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PMA+Ion和PHA用于流式细胞术检测Th1/Th2细胞的结果比较 被引量:5
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作者 焦志军 王文红 辛利军 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期558-559,共2页
关键词 TH1/TH2细胞 流式细胞检测 结果比较 细胞细胞因子 PHA acetate 细胞活化 分泌细胞因子 细胞因子分泌 细胞表面分子
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细针穿刺流式细胞术检测在非霍奇金淋巴瘤诊断中的应用 被引量:1
2
作者 谢彦 勇威本 +4 位作者 河福金 朱军 张运涛 郑文 王小沛 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2005年第10期592-593,共2页
关键词 非霍奇金淋巴瘤 细针穿刺 流式细胞检测 诊断
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小鼠供体嵌合率定量检测方法的建立及评价 被引量:3
3
作者 左洪莉 王丹红 艾辉胜 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2010年第4期1002-1006,共5页
本研究探讨建立小鼠供体嵌合率(DC)定量检测方法的有效性。模拟小鼠单倍体相合造血干细胞移植模型,以雄性C57BL/6为供鼠,雌性CB6F1小鼠为受鼠,受鼠随机分成两组,分别给予2Gy与6Gy的60Coγ照射,随后接种供鼠骨髓(BMCs)及脾细胞悬液(SPMN... 本研究探讨建立小鼠供体嵌合率(DC)定量检测方法的有效性。模拟小鼠单倍体相合造血干细胞移植模型,以雄性C57BL/6为供鼠,雌性CB6F1小鼠为受鼠,受鼠随机分成两组,分别给予2Gy与6Gy的60Coγ照射,随后接种供鼠骨髓(BMCs)及脾细胞悬液(SPMNCs)。移植后利用流式细胞术及real-time PCR技术定量检测DC。结果表明:两种方法检测移植后DC时各有优缺点。6Gy组小鼠在移植后DC数>90%、且此状况稳定存在3月以上,采用FCM法检测效果较好;2Gy组小鼠移植后DC数<10%,随后以不同水平的微嵌合体存在直至消失,则宜选用realtime-PCR法检测。结论:流式细胞术检测供体大嵌合准确性高,但当DC数<1%时灵敏度差;realtime-PCR法的灵敏度可检测出微嵌合体,但在检测大嵌合体时精确性差。两种方法互补运用则灵敏度高,精确性强,因此可作为小鼠移植与过继免疫治疗模型中定量检测DC的最佳方法。 展开更多
关键词 供体嵌合率 单倍体相合造血干细胞移植 实时荧光定量PCR 流式细胞检测术
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舒林酸对结肠癌细胞SW480FasL蛋白表达及诱导淋巴细胞凋亡的影响 被引量:4
4
作者 吴志刚 马庆久 +5 位作者 何显力 赖大年 李金茂 武永忠 包国强 吴涛 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期374-376,共3页
目的在体外通过细胞培养,探讨舒林酸对结、直肠癌发生、发展的化学预防机制。方法应用Western blot法检测舒林酸作用前后SW480细胞FasL蛋白表达的变化;应用流式细胞术检测舒林酸作用前后SW480细胞诱导淋巴细胞凋亡率的变化。结果舒林酸... 目的在体外通过细胞培养,探讨舒林酸对结、直肠癌发生、发展的化学预防机制。方法应用Western blot法检测舒林酸作用前后SW480细胞FasL蛋白表达的变化;应用流式细胞术检测舒林酸作用前后SW480细胞诱导淋巴细胞凋亡率的变化。结果舒林酸处理后较处理前SW480细胞FasL蛋白表达明显降低,而且FasL蛋白表达随舒林酸作用浓度增加显著降低;随舒林酸作用浓度升高,SW480细胞诱导淋巴细胞凋亡率明显降低,不同浓度组比较均有显著性差异(P<0.01)。结论舒林酸降低结肠癌SW480细胞FasL蛋白表达,使SW480细胞诱导Jurkat细胞凋亡率降低,可能是其对结、直肠癌发生、发展的化学预防机制。 展开更多
关键词 舒林酸 培养的肿瘤细胞 JURKAT细胞 FAS配体 凋亡 淋巴细胞凋亡率 蛋白表达 结肠癌细胞 SW480细胞 流式细胞检测
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热疗促进HSP70表达对免疫效应细胞杀伤肿瘤的影响 被引量:16
5
作者 石永进 虞积仁 +2 位作者 岑溪南 朱强 任汉云 《北京大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期175-178,共4页
目的: 探讨热疗通过促进乳腺癌药物敏感细胞株与多药耐药细胞株表达热休克蛋白 (HSP)70,提高免疫效应细胞对靶细胞的杀伤活性。为开展基于热疗的细胞免疫治疗提供实验依据。方法: 采用IFNγ、CD3单抗、IL 1和IL 2等细胞因子诱导并扩增... 目的: 探讨热疗通过促进乳腺癌药物敏感细胞株与多药耐药细胞株表达热休克蛋白 (HSP)70,提高免疫效应细胞对靶细胞的杀伤活性。为开展基于热疗的细胞免疫治疗提供实验依据。方法: 采用IFNγ、CD3单抗、IL 1和IL 2等细胞因子诱导并扩增免疫效应细胞。分别给予乳腺癌药物敏感株MCF7和耐受株MCF7 /ADR非致死温度热冲击 42℃ 1h,继续培养 4h, 24h, 48h后收获细胞,用流式细胞术检测靶细胞上HSP70的表达。用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定靶细胞增殖活性以及免疫效应细胞对靶细胞的杀伤活性。结果: HSP70在两种靶细胞上的表达有差异,加热前MCF7 /ADR细胞HSP70表达明显高于MCF7,加热后 4h,HSP70在MCF7 /ADR表达提高了 6倍,在MCF7表达提高了 22倍,超过了耐药株。药物敏感株MCF7增殖的热抑制率低于耐药株MCF7 /ADR。热冲击前免疫效应细胞对MCF7细胞的杀伤活性低于MCF7 /ADR细胞。热冲击后免疫效应细胞对MCF7的杀伤活性提高了 86. 23%,超过了对MCF7 /ADR的杀伤活性 (提高了 30. 32% )。结论: 热疗明显提高HSP70在乳腺癌药物敏感与耐受细胞系上的表达,增加了免疫效应细胞对这两种靶细胞的杀伤活性。HSP70在乳腺癌药物敏感与耐受细胞系上的差异性表达对免疫效应细胞的杀伤活性有影响。 展开更多
关键词 免疫效应细胞 HSP70表达 MCF7/ADR细胞 热疗 杀伤肿瘤 多药耐药细胞 流式细胞检测 四甲基偶氮唑蓝 杀伤活性 药物敏感 细胞免疫治疗 细胞因子诱导 细胞增殖活性 MCF7增殖 MCF7细胞 热休克蛋白 细胞 CD3单抗 差异性表达
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合成紫花茄皂苷诱导人肝癌BEL-7402细胞凋亡 被引量:6
6
作者 马朋 顾国锋 +3 位作者 陈希 赵翔 杜宇国 张页 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2005年第9期481-485,共5页
目的:探讨合成紫花茄皂苷对BEL-7402细胞的增殖抑制及凋亡诱导作用。方法:采用酸性磷酸酶(APA)法、吖啶橙荧光染色法和流式细胞术检测合成紫花茄皂苷对人肝癌BEL-7402细胞增殖的影响以及诱导细胞凋亡的作用。利用蛋白印迹法检测药物作... 目的:探讨合成紫花茄皂苷对BEL-7402细胞的增殖抑制及凋亡诱导作用。方法:采用酸性磷酸酶(APA)法、吖啶橙荧光染色法和流式细胞术检测合成紫花茄皂苷对人肝癌BEL-7402细胞增殖的影响以及诱导细胞凋亡的作用。利用蛋白印迹法检测药物作用后凋亡相关蛋白PARP的表达水平。结果:合成紫花茄皂苷对人肝癌BEL-7402细胞有明显的增殖抑制作用,其72h的IC50为4.2μg/ml。荧光显微镜下细胞呈现典型的凋亡形态。流式细胞术分析发现,细胞经皂苷作用6h、12h和24h后,凋亡率显著增加。蛋白印迹检测结果显示,合成紫花茄皂苷作用后肿瘤细胞内的PARP蛋白被剪切,Bcl-2蛋白的表达量下调。结论:合成紫花茄皂苷对人肝癌细胞的增殖抑制呈浓度相关性,具有诱导肿瘤细胞凋亡的作用,且这一作用可能与Bcl-2表达下调有关。 展开更多
关键词 7402细胞凋亡 皂苷 合成 BEL-7402细胞 流式细胞检测 Bcl-2蛋白 凋亡诱导作用 凋亡相关蛋白 诱导细胞凋亡 增殖抑制作用 肿瘤细胞凋亡 酸性磷酸酶 蛋白印迹法 荧光染色法 人肝癌细胞 PARP 药物作用 细胞增殖 IC50 显微镜下
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甲异靛联合imatinib对CML K562细胞的促凋亡作用 被引量:4
7
作者 吴英理 印彤 +2 位作者 孙云 邬维礼 孙关林 《上海第二医科大学学报》 CSCD 北大核心 2005年第5期433-436,共4页
目的研究甲异靛联合imatinib促进K562细胞凋亡的作用。方法K562细胞经imatinib或/和甲异靛处理48h后,采用流式细胞术检测细胞凋亡相关指标(线粒体跨膜电位和AnnexinV/PI)的改变,ELISA方法检测caspase3活性改变,Westernblot检测凋亡相关... 目的研究甲异靛联合imatinib促进K562细胞凋亡的作用。方法K562细胞经imatinib或/和甲异靛处理48h后,采用流式细胞术检测细胞凋亡相关指标(线粒体跨膜电位和AnnexinV/PI)的改变,ELISA方法检测caspase3活性改变,Westernblot检测凋亡相关蛋白(cytC,cIAP1,procaspase3和PARP)的改变。结果与单用组相比,20μmol/L甲异靛与0.3μmol/Limatinib联合应用后,线粒体跨膜电位下降细胞比例明显升高,cytC释放入胞浆,caspase3酶原形式procaspase3减少,caspase3活性升高,其底物PARP被降解,AnnexinV水平升高。结论甲异靛与imatinib合用可协同促进K562细胞凋亡。 展开更多
关键词 IMATINIB 甲异靛 促凋亡作用 K562细胞凋亡 caspase Annexin CML 线粒体跨膜电位 流式细胞检测 ELISA方法 Western mol/L 凋亡相关蛋白 BLOT检测 C-IAP1 跨膜电位下降 活性改变 PARP 关指标 应用后 升高 cyt
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自然感染兔脑炎原虫獭兔肾上皮细胞凋亡的研究 被引量:4
8
作者 张柳平 潘耀谦 段艳 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期365-369,共5页
运用透射电镜术、原位末端标记技术(TUNEL)和流式细胞术对11只自然感染兔脑炎原虫獭兔的肾脏进行了细胞凋亡研究,5只健康长耳白兔用作对照。结果表明,凋亡细胞多见于远曲小管和集合管的上皮细胞。用透射电镜观察,初期的凋亡细胞,其细胞... 运用透射电镜术、原位末端标记技术(TUNEL)和流式细胞术对11只自然感染兔脑炎原虫獭兔的肾脏进行了细胞凋亡研究,5只健康长耳白兔用作对照。结果表明,凋亡细胞多见于远曲小管和集合管的上皮细胞。用透射电镜观察,初期的凋亡细胞,其细胞核的染色质高度凝集,边缘化,粗面内质网增多、扩张呈泡状;后期的凋亡细胞,其细胞质浓缩,细胞膜起泡,细胞核分裂成块状,最后形成膜包裹的凋亡小体。TUNEL法检测,病变轻微的细胞,胞核微缩,胞膜增厚;病变严重的细胞,其胞核体积明显缩小,胞膜皱缩,最后形成膜包裹的凋亡小体。流式细胞术检测,病兔可呈现明显的亚“G1”峰,凋亡细胞百分比与对照兔相比差异极显著(P=0101),且病兔肾细胞的周期也有所改变。结果表明,3种方法检测的病兔肾上皮细胞凋亡数均高于对照兔。 展开更多
关键词 细胞凋亡 自然感染 兔脑炎 獭兔 原虫 流式细胞检测 凋亡细胞 透射电镜观察 TUNEL法 凋亡小体 粗面内质网 标记技 上皮细胞 对照 集合管 染色质 细胞 边缘化 细胞 细胞 核分裂 病兔 百分比 细胞 包裹 成膜
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糖尿病大鼠皮肤组织表皮细胞增殖相关事件的研究 被引量:9
9
作者 谢挺 陆树良 《上海第二医科大学学报》 CSCD 北大核心 2005年第6期541-544,共4页
目的研究糖尿病大鼠皮肤组织中表皮细胞的增殖改变及其可能机制。方法12只SPF级SD大鼠随机分为糖尿病组(6只)和正常对照组(6只),糖尿病大鼠以STZ诱导。成模后8周,二组同时采集背部皮肤,观察表皮的组织学特征;流式细胞术检测表皮细胞的... 目的研究糖尿病大鼠皮肤组织中表皮细胞的增殖改变及其可能机制。方法12只SPF级SD大鼠随机分为糖尿病组(6只)和正常对照组(6只),糖尿病大鼠以STZ诱导。成模后8周,二组同时采集背部皮肤,观察表皮的组织学特征;流式细胞术检测表皮细胞的细胞周期;Westernblot检测细胞增殖调节因子cyclinD1、cyclinB1和cdk4的表达水平,并测定表皮细胞丝裂期促进因子(MPF)的组蛋白激酶活性。结果与正常组相比,糖尿病大鼠表皮结构欠清晰,部分表皮缺乏复层排列,表皮细胞数量明显减少,表皮层厚度明显变薄;S期和G2/M期表皮细胞百分比均显著降低(P<0.01,P<0.05);糖尿病组cdk4的表达水平显著低于正常组(P<0.05),两组间cyclinD1、cyclinB1表达无显著差异(P>0.05);糖尿病组表皮细胞MPF活性显著降低(P<0.01)。结论糖尿病大鼠皮肤表皮细胞处于明显增殖抑制状态,这种增殖抑制可能与cdk4的低表达和MPF活性下降有关。 展开更多
关键词 糖尿病大鼠 皮肤组织 表皮细胞增殖 相关事件 cyclin 流式细胞检测 Western BLOT检测 cdk4 蛋白激酶活性 皮肤表皮细胞 正常对照组 STZ诱导 组织学特征 可能机制 SD大鼠 SPF级 细胞周期 调节因子 促进因子 表皮结构 细胞数量
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慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞TLR2 mRNA表达与IFN-γ及IL-4表达相关性分析
10
作者 王前明 宋秀宇 +1 位作者 黄如欣 郑港森 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第11期1042-1042,1045,共2页
关键词 外周血单个核细胞 慢性乙型肝炎患者 MRNA表达 IFN-Γ TLR2 IL-4 流式细胞检测 receptor
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maFGF及aFGF对培养大鼠心肌缺氧/复氧后细胞凋亡的影响
11
作者 李彦 李菁 李校堃 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第8期1653-1653,共1页
目的:观察并比较maFGF及aFGF对心肌缺氧/复氧后细胞凋亡的影响. 方法:利用原代培养的SD大鼠乳鼠心肌细胞建立体外心肌缺氧/复氧模型,实验分为12组:(1)对照组;(2)缺氧/复氧(A/R)组;(3)0.5μgL aFGF+A/R组;(4)5 μg/L aFGF+A/R组;(5)50 μ... 目的:观察并比较maFGF及aFGF对心肌缺氧/复氧后细胞凋亡的影响. 方法:利用原代培养的SD大鼠乳鼠心肌细胞建立体外心肌缺氧/复氧模型,实验分为12组:(1)对照组;(2)缺氧/复氧(A/R)组;(3)0.5μgL aFGF+A/R组;(4)5 μg/L aFGF+A/R组;(5)50 μg/L aFGF+A/R组;(6)500 μg/L aFGF+A/R组;(7)5 mg/L aFGF+A/R组;(8)0.5μg/L maFGF+A/R组;(9)5 μg/L maFGF+A/R组;(10)50 μg/L maFGF+A/R组;(11)500 μg/LmaFGF+A/R组;(12)5 mg/L maFGF+A/R组.利用流式细胞术检测心肌细胞凋亡率,比较maFGF及aFGF对缺氧/复氧后心肌细胞凋亡的影响. 展开更多
关键词 心肌缺氧/复氧 细胞凋亡率 AFGF SD大鼠 原代培养 心肌细胞凋亡 流式细胞检测 对照组 5μg
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γ射线照射对前列腺癌细胞金属基质蛋白酶和促红细胞生成素受体表达的影响
12
作者 张晓毅 洪宝发 +3 位作者 周立权 周建光 邹跃 邹练 《实用医学杂志》 CAS 2005年第7期665-667,共3页
目的:前列腺癌PC-3细胞接受不同剂量γ射线照射后,观察其金属基质蛋白酶-2(M M P2)、金属基质蛋白酶-9(M M P9)及促红细胞生成素受体蛋白(E PO-R)表达的变化,阐明γ射线对前列腺癌PC-3细胞生物学行为的影响。方法:分别用1G y、3G y、5G ... 目的:前列腺癌PC-3细胞接受不同剂量γ射线照射后,观察其金属基质蛋白酶-2(M M P2)、金属基质蛋白酶-9(M M P9)及促红细胞生成素受体蛋白(E PO-R)表达的变化,阐明γ射线对前列腺癌PC-3细胞生物学行为的影响。方法:分别用1G y、3G y、5G y剂量的60C oγ射线,照射体外培养的PC-3细胞系。用流式细胞术检测M M P2、M M P9及E PO-R的含量;并测定细胞生长曲线及克隆形成率。结果:(1)1G y剂量即可明显抑制细胞的生长,并且细胞克隆形成率随着剂量的增加而降低;(2)E PO-R表达在1G y和3G y组高于对照组,5G y组低于对照组;(3)M M P2总体上出现降低趋势;M M P9表达在1~5G y组均高于对照组。结论:虽然60C oγ射线照射可明显抑制前列腺癌PC-3细胞的生长,但是M M P9及E PO-R表达却增高,提示亚致死剂量的γ射线照射可使存活细胞的浸润性增高。 展开更多
关键词 金属基质蛋白酶 促红细胞生成素 前列腺癌细胞 受体表达 ^60COΓ射线照射 PC-3细胞 细胞生物学行为 流式细胞检测 细胞克隆形成率 MMP9 细胞生长曲线 亚致死剂量 对照组 不同剂量 受体蛋白 体外培养 MMP2 抑制细胞 存活细胞
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鱼藤素对U937细胞细胞周期及核孔蛋白Nup98和Nup88的调控作用
13
作者 陈燕 刘红利 崔国惠 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期313-313,共1页
为探讨鱼藤素对人类白血病细胞株U937细胞体外抗癌作用的分子机制,采用MTT法检测细胞增殖活性,流式细胞术检测细胞周期分布,激光共聚焦显微镜检测Nup98和Nup88蛋白表达变化,免疫电镜和流式细胞术观测鱼藤素对Nup98和Nup88的调控,We... 为探讨鱼藤素对人类白血病细胞株U937细胞体外抗癌作用的分子机制,采用MTT法检测细胞增殖活性,流式细胞术检测细胞周期分布,激光共聚焦显微镜检测Nup98和Nup88蛋白表达变化,免疫电镜和流式细胞术观测鱼藤素对Nup98和Nup88的调控,Western blot检测鱼藤素对U937细胞Nup98和Nup88蛋白表达的影响。 展开更多
关键词 U937细胞 细胞周期分布 调控作用 核孔蛋白 鱼藤素 流式细胞检测 体外抗癌作用 白血病细胞
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保护性抗体存在时细胞免疫反应对雪貂感染1918年流感的保护作用
14
作者 占玲俊 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2011年第4期357-357,共1页
研究感染人的高致病性流感的保护性免疫反应,对研发下一代的流感疫苗有重要的提示作用。鉴于此,采用不同的免疫方式对雪貂进行免疫,分别有:一针免疫传统疫苗;两针免疫表达HA的DNA疫苗,或者先以前述的DNA疫苗初免,然后注射表达HA的腺... 研究感染人的高致病性流感的保护性免疫反应,对研发下一代的流感疫苗有重要的提示作用。鉴于此,采用不同的免疫方式对雪貂进行免疫,分别有:一针免疫传统疫苗;两针免疫表达HA的DNA疫苗,或者先以前述的DNA疫苗初免,然后注射表达HA的腺病毒载体加强免疫。免疫后除了检测抗体外,还利用雪貂特异性的IFN—ELISpot方法和流式细胞术检测细胞免疫反应。 展开更多
关键词 细胞免疫反应 保护性抗体 流感疫苗 保护作用 感染 流式细胞检测 DNA疫苗
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急性单核白血病细胞系THP-1细胞MLL-AF9融合基因沉默对p27表达的影响
15
作者 李蕾 刘凌波 王利 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期794-794,共1页
关键词 急性单核细胞白血病细胞 THP-1细胞 P27表达 基因沉默 流式细胞检测 RT-PCR法 脂质体转染 mRNA表达
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γ干扰素体外诱导骨髓间充质干细胞的IDO表达及其免疫调节作用
16
《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期624-624,共1页
探讨γ干扰素(IFN-γ)体外诱导作用成人骨髓间充质干细胞(MSCs)的吲哚胺2,3-过氧化酶(IDO)的表达及IDO对异基因T淋巴细胞增殖的影响。从人骨髓中分离、培养MSCs,观察传代3次以上的细胞形态,应用流式细胞术检测其表面标志,以... 探讨γ干扰素(IFN-γ)体外诱导作用成人骨髓间充质干细胞(MSCs)的吲哚胺2,3-过氧化酶(IDO)的表达及IDO对异基因T淋巴细胞增殖的影响。从人骨髓中分离、培养MSCs,观察传代3次以上的细胞形态,应用流式细胞术检测其表面标志,以鉴定其纯度。分别用浓度为O、20、50、100、200U/ml的IFN-γ诱导作用MSCs后,以逆转录聚合酶链反应检测IDO mRNA的表达,蛋白印迹法检测IDO蛋白的表达,反相高效液相色谱法检测色氨酸的特异代谢产物犬尿氨酸的特异代谢率, 展开更多
关键词 成人骨髓间充质干细胞 体外诱导 Γ干扰素 IDO 免疫调节作用 流式细胞检测 反相高效液相色谱法 聚合酶链反应检测
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腺性膀胱炎中肿瘤相关指标的改变和临床分型的探讨
17
《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期722-722,共1页
探讨腺性膀胱炎的、良恶性及癌变可能性,并探讨临床分型的合理性。根据膀胱镜下表现将腺性膀胱炎分为低危型及高危型。25例腺性膀胱炎新鲜组织,其中低危型12例,高危型13例,用流式细胞术检测其DNA含量;38例腺性膀胱炎蜡块组织,其... 探讨腺性膀胱炎的、良恶性及癌变可能性,并探讨临床分型的合理性。根据膀胱镜下表现将腺性膀胱炎分为低危型及高危型。25例腺性膀胱炎新鲜组织,其中低危型12例,高危型13例,用流式细胞术检测其DNA含量;38例腺性膀胱炎蜡块组织,其中低危型20例,高危型18例,用免疫组织化学的方法研究增殖细胞核抗原(PCNA)、突变型p53、p21ms、bcl-2及Rb等的表达。结果:正常二倍体DNA指数为1.00±0.03,低危型腺性膀胱炎组为1.01±0.05,高危型组为1.05±0.07,低危型组和高危型组之间的差异无统计学意义(t=-1.639,P=0.115);PCNA及p53在低危型组均表达阴性, 展开更多
关键词 腺性膀胱炎 临床分型 增殖细胞核抗原(PCNA) 关指标 突变型P53 流式细胞检测 肿瘤 免疫组织化学 高危型 DNA含量
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