分光光度法与活菌计数法测定副鸡禽杆菌菌液浓度的相关性研究 被引量：1

1

作者 佟仁冬 冯妍 +5 位作者 张一帜 任小侠 刘燕 朱良全 郝力力 姚文生 《中国兽药杂志》 2024年第4期34-42,共9页

为建立一种快速测定副鸡禽杆菌菌液浓度的方法,本研究选取副鸡禽杆菌血清A、B和C型代表性菌株(CVCC254株、CVCC257株和CVCC256株),培养制备菌液,分别在450、540、600、650 nm波长测定其吸光度值(OD值),同时测定活菌计数值。回归分析两... 为建立一种快速测定副鸡禽杆菌菌液浓度的方法,本研究选取副鸡禽杆菌血清A、B和C型代表性菌株(CVCC254株、CVCC257株和CVCC256株),培养制备菌液,分别在450、540、600、650 nm波长测定其吸光度值(OD值),同时测定活菌计数值。回归分析两组数据,获取回归方程及标准曲线,分析回归方程的测定系数(R^(2))和标准曲线的点线离散度,确定最适测定波长。再选取不同培养时间点(10、12、14、16、18、20 h)的菌液,在最适波长下测定其OD值并代入回归方程获取活菌数,同时采用活菌计数法获取活菌计数值,将两组数据使用SPSS 17.0软件进行统计分析,进一步验证分光光度法与活菌计数法测定菌液浓度的相关性。结果显示,3株菌液在600 nm波长测定的OD值与活菌计数值之间均呈最佳的线性关系,确定其菌液浓度最适测定波长均为600 nm,其回归方程分别为y=14.302x-0.1441(R^(2)=0.9962)、y=14.464x-0.2746(R^(2)=0.995)和y=14.681x-0.01326(R^(2)=0.9989),y为活菌计数值(×10^(8)CFU/mL),x为OD600值。3株培养至衰退期前的菌液在600 nm波长测定的OD值代入回归方程计算获得的活菌数值与其活菌计数值无显著差异(P>0.05)。研究结果表明,衰退期前副鸡禽杆菌菌液的分光光度法与活菌计数法具有良好的相关性。因此,该分光光度法可用于快速测定衰退期前副鸡禽杆菌菌液浓度。 展开更多

关键词 副鸡禽杆菌 菌液浓度 分光光度法 活菌计数法

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一种简单准确的酵母微量活菌计数方法 被引量：9

2

作者 李颖 王德培 +1 位作者 王勇 高年发 《中国酿造》 CAS 北大核心 2008年第9X期75-77,共3页

10μL点样酵母活菌计数法是取100μL菌液在1.5mL离心管中进行梯度稀释,最后将10μL稀释菌液点在平板上计数。该方法与传统活菌计数法比较工作量小,重复性好,准确性高,是一种简单、准确的酵母微量活菌计数方法。

关键词 10μL点样 酵母菌 活菌计数

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布氏菌病活疫苗活菌计数项目能力验证结果分析 被引量：5

3

作者 王楠 李旭妮 +6 位作者 于晓辉 徐磊 张媛 刘博 李建 毛开荣 蒋玉文 《中国兽药杂志》 北大核心 2016年第5期15-18,共4页

为了解全国布氏菌病活疫苗生产企业活菌计数能力,2015年对该项目进行了能力验证分析,每名参比企业发放布氏菌活疫苗(S2株)样品3份,要求在规定时间内对其进行活菌计数并提交结果报告。结果显示,参比的17家企业中,15家结果"满意"... 为了解全国布氏菌病活疫苗生产企业活菌计数能力,2015年对该项目进行了能力验证分析,每名参比企业发放布氏菌活疫苗(S2株)样品3份,要求在规定时间内对其进行活菌计数并提交结果报告。结果显示,参比的17家企业中,15家结果"满意",2家企业结果"不满意",表明全国大部分布氏菌病活疫苗生产企业具备可信任的布氏菌病活疫苗活菌计数检测能力。 展开更多

关键词 布氏菌病活疫苗 活菌计数 能力验证 结果分析

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用活菌计数法检测双歧杆菌对伤寒沙门菌粘附和侵袭的抑制作用 被引量：6

4

作者 陈芳 王跃 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第u04期71-72,共2页

目的　研究双歧杆菌是否对伤寒沙门菌粘附和侵袭肠上皮细胞具有抑制作用。方法　用活菌计数法测定双歧杆菌对伤寒沙门菌粘附和侵袭LOVO细胞的抑制率。结果　发现伤寒沙门菌粘附LOVO细胞后的活菌计数为 79 0CFU ,侵袭后的活菌计数为 2 6 ... 目的　研究双歧杆菌是否对伤寒沙门菌粘附和侵袭肠上皮细胞具有抑制作用。方法　用活菌计数法测定双歧杆菌对伤寒沙门菌粘附和侵袭LOVO细胞的抑制率。结果　发现伤寒沙门菌粘附LOVO细胞后的活菌计数为 79 0CFU ,侵袭后的活菌计数为 2 6 .3CFU ,当将伤寒沙门菌与双歧杆菌混合加入LOVO细胞中 ,伤寒沙门菌粘附和侵袭后的活菌计数分别下降为2 7 0和 15 .7CFU ,差异显著 (P <0 .0 1和P <0 .0 5 )。结论　双歧杆菌对伤寒沙门菌的肠上皮细胞的粘附和侵袭均具有明显抑制作用 ,这正是双歧杆菌对肠道感染防治的作用机理之一 ,采用活菌计数法 ,可提高实验的客观性和准确性。 展开更多

关键词 活菌计数法 双歧杆菌 伤寒沙门菌 粘附 检测 抑制作用

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稳健统计方法及t检验法在活菌计数能力比对中的应用 被引量：3

5

作者 张媛 张磊 +5 位作者 李建 丁家波 李旭妮 刘轶秋 王楠 徐磊 《中国兽药杂志》 2013年第4期19-22,共4页

为比较检验员活菌计数能力及常量法和微量法在活菌计数应用中是否存在差异,8名检验员于同时、同环境中对同一细菌培养物采用常量法和微量法进行活菌计数,采用稳健统计方法对不同人员相同方法的计数结果进行统计,将检验结果分为"满... 为比较检验员活菌计数能力及常量法和微量法在活菌计数应用中是否存在差异,8名检验员于同时、同环境中对同一细菌培养物采用常量法和微量法进行活菌计数,采用稳健统计方法对不同人员相同方法的计数结果进行统计,将检验结果分为"满意"、"可疑"和"不满意";采用t检验法对使用不同方法对同一样品的计数结果进行统计,将结果分为"差异显著"和"差异不显著"。稳健统计方法表明,用常量法进行检测,有6名检验员的检验结果全部满意,而微量法的结果中只有2名检验员获得了全部满意的结果;t检验法表明常量法和微量法之间存在显著差异。稳健统计方法及t检验法统计结果显示,不能用微量法代替常量法进行检验,个别检验员的活菌计数能力有待进一步提高。 展开更多

关键词 活菌计数 能力比对 稳健统计方法 t检验法

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沙门氏菌类活疫苗活菌计数参考疫苗的研究 被引量：3

6

作者 王秀丽 张媛 +8 位作者 李红霞 袁露 李爱玲 曹翠萍 刘博 辛凌翔 彭国瑞 李建 蒋玉文 《中国兽药杂志》 2019年第3期19-25,共7页

为研制沙门氏菌类活疫苗活菌计数的参考疫苗,以期更科学地评价活菌计数结果的有效性,研究制备了一批仔猪副伤寒活疫苗作为参考疫苗候选物,对其性状、纯粹检验、真空度、剩余水分进行检测,对其运输稳定性、均一性进行测定,组织协作标定... 为研制沙门氏菌类活疫苗活菌计数的参考疫苗,以期更科学地评价活菌计数结果的有效性,研究制备了一批仔猪副伤寒活疫苗作为参考疫苗候选物,对其性状、纯粹检验、真空度、剩余水分进行检测,对其运输稳定性、均一性进行测定,组织协作标定对参考疫苗候选物进行赋值,用协作标定的方法统计参考疫苗候选物在18个月的保存期,将参考疫苗初步应用于仔猪副伤寒活疫苗活菌计数的检验。结果表明,参考疫苗的性状、纯粹检验、剩余水分和真空度测定均符合《中国兽药典》的规定,均一性试验结果显示10瓶参考疫苗候选物计数结果的变异系数小于10%,说明其均一性良好。协作标定统计出参考疫苗候选物的赋值范围为(3.0,4.0)×109CFU/头份,保存期试验结果显示参考疫苗候选物在-70℃以下保存18个月菌数稳定。参考疫苗的初步应用显示本参考疫苗不仅可以为沙门氏菌类活疫苗活菌计数提供参照物,而且还可用于控制普通琼脂培养基的质量。 展开更多

关键词 参考疫苗 活菌计数 沙门氏菌活疫苗

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首届兽药职业技能大赛参赛选手活菌计数能力分析

7

作者 张媛 李建 +5 位作者 魏财文 刘轶秋 王楠 彭小兵 张广川 王峰 《中国兽药杂志》 2014年第4期39-42,共4页

通过对首届兽药职业技能大赛62名参赛选手大肠杆菌活菌计数结果进行分析,了解我国兽用生物制品生产企业活菌计数能力的整体水平。每名参赛选手发放大肠杆菌菌液1支,要求参赛选手在规定时间内进行活菌计数并提交计数结果。40%参赛选手活... 通过对首届兽药职业技能大赛62名参赛选手大肠杆菌活菌计数结果进行分析,了解我国兽用生物制品生产企业活菌计数能力的整体水平。每名参赛选手发放大肠杆菌菌液1支,要求参赛选手在规定时间内进行活菌计数并提交计数结果。40%参赛选手活菌计数检验结果满意(25/62);60%检验结果不满意(37/62)。此次技能大赛体现出我国兽用生物制品生产企业检验人员的活菌计数水平参差不齐,部分检验人员活菌计数能力有待进一步提高。 展开更多

关键词 兽用生物制品 活菌计数能力 稳健统计方法

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PMA-qPCR技术在发酵食品活菌计数中的应用 被引量：8

8

作者 陈卓君 魏铭 +4 位作者 林果 陈昱锜 梁杉 张柏林 朱保庆 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期242-248,共7页

发酵食品具有丰富的口感和较高的营养价值,深受广大消费者喜爱。准确计数发酵食品生产加工与贮藏过程中的活菌,是对产品进行质量控制、评价以及工艺改进的基础。叠氮溴化丙锭(propidium monoazide,PMA)是一种具有高亲和力的光敏性DNA结... 发酵食品具有丰富的口感和较高的营养价值,深受广大消费者喜爱。准确计数发酵食品生产加工与贮藏过程中的活菌,是对产品进行质量控制、评价以及工艺改进的基础。叠氮溴化丙锭(propidium monoazide,PMA)是一种具有高亲和力的光敏性DNA结合染料,用于处理样品后偶联使用实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real-time PCR,qPCR)计数可极大缩短检测时长且灵敏度高、特异性强。该文综述PMA-qPCR技术的原理、影响因素及其在红酒、啤酒、酸奶等发酵食品活菌计数中的应用现状。将目标微生物及PMA处理条件列为此技术影响因素,以此为基础总结各类发酵食品中可检测微生物及检测线性范围及检测限,为扩大此方法使用范围,获取发酵食品中更为丰富和精准的活菌检测结果提供参考。 展开更多

关键词 发酵食品 活菌计数 叠氮溴化丙锭 实时荧光定量PCR

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MTT法在酵母菌活菌计数中最佳条件的研究 被引量：3

9

作者 龚加路 邓静 +4 位作者 吴华昌 邹伟 张静 赵长青 赵兴秀 《中国调味品》 CAS 北大核心 2016年第1期10-14,共5页

为建立一种快速、准确并可以反映酵母菌活性的计数方法。以酵母菌Kazachstaniabarnettii为研究对象，探究了MTT计数法的最大吸收波长、反应时间、MTT添加量及甲腊是否溶解等影响因素。结果显示：MTT法测定Kazachstaniabarnettii活菌数... 为建立一种快速、准确并可以反映酵母菌活性的计数方法。以酵母菌Kazachstaniabarnettii为研究对象，探究了MTT计数法的最大吸收波长、反应时间、MTT添加量及甲腊是否溶解等影响因素。结果显示：MTT法测定Kazachstaniabarnettii活菌数的最大吸收波长为500nm，MTT反应量为10肛L，反应时间为150min，是否溶解甲腊对测定结果无显著差异（p=0．113〉0．05）。在10^7～10^9cfu／mL的菌浓度范围内，MTT计数法与平板计数法呈显著相关性（p=0．998），表明MTT用于酵母菌活菌计数是可行的。 展开更多

关键词 Kazakhstanis barnettii 活菌计数 MTT

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用于水生病原菌的3种高通量活菌计数方法的比较 被引量：1

10

作者 邹培卓 杨倩 +2 位作者 董宣 谢国驷 黄倢 《渔业科学进展》 CSCD 北大核心 2019年第3期133-140,共8页

以一株副溶血弧菌(Vibrioparahaemolyticus)作为研究对象,比较了MTT[3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐]比色法、ATP生物发光法和高通量生长曲线法在活细菌高通量计数上的应用效果。用96孔培养板进行不同浓度细菌活菌计数,确... 以一株副溶血弧菌(Vibrioparahaemolyticus)作为研究对象,比较了MTT[3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐]比色法、ATP生物发光法和高通量生长曲线法在活细菌高通量计数上的应用效果。用96孔培养板进行不同浓度细菌活菌计数,确定了上述3种方法在副溶血弧菌活菌计数的标准曲线和线性范围。结果显示,副溶血弧菌的MTT比色法以DMSO溶解的MTT产物甲瓒在555 nm的吸光度(OD555 nm)为计数依据,活菌数的对数(Lg C)与Lg OD555 nm线性关系的标准曲线为Lg C=(1.0439±0.0200)LgOD555 nm+(8.0565±0.0125),相关系数R2=0.9965,线性检测范围为7.8×106~2.5×108CFU/ml;ATP生物发光法以ATP产生的相对发光度值(RLU)为计数依据,Lg C与LgRUL线性关系的标准曲线为Lg C=(0.9590±0.0065)LgRLU+(0.9949±0.0366),相关系数R2=0.9994,线性检测范围为1.0×104~3.0×108 CFU/ml;高通量生长曲线法以生长曲线达到拐点的时间(Ts)为计数依据,Lg C与Ts线性关系的标准曲线为Lg C=-(0.8727±0.0230)Ts+(9.0128±0.1572),相关系数R2=0.9924,线性检测范围为1.0×100~1.0×107 CFU/ml。用3种方法对实际菌液测量并与平板计数法比较表明,ATP生物发光法与高通量生长曲线法有很好的准确性,MTT比色法准确度稍差,而高通量生长曲线法有最宽的线性范围,也最适合高通量测定。 展开更多

关键词 活菌计数 MTT比色法 ATP生物发光法 高通量生长曲线法

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兽用生物制品活菌计数方法改进的研究 被引量：3

11

作者 张一帜 张媛 +14 位作者 李建 王秀丽 刘元杰 王楠 徐磊 辛凌翔 任小侠 刘博 魏津 马欣 彭小兵 李旭妮 彭国瑞 李俊平 罗玉峰 《中国兽药杂志》 2020年第11期22-29,共8页

活菌计数是细菌类活疫苗质量标准中重要的检验参数,与疫苗的保护效果显著相关。现行兽用细菌类生物制品检验中的活菌计数方法部分步骤易产生误差,试验成立标准表述笼统,最终影响到细菌活疫苗质量评判。因此,从检验实际需求出发,参照国... 活菌计数是细菌类活疫苗质量标准中重要的检验参数,与疫苗的保护效果显著相关。现行兽用细菌类生物制品检验中的活菌计数方法部分步骤易产生误差,试验成立标准表述笼统,最终影响到细菌活疫苗质量评判。因此,从检验实际需求出发,参照国内外活菌计数相关规程,通过比对试验研究,对“活菌计数法”中平板干湿程度、菌液滴加方法、菌液分散方法进行改进,提出及验证以标准差(s)衡量结果的有效性并提供参考值。改进后的方法要求更明确,普适性更高,从而减少了操作误差,提升了“活菌计数法”的规范性、可操作性及检验结果可靠性。 展开更多

关键词 活菌计数法 细菌活疫苗 检验技术方法

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饲用微生物添加剂地衣芽孢杆菌活菌计数不确定度评定方法的建立 被引量：4

12

作者 李欣南 《食品安全质量检测学报》 CAS 2019年第11期3414-3418,共5页

目的探讨检测实验室饲用微生物添加剂地衣芽孢杆菌活菌计数的不确定度评价方法。方法实验依据JJF1059.1-2012《测量不确定度评定与表示》、RB/T151-2016《食品微生物定量检测的测量不确定度评估指南》和NY/T1461-2007《饲料微生物添加... 目的探讨检测实验室饲用微生物添加剂地衣芽孢杆菌活菌计数的不确定度评价方法。方法实验依据JJF1059.1-2012《测量不确定度评定与表示》、RB/T151-2016《食品微生物定量检测的测量不确定度评估指南》和NY/T1461-2007《饲料微生物添加剂地衣芽孢杆菌》,对地衣芽孢杆菌活菌计数的不确定度分量进行分析。结果本研究建立了地衣芽孢杆菌活菌计数不确定度评定方法,当包含因子k=2时,扩展不确定度U=4.05%,样品的误差允许范围在0.95×10^10~1.15×10^10CFU/g之间。结论建立的地衣芽孢杆菌活菌计数不确定度评定方法简单、易行,符合实际检测要求。 展开更多

关键词 不确定度 地衣芽孢杆菌 活菌计数

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广西检验检疫局“厌氧菌活菌计数培养平板”获国家专利

13

《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期10-10,共1页

关键词 兼性厌氧菌 检验检疫局 活菌计数 国家专利 平板 培养 广西 局部组织

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植物乳杆菌活菌计数方法的优化

14

作者 王雅丽 张晓蕊 +1 位作者 范翠翠 徐长隆 《食品安全导刊》 2018年第36期62-62,共1页

本文旨在找到一种操作简单、工作量小、重复性好、准确性高的乳酸菌计数方法,从而提高工作效率。方法:通过筛选不同培养基配方、不同培养时间、不同培养条件等方面对本实验室活菌计数试验进行优化。结果:添加1%番茄汁、pH值为6.2的自配... 本文旨在找到一种操作简单、工作量小、重复性好、准确性高的乳酸菌计数方法,从而提高工作效率。方法:通过筛选不同培养基配方、不同培养时间、不同培养条件等方面对本实验室活菌计数试验进行优化。结果:添加1%番茄汁、pH值为6.2的自配MRS培养基,48 h需氧培养,计数效果好。结论:本实验条件下确定了适用于植物乳杆菌的检验用培养基为添加1%番茄汁、pH值为6.2的自配MRS培养基,需氧培养48 h进行计数。 展开更多

关键词 乳杆菌 活菌计数 培养方式

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微生态制剂活菌的计数方法分析 被引量：5

15

作者 苏梦缘 伍新叶 +5 位作者 朱曦 王茜瑛 邵嫄 李克克 梁运祥 李英俊 《中南农业科技》 2022年第3期139-143,共5页

活菌数是微生态制剂质量与安全性的重要考察指标,选用恰当的活菌计数方法对微生态制剂的研究开发与应用具有重要意义。分析了微生态制剂试验中常用的12种活菌计数法,介绍平板培养法、直接染色观察法、流式细胞术检测法、MTT计数法、MPN-... 活菌数是微生态制剂质量与安全性的重要考察指标,选用恰当的活菌计数方法对微生态制剂的研究开发与应用具有重要意义。分析了微生态制剂试验中常用的12种活菌计数法,介绍平板培养法、直接染色观察法、流式细胞术检测法、MTT计数法、MPN-PCR检测法、实时荧光定量检测法、ATP生物发光法、Bactec 9120血培养仪法、高通量生长曲线法、滤膜法(浓缩法)、颜色改变单位法(CCU)、LAMP环介导等温扩增法及其原理,比较12种检测方法的优点、缺点和适用范围,旨在为相关研究和应用提供参考。 展开更多

关键词 微生态制剂 活菌计数 定量 快速检测

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PMA-qPCR定量检测饮用水中铜绿假单胞菌的方法

16

作者 张瑞停 王园媛 +2 位作者 邢方潇 张晓 张岚 《净水技术》 2025年第5期206-215,共10页

【目的】为预防水源性疾病暴发和保障水质安全,建立快速、准确的检测水中活性病原菌的方法至关重要。鉴于生活饮用水细菌含量较低,建立一种适用于大体积饮用水中铜绿假单胞菌检测的富集浓缩及叠氮溴化丙锭-定量聚合酶链式反应(PMA-qPCR... 【目的】为预防水源性疾病暴发和保障水质安全,建立快速、准确的检测水中活性病原菌的方法至关重要。鉴于生活饮用水细菌含量较低,建立一种适用于大体积饮用水中铜绿假单胞菌检测的富集浓缩及叠氮溴化丙锭-定量聚合酶链式反应(PMA-qPCR)方法。【方法】通过调整涡旋振荡时长,计算加标回收率,优化富集浓缩方法;采用L_(16)(4^(3))正交试验筛选能够有效去除铜绿假单胞菌死菌脱氧核糖核酸的PMA处理条件的最佳组合,并进行验证。【结果】通过膜过滤法将10 L饮用水中的铜绿假单胞菌富集至膜上后,采用涡旋振荡(转速为3000 r/min,振荡时间为15 min,重复2次)及离心(8000 g,10 min)的方式将膜上的细菌洗脱至1 mL磷酸盐缓冲液(PBS)中。该方法在50 min内完成且回收率可达80.95%±7.43%。PMA-qPCR法的最优PMA处理条件:PMA浓度为30μmol/L、黑暗中孵育时间为20 min、光暴露时间为20 min。该方法与平板计数法的检测结果一致,可有效抑制死菌DNA的扩增。活菌数与PMA-qPCR扩增循环数为1×10^(2)~1×10^(6)CFU/mL时呈现良好的线性关系(R2=0.99),建立的标准曲线方程(y=-3.541x+44.11)可定量检测活菌数量。PMA-qPCR法定量限为1×10^(2)CFU/mL,且结合富集的方式,灵敏度可被提高1×10^(4)倍。【结论】该研究建立的检测方法适用于10 L大体积饮用水中铜绿假单胞菌活菌的定量分析,为后续深入研究提供了有效的技术手段。 展开更多

关键词 铜绿假单胞菌 叠氮溴化丙锭(PMA) 荧光定量聚合酶链式反应(PCR) 活菌计数 饮用水

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乳酸菌计数培养基和培养方法的筛选 被引量：31

17

作者 谭周进 肖克宇 +1 位作者 肖启明 阳赛培 《湖南农业大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期398-400,共3页

对保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌活菌计数的培养基和培养方法的研究结果表明 ,采用保加利亚乳杆菌选择性培养基的双层平板法和酸化的 MRS培养基的试管法可对保加利亚乳杆菌进行选择性计数 ;采用 MRS培养基的双层平板法和 MRS培养基的试管... 对保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌活菌计数的培养基和培养方法的研究结果表明 ,采用保加利亚乳杆菌选择性培养基的双层平板法和酸化的 MRS培养基的试管法可对保加利亚乳杆菌进行选择性计数 ;采用 MRS培养基的双层平板法和 MRS培养基的试管法可对嗜热链球菌进行选择性计数 ;采用改进的 MRS和西 展开更多

关键词 乳酸菌 活菌计数 培养基 培方法

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MTT法测定瑞士乳杆菌MB2-1活菌数 被引量：11

18

作者 杨培洁 李腾 +2 位作者 陈晓红 李伟 董明盛 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第20期99-102,共4页

以赛里木拉丝酸奶中提取的瑞士乳杆菌MB 2-1(Lactobacillus helveticus MB 2-1)为研究对象,探讨MTT法用于细菌计数的可行性及测量细菌数量的范围,优化MTT法用于瑞士乳杆菌活菌计数的工作波长、MTT和DMSO用量、反应时间。结果表明:在107... 以赛里木拉丝酸奶中提取的瑞士乳杆菌MB 2-1(Lactobacillus helveticus MB 2-1)为研究对象,探讨MTT法用于细菌计数的可行性及测量细菌数量的范围,优化MTT法用于瑞士乳杆菌活菌计数的工作波长、MTT和DMSO用量、反应时间。结果表明:在107～109CFU/mL内测出的OD值与细菌浓度呈正向线性关系(R2>0.99),最佳反应条件为:1.0mL待测菌液与0.2mL MTT溶液在40℃条件下染色反应1h,反应液需要经过12000r/min离心10min,取离心沉淀物溶解于1.0mL二甲基亚砜中,于工作波长510nm处测定此溶液的OD值。MTT比色分析法可用于检测乳酸菌活菌数量。 展开更多

关键词 MTT染色计数法 瑞士乳杆菌MB 2-1 活菌计数 条件优化

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运用OD值对常见畜禽腹泻病原菌计数的研究 被引量：1

19

作者 王佳 张莉 +2 位作者 豆思远 高军军 李勇生 《国外畜牧学（猪与禽）》 2023年第4期101-106,共6页

本研究就畜禽常见腹泻病原菌的生长特性、细菌悬液浊度和细菌计数之间的关系进行探讨,通过对常见畜禽腹泻病原菌大肠杆菌(O8型和O139型)、鸡白痢沙门菌、鼠伤寒沙门菌和鸡伤寒沙门菌不同培养时间段吸光度(optical density,OD)值的测定,... 本研究就畜禽常见腹泻病原菌的生长特性、细菌悬液浊度和细菌计数之间的关系进行探讨,通过对常见畜禽腹泻病原菌大肠杆菌(O8型和O139型)、鸡白痢沙门菌、鼠伤寒沙门菌和鸡伤寒沙门菌不同培养时间段吸光度(optical density,OD)值的测定,结合平板活菌计数法来确定这5种细菌的生长曲线,并对细菌浊度和细菌计数相关性进行统计分析,发现极显著相关(P<0.01),建立了5种细菌在生长期和稳定期的OD值-细菌数对数的曲线回归方程,O8型大肠杆菌:y=2.55x+6.72(r^(2)=0.96);O139型大肠杆菌:y=1.45x+8.77(r^(2)=0.95);鸡伤寒沙门菌:y=4.50x+7.02(r^(2)=0.95);鼠伤寒沙门菌:y=5.59x+7.67(r^(2)=0.97);鸡白痢沙门菌:y=9.72x+6.60(r^(2)=0.98)。利用该回归方程可快速准确地确定菌液浓度,为探讨细菌的培养特性、致病机制及动物实验中攻毒剂量的确定等相关实验提供参考依据。 展开更多

关键词 生长曲线 紫外分光光度法 活菌计数

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乳品中的酵母活菌数PMA-qPCR检测方法的建立及初步应用 被引量：3

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作者 李畅 赵柯 +11 位作者 常江 张嵩 李萌 关玉婷 孟宪梅 柳增善 胡盼 任洪林 卢士英 李岩松 孙宇 刘熙 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2018年第22期128-132,共5页

本实验旨在对乳品中酵母菌活菌总数进行准确的定量检测,深入研究PMA处理乳品中酵母热损伤菌的最佳工作条件,去除热损伤死菌DNA的影响。针对从乳品中分离的三株酵母菌26S rDNA D1/D2区域序列设计引物Y3和Y4,运用实时荧定定量PCR进行序列... 本实验旨在对乳品中酵母菌活菌总数进行准确的定量检测,深入研究PMA处理乳品中酵母热损伤菌的最佳工作条件,去除热损伤死菌DNA的影响。针对从乳品中分离的三株酵母菌26S rDNA D1/D2区域序列设计引物Y3和Y4,运用实时荧定定量PCR进行序列扩增,以重组质粒pMD-18T-26S拷贝数对数与扩增循环数(Ct)值为坐标轴建立标准曲线,建立PMA-qPCR检测方法,并对实际样品中的酵母菌活菌富集后进行数量检测。PMA-q PCR法可达到国标规定的食品中酵母菌最高限量值1×10~2CFU/mL的检测标准,对应Ct值为36.67±0.43,重复性良好,总耗时6～7 h,可对酵母菌数量进行准确和快速的定量分析,为乳品中腐败微生物的鉴定与监控提供有价值的借鉴。 展开更多

关键词 乳品 PMA qPCR 酵母活菌计数

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