白细胞及其粘附分子活性表达在体外循环急性肺损伤中的作用 被引量：2

1

作者 仇万山 景华 +2 位作者 李德闽 李忠东 胡小南 《医学研究生学报》 CAS 2003年第1期30-33,共4页

目的 :探讨心内直视手术患者白细胞及其粘附分子表达在体外循环相关急性肺损伤中的作用。　方法 :随机连续选取 36例经检查确诊需在CPB下手术的心脏病患者 ,按病种分成 4组 :风心病单瓣组 (Ⅰ )及双瓣组 (Ⅱ )、先天性心脏病紫绀组 (Ⅲ ... 目的 :探讨心内直视手术患者白细胞及其粘附分子表达在体外循环相关急性肺损伤中的作用。　方法 :随机连续选取 36例经检查确诊需在CPB下手术的心脏病患者 ,按病种分成 4组 :风心病单瓣组 (Ⅰ )及双瓣组 (Ⅱ )、先天性心脏病紫绀组 (Ⅲ )及非紫绀组 (Ⅳ )。分别于术前 (A)、肝素化后 (B)、主动脉开放前 (C)及开放后半小时(D)、鱼精蛋白中和后 (E) 5个时间点 ,分别抽取左右心房血样各 5ml行白细胞计数和CD11b水平测定。观察术后不同时间点肺功能改变。每例患者手术前后构成自身对照。　结果 :各组间主动脉阻断时间和体外循环时间差异显著 (P <0 .0 5 )。所有患者术中各时间点白细胞计数及跨肺前后的差值均较术前明显升高 ,其中B点升高轻微 ,C、D、E点均明显升高。不同组间变化不一 ,甚至存在显著差异。CD11b作为激活白细胞的表面标记 ,其荧光强度变化与白细胞计数变化相似。　结论 :CPB可引起全身性炎症反应 ,导致白细胞激活。CD11b作为白细胞激活的表面标记物 ,在CPB导致的急性炎症粘附反应中起重要作用 ,可作为肺损伤。 展开更多

关键词 粘附分子 体外循环 急性肺损伤 白细胞 CD11B 分子活性表达

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木糖还原酶基因在大肠杆菌中活性表达 被引量：1

2

作者 王晓霞 方柏山 李雯君 《华侨大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2008年第3期383-386,共4页

利用聚合酶链式反应(PCR)方法,从休哈塔假丝酵母(Candida shehatae)基因组DNA扩增得到了木糖还原酶(Xylose Reductase,XR)基因,并在大肠杆菌中活性表达.重组菌在诱导6 h时的XR表达量最大,约为总蛋白的20%.实验考察不同质量浓度的乳糖和... 利用聚合酶链式反应(PCR)方法,从休哈塔假丝酵母(Candida shehatae)基因组DNA扩增得到了木糖还原酶(Xylose Reductase,XR)基因,并在大肠杆菌中活性表达.重组菌在诱导6 h时的XR表达量最大,约为总蛋白的20%.实验考察不同质量浓度的乳糖和异丙基--βD-硫代半乳糖苷(IPTG)对酶活性的影响,结果表明,重组菌在以乳糖作为诱导剂时酶活最高为232.38μkat.g-1,以IPTG作为诱导剂时酶活最高为206.04μkat.g-1. 展开更多

关键词 木糖还原酶 乳糖诱导 聚合酶链式反应 大肠杆菌 活性表达

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结核分枝杆菌腺苷磷酰硫酸激酶的异源活性表达和酶学性质

3

作者 胥睿睿 王阳 +1 位作者 史仲平 康振 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期49-56,共8页

PAPS是生物体内磺化反应的惟一活性磺酸基团供体。腺苷磷酰硫酸激酶是催化APS和ATP生成PAPS和ADP的一类酶。为实现PAPS的酶法合成,作者通过密码子优化来自结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis AUSMDU00018547)的腺苷磷酰硫酸激酶... PAPS是生物体内磺化反应的惟一活性磺酸基团供体。腺苷磷酰硫酸激酶是催化APS和ATP生成PAPS和ADP的一类酶。为实现PAPS的酶法合成,作者通过密码子优化来自结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis AUSMDU00018547)的腺苷磷酰硫酸激酶编码基因与共表达硫氧还蛋白TrxB,实现了腺苷磷酰硫酸激酶在大肠杆菌Escherichia coli BL21(DE3)中的异源高活性表达。采用His-Tag标签实现了对腺苷磷酰硫酸激酶的纯化,进一步酶学性质分析结果表明,重组腺苷磷酰硫酸激酶最适温度、最适pH以及比酶活分别为35℃、7.5和(1.26±0.08)U/mg。腺苷磷酰硫酸激酶的异源活性表达与酶学性质分析为未来实现酶法合成PAPS奠定了基础。 展开更多

关键词 PAPS 腺苷磷酰硫酸激酶 结核分枝杆菌 活性表达 活性分析

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毛白杨4-香豆酸:辅酶A连接酶可溶性原核表达及活性检测 被引量：20

4

作者 范丙友 胡诗宇 +1 位作者 陆海 蒋湘宁 《北京林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期1-8,共8页

为了进一步研究毛白杨4CL1的酶学特性，构建了毛白杨4CL1原核表达载体pQE31-4CL1．经IPTG诱导在大肠杆菌中表达了毛白杨4CL1蛋白，SDS-PAGE电泳分析表明该新蛋白的分子量为60kD，与预测值一致．对毛白杨4CL1蛋白在大肠杆菌中的表达体系... 为了进一步研究毛白杨4CL1的酶学特性，构建了毛白杨4CL1原核表达载体pQE31-4CL1．经IPTG诱导在大肠杆菌中表达了毛白杨4CL1蛋白，SDS-PAGE电泳分析表明该新蛋白的分子量为60kD，与预测值一致．对毛白杨4CL1蛋白在大肠杆菌中的表达体系进行了优化，确定IPTG的最佳浓度为0．4mmol／L，诱导时的菌液密度OD600为0．3-0．5，最佳表达时间为2h．37℃下表达的4CL1融合蛋白以包涵体的形式存在，没有生物学活性．当表达温度从37℃降低为28℃时，可溶性的有生物学活性的毛白杨4CL1蛋白诱导表达获得成功，表达量达11％．以耦联有Ni^2＋-NTA的琼脂糖为亲和层析填料，金属鳌合亲和柱层析一步纯化获得了电泳纯4CL1蛋白，4CL1蛋白对5种底物的比活性分别为：4-香豆酸3949．0pkat／mg，咖啡酸2214．0pkat／mg，阿魏酸715．0pkat／mg，肉桂酸84．9pkat／mg，而对芥子酸没有生物活性． 展开更多

关键词 毛白杨 4-香豆酸 辅酶A连接酶 可溶性原核表达 酶活性

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核桃JreIF1A基因启动子的鉴定及表达活性分析

5

作者 张英杰 闫鹏宇 +3 位作者 李文凯 崔茂凯 张彤 杨桂燕 《西部林业科学》 CAS 北大核心 2019年第5期15-21,共7页

真核生物翻译起始因子(eIF1)对逆境响应具有一定正响应;启动子能有效预测基因功能。以本研究鉴定获得核桃eIF1A基因(即JreIF1A)为其上游启动子,通过生物信息学、瞬时转化及GUS活性测定等不同技术,分析JreIF1A启动子的基本生物功能。结... 真核生物翻译起始因子(eIF1)对逆境响应具有一定正响应;启动子能有效预测基因功能。以本研究鉴定获得核桃eIF1A基因(即JreIF1A)为其上游启动子,通过生物信息学、瞬时转化及GUS活性测定等不同技术,分析JreIF1A启动子的基本生物功能。结果显示,JreIF1A上游1200bp启动子序列中包含众多与逆境响应相关的元件,病害响应相关的BIHD1OS、热胁迫响应相关的CCAATBOX1、Dof转录因子识别的DOFCOREZM、WRKY识别的WRKY71OS等。将JreIF1A启动子瞬时转入烟草测定GUS酶活性,发现JreIF1A启动子具有表达活性,且受干旱、盐、寒、热等胁迫诱导。表明JreIF1A启动子具有逆境响应表达活性,可能调控JreIF1A基因参与多重逆境响应。 展开更多

关键词 核桃 真核翻译起始因子 eIF1A基因 启动子 表达活性

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基于蛋白质半胱氨酸的活性蛋白表达谱分析

6

作者 姜中尧 牛雅新 +2 位作者 王楠 陈蓁蓁 唐波 《大学化学》 CAS 2023年第1期119-128,共10页

蛋白质中的半胱氨酸对维持和调控细胞内的氧化还原平衡起着重要作用,同时它们也是多种蛋白质的功能活性位点,参与诸多生理过程。此外,蛋白质中的半胱氨酸上所发生的一系列翻译后修饰也扩展了蛋白质功能的多样性。随着化学蛋白质组学的发... 蛋白质中的半胱氨酸对维持和调控细胞内的氧化还原平衡起着重要作用,同时它们也是多种蛋白质的功能活性位点,参与诸多生理过程。此外,蛋白质中的半胱氨酸上所发生的一系列翻译后修饰也扩展了蛋白质功能的多样性。随着化学蛋白质组学的发展,基于活性的蛋白表达谱(Activity-basedproteinprofiling,ABPP)分析技术在探究蛋白质半胱氨酸及其翻译后修饰方面取得了很多重要的研究成果。本文简要介绍了用于蛋白质半胱氨酸的活性蛋白表达谱分析方法,讨论了针对蛋白质半胱氨酸及其翻译后修饰的蛋白质组学领域的最新研究,并对该领域的未来发展趋势进行了展望。 展开更多

关键词 半胱氨酸 蛋白质翻译后修饰 活性蛋白表达谱 化学探针

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水通道蛋白1在老年性白内障及透明晶状体前囊膜上皮细胞的表达 被引量：4

7

作者 王玉萍 张文芳 鲁建华 《临床眼科杂志》 2005年第3期195-197,289,共4页

目的明确水通道蛋白1(aquaporin1,AQP1)在透明晶状体及老年性白内障晶状体上皮细胞及前囊膜的表达及分布,并初步探讨AQP1在老年性白内障发病中的重要作用。方法收集52例老年性白内障及10例正常透明晶状体前囊膜,通过HE染色和免疫组化方... 目的明确水通道蛋白1(aquaporin1,AQP1)在透明晶状体及老年性白内障晶状体上皮细胞及前囊膜的表达及分布,并初步探讨AQP1在老年性白内障发病中的重要作用。方法收集52例老年性白内障及10例正常透明晶状体前囊膜,通过HE染色和免疫组化方法检测AQP1的表达。结果老年性白内障及正常透明晶状体上皮细胞中均可见AQP1的表达,透明晶状体组中AQP1的阳性细胞表达率(100%)显著高于老年性白内障组(53.8%)(P<0.05)。而在晶状体纤维中未见表达。结论晶状体上皮细胞是晶状体代谢最活跃的部位,终身进行有丝分裂,并移行至赤道部分化成晶状体纤维。晶状体上皮细胞有AQP1的活性表达,这对于维持晶状体上皮细胞一定的增殖潜能,保证晶状体的生理动态平衡和晶状体的透明性起到了重要的作用。提示AQP1在老年性白内障晶状体前囊膜及上皮细胞中的异常表达与老年性白内障的发生密切相关,具体调控机制有待进一步研究。 展开更多

关键词 晶状体前囊膜 老年性白内障 水通道蛋白1 晶状体上皮细胞 AQP1 透明晶状体 晶状体纤维 免疫组化方法 自内障 晶状体代谢 初步探讨 HE染色 阳性细胞 有丝分裂 活性表达 增殖潜能 动态平衡 异常表达 调控机制 表达及 表达率

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黄鳝Dmrt1基因5′端侧翼序列克隆和报告基因载体活性分析

8

作者 杜怡芳 朱信超 +1 位作者 李贤慧 曲宪成 《淡水渔业》 CSCD 北大核心 2022年第3期52-58,共7页

为深入研究黄鳝Dmrt1基因5′端侧翼序列在性别决定与分化中细胞通路之间的转录调控作用。本研究以黄鳝基因组DNA为模板,PCR扩增出Dmrt1基因5′端侧翼序列,并对该序列进行了生物信息学分析,然后将克隆获得的Dmrt1基因5′端侧翼序列构建到... 为深入研究黄鳝Dmrt1基因5′端侧翼序列在性别决定与分化中细胞通路之间的转录调控作用。本研究以黄鳝基因组DNA为模板,PCR扩增出Dmrt1基因5′端侧翼序列,并对该序列进行了生物信息学分析,然后将克隆获得的Dmrt1基因5′端侧翼序列构建到PGL3-enhancer载体中,命名为pGL3-enhancer-Dmrt1,最后将pGL3-enhancer-Dmrt1和内参质粒pRL-TK共转染至HEK293细胞,采用双荧光素酶检测系统对Dmrt1基因5′端侧翼的启动活性进行了检测。实验结果显示:克隆获得的Dmrt1基因5′端侧翼序列为1519 bp;利用TESS-Transcription Element Search System转录因子结合位点在线预测数据库对黄鳝Dmrt1基因5′端侧翼序列进行预测分析结果表明,该序列存在AP-1、Oct-1、C/EBPa和GATAx等真核生物通用的转录因子结合位点以及与性别相关基因的蛋白结合位点,如SRY、Sox3和Sox5等;双荧光素酶检测结果显示,该5′端侧翼序列具有启动活性。 展开更多

关键词 黄鳝(Monopterus albus) Dmrt1基因5′端侧翼启动子序列 克隆 报告基因 表达活性

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端粒酶与卵巢功能

9

作者 夏天 侯莉莉 韩冰 《国外医学（计划生育分册）》 2005年第4期197-200,共4页

端粒酶在保持端粒稳定、基因组完整、细胞长期的活性和潜在的继续增殖能力等方面有重要作用,与卵巢卵母细胞及颗粒细胞等的增殖分化、凋亡及激素分泌有着密切关系。为说明端粒酶与卵巢功能调节之间的密切关系,指导药物通过干预端粒酶活... 端粒酶在保持端粒稳定、基因组完整、细胞长期的活性和潜在的继续增殖能力等方面有重要作用,与卵巢卵母细胞及颗粒细胞等的增殖分化、凋亡及激素分泌有着密切关系。为说明端粒酶与卵巢功能调节之间的密切关系,指导药物通过干预端粒酶活性来调节卵巢功能的应用,对其在卵巢中的表达、与甾体激素的关系、在卵泡发育及闭锁中的作用、其活性表达的调节以及临床中的应用做一综述。 展开更多

关键词 卵巢功能调节 临床中的应用 密切关系 端粒酶活性 增殖能力 增殖分化 颗粒细胞 卵母细胞 激素分泌 甾体激素 卵泡发育 活性表达 基因组

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rd29A启动子克隆及对低温响应的研究 被引量：5

10

作者 白斌 张金文 +1 位作者 郭志鸿 陈正华 《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 2004年第3期249-254,共6页

研究从拟南芥(Arabidopsis thaliana)基因组DNA克隆了rd29A基因启动子,序列分析表明该启动子具有两个干旱、高盐和低温响应顺式作用元件(DRE),在851～856 bp碱基处为TATA box,其它主要调控区域也存在。然后,分别用rd29A启动子和CaMV 35... 研究从拟南芥(Arabidopsis thaliana)基因组DNA克隆了rd29A基因启动子,序列分析表明该启动子具有两个干旱、高盐和低温响应顺式作用元件(DRE),在851～856 bp碱基处为TATA box,其它主要调控区域也存在。然后,分别用rd29A启动子和CaMV 35S启动子,构建了具有绿色荧光蛋白(GFP)基因的植物表达载体pBIG和pBIRG。通过基因枪导入法转化洋葱表皮细胞,在25 ℃和4 ℃条件下培养16 h后,用荧光显微镜观察GFP基因的表达水平。结果表明,在低温条件下,rd29A启动子的活性明显高于CaMV 35S启动子,说明rd29A启动子是一低温诱导型启动子,可满足在低温条件下使目的基因在转基因植物中进行表达的目的。 展开更多

关键词 RD29A启动子 绿色荧光蛋白基因 基因枪法 低温诱导 表达活性

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生物转化法生产茶氨酸的重组大肠杆菌的构建 被引量：13

11

作者 郭亮 沈微 +1 位作者 王正祥 诸葛健 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期41-45,共5页

为构建生物转化法生产茶氨酸的基因工程菌,作者分析了影响大肠杆菌高效表达γ 谷氨酰基转肽酶的几个主要因素.将大肠杆菌 JM109 的 ggt基因接入两种不同的质粒中后,转化大肠杆菌JM109,并在一定的条件下进行表达.通过对比 E coli JM109 ... 为构建生物转化法生产茶氨酸的基因工程菌,作者分析了影响大肠杆菌高效表达γ 谷氨酰基转肽酶的几个主要因素.将大肠杆菌 JM109 的 ggt基因接入两种不同的质粒中后,转化大肠杆菌JM109,并在一定的条件下进行表达.通过对比 E coli JM109 和转化子的γ 谷氨酰基转肽酶表达活性的不同,探讨了ggt基因的拷贝数、启动子的强弱等几个因素对γ 谷氨酰基转肽酶高效表达的影响.实验表明,将含有自身信号肽和启动子的 E coli JM109 的 ggt基因接入高拷贝的质粒pUC18中,仅提高 ggt基因的拷贝数不能增加γ 谷氨酰基转肽酶的表达量.将含有自身信号肽但不含有自身启动子的E coli JM109的ggt基因接入具有 tac启动子的表达载体 pEtac中,发现在强启动子tac的控制下,γ 谷氨酰基转肽酶的表达量提高至出发菌株的 2 3 倍.将构建的工程菌用于生物转化法生成茶氨酸,底物转化率相应地提高至出发菌株的1 7倍. 展开更多

关键词 生物转化法 重组大肠杆菌 茶氨酸 构建 E.coli 高效表达 基因工程菌 ggt PUC18 作者分析 表达活性 表达载体 强启动子 拷贝数 信号肽 表达量 tac 肽酶 酰基 接入 转化子 转化率 质粒 菌株 底物

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人体生物化学

12

《国外科技资料目录（医药卫生）》 2000年第3期10-11,共2页

0007668 神经内分泌蛋白782对蛋白分解酶转化和体内前蛋白转化酶2的激活是必需的/Seidel B//DNA Cell Biol.-1998,17(12).-1017～1029 一军大0007669 解除对 CDK2-或 CDK3-缔合激酶活性表达控制,增强 c-Myc 诱导凋亡/Braun K//DNA Cell ... 0007668 神经内分泌蛋白782对蛋白分解酶转化和体内前蛋白转化酶2的激活是必需的/Seidel B//DNA Cell Biol.-1998,17(12).-1017～1029 一军大0007669 解除对 CDK2-或 CDK3-缔合激酶活性表达控制,增强 c-Myc 诱导凋亡/Braun K//DNA Cell Biol.-1998,17(9).-789～798 展开更多

关键词 神经内分泌 蛋白分解 活性表达 酶转化 转化酶 人体生物化学 诱导凋亡 载脂蛋白 小鼠 催乳素受体基因

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毒物学(毒理学)

13

《国外科技资料目录（医药卫生）》 1998年第12期196-196,共1页

关键词 毒理学 毒物学 细菌内毒素 活性表达 医疗 现代 霍乱毒素 外毒素 葡萄糖 氨基酸

全文增补中

同一基因可有完全不同的功能

14

《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期150-150,共1页

同源染色体基因表达活性不同的现象,称为基因印记。据美国物理学家组织网报道,英国巴斯大学科学家近日发现了一种名为Grb10的基因,与通常的印记基因表达规则不符的是,它从父母双方遗传下来的等位基因作用截然不同。相关研究发表在近期... 同源染色体基因表达活性不同的现象,称为基因印记。据美国物理学家组织网报道,英国巴斯大学科学家近日发现了一种名为Grb10的基因,与通常的印记基因表达规则不符的是,它从父母双方遗传下来的等位基因作用截然不同。相关研究发表在近期出版的《自然》杂志上。 展开更多

关键词 基因印记 功能 《自然》杂志 同源染色体 表达活性 物理学家 基因表达 基因作用

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