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微流控芯片用于流式细胞术的基础研究 被引量:7
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作者 杨蕊 牟颖 +2 位作者 邹明强 吴 金钦汉 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2004年第10期1816-1819,共4页
自行设计并加工了玻璃微流控芯片 ,并将其与流式细胞术相结合 ,采用羟丙基甲基纤维素 ( HPMC)的磷酸盐溶液为缓冲体系和鞘液 ,解决了微粒在微芯片中流动的若干问题 ,使其状态可以得到更有效的控制 .采用自行组装的激光诱导荧光装置并结... 自行设计并加工了玻璃微流控芯片 ,并将其与流式细胞术相结合 ,采用羟丙基甲基纤维素 ( HPMC)的磷酸盐溶液为缓冲体系和鞘液 ,解决了微粒在微芯片中流动的若干问题 ,使其状态可以得到更有效的控制 .采用自行组装的激光诱导荧光装置并结合动电聚焦技术 ,实现了对荧光微球的计数 ,并可通过荧光倒置显微镜实时观察到微通道内微球的实际流动情况 .方法简单 ,操作方便 ,并且具有仪器体积小。 展开更多
关键词 流控芯片 流式细胞 羟丙基甲基纤维素 动电聚焦技 荧光
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流式细胞术微球阵列法检测急性白血病血清IL-6、IL-10和TNF水平 被引量:13
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作者 肖平 曾耀英 林蔚 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期375-377,共3页
目的:探讨流式细胞术微球阵列法(CBA)在细胞因子检测中的应用及血清肿瘤坏死因子(TNF)、白细胞介素6(IL-6)和白细胞介素10(IL-10)在不同亚型急性白血病(AL)中的表达水平。方法:采用BD CBA F lex Set IL-6、IL-10、TNF试剂盒和流式细胞... 目的:探讨流式细胞术微球阵列法(CBA)在细胞因子检测中的应用及血清肿瘤坏死因子(TNF)、白细胞介素6(IL-6)和白细胞介素10(IL-10)在不同亚型急性白血病(AL)中的表达水平。方法:采用BD CBA F lex Set IL-6、IL-10、TNF试剂盒和流式细胞术检测29例急性白血病患者和20例正常人血清样本中3种细胞因子水平。结果:AL患者IL-6、IL-10和TNF水平显著高于正常对照组,急性淋巴细胞白血病(ALL)的IL-10和TNF水平较急性非淋巴细胞白血病(ANLL)有显著性提高(P<0.05)。在ANLL亚型中,M1型IL-6水平最高。结论:CBA法能快速、准确地定量检测细胞因子;AL血清中IL-6、IL-10和TNF水平升高,可能与疾病的发生发展存在相关性。 展开更多
关键词 流式细胞阵列法 急性白血病 细胞因子
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流式细胞术微球阵列法检测多种细胞因子在分泌性中耳炎患者中的表达 被引量:22
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作者 刘振 王跃健 +1 位作者 肖平 谢雪颜 《中华耳科学杂志》 CSCD 2011年第4期448-450,共3页
目的检测急性分泌性中耳炎(acute secretory otitis media,SOM)患者外周血及中耳积液中IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、TNF、IFN-γ的表达水平,以期综合分析免疫因素在其发病中的作用。方法采用BD CBA Flex SetIL-2、IL-4、IL-6、IL-10、TNF... 目的检测急性分泌性中耳炎(acute secretory otitis media,SOM)患者外周血及中耳积液中IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、TNF、IFN-γ的表达水平,以期综合分析免疫因素在其发病中的作用。方法采用BD CBA Flex SetIL-2、IL-4、IL-6、IL-10、TNF、γ-干扰素试剂盒,利用流式细胞术微球阵列法检测37例急性上呼吸道感染诱发急性分泌性中耳炎外周血、耳积液,8例鼻咽癌患者放疗后分泌性中耳炎耳积液和10例正常人血清样本中6种细胞因子水平。结果急性上呼吸道感染诱发的中耳积液中的IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、TNF、IFN-γ表达水平显著高于外周血(P<0.05);其中IL-6、IL-10、TNF、IFN-γ水平明显高于放疗后耳积液水平(P<0.05)。急性分泌性中耳炎外周血上述六种因子较正常对照组外周血差异无统计学意义(P>0.05)。结论中耳粘膜参与了急性分泌性中耳炎患者局部的免疫反应,在其发病中可能起到一定作用。 展开更多
关键词 流式细胞阵列法 急性分泌性中耳炎 细胞因子
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用定量荧光微球作对照的流式细胞术对细胞表面抗原分子数的测定
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作者 张双喜 孙启鸿 +3 位作者 陈勇 孙瑛勋 于鸣 沈倍奋 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 1997年第3期276-280,共5页
定性、定位和定量地确定细胞表达的各种重要分子是在分子水平上认识细胞功能的前提,其中以确定特定分子在细胞膜表面的绝对数目较为困难。
关键词 流式细胞 定量荧光 细胞表面抗原分子 CD19细胞 CD20细胞
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流式细胞术检测小鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力的方法学探讨 被引量:13
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作者 陈东亚 陆罗定 +3 位作者 俞萍 卞倩 徐军 杨明晶 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第8期1074-1077,共4页
目的:探讨利用流式细胞术检测小鼠腹腔巨噬细胞吞噬荧光微球能力试验方法的灵敏性、稳定性以及易操作性,以期获得一套最优化的方案。方法:取ICR小鼠腹腔巨噬细胞,以原液和1∶1稀释液使用,采用三个微球浓度(5×106/孔、1×... 目的:探讨利用流式细胞术检测小鼠腹腔巨噬细胞吞噬荧光微球能力试验方法的灵敏性、稳定性以及易操作性,以期获得一套最优化的方案。方法:取ICR小鼠腹腔巨噬细胞,以原液和1∶1稀释液使用,采用三个微球浓度(5×106/孔、1×107/孔和1.5×107/孔),经1 h、1.5 h和2 h孵育,通过酶消化或细胞刮刀法将贴壁细胞消化处理后,利用流式细胞仪检测含不同数量荧光微球的巨噬细胞数值,计算吞噬率及吞噬指数。为验证实验条件的可靠性,取ICR小鼠每日灌胃金葵素胶囊30 d后,取腹腔巨噬细胞分别用流式细胞术和传统鸡红细胞方法检测吞噬能力。结果:微球浓度越高,吞噬率和吞噬指数越大;细胞浓度为1×105~2×105 ml-1,孵育时间1.5 h,微球浓度为1.5×107/孔时吞噬率(PP)和吞噬指数(PI)最高(89.87%,1.54),孵育至2 h时出现下降(57.71%,1.51);细胞浓度对吞噬率和吞噬指数的影响与荧光微球浓度呈负相关。贴壁巨噬细胞经胰酶加EDTA消化后PP为44.51%,PI为0.68,单独使用EDTA消化后PP为37.92%,PI为0.57,均低于使用细胞刮刀处理组。流式细胞术法与鸡红细胞法测定金葵素胶囊对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力影响的结果一致,均为高剂量组吞噬率与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论:小鼠腹腔巨噬细胞浓度调整为1×105~2×105,孵育1 h,1×107/孔微球浓度可使实验快速而又精确地反映巨噬细胞的吞噬率和吞噬指数,且与传统方法结果有良好的一致性。 展开更多
关键词 巨噬细胞 流式细胞 吞噬能力 荧光
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基于量子点编码微球的流式检测技术用于白血病诊断的研究
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作者 杨俊飞 王烨颖 +3 位作者 周靖娥 王镜 闫志强 俞磊 《华东师范大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期139-149,共11页
采用种子聚合法制备了微米级的聚苯乙烯微球(Polystyrene Microspheres,PS),并将微球羧基化和多孔化.将量子点(Quantum Dots,QDs)作为荧光分子,合成了不同发射波长的量子点,并成功将其装载到多孔微球当中形成荧光编码微球(QDs@PS),最后... 采用种子聚合法制备了微米级的聚苯乙烯微球(Polystyrene Microspheres,PS),并将微球羧基化和多孔化.将量子点(Quantum Dots,QDs)作为荧光分子,合成了不同发射波长的量子点,并成功将其装载到多孔微球当中形成荧光编码微球(QDs@PS),最后检测急性白血病(Acute Leukemia,AL)患者血清样本,通过流式实现对血清中抗原的定量分析.扫描电子显微镜(Scanning Electron Microscope,SEM)和流式细胞术图像显示,微球的球形规整,尺寸均一.荧光显微镜观察,QDs基本均匀渗透到整个微球中.此外,QDs@PS显示了良好的光稳定性,未见QDs泄漏,并可保持其荧光至少两周.荧光光谱分析对人免疫球蛋白G(Immunoglobulin G,IgG)检测的性能表明,荧光微球表面的羧基有利于生物大分子的高效共价结合,可应用于三明治免疫夹心反应偶联白血病高表达抗原白介素6(Interleukin 6,IL-6).结合白血病患者血清样品,通过流式细胞仪检测出量子点的荧光,计算其平均荧光强度(Mean Fluorescence Intensity,MFI)来表示血清中IL-6的含量.这些结果表明,设计的光学编码微载体可以成功地应用于高通量和多路生物分子分析,在血液疾病检测和诊断中有很大潜力. 展开更多
关键词 多孔聚苯乙烯 量子点 流式细胞 白血病 IL-6
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MDS、AML患者T淋巴细胞及相关细胞因子表达水平的研究 被引量:6
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作者 郭含梦 倪婧 +2 位作者 郑美娟 陈冰 杨明珍 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2018年第7期1072-1075,共4页
目的通过检测骨髓增生异常综合征(MDS)和急性髓系白血病(AML)患者外周血T淋巴细胞及其分泌的相关细胞因子表达水平的变化,研究此两种疾病免疫状态的区别并指导治疗。方法采用流式细胞微球芯片捕获术(CBA)及流式细胞术检测20例MDS患者[MD... 目的通过检测骨髓增生异常综合征(MDS)和急性髓系白血病(AML)患者外周血T淋巴细胞及其分泌的相关细胞因子表达水平的变化,研究此两种疾病免疫状态的区别并指导治疗。方法采用流式细胞微球芯片捕获术(CBA)及流式细胞术检测20例MDS患者[MDS组,难治性贫血(RA)与难治性贫血伴原始细胞增多(RAEB)各10例]、15例AML患者(AML组)和10名健康体检者(正常对照组)外周血中调节性T细胞(Treg)、白细胞介素-2(IL-2)、γ-干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子(TNF)、白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)、白细胞介素-17(IL-17)的表达水平,间接评价各组T淋巴细胞免疫状态,并作比较。结果与正常对照组相比,RA组TNF、IL-17、IL-2、IFN-γ表达水平均较高(P<0.05),RAEB组和AML组Treg、IL-10、IL-6、IL-4表达水平均较高(P<0.05)。与MDS-RA组比较,MDS-RAEB组和AML组TNF、IL-17、IL-2、IFN-γ表达水平均较低(P<0.05),而Treg、IL-10、IL-6、IL-4表达水平均较高(P<0.05)。结论不同时期的MDS和AML患者其免疫状态并不相同。 展开更多
关键词 骨髓增生异常综合征 急性髓系白血病 TREG 细胞因子 流式细胞微球芯片捕获术 流式细胞
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三种小鼠血清中Th1/Th2类细胞因子正常值比较 被引量:1
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作者 张洋 阎国辉 +4 位作者 苏玉虹 朱宝琴 李会 佟伟 智光 《中国比较医学杂志》 CAS 2007年第5期272-274,共3页
目的建立健康正常BALB/c、C3H/HeJ和C3H/SW小鼠Th1/Th2中5种细胞因子正常水平,比较三种小鼠的差异性。方法用流式细胞仪及CBA试剂盒测定BALB/c、C3H/HeJ和C3H/SW小鼠血清中5种细胞因子水平。结果三种小鼠5种Th1/Th2细胞因子呈正态分布,... 目的建立健康正常BALB/c、C3H/HeJ和C3H/SW小鼠Th1/Th2中5种细胞因子正常水平,比较三种小鼠的差异性。方法用流式细胞仪及CBA试剂盒测定BALB/c、C3H/HeJ和C3H/SW小鼠血清中5种细胞因子水平。结果三种小鼠5种Th1/Th2细胞因子呈正态分布,95%可信区间可以被认可;三种小鼠IL-4I、L-5水平差异性不大(P>0.05),INF-γ、TNF-αI、L-2差异性较大,其中BALB/c小鼠Th1细胞因子水平均比两种C3H小鼠高,其中INF-γ和TNF-α具有显著性意义(P<0.05)。结论本实验建立了健康正常BALB/c、C3H/HeJ和C3H/SW小鼠Th1/Th2中5种细胞因子的正常参考值;BALB/c小鼠比C3H/HeJ、C3H/SW小鼠处于高免疫反应状态。 展开更多
关键词 流式细胞芯片捕获(CBA技) TH1/TH2细胞因子 正常参考范围
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外用红色诺卡氏菌细胞壁骨架效力测试实验方法的研究 被引量:1
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作者 窦恒 樊华 +5 位作者 王秀英 佟东辉 曲晶 王丹 孙鹤 张怡轩 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2021年第6期35-43,共9页
摸索改进外用红色诺卡氏菌(Nocardia rubra)细胞壁骨架的两种效力测试方法,即流式细胞术-荧光微球法、流式细胞术-免疫双标法(荧光微球+荧光抗体),并与国家食品药品监督管理局原审批方法进行比较,经过统计学评估,评价两种方法的可行性... 摸索改进外用红色诺卡氏菌(Nocardia rubra)细胞壁骨架的两种效力测试方法,即流式细胞术-荧光微球法、流式细胞术-免疫双标法(荧光微球+荧光抗体),并与国家食品药品监督管理局原审批方法进行比较,经过统计学评估,评价两种方法的可行性。通过抽取小鼠免疫后获得的腹腔液注入到流式细胞仪,在发射光的荧光通路中,检测巨噬细胞的荧光强度,测定未吞噬荧光微球的巨噬细胞和吞噬荧光微球的巨噬细胞的比例,全部数据经统计学分析,按公式计算吞噬率及吞噬指数完成流式细胞术检测过程。分别采用荧光微球以及荧光微球+荧光抗体两种方式上机检测巨噬细胞吞噬结果。测得的结果与原检验方法——人工显微镜观察法的结果进行比较,确定评估方法的有效性和准确性。结果表明,显微镜人工计数法与流式细胞术-免疫双标法(荧光微球+荧光抗体)的3次实验结果与正常对照组比较,吞噬率明显升高(P<0.01),吞噬指数明显增大(P<0.01),有显著性差异,判定结果为阳性;3次流式细胞术-荧光微球法实验,结果不稳定。流式细胞术-免疫双标法(荧光微球+荧光抗体)由于加入了成熟小鼠巨噬细胞表面特异性标志物抗体F480荧光抗体,可有效标记小鼠巨噬细胞,加强了流式细胞仪收集巨噬细胞的准确性,两者结合应用更能准确反映供试品对小鼠巨噬细胞吞噬功能的作用。利用此方法检测外用红色诺卡氏菌细胞壁骨架增强免疫力的结果和药品原检验方法的统计学结果一致。该方法获取的巨噬细胞数量远多于原方法,加入的荧光微球及荧光抗体,能更准确反应供试品对小鼠巨噬细胞的吞噬作用。该方法灵敏性高、稳定性好,并且易操作,可作为原实验方法的改良参考。 展开更多
关键词 荧光 镜法 流式细胞-免疫双标法 巨噬细胞 吞噬效力
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IL-2、IL-4、IL-6、IFN-γ、IL-17A在肝癌组织中表达及其与乙肝病毒感染的关系 被引量:22
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作者 黄传钟 李洁羽 +2 位作者 陈淑萍 刘枋 叶韵斌 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期527-530,共4页
目的:研究Th17(IL-17A)在肝细胞癌发生发展中的作用,尤其与乙肝病毒感染的关系。方法:收集39例原发性肝细胞癌患者的癌与非癌组织,应用流式细胞微球阵列术(CBA)检测IL-2、IL-4、IL-6、IFN-γ、IL-17A细胞因子水平,并与患者临床资料进行... 目的:研究Th17(IL-17A)在肝细胞癌发生发展中的作用,尤其与乙肝病毒感染的关系。方法:收集39例原发性肝细胞癌患者的癌与非癌组织,应用流式细胞微球阵列术(CBA)检测IL-2、IL-4、IL-6、IFN-γ、IL-17A细胞因子水平,并与患者临床资料进行统计比较分析。结果:肝癌组织中IL-2、IL-4、IFN-γ表达水平好[分别为(4.61±0.28)、(3.37±0.58)、(3.08±1.08)pg/ml]显著低于非癌组织[分别为(5.57±0.59)、(3.77±0.70)、(3.69±1.20)pg/ml],而IL-6、IL-17A水平[分别为(280.09±254.68)、(2.66±1.66)pg/ml]显著高于非癌组织[分别为(6.58±1.92)、(1.49±0.98)pg/ml],同时无论癌组织还是非癌组织,高乙肝病毒载量(>1 000 U/ml)的组织IL-17A的表达[(3.45±1.86)pg/ml]显著高于低病毒载量(<1 000U/ml)的组织[(1.97±1.16)pg/ml]。结论:Th17细胞分泌的细胞因子IL-17A在肝癌组织中高表达,IL-2、IL-4和IFN-γ可能抑制其表达,而IL-6可能促进其表达;乙肝病毒感染有可能促进Th17的表达,从而降低患者的预后。 展开更多
关键词 肝癌 TH17 乙肝病毒 流式细胞阵列
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