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基于表面等离子共振技术捕获法的CYFRA21-1蛋白活性浓度定量方法研究
1
作者
占宇华
刘鹏鹏
+3 位作者
梁媛媛
俞晓平
宋阳
申屠旭萍
《分析测试学报》
北大核心
2025年第7期1247-1253,共7页
基于表面等离子体共振(SPR)技术的无标浓度分析(CFCA)方法可以不借助任何标准品,仅利用已知的蛋白质扩散系数和在扩散受限条件下测定蛋白的活性浓度。该研究提出了一种捕获形式下的CFCA方法(CCFCA),用于测定CYFRA21-1蛋白活性浓度。结...
基于表面等离子体共振(SPR)技术的无标浓度分析(CFCA)方法可以不借助任何标准品,仅利用已知的蛋白质扩散系数和在扩散受限条件下测定蛋白的活性浓度。该研究提出了一种捕获形式下的CFCA方法(CCFCA),用于测定CYFRA21-1蛋白活性浓度。结果表明,CCFCA法的测定值为0.67 mg/mL,日间精密度为4.6%,而CFCA法的测定值为0.7 mg/mL,日间精密度为6.5%。此外,抗体偶联水平一直是限制CFCA使用的关键性因素,若芯片储存方法或活化方法不当,将导致芯片表面偶联抗体水平达不到CFCA方法所要求的克服传质限制要求(CFCA进行拟合方法学要求QC_(ratio)>0.2),导致测定结果不可靠。由于捕获法能够在Protein G蛋白辅助下使抗体的空间朝向更为合适,使得在低偶联水平下CCFCA法的检测结果仍准确稳定。与经典CFCA方法相比,CCFCA法检测结果可靠,单块芯片通过再生可用于多个抗体-分析物检测,可作为未来测定蛋白质活性浓度的更好选择。
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关键词
无标定量
CYFRA21-1
活性蛋白浓度
捕获法
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职称材料
题名
基于表面等离子共振技术捕获法的CYFRA21-1蛋白活性浓度定量方法研究
1
作者
占宇华
刘鹏鹏
梁媛媛
俞晓平
宋阳
申屠旭萍
机构
中国计量大学生命科学学院/浙江省生物计量及检验检疫技术重点实验室
浙江方圆检测集团股份有限公司
浙江省市场监管生物安全重点实验室
出处
《分析测试学报》
北大核心
2025年第7期1247-1253,共7页
基金
国家重点研发计划(2022YFF0608402)
浙江省市场监管生物安全重点实验室课题(2024BS002)。
文摘
基于表面等离子体共振(SPR)技术的无标浓度分析(CFCA)方法可以不借助任何标准品,仅利用已知的蛋白质扩散系数和在扩散受限条件下测定蛋白的活性浓度。该研究提出了一种捕获形式下的CFCA方法(CCFCA),用于测定CYFRA21-1蛋白活性浓度。结果表明,CCFCA法的测定值为0.67 mg/mL,日间精密度为4.6%,而CFCA法的测定值为0.7 mg/mL,日间精密度为6.5%。此外,抗体偶联水平一直是限制CFCA使用的关键性因素,若芯片储存方法或活化方法不当,将导致芯片表面偶联抗体水平达不到CFCA方法所要求的克服传质限制要求(CFCA进行拟合方法学要求QC_(ratio)>0.2),导致测定结果不可靠。由于捕获法能够在Protein G蛋白辅助下使抗体的空间朝向更为合适,使得在低偶联水平下CCFCA法的检测结果仍准确稳定。与经典CFCA方法相比,CCFCA法检测结果可靠,单块芯片通过再生可用于多个抗体-分析物检测,可作为未来测定蛋白质活性浓度的更好选择。
关键词
无标定量
CYFRA21-1
活性蛋白浓度
捕获法
Keywords
calibration free concentration analysis
CYFRA21-1
active protein concentration
capture method
分类号
O657.63 [理学—分析化学]
O629.7 [理学—有机化学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
基于表面等离子共振技术捕获法的CYFRA21-1蛋白活性浓度定量方法研究
占宇华
刘鹏鹏
梁媛媛
俞晓平
宋阳
申屠旭萍
《分析测试学报》
北大核心
2025
0
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参考文献
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