脱氧雪腐镰刀菌烯醇对仔猪海马神经细胞凋亡及线粒体膜电位的影响 被引量：5

1

作者 陈晓芳 张娅菲 +7 位作者 储小燕 姜云晶 朱电锋 范梦雪 冯士彬 李玉 吴金节 王希春 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期526-533,共8页

[目的]本试验旨在研究脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)对仔猪海马神经细胞的凋亡及其信号通路的影响。[方法]体外培养仔猪海马神经细胞至对数生长期,以不同质量浓度的DON(0、125、250、500、1 000和2 000 ng·mL^(-1))进行... [目的]本试验旨在研究脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)对仔猪海马神经细胞的凋亡及其信号通路的影响。[方法]体外培养仔猪海马神经细胞至对数生长期,以不同质量浓度的DON(0、125、250、500、1 000和2 000 ng·mL^(-1))进行处理,采用倒置显微镜和透射电镜观察细胞的形态学变化及线粒体结构,CCK-8试剂盒检测细胞的存活率,流式细胞仪检测线粒体膜电位的变化,ELISA试剂盒检测caspase-3酶活性,荧光定量PCR(RT-qPCR)检测Bcl-2和Bax mRNA的表达水平。[结果]DON可显著抑制仔猪海马神经细胞存活率并诱导细胞发生明显的形态学变化,且具有剂量和时间效应;DON可降低线粒体膜电位,增强caspase-3酶活力,并通过上调Bax mRNA和下调Bcl-2 mRNA的表达,增加Bax/Bcl-2值。[结论]DON可通过引起线粒体功能障碍,激活caspases-3并调节Bcl-2家族基因,从而诱导仔猪海马神经细胞凋亡。 展开更多

关键词 脱氧雪腐镰刀菌烯醇 海马神经细胞 凋亡 线粒体通路 膜电位

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粉防己碱对鼠脑缺血海马神经细胞的保护作用 被引量：5

2

作者 张雄 黄怀钧 +1 位作者 刘煜敏 王伟 《同济医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期53-55,共3页

采用全脑缺血再灌注模型 ,应用 Fura- 2荧光探针检测海马神经细胞游离钙 ([Ca2 + ]i)水平 ,硫代巴比妥显色法检测海马匀浆中过氧化脂质 (L PO)含量 ,同时电镜下观察海马 CA1 区神经细胞改变 ,以评价药物粉防己碱的作用。结果表明 :粉防... 采用全脑缺血再灌注模型 ,应用 Fura- 2荧光探针检测海马神经细胞游离钙 ([Ca2 + ]i)水平 ,硫代巴比妥显色法检测海马匀浆中过氧化脂质 (L PO)含量 ,同时电镜下观察海马 CA1 区神经细胞改变 ,以评价药物粉防己碱的作用。结果表明 :粉防己碱预处理后 ,能够显著抑制全脑缺血 2 0 min再灌注 6 0 min海马组织 [Ca2 + ]i及 L PO含量的升高 ,减轻神经细胞病理损伤。 展开更多

关键词 粉防己碱 脑缺血 游离钙 脂质过氧化 海马神经细胞 保护作用

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维生素C对新生大鼠海马神经细胞生长的影响 被引量：6

3

作者 刘新颖 安志兴 +1 位作者 吴月红 张涌 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2005年第6期31-34,共4页

　取新生大鼠海马组织进行原代体外分散培养,用MTT比色法检测不同浓度维生素C对神经细胞生长的影响,并观察其形态学变化和分化程度。结果表明,2和20nmol/L维生素C组对神经细胞生长的影响与对照组无显著差别(P>0.05);200nmol/L维生素... 　取新生大鼠海马组织进行原代体外分散培养,用MTT比色法检测不同浓度维生素C对神经细胞生长的影响,并观察其形态学变化和分化程度。结果表明,2和20nmol/L维生素C组对神经细胞生长的影响与对照组无显著差别(P>0.05);200nmol/L维生素C组能促进神经细胞的存活,与对照组相比差异显著(P<0.01),进一步观察发现,该处理的细胞突起数目、长度、胞体面积均显著高于对照组(P<0.01);2000nmol/L维生素C组可显著减少细胞的存活数,能引起细胞凋亡。提示200nmol/L维生素C对神经细胞生长发育有一定的促进作用。 展开更多

关键词 维生素C 海马神经细胞 体外培养

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脱氢表雄酮及其衍生物对谷氨酸致海马神经细胞损伤的保护作用 被引量：5

4

作者 杨楠 刘雁勇 左萍萍 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第7期750-753,共4页

目的　观察脱氢表雄酮 (DHEA)及其衍生物 7 羰基 脱氢表雄酮 (7 oxo DHEA)对谷氨酸诱导的海马神经损伤的保护作用。方法　原代培养的SD大鼠海马神经细胞 ,MTT比色法检测细胞存活率 ;激光扫描共聚焦显微镜检测细胞内Ca2 + 及自由基随时... 目的　观察脱氢表雄酮 (DHEA)及其衍生物 7 羰基 脱氢表雄酮 (7 oxo DHEA)对谷氨酸诱导的海马神经损伤的保护作用。方法　原代培养的SD大鼠海马神经细胞 ,MTT比色法检测细胞存活率 ;激光扫描共聚焦显微镜检测细胞内Ca2 + 及自由基随时间变化曲线 ;比色法测定细胞内谷胱甘肽(GSH)水平。结果　DHEA(0 1μmol·L-1)及 7 oxo DHEA(0 1μmol·L-1)预保护后的谷氨酸损伤海马神经细胞胞内Ca2 + 及自由基变化曲线均明显低于无预保护组 ,GSH水平明显高于无预保护组 (P <0 0 1)。结论　DHEA及 7 oxo DHEA对谷氨酸诱导海马神经细胞损伤有保护作用。 展开更多

关键词 DHEA 7-oxo—DHEA 海马神经细胞 谷氨酸 细胞内CA^2+

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脱氧雪腐镰刀菌烯醇暴露对仔猪海马神经细胞神经递质、脂质过氧化及钙稳态的影响 被引量：4

5

作者 王希春 储小燕 +5 位作者 张娅菲 朱雷 范梦雪 冯士彬 李玉 吴金节 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第9期3726-3733,共8页

本试验旨在研究脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)暴露对体外培养的仔猪海马神经细胞中神经递质、脂质过氧化及钙稳态的影响,探讨DON的神经毒性作用。以不同质量浓度的DON(0、125、250、500、1 000和2 000 ng/m L)处理仔猪海马神经细胞24 h后,检... 本试验旨在研究脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)暴露对体外培养的仔猪海马神经细胞中神经递质、脂质过氧化及钙稳态的影响,探讨DON的神经毒性作用。以不同质量浓度的DON(0、125、250、500、1 000和2 000 ng/m L)处理仔猪海马神经细胞24 h后,检测细胞中5-羟色胺(5-HT)、多巴胺(DA)、乙酰胆碱(ACH)、γ-氨基丁酸(GABA)、去甲肾上腺素(NE)含量,总抗氧化能力(T-AOC)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性和一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)含量,钙离子(Ca2+)、钙调蛋白(Ca M)含量以及Ca M m RNA相对表达量。结果表明:与对照组相比,1)当DON浓度为1 000 ng/m L时,5-HT、DA、ACH含量显著升高(P<0.05),GABA含量极显著升高(P<0.01),而NE含量显著降低(P<0.05);当DON浓度为2 000 ng/m L时,5-HT、DA、ACH含量极显著升高(P<0.01)。2)当DON浓度为250 ng/m L时,SOD活性和T-AOC极显著降低(P<0.01);当DON浓度为1 000 ng/m L时,GSH-Px活性显著降低(P<0.05),NO含量极显著降低(P<0.01),而MDA含量极显著升高(P<0.01);当DON浓度为2 000 ng/m L时,CAT活性显著降低(P<0.05),GSH-Px活性极显著降低(P<0.01)。3)当DON浓度为125 ng/m L时,Ca M含量极显著升高(P<0.01);当DON浓度为250 ng/m L及以上时,Ca2+含量和Ca M m RNA相对表达量极显著升高(P<0.01)。综上,DON暴露可改变仔猪海马神经细胞神经递质的分泌及脂质过氧化,并影响钙稳态,对仔猪海马神经细胞具有一定的神经毒性作用。 展开更多

关键词 脱氧雪腐镰刀菌烯醇 仔猪海马神经细胞 神经递质 脂质过氧化 钙稳态

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miRNA-210-3p对缺氧诱导海马神经细胞HT22凋亡的影响 被引量：6

6

作者 丁娜 黄月 田龙 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2019年第2期275-279,共5页

目的:研究miRNA-210-3p对缺氧诱导海马神经细胞凋亡的影响及机制。方法:将海马神经元HT22细胞分成4组,分别为对照组、缺氧组、阴性对照+缺氧组、miRNA-210-3p+缺氧组,采用qRT-PCR方法检测HT22细胞中miRNA-210-3p的表达,Annexin V-FITC/P... 目的:研究miRNA-210-3p对缺氧诱导海马神经细胞凋亡的影响及机制。方法:将海马神经元HT22细胞分成4组,分别为对照组、缺氧组、阴性对照+缺氧组、miRNA-210-3p+缺氧组,采用qRT-PCR方法检测HT22细胞中miRNA-210-3p的表达,Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡情况,Western blot检测细胞中活化型Caspase-3和Caspase-9蛋白表达水平,用硫代巴比妥酸法检测MDA含量,用二硫代二硝基苯甲酸法检测GSH-Px活性,用水溶性四唑盐法检测SOD活性。结果:转染miRNA-210-3p模拟物的HT22细胞经缺氧处理后,细胞中miRNA-210-3p表达水平升高(P <0. 05)。缺氧处理后的HT22细胞凋亡率升高,细胞中活化型Caspase-3和Caspase-9蛋白表达水平升高,GSH-Px、SOD活性降低,MDA含量升高(P <0. 05);上调miRNA-210-3p表达可拮抗缺氧诱导的HT22细胞凋亡和活化型Caspase-3、Caspase-9蛋白表达,提高细胞中GSH-Px、SOD活性,降低细胞中MDA含量(P <0. 05)。结论:上调miRNA-210-3p能够抑制缺氧诱导的海马神经细胞凋亡,其作用机制可能与降低氧化应激有关。 展开更多

关键词 海马神经细胞 miRNA-210-3p 凋亡 氧化应激 HT22细胞

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突触融合蛋白17改善Aβ31-35诱导的小鼠海马神经细胞死亡 被引量：3

7

作者 王宁 周秀雅 +5 位作者 何星鸿 张立飞 李朋佳 师姝 王丽 王晓晖 《陆军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第17期1712-1719,共8页

目的探究突触融合蛋白17(syntaxin17,STX17)在Aβ诱导的小鼠海马神经细胞死亡中的作用。方法基于WGCNA方法选取与阿尔茨海默病显著相关的基因,与自噬基因库和SNARE家族基因取交集筛选关键基因;C57BL/6小鼠海马组织中注射浓度为1 g/L的A... 目的探究突触融合蛋白17(syntaxin17,STX17)在Aβ诱导的小鼠海马神经细胞死亡中的作用。方法基于WGCNA方法选取与阿尔茨海默病显著相关的基因,与自噬基因库和SNARE家族基因取交集筛选关键基因;C57BL/6小鼠海马组织中注射浓度为1 g/L的Aβ31-35和使用终浓度为5μmol/L Aβ31-35处理HT22海马神经细胞,采用Western Blot检测STX17、LC3Ⅱ、P62的蛋白表达情况;CCK-8法检测Aβ31-35处理的HT22海马神经细胞存活率;慢病毒介导HT22海马神经细胞STX17过表达后,Western blot检测Aβ31-35处理后LC3Ⅱ、P62的蛋白表达情况。结果与阿尔茨海默病显著相关的Salmon和Black模块分别与自噬基因库和SNARE亚家族取交集获取关键基因STX17。与对照组比较,经Aβ31-35处理后,HT22细胞细胞存活率[(81.81±11.65)%]明显下降(P<0.05),小鼠海马组织和HT22细胞中STX17蛋白表达均显著降低(P<0.05),LC3Ⅱ和P62蛋白表达均显著升高(P<0.05);慢病毒介导HT22海马神经细胞STX17过表达后,显著逆转Aβ31-35诱导的LC3Ⅱ、P62的蛋白表达上调(P<0.05),并改善Aβ31-35诱导的HT22海马神经细胞存活率下降[(101.91±13.81)%vs(79.21±8.75)%,P<0.05]。结论STX17通过促进自噬来改善Aβ诱导的小鼠海马神经细胞死亡。 展开更多

关键词 STX17 AΒ 小鼠海马神经细胞 细胞死亡 自噬

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内源性内皮衍生超极化因子对缺氧/再给氧致大鼠海马神经细胞凋亡的抑制作用 被引量：2

8

作者 余小蒙 吴剑 +1 位作者 陈志武 郭岩 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2014年第9期1258-1262,共5页

目的研究乙酰胆碱(ACh)诱导内源性内皮衍生超极化因子(EDHF)对缺氧/再给氧大鼠海马神经细胞凋亡的影响。方法取原代培养的大鼠海马神经细胞制备缺氧/再给氧损伤模型;大鼠大脑中动脉(MCA)血管段用一氧化氮合酶抑制剂NG-nitro-L-argininem... 目的研究乙酰胆碱(ACh)诱导内源性内皮衍生超极化因子(EDHF)对缺氧/再给氧大鼠海马神经细胞凋亡的影响。方法取原代培养的大鼠海马神经细胞制备缺氧/再给氧损伤模型;大鼠大脑中动脉(MCA)血管段用一氧化氮合酶抑制剂NG-nitro-L-argininemethyl ester(L-NAME)和前列环素抑制剂indomethacin(Indo)预处理,用ACh诱导血管内皮细胞合成释放内源性EDHF;分别用流式细胞仪法和Hoechst荧光法检测海马神经元凋亡。结果流式细胞仪法和Hoechst荧光法检测均表明假缺氧组海马神经细胞的凋亡率很低,分别为3.1%和2.2%左右,而缺氧/再给氧的模型组细胞凋亡率有显著升高;与缺氧/再给氧模型组相比,内皮完整血管段合用1μmol/L ACh或合用1μmol/L ACh、30μmol/L L-NAME及10μmol/L Indo均可明显抑制缺氧/再给氧所致的细胞凋亡,而单用ACh或内皮完整的血管或ACh合用去内皮的血管段对细胞凋亡无明显影响。结论 ACh诱导大鼠脑血管内皮细胞释放的内源性EDHF对缺氧/再给氧海马神经细胞凋亡有明显的抑制作用。 展开更多

关键词 内皮依赖性超极化因子 海马神经细胞 细胞凋亡 缺氧/再复氧

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中药复方水煎液对体外培养大鼠海马神经细胞缺氧损伤的保护作用 被引量：1

9

作者 许健鹏 徐基民 +3 位作者 赵蕾 杨键 董浩 徐永琦 《中国康复理论与实践》 CSCD 2002年第7期426-427,共2页

目的探讨中药复方水煎液Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ号对大鼠海马神经细胞缺氧损伤有无保护作用。方法 1 6只Wistar大鼠 ,随机分为 4组 ,第 1组每天分两次灌喂生理盐水 4ml,第 2— 4组分别每天分两次灌喂等量中药复方水煎液Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ号 ,3天后取血 ,制... 目的探讨中药复方水煎液Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ号对大鼠海马神经细胞缺氧损伤有无保护作用。方法 1 6只Wistar大鼠 ,随机分为 4组 ,第 1组每天分两次灌喂生理盐水 4ml,第 2— 4组分别每天分两次灌喂等量中药复方水煎液Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ号 ,3天后取血 ,制备血清。另取新生 48小时内的Wistar大鼠 ,在无菌条件下断头取脑 ,分离海马 ,制成细胞悬液体外培养。在培养第 7天将培养皿随机分为 5组 ,第 1组为正常对照组 ,第 2— 5组分别加入灌喂生理盐水及中药复方Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ号的大鼠血清 ,2 4小时后 2— 5组培养皿置缺氧环境 1小时 ,之后再培养 2 4小时 ,检测各培养皿细胞存活率及培养液中乳酸脱氢酶 (LDH)活性和丙二醛 (MDA)含量。结果灌喂复方Ⅰ号组和Ⅱ号组大鼠血清的培养液中LDH的活性和MDA的含量明显低于缺氧对照组 ,细胞存活率高于缺氧对照组 ,均有统计学意义 (P <0 .0 5— 0 .0 0 1 )。结论中药复方Ⅰ号和Ⅱ号对体外培养大鼠海马神经元缺氧损伤具有保护作用。 展开更多

关键词 中药复方水煎液 体外培养 大鼠 海马神经细胞 缺氧损伤 保护作用

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蒙药珍宝丸通过激活SIRT1/NF-κB通路抑制氧糖剥夺/复氧小鼠海马神经细胞炎症和凋亡 被引量：1

10

作者 包春生 乌云苏热古格 高玉峰 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期1003-1009,共7页

目的观察蒙药珍宝丸即额尔敦-乌日勒(EU)对氧糖剥夺/复氧(OGD/R)的HT22小鼠海马神经细胞凋亡的影响,并探究其潜在机制。方法采用三气培养箱和无糖无氧培养基构建OGD/R损伤HT22细胞模型;(10、20、40)μg/mL EU处理OGD/R细胞,筛选最适剂... 目的观察蒙药珍宝丸即额尔敦-乌日勒(EU)对氧糖剥夺/复氧(OGD/R)的HT22小鼠海马神经细胞凋亡的影响,并探究其潜在机制。方法采用三气培养箱和无糖无氧培养基构建OGD/R损伤HT22细胞模型;(10、20、40)μg/mL EU处理OGD/R细胞,筛选最适剂量20μg/mL。沉默信号调节因子1(SIRT1)抑制剂尼克酰胺(NAM)联合EU处理OGD/R损伤细胞设为EU联合NAM组,二甲基亚砜(DMSO)联合EU处理的OGD/R损伤细胞设为EU联合DMSO组;CCK-8法检测细胞活性,ELISA检测乳酸脱氢酶(LDH)漏出率;实时荧光定量PCR检测HT22细胞肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、IL-1β的mRNA表达,流式细胞术检测细胞凋亡;Western blot法检测B细胞淋巴瘤因子2(Bcl2)、Bcl2相关X蛋白(BAX)、SIRT1、核因子κB抑制物α(IκBα)、磷酸化的核因子κB(p-NF-κB)的蛋白表达。结果与对照组相比,OGD/R组HT22细胞活性显著降低,LDH漏出率显著升高,而(20、40)μg/mL EU处理后,细胞活性显著升高,LDH漏出率也明显降低,20μg/mL的EU为最适剂量。OGD/R组细胞TNF-α、IL-6、IL-1β的mRNA表达及凋亡率均显著高于对照组,SIRT1、IκBα、Bcl2蛋白显著低于对照组,p-NF-κB、BAX蛋白显著高于对照组,EU明显抑制OGD/R引起的HT22细胞TNF-α、IL-6、IL-1β分泌和凋亡。结论EU显著减轻OGD/R小鼠的炎性反应和海马神经细胞凋亡,这与激活SIRT1/NF-κB信号通路有关。 展开更多

关键词 蒙药珍宝丸(额尔敦-乌日勒) 海马神经细胞 沉默信号调节因子1(SIRT1) 核因子κB(NF-κB) 炎症 凋亡

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海马神经细胞的无血清原代培养方法 被引量：1

11

作者 尹艳玲 李菁锦 《首都医科大学学报》 CAS 2004年第4期539-542,共4页

关键词 海马神经细胞 无血清培养 原代培养方法 培养的细胞 养血 结果影响 增生 DNA 细胞生长 生理特性

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高渗氯化钠溶液对原代培养海马神经细胞容积的影响 被引量：1

12

作者 袁世荧 曾邦雄 《临床麻醉学杂志》 CAS CSCD 2000年第3期136-138,共3页

目的 :观察海马神经细胞的容积在不同浓度高渗NaCl溶液中 7天内的变化。方法 :原代培养妊娠大白鼠胚胎的海马神经细胞 ,用细胞内水分含量的测定方法测量其暴露于高渗NaCl溶液 15分钟后的细胞容积。结果 :细胞暴露于不同浓度的NaCl溶液 1... 目的 :观察海马神经细胞的容积在不同浓度高渗NaCl溶液中 7天内的变化。方法 :原代培养妊娠大白鼠胚胎的海马神经细胞 ,用细胞内水分含量的测定方法测量其暴露于高渗NaCl溶液 15分钟后的细胞容积。结果 :细胞暴露于不同浓度的NaCl溶液 15分钟 ,细胞容积与同一实验时间的对照值相比无显著性差异 (P >0 0 5 )。 6 0分钟后 ,所有细胞明显肿胀。 1天后至第 7天 ,各组细胞容积基本恢复至对照组细胞容积水平 (P >0 0 5 )。结论 :海马神经细胞在暴露于高渗溶液后具有细胞容积调节功能。尽管当细胞重新置入等渗培养液后肿胀 ,但 1天后直到第 7天 。 展开更多

关键词 海马神经细胞 细胞容积 高渗 氯化钠溶液 脑水肿

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NF-κB在NGF和TNF-α对Aβ_(25～35)海马神经细胞毒的保护作用中的机制研究 被引量：2

13

作者 邓钰蕾 徐玮 +1 位作者 汤荟冬 陈生弟 《现代神经疾病杂志》 2003年第6期346-350,共5页

目的研究神经生长因子(NGF)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)对β-淀粉样蛋白25～35(Aβ25～35)诱导海马神经细胞凋亡的保护作用,探讨核转录因子-κB(nucleartranscriptionfactor,NF-κB)在此过程中的可能机制。方法通过体外SD大鼠海马原代细... 目的研究神经生长因子(NGF)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)对β-淀粉样蛋白25～35(Aβ25～35)诱导海马神经细胞凋亡的保护作用,探讨核转录因子-κB(nucleartranscriptionfactor,NF-κB)在此过程中的可能机制。方法通过体外SD大鼠海马原代细胞培养,采用TUNEL和AnnexinV染色法观察Aβ25-35诱导的细胞凋亡;采用MTT法观察细胞存活率,以及采用WesternBlot法检测NF-κBp65蛋白的表达。结果大鼠海马神经细胞经Aβ25～3510mg/L孵育48h后,TUNEL染色显示神经细胞核多呈绿色荧光着色,提示细胞凋亡,而对照组未见荧光着色;AnnexinV染色海马神经细胞膜亦多呈绿色荧光着色,但细胞核未着色,对照组则无荧光着色。MTT检测显示,NGF组和TNF-α组神经细胞存活率均较Aβ组明显增加(P<0.05);经NF-κB抑制剂SN50预处理后,NGF组和TNF-α组神经细胞存活率与Aβ组相比,差异无显著性意义(P>0.05)。WesternBlot法检测显示,NGF组和TNF-α组的海马神经细胞NF-κBp65蛋白表达明显增加。当NGF和TNF-α的浓度为10μg/L时,均对Aβ25～35的海马神经细胞毒具有保护作用。经NGF和TNF-α处理后,NF-κB活性增加;当给予18mol/LSN50抑制NF-κB活性后,NGF和TNF-α对海马神经细胞的保护作用减弱(P>0.05)。结论体外原代海马神经细胞培养结果表明。 展开更多

关键词 神经生长因子 肿瘤坏死因子-α Β-淀粉样蛋白25-35 海马神经细胞 细胞凋亡 核转录因子-ΚB

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大鼠海马神经细胞原代培养及塑料孔板原位鉴定

14

作者 贾兰玲 陈相 +3 位作者 庹航行 贾心善 陈颖 李继光 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期843-845,共3页

目的原代培养大鼠海马神经细胞,探讨简单、有效的塑料孔板原位鉴定方法。方法采用Hiroaki等的方法并做了改良,在塑料孔板里进行胎鼠海马神经细胞原代培养,7d后分别用传统和改良的甲苯胺蓝(TB)染色法、改良的神经细胞特异性烯醇化酶(NSE... 目的原代培养大鼠海马神经细胞,探讨简单、有效的塑料孔板原位鉴定方法。方法采用Hiroaki等的方法并做了改良,在塑料孔板里进行胎鼠海马神经细胞原代培养,7d后分别用传统和改良的甲苯胺蓝(TB)染色法、改良的神经细胞特异性烯醇化酶(NSE)染色法对海马神经细胞进行鉴定。结果无血清细胞培养法神经细胞结构特征明显,能形成明显的神经网络结构。传统的TB染色法染色单一,均为淡蓝色;改良的TB染色法红蓝匹配,对比度好;改良的免疫组化NSE染色法胞质阳性。结论无血清培养法是海马神经细胞培养的理想方法,塑料孔板细胞培养原位染色简单易行,对细胞及分子水平研究有重要意义。 展开更多

关键词 塑料孔板 海马神经细胞 原代培养 甲苯胺蓝 神经细胞特异性烯醇化酶

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苯环壬酯对N-甲基-D-天冬氨酸诱导的原代培养的大鼠海马神经细胞损伤的保护作用

15

作者 王永安 周文霞 +1 位作者 刘艳芹 阮金秀 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期315-315,共1页

目的　观察苯环壬酯对N 甲基 D 天冬氨酸(NMDA)诱导的原代培养大鼠海马神经细胞损伤的保护作用。方法　建立NMDA诱导的原代培养大鼠海马神经细胞损伤模型 ,采用乳酸脱氢酶 (LDH )法及噻唑蓝 (MTT)比色法 ,以特异性NMDA受体拮抗剂MK 80 ... 目的　观察苯环壬酯对N 甲基 D 天冬氨酸(NMDA)诱导的原代培养大鼠海马神经细胞损伤的保护作用。方法　建立NMDA诱导的原代培养大鼠海马神经细胞损伤模型 ,采用乳酸脱氢酶 (LDH )法及噻唑蓝 (MTT)比色法 ,以特异性NMDA受体拮抗剂MK 80 1作为阳性对照药 ,观察抗胆碱药苯环壬酯、东莨菪碱对NMDA诱导的原代培养大鼠海马神经细胞损伤的保护作用。结果　NMDA (4 0 0μmol·L- 1)可明显降低海马神经细胞的存活率 ,表现为细胞LDH释放量明显增高 ,MTT比色后的吸光值明显降低。苯环壬酯 (1,2 .5 ,10 ,2 0和 5 0 μmol·L- 1)对NMDA所致的LDH升高有明显对抗作用 ,MTT比色后的吸光值明显增高 (P <0 .0 1) ,其作用类似于MK 80 1(1,10 μmol·L- 1) ;而另外一种抗胆碱药东莨菪碱 (1,10 ,10 0 0 μmol·L- 1)对损伤细胞的LDH释放及MTT比色后的吸光值无明显影响。结论　苯环壬酯对NMDA诱导的大鼠海马神经细胞损伤有明显保护作用 。 展开更多

关键词 N-甲基-D-天冬氨酸 海马神经细胞损伤 苯环壬酯 神经保护

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酸性肽对硝普钠诱导体外培养SD大鼠海马神经细胞凋亡的保护作用

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作者 毛红丽 安玉会 +1 位作者 张善锋 岳保红 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2008年第4期709-712,共4页

目的:观察不同剂量酸性肽(AP)对NO供体硝普钠(SNP)诱导的大鼠海马神经细胞凋亡的影响。方法:分离培养新生SD大鼠海马神经细胞,用终浓度为50μmol/L的SNP诱导海马神经细胞凋亡。实验共设空白对照组、SNP处理组和AP实验组,AP实验组分别加... 目的:观察不同剂量酸性肽(AP)对NO供体硝普钠(SNP)诱导的大鼠海马神经细胞凋亡的影响。方法:分离培养新生SD大鼠海马神经细胞,用终浓度为50μmol/L的SNP诱导海马神经细胞凋亡。实验共设空白对照组、SNP处理组和AP实验组,AP实验组分别加入浓度为0.0375、0.0750、0.1500g/L的AP与SNP共培养24h后,通过细胞形态学观察、MTT测定、吖啶橙荧光染色及DNA琼脂糖凝胶电泳等方法检测细胞凋亡情况及细胞存活率。结果:SNP处理组海马神经细胞存活率降低至58.9%±4.5%,与空白对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。3个AP实验组海马神经细胞存活率均高于SNP处理组(P<0.05或0.01)。SNP组凋亡细胞的形态学改变及细胞核固缩、核碎裂现象明显,DNA琼脂糖凝胶电泳图谱具有DNAladder;各AP实验组凋亡细胞形态学改变不明显,DNA琼脂糖凝胶电泳图谱没有DNAladder出现。结论:AP对SNP诱导的海马神经细胞凋亡具有保护作用。 展开更多

关键词 酸性肽 硝普钠 凋亡 海马神经细胞 大鼠

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脂多糖激活所致大鼠抑郁样行为及对海马神经细胞钾电流变化的影响 被引量：1

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作者 池少鹏 戚智 +2 位作者 姬广聚 邝雪莹 林文娟 《心理学报》 CSSCI CSCD 北大核心 2012年第4期459-468,共10页

采用细胞因子刺激剂脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)为免疫激活手段,研究LPS诱导的免疫激活产生的抑郁样行为及对海马神经细胞电压依赖钾电流变化的影响。应用膜片钳技术对海马神经细胞钾电流进行全细胞记录,比较抑郁样行为大鼠与正常... 采用细胞因子刺激剂脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)为免疫激活手段,研究LPS诱导的免疫激活产生的抑郁样行为及对海马神经细胞电压依赖钾电流变化的影响。应用膜片钳技术对海马神经细胞钾电流进行全细胞记录,比较抑郁样行为大鼠与正常大鼠钾离子通道电流密度和激活特性的变化。结果发现,与生理盐水对照组相比,一次LPS注射后2hr,实验组动物产生抑郁样行为,同时急性观察的海马神经细胞的钾离子通道的电流密度呈现显著升高(p<0.01);而一次LPS注射后24hr,动物的抑郁样行为消失,且急性观察的海马神经细胞的钾离子通道与对照组相比较,其电流密度和激活曲线没有显著性变化。结论:LPS诱导的抑郁样行为,与LPS诱导的海马神经细胞电压依赖钾电流的上调在时程上同步,提示钾离子通道可能参与免疫激活所致的抑郁样行为。 展开更多

关键词 脂多糖 抑郁样行为 海马神经细胞 电压依赖钾通道

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脱氧雪腐镰刀菌烯醇诱导仔猪海马神经细胞凋亡的线粒体通路研究 被引量：1

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作者 朱雷 曹利 +5 位作者 申茂玉 陈晓芳 李玉 冯士彬 吴金节 王希春 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期4675-4683,共9页

为探讨脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)对神经细胞毒性的作用机理,本试验选用仔猪海马神经细胞为研究对象,体外培养至对数生长期后,分别用含0(空白)、250、500、1 000 ng/mL DON和1 000 ng/mL DON+20μmol/L半胱天冬酶(Caspase)-8抑制剂(FMK)... 为探讨脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)对神经细胞毒性的作用机理,本试验选用仔猪海马神经细胞为研究对象,体外培养至对数生长期后,分别用含0(空白)、250、500、1 000 ng/mL DON和1 000 ng/mL DON+20μmol/L半胱天冬酶(Caspase)-8抑制剂(FMK)的培养液进行染毒培养。培养24 h后,采用流式细胞术检测细胞凋亡率、活性氧(ROS)水平以及线粒体膜电位变化;采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测细胞凋亡线粒体途径中主要凋亡基因B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、BH3相互作用域死亡激动剂(Bid)、Caspase-2、Caspase-3和Caspase-9 mRNA的表达量。结果显示:1)与空白组相比,250、500、1 000 ng/mL DON组的细胞凋亡率显著或极显著升高(P<0.05或P<0.01);与1 000 ng/mL DON组相比,1 000 ng/mL DON+FMK组的细胞凋亡率极显著降低(P<0.01)。2)与空白组相比,250、500、1 000 ng/mL DON组的ROS水平极显著升高(P<0.01);与1 000 ng/mL DON组相比,1 000 ng/mL DON+FMK组的ROS水平极显著降低(P<0.01)。3)与空白组相比,250、500、1 000 ng/mL DON组的线粒体膜电位极显著降低(P<0.01);与1 000 ng/mL DON组相比,1 000 ng/mL DON+FMK组的线粒体膜电位极显著升高(P<0.01)。4)与空白组相比,500、1 000 ng/mL DON组的Bax、Bid、Caspase-2、Caspase-9和Caspase-3 mRNA表达量显著或极显著升高(P<0.05或P<0.01),而Bcl-2 mRNA表达量极显著降低(P<0.01);与1 000 ng/mL DON组相比,1 000 ng/mL DON+FMK组的Bax、Bid、Caspase-2、Caspase-9和Caspase-3 mRNA表达量极显著降低(P<0.01),而Bcl-2 mRNA表达量极显著升高(P<0.01)。结果表明,DON可通过线粒体通路诱导仔猪海马神经细胞凋亡。 展开更多

关键词 脱氧雪腐镰刀菌烯醇 仔猪海马神经细胞 细胞凋亡 线粒体通路

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自噬对DON诱导仔猪海马神经细胞损伤的影响 被引量：1

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作者 储小燕 张娅菲 +4 位作者 朱雷 李玉 冯士彬 吴金节 王希春 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期160-167,共8页

[目的]本试验旨在研究自噬对脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)诱导仔猪海马神经细胞损伤的影响。[方法]以不同质量浓度DON(0,125,250,500,1 000和2 000 ng·mL^(-1))处理对数生长期仔猪海马神经细胞24 h后,采用倒置显微镜、透射电镜观察DON... [目的]本试验旨在研究自噬对脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)诱导仔猪海马神经细胞损伤的影响。[方法]以不同质量浓度DON(0,125,250,500,1 000和2 000 ng·mL^(-1))处理对数生长期仔猪海马神经细胞24 h后,采用倒置显微镜、透射电镜观察DON对仔猪海马神经细胞形态和超微结构的影响;采用p EGFP-LC3质粒瞬时转染细胞,荧光显微镜检测绿色荧光蛋白的分布情况;采用Western blot检测DON对仔猪海马神经细胞自噬标志性蛋白LC3的表达;通过添加自噬激活剂雷帕霉素(RAP)和自噬抑制剂氯喹(CQ)来升高和降低细胞的自噬水平,CCK-8法检测细胞的存活率。[结果]不同质量浓度的DON均可诱导细胞自噬,自噬水平随着DON浓度的增加先上升后下降,在1 000 ng·mL^(-1)时达到峰值。与对照组相比,DON可显著抑制细胞存活率并诱导细胞发生明显的形态学变化,并呈剂量依赖性;随着DON浓度的升高,细胞LC3-Ⅱ含量先上升后下降,1 000 ng·mL^(-1)时,LC3-Ⅱ含量最高,差异显著或极显著(P<0.05或P<0.01)。与DON处理组相比,自噬水平的上升显著提高细胞活性(P<0.05),而自噬水平的下降显著降低细胞活性(P<0.05)。[结论]DON可以引起仔猪海马神经细胞自噬水平的上升,激活的自噬对DON导致的细胞损伤具有一定的保护作用。 展开更多

关键词 自噬 脱氧雪腐镰刀菌烯醇 海马神经细胞 细胞存活率

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黄柏提取物对Aβ_(1-42)诱导的海马神经细胞的影响 被引量：4

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作者 谭峰浪 任宏丽 王宏飞 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2022年第11期1213-1220,共8页

目的:探讨黄柏提取物对Aβ_(1-42)诱导的海马神经细胞的影响及分子机制。方法:分离培养海马神经细胞,将其分为对照组、模型组、模型+黄柏低、中、高浓度组、模型+si-NC组、模型+si-X失活的特异性转录本(XIST)组、模型+黄柏高浓度+pcDNA... 目的:探讨黄柏提取物对Aβ_(1-42)诱导的海马神经细胞的影响及分子机制。方法:分离培养海马神经细胞,将其分为对照组、模型组、模型+黄柏低、中、高浓度组、模型+si-NC组、模型+si-X失活的特异性转录本(XIST)组、模型+黄柏高浓度+pcDNA组、模型+黄柏高浓度+pcDNA-XIST组。MTT检测细胞存活率;流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡;Western blot法检测Cleaved-caspase3蛋白表达;RT-qPCR检测XIST表达水平。结果:模型组细胞存活率、S期细胞比例降低,G_(0)-G _(1)期细胞比例、XIST表达水平、凋亡率、Cleaved-caspase3表达水平升高(P<0.05)。不同浓度黄柏提取物处理及抑制XIST表达后,细胞存活率、S期细胞比例升高,G_(0)-G _(1)期细胞比例、XIST表达水平、凋亡率、Cleaved-caspase3表达水平降低(P<0.05)。过表达XIST减弱了黄柏提取物对Aβ_(1-42)诱导的海马神经细胞增殖、凋亡的影响。结论:黄柏提取物抑制Aβ_(1-42)诱导的海马神经细胞凋亡,可能与下调XIST相关。 展开更多

关键词 黄柏提取物 X失活的特异性转录本(XIST) 阿尔茨海默病 海马神经细胞 凋亡

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