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液泡膜蛋白1通过影响活性氧介导心脏成纤维细胞激活与增殖
1
作者
李雅
冯翠娜
+2 位作者
祖玉刚
汪煜
江永正
《中国医药导报》
2024年第36期13-17,31,共6页
目的探讨液泡膜蛋白1(VMP1)对心脏成纤维细胞激活、增殖的影响。方法分离小鼠乳鼠心脏成纤维细胞,将细胞分为对照组、转化生长因子β(TGF-β)诱导组、VMP1敲减组、VMP1敲减+TGF-β诱导组。采用Western blot法明确TGF-β激活的成纤维细胞...
目的探讨液泡膜蛋白1(VMP1)对心脏成纤维细胞激活、增殖的影响。方法分离小鼠乳鼠心脏成纤维细胞,将细胞分为对照组、转化生长因子β(TGF-β)诱导组、VMP1敲减组、VMP1敲减+TGF-β诱导组。采用Western blot法明确TGF-β激活的成纤维细胞VMP1的变化情况。采用免疫荧光比较各组细胞α-SMA的表达情况及细胞形态;培养24、48、72 h后采用CCK-8法检测各组细胞增殖情况,采用碘化丙啶(PI)染色及流式细胞术检测细胞周期情况;采用活性氧探针及流式细胞术检测各组活性氧(ROS)的含量。结果与对照组比较,TGF-β诱导组α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达水平升高、VMP1表达水平降低(P<0.05)。与对照组比较,TGF-β诱导组心脏成纤维细胞α-SMA的免疫荧光强度增加(P<0.01),与TGF-β诱导组比较,VMP1敲减+TGF-β诱导组α-SMA免疫荧光强度增加(P<0.01)。CCK-8实验发现,TGF-β诱导组各时间点光密度(OD)值高于对照组(P<0.05)。与TGF-β诱导组比较,VMP1敲减+TGF-β诱导组各时间点OD值低于TGF-β诱导组。流式细胞术检测发现,与对照组比较,TGF-β诱导组细胞G2/M期的细胞比例增加(P<0.05)。与TGF-β诱导组比较,VMP1敲减+TGF-β诱导组的细胞G2/M期的细胞比例增加(P<0.01)。ROS探针显示,TGF-β诱导组ROS荧光阳性细胞数与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。与TGF-β诱导组比较,VMP1敲减+TGF-β诱导组ROS荧光阳性细胞数增加(P<0.05)。结论在TGF-β诱导的心脏成纤维细胞转化中,VMP1蛋白表达降低,通过增加成纤维细胞ROS累积,促进细胞增殖,并参与成纤维细胞活化为肌成纤维细胞,最终促进心脏纤维化。
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关键词
液泡膜蛋白1
心脏成纤维细胞
心脏纤维化
心脏重构
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题名
液泡膜蛋白1通过影响活性氧介导心脏成纤维细胞激活与增殖
1
作者
李雅
冯翠娜
祖玉刚
汪煜
江永正
机构
上海市松江区泗泾医院心内科
河北大学附属医院心内科
出处
《中国医药导报》
2024年第36期13-17,31,共6页
基金
河北省自然科学基金资助项目(H2021201046)。
文摘
目的探讨液泡膜蛋白1(VMP1)对心脏成纤维细胞激活、增殖的影响。方法分离小鼠乳鼠心脏成纤维细胞,将细胞分为对照组、转化生长因子β(TGF-β)诱导组、VMP1敲减组、VMP1敲减+TGF-β诱导组。采用Western blot法明确TGF-β激活的成纤维细胞VMP1的变化情况。采用免疫荧光比较各组细胞α-SMA的表达情况及细胞形态;培养24、48、72 h后采用CCK-8法检测各组细胞增殖情况,采用碘化丙啶(PI)染色及流式细胞术检测细胞周期情况;采用活性氧探针及流式细胞术检测各组活性氧(ROS)的含量。结果与对照组比较,TGF-β诱导组α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达水平升高、VMP1表达水平降低(P<0.05)。与对照组比较,TGF-β诱导组心脏成纤维细胞α-SMA的免疫荧光强度增加(P<0.01),与TGF-β诱导组比较,VMP1敲减+TGF-β诱导组α-SMA免疫荧光强度增加(P<0.01)。CCK-8实验发现,TGF-β诱导组各时间点光密度(OD)值高于对照组(P<0.05)。与TGF-β诱导组比较,VMP1敲减+TGF-β诱导组各时间点OD值低于TGF-β诱导组。流式细胞术检测发现,与对照组比较,TGF-β诱导组细胞G2/M期的细胞比例增加(P<0.05)。与TGF-β诱导组比较,VMP1敲减+TGF-β诱导组的细胞G2/M期的细胞比例增加(P<0.01)。ROS探针显示,TGF-β诱导组ROS荧光阳性细胞数与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。与TGF-β诱导组比较,VMP1敲减+TGF-β诱导组ROS荧光阳性细胞数增加(P<0.05)。结论在TGF-β诱导的心脏成纤维细胞转化中,VMP1蛋白表达降低,通过增加成纤维细胞ROS累积,促进细胞增殖,并参与成纤维细胞活化为肌成纤维细胞,最终促进心脏纤维化。
关键词
液泡膜蛋白1
心脏成纤维细胞
心脏纤维化
心脏重构
Keywords
Vacuole membrane protein
1
Cardiacfibroblasts
Myocardial fibrosis
Cardiac remodeling
分类号
R542.23 [医药卫生—心血管疾病]
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作者
出处
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1
液泡膜蛋白1通过影响活性氧介导心脏成纤维细胞激活与增殖
李雅
冯翠娜
祖玉刚
汪煜
江永正
《中国医药导报》
2024
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