淀粉液化芽孢杆菌 温度 蛋白酶
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淀粉液化芽孢杆菌产β-葡聚糖酶培养基优化以及酶稳定剂的研究 被引量:12
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作者 郝秋娟 李永仙 李崎 《中国酿造》 CAS 北大核心 2006年第4期18-22,共5页
采用正交试验方法,进行了淀粉液化芽孢杆菌发酵产β-葡聚糖酶培养基的优化。结果表明,采用玉米粉30g/L,大麦粉40g/L,豆饼粉30g/L,Na2HPO4.12H2O 6g/L,(NH4)2SO4 4g/L,CaCl2 0.8g/L,MgSO4.7H2O1g/L组成的培养基发酵,β-葡聚糖酶活力达到1... 采用正交试验方法,进行了淀粉液化芽孢杆菌发酵产β-葡聚糖酶培养基的优化。结果表明,采用玉米粉30g/L,大麦粉40g/L,豆饼粉30g/L,Na2HPO4.12H2O 6g/L,(NH4)2SO4 4g/L,CaCl2 0.8g/L,MgSO4.7H2O1g/L组成的培养基发酵,β-葡聚糖酶活力达到128.55U/mL,比优化前提高了22.48%。在β-葡聚糖酶溶液中添加大分子亲水型多糖黄原胶、动物蛋白明胶、甘油、氯化钠可明显提高β-葡聚糖酶的热稳定性。将添加甘油120g/L、黄原胶5g/L复合稳定剂的葡聚糖酶溶液60℃处理2h,酶液的残余酶活比未经处理的酶活提高了55.3%。 展开更多
关键词 淀粉液化芽孢杆菌 培养基优化 Β-葡聚糖酶 稳定剂
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温度对淀粉液化芽孢杆菌5582产β-葡聚糖酶的影响 被引量:3
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作者 郝秋娟 陈颖 +1 位作者 李永仙 李崎 《中国酿造》 CAS 北大核心 2007年第3期11-15,共5页
为进一步提高淀粉液化芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefacien)BS 5582产β-葡聚糖酶的水平,采用了分阶段控温工艺,在5L发酵罐,装料系数0.6,接种量6.67%,种龄18h,通气量1.0L(/L·min),搅拌转速500r/min,起始发酵温度36℃,培养27h(稳定... 为进一步提高淀粉液化芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefacien)BS 5582产β-葡聚糖酶的水平,采用了分阶段控温工艺,在5L发酵罐,装料系数0.6,接种量6.67%,种龄18h,通气量1.0L(/L·min),搅拌转速500r/min,起始发酵温度36℃,培养27h(稳定期)后,降温至32℃继续发酵至终了。β-葡聚糖酶酶活在51.75h达到182.52U/mL,比恒温发酵提高了28%。 展开更多
关键词 淀粉液化芽孢杆菌 温度 Β-葡聚糖酶
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Ca^(2+)诱导的淀粉液化芽孢杆菌α-淀粉酶分子的生物活性和结构变化 被引量:7
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作者 冀旭 边六交 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2013年第11期2517-2523,共7页
在研究Ca2+对淀粉液化芽孢杆菌α-淀粉酶分子生物活性影响的基础上,采用荧光光谱法和傅里叶变换红外光谱法研究了Ca2+诱导的酶分子结构变化.结果表明,当溶液中Ca2+浓度低于25.0 mmol/L时,Ca2+对酶分子具有激活作用;而当Ca2+浓度高于25.0... 在研究Ca2+对淀粉液化芽孢杆菌α-淀粉酶分子生物活性影响的基础上,采用荧光光谱法和傅里叶变换红外光谱法研究了Ca2+诱导的酶分子结构变化.结果表明,当溶液中Ca2+浓度低于25.0 mmol/L时,Ca2+对酶分子具有激活作用;而当Ca2+浓度高于25.0 mmol/L时,Ca2+对酶分子的生物活性具有抑制作用.在Ca2+诱导的淀粉液化芽孢杆菌α-淀粉酶分子结构变化过程中,酶分子仅发生二级结构的变化,并不涉及其三级结构.当Ca2+对酶分子具有激活作用时,酶分子中的无规卷曲结构及β-折叠结构的含量下降,而α-螺旋结构及β-转角结构的含量上升;而当Ca2+对酶分子生物活性具有抑制作用时,酶分子中的α-螺旋结构及β-转角结构的含量下降,而无规卷曲结构及β-折叠结构的含量上升. 展开更多
关键词 淀粉液化芽孢杆菌α-淀粉 CA2+ 生物活性 二级结构
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多方法组合分析脲诱导的淀粉液化芽孢杆菌α-淀粉酶去折叠和重折叠过程的构象转化 被引量:1
7
作者 杨文慧 冀旭 边六交 《分析科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期8-14,共7页
以变性和非变性电泳、体积排阻色谱、内源荧光发射光谱、荧光相图、荧光猝灭以及活性测定等组合分析方法,研究了脲诱导的淀粉液化芽孢杆菌α-淀粉酶分子的去折叠和重折叠过程。结果表明,在脲诱导的芽孢杆菌α-淀粉酶分子的去折叠和重折... 以变性和非变性电泳、体积排阻色谱、内源荧光发射光谱、荧光相图、荧光猝灭以及活性测定等组合分析方法,研究了脲诱导的淀粉液化芽孢杆菌α-淀粉酶分子的去折叠和重折叠过程。结果表明,在脲诱导的芽孢杆菌α-淀粉酶分子的去折叠和重折叠过程中,芽孢杆菌α-淀粉酶分子始终以单分子形式存在,不会形成分子间的聚集体或聚集体沉淀。当变性液或复性液中脲浓度约为4.0mol/L时,芽孢杆菌α-淀粉酶分子的去折叠和重折叠过程中均出现一个部分折叠中间体,两个过程均符合"三态模型"。脲诱导的芽孢杆菌α-淀粉酶分子重折叠过程的复性曲线几乎与芽孢杆菌α-淀粉酶分子去折叠过程的残余活性率曲线重合。通过这些结果,并结合盐酸胍诱导的芽孢杆菌α-淀粉酶分子的去折叠和重折叠过程,推断脲和盐酸胍诱导的芽孢杆菌α-淀粉酶分子的去折叠和重折叠过程分别是相互可逆的。 展开更多
关键词 淀粉液化芽孢杆菌α-淀粉 去折叠 重折叠 折叠中间态
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淀粉液化芽孢杆菌BS5582产蛋白酶的酶谱分析与鉴定 被引量:2
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作者 徐爱兰 朱林江 +2 位作者 李永仙 王金晶 李崎 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期142-145,150,共5页
本研究对淀粉液化芽孢杆菌BS5582分泌的蛋白酶进行快速分析与鉴定。测定菌株胞外蛋白酶酶活,结果显示蛋白酶在中性条件下活力最高,且在发酵过程中出现三个酶活高峰,表明菌株可能分泌多种蛋白酶。蛋白酶酶谱分析发现共有五条蛋白水解条... 本研究对淀粉液化芽孢杆菌BS5582分泌的蛋白酶进行快速分析与鉴定。测定菌株胞外蛋白酶酶活,结果显示蛋白酶在中性条件下活力最高,且在发酵过程中出现三个酶活高峰,表明菌株可能分泌多种蛋白酶。蛋白酶酶谱分析发现共有五条蛋白水解条带。通过质谱鉴定这些水解条带对应非变性-SDS-PAGE凝胶上的蛋白条带,表明该菌株可能产Bacillopeptidase F、胞外中性金属蛋白酶和枯草杆菌蛋白酶Bpn'这三种蛋白酶,其中Bacillopeptidase F和胞外中性金属蛋白酶存在两种形式。结果显示酶谱分析法结合质谱鉴定能快速鉴定菌株BS5582分泌的胞外蛋白酶的多种复杂形式,是一种快速鉴定多种蛋白酶的有效方法。 展开更多
关键词 淀粉液化芽孢杆菌 蛋白酶 酶谱分析 非变性-SDS—PAGE 质谱鉴定
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产β-葡聚糖酶淀粉液化芽孢杆菌的选育 被引量:2
9
作者 林小杰 李崎 顾国贤 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期57-60,65,共5页
通过对一株淀粉液化芽孢杆菌进行紫外和60Co逐级诱变,使该菌株产β-葡聚糖酶酶活从80 U/mL提高到105 U/mL;对突变株进行多次单菌落分离及传代,对其传代稳定性的研究表明:该菌株产酶性能稳定;在5 L发酵罐中突变株的产酶水平比摇瓶要高,可... 通过对一株淀粉液化芽孢杆菌进行紫外和60Co逐级诱变,使该菌株产β-葡聚糖酶酶活从80 U/mL提高到105 U/mL;对突变株进行多次单菌落分离及传代,对其传代稳定性的研究表明:该菌株产酶性能稳定;在5 L发酵罐中突变株的产酶水平比摇瓶要高,可达120 U/mL,产酶周期比摇瓶缩短了15 h. 展开更多
关键词 淀粉液化芽孢杆菌 筛选 发酵 Β-葡聚糖酶
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溶氧对淀粉液化芽孢杆菌BS5582产β-葡聚糖酶的影响 被引量:2
10
作者 刘泽慧 李永仙 李崎 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2012年第14期173-175,共3页
淀粉液化芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)BS5582在10L全自动发酵罐规模生产β-葡聚糖酶,分别控制通气量、罐压和搅拌转速进行溶氧优化,研究发现在装液量6L,接种量6.67%,发酵温度37℃的条件下,优化后通气量9L/min,搅拌转速600r/min... 淀粉液化芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)BS5582在10L全自动发酵罐规模生产β-葡聚糖酶,分别控制通气量、罐压和搅拌转速进行溶氧优化,研究发现在装液量6L,接种量6.67%,发酵温度37℃的条件下,优化后通气量9L/min,搅拌转速600r/min,罐压0.6MPa,β-葡聚糖酶酶活在44h达到511U/mL,比优化前提高了122.76%。 展开更多
关键词 淀粉液化芽孢杆菌 Β-葡聚糖酶 溶氧 优化
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淀粉液化芽孢杆菌BS5582中性蛋白酶基因的克隆表达及其酶学性质研究 被引量:1
11
作者 万岩松 李永仙 +2 位作者 郑飞云 刘春凤 李崎 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期237-240,共4页
以一株高产中性蛋白酶的Bacillus amyloliquefaciens BS5582基因组DNA为模板,PCR扩增获得结构基因npr,构建质粒pPIC9K-npr,并转化到表达菌株毕赤酵母GS115中得到重组菌。经甲醇诱导发酵,测定中性蛋白酶活性。结果表明,目的基因大小为156... 以一株高产中性蛋白酶的Bacillus amyloliquefaciens BS5582基因组DNA为模板,PCR扩增获得结构基因npr,构建质粒pPIC9K-npr,并转化到表达菌株毕赤酵母GS115中得到重组菌。经甲醇诱导发酵,测定中性蛋白酶活性。结果表明,目的基因大小为1566bp,在宿主中得到了成功表达,重组菌酶活力为9.17×103U/g,酶学性质分析表明,重组中性蛋白酶的最适反应温度为50℃,最适反应pH为7,在40℃中保温1h后仍能保持85%左右活性,在pH4~9的范围内稳定性较好,Ca2+、Mg2+、Mn2+离子对该酶有激活作用。 展开更多
关键词 淀粉液化芽孢杆菌 中性蛋白酶 克隆表达 酶学性质
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细菌α-淀粉酶发酵技术研究(Ⅱ)——淀粉液化芽孢杆菌α-淀粉酶的发酵条件的研究
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作者 邬显章 儿玉彻 +1 位作者 大森俊雄 和蓑田泰治 《食品与生物技术学报》 CAS 1983年第4期13-18,共6页
将在日本收集的α-淀粉酶有关菌种,作了菌种酶活性的比较,发现淀粉液化芽孢杆菌Bacillus amyloliquefaciens KA 63培养在10%可溶性淀粉,2%蛋白胨,1%牛肉膏,0.5%酵母粉,0.5%NaCl,0.5%K_2HPO_4中可获较高的α-淀粉酶酶活,2升发酵罐培养28... 将在日本收集的α-淀粉酶有关菌种,作了菌种酶活性的比较,发现淀粉液化芽孢杆菌Bacillus amyloliquefaciens KA 63培养在10%可溶性淀粉,2%蛋白胨,1%牛肉膏,0.5%酵母粉,0.5%NaCl,0.5%K_2HPO_4中可获较高的α-淀粉酶酶活,2升发酵罐培养28-30小时,α-淀粉酶酶活可达400单位/亳升,该菌种具有一定的生产价值,将为我国增添一个液化型α-淀粉酶的新品种。 展开更多
关键词 Α-淀粉 淀粉液化芽孢杆菌 牛肉膏 酵母粉 牛肉浸膏 黃喋呤 发酵条件 发酵培养基 可溶性淀粉
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液化淀粉芽孢杆菌YM3发酵配方研究
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作者 林崇宝 杨雯馨 +9 位作者 何铁光 何永群 张野 胡钧铭 韦彩会 李婷婷 俞月凤 李忠义 唐红琴 王瑾 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2015年第5期2030-2035,共6页
为筛选液化淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)YM3的发酵配方,初期以摇瓶进行培养,确定最适配方并以此配方进行培养条件筛选。结果表明最适配方为糖蜜0.5%、乳糖1%、大豆分离蛋白2%,以此配方进行培养条件研究,接种24 h内菌量... 为筛选液化淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)YM3的发酵配方,初期以摇瓶进行培养,确定最适配方并以此配方进行培养条件筛选。结果表明最适配方为糖蜜0.5%、乳糖1%、大豆分离蛋白2%,以此配方进行培养条件研究,接种24 h内菌量显著提升1000倍,24~8 h菌量显着提升10倍,此后培养菌量无显着差异。其他培养条件如不同温度、p H之间菌量则无显着性差异。用10 L发酵槽测试,显示以糖蜜0.5%、乳糖1%、大豆分离蛋白2%作为培养基,转速200至300 r/min、温度30℃、p H无调整,培养5 d,可得到菌量4×109CFU/m L以上之发酵液。利用1 t大型发酵槽以相同的培养基培养,发酵条件为30℃、转速160~200 r/min、通气量0.5 vvm,培养5 d,其菌量可达6×108CFU/m L以上。该发酵配方可以用来大量生产液化淀粉芽孢杆菌。 展开更多
关键词 液化淀粉芽孢杆菌 发酵 益生菌 配方筛选
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产碱性纤维素酶芽孢杆菌ZA-05的分离及功能基因克隆 被引量:2
14
作者 魏艳丽 李红梅 +2 位作者 李纪顺 扈进冬 杨合同 《湖北农业科学》 北大核心 2011年第18期3859-3863,共5页
从造纸污泥中分离到一株芽孢杆菌ZA-05,该菌可产生内切β-1,4-葡聚糖酶酶活性,且在碱性条件下酶活较高,经生理生化和分子生物学鉴定,该菌株为淀粉液化芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens);根据GenBank登录的内切-β-1,4-葡聚糖酶基因(... 从造纸污泥中分离到一株芽孢杆菌ZA-05,该菌可产生内切β-1,4-葡聚糖酶酶活性,且在碱性条件下酶活较高,经生理生化和分子生物学鉴定,该菌株为淀粉液化芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens);根据GenBank登录的内切-β-1,4-葡聚糖酶基因(DQ782954.1,M28332.1,AY859492.1)的同源性序列,利用PCR方法克隆到该菌株的功能基因,并对其进行测序。测序结果显示其全长为1 500 bp,推测其含499个氨基酸。 展开更多
关键词 淀粉液化芽孢杆菌 分离鉴定 碱性纤维素酶 基因克隆
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新型中性植酸酶在大肠杆菌中的高效表达、纯化及酶学性质 被引量:3
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作者 路国伟 许伟 +1 位作者 邵荣 云志 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第21期153-156,共4页
运用基因工程技术,将克隆到的淀粉液化芽孢杆菌Bacillus amyloliquefaciens DSM 1061新型中性植酸酶基因(GenBank登录号为HM747163)构建到表达载体pET22b(+)上,并在E.coli BL21(DE3)中进行高效表达。电泳结果表明该酶分子质量约为42kD,... 运用基因工程技术,将克隆到的淀粉液化芽孢杆菌Bacillus amyloliquefaciens DSM 1061新型中性植酸酶基因(GenBank登录号为HM747163)构建到表达载体pET22b(+)上,并在E.coli BL21(DE3)中进行高效表达。电泳结果表明该酶分子质量约为42kD,目的蛋白占大肠杆菌可溶性蛋白30%左右。利用Ni-NTA琼脂糖凝胶进行亲和纯化,酶学性质研究表明,其最适温度为60℃,最适pH值为7.0,最大酶比活力为15U/mg。60℃时以植酸钠为底物的Km值为0.30mmol/L。 展开更多
关键词 淀粉液化芽孢杆菌 高效表达 中性植酸酶 酶学性质
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Bacillus amyloliquefaciens ES-2液体发酵抗菌脂肽培养基及其主要影响因子筛选 被引量:15
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作者 孙力军 陆兆新 孙德坤 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期60-63,共4页
对淀粉液化芽孢杆菌ES-2抗菌脂肽深层液体发酵培养基及其主要影响因子进行了筛选。首先采用单因子实验,确定了Landy培养基为起始培养基,再采用Plackett-Burman设计法,对影响抗菌肽发酵的显著因素进行筛选。结果表明,在所选取的12个相关... 对淀粉液化芽孢杆菌ES-2抗菌脂肽深层液体发酵培养基及其主要影响因子进行了筛选。首先采用单因子实验,确定了Landy培养基为起始培养基,再采用Plackett-Burman设计法,对影响抗菌肽发酵的显著因素进行筛选。结果表明,在所选取的12个相关因素中,对抗菌肽的产量具有显著影响的因子是KC、lFeSO4、温度。 展开更多
关键词 淀粉液化芽孢杆菌 抗菌脂肽 培养基 Plackett—Burman实验设计
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A marked enhancement in production of amylase by Bacillus amyloliquefaciens in flask fermentation using statistical methods 被引量:3
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作者 赵伟 郑甲 +1 位作者 王玉光 周洪波 《Journal of Central South University》 SCIE EI CAS 2011年第4期1054-1062,共9页
A total of 126 bacterial strains were isolated from soil samples. Among them, 11 isolates were found positive for amylase production. Strain YL produced the largest zone of clearance on plate assay. The isolate YL was... A total of 126 bacterial strains were isolated from soil samples. Among them, 11 isolates were found positive for amylase production. Strain YL produced the largest zone of clearance on plate assay. The isolate YL was identified as Bacillus sp. based on morphological and physiochemical characterization. According to 16S rRNA gene sequencing data, the closest phylogenetic neighbor of strain YL was Bacillus amyloliquefaciens (99.54%). After that, an optimization of culture conditions was carried out for the improvement of a-amylase production. Response surface methodology (RSM) was applied to evaluate the effect of medium components including wheat bran, cottonseed extract, yeast extract, starch, NaC1 and CaCl2. Three variables (wheat bran, cottonseed extract, and starch), which were identified to significantly affect amylase production by Plackett-Burman design were further optimized using response surface methodology of Box-Behnken design (BBD). The optimal concentrations estimated for each variable related to the maximum of amylase activity (86 kU/mL) were 10.80 g/L wheat bran, 9.90 g/L cottonseed extract, 0.5 g/L starch, 2.0 g/L yeast extract, 5.00 g/L NaCl and 2.00 g/L CaC12. The fermentation using optimized culture medium allowed a significant increase in amylase production (by 3-fold). The improvement in the a-amylase production after optimization process can be considered adequate for large-scale applications. 展开更多
关键词 response surfhce methodology AMYLASE medium optimization Bacillus amyloliqueJktciens
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