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基于重组酶聚合酶扩增-CRISPR/Cas12a的沙门氏菌可视化检测方法的建立
1
作者
黄建飞
陈晶
+3 位作者
张倩
肖承荣
吴燕蕙
赖心田
《食品安全质量检测学报》
2025年第8期122-130,共9页
目的建立基于重组酶聚合酶扩增-CRISPR/Cas12a的沙门氏菌可视化检测方法。方法本研究将重组酶聚合酶扩增(recombinase polymerase amplification,RPA)技术与成簇规律间隔短回文重复序列及其相关蛋白12a(clustered regularly interspaced...
目的建立基于重组酶聚合酶扩增-CRISPR/Cas12a的沙门氏菌可视化检测方法。方法本研究将重组酶聚合酶扩增(recombinase polymerase amplification,RPA)技术与成簇规律间隔短回文重复序列及其相关蛋白12a(clustered regularly interspaced short palindromic repeats/associated protein 12a,CRISPR/Cas12a)系统相结合,以沙门氏菌invA作为目标基因,设计并合成RPA引物和CRISPR引导RNA(CRISPR-derived RNA,crRNA),通过荧光法和试纸条两种方法读取结果。对优化的RPA-CRISPR/Cas12检测体系进行特异性和灵敏度实验,并应用于食品样本检测。结果本研究成功研制纳米金核酸试纸条,建立的RPA-CRISPR/Cas12a体系可在1.5 h内特异性完成沙门氏菌的检测,灵敏度为80 CFU/mL。利用此方法对21个食品样本进行检测,荧光法、试纸条法与国家标准法检测结果完全一致,沙门氏菌检出率为4.8%。结论本研究建立的沙门氏菌RPA-CRISPR/Cas12a可视化检测方法具有高特异性和灵敏度,在沙门氏菌的现场快速检测方面具有应用价值。
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关键词
沙门氏菌
成
簇
规律间隔短回文重复序列及其相关蛋白12a
试纸条
重组酶聚合酶扩增
可视
化
检测
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职称材料
基于DNA模板合成的银簇建立“点亮型”荧光法检测卡那霉素
被引量:
1
2
作者
林碧霞
蒙佩怡
+5 位作者
陈梦玲
吴峻宇
冷江东
黄月梅
杨诗意
俞英
《分析测试学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第9期1051-1058,共8页
以DNA为模板合成弱荧光的银纳米簇。利用DNA模板中的适配体序列识别目标卡那霉素后,形成发夹结构使适配体序列上的G碱基和C碱基靠近银簇,导致银簇荧光增强。同时,DNA二级结构的改变使银纳米粒子形成小的银纳米簇也促使银簇的荧光增强。...
以DNA为模板合成弱荧光的银纳米簇。利用DNA模板中的适配体序列识别目标卡那霉素后,形成发夹结构使适配体序列上的G碱基和C碱基靠近银簇,导致银簇荧光增强。同时,DNA二级结构的改变使银纳米粒子形成小的银纳米簇也促使银簇的荧光增强。据此建立“点亮型”荧光法对卡那霉素进行定量分析。银簇荧光增强比值与卡那霉素浓度在0.075~8.0μmol/L范围内呈线性关系,线性方程为F/F0=0.616 8C+0.927 6,检出限为36 nmol/L。卡那霉素在牛奶和蜂蜜样品中的回收率为92.4%~112%。此外,随着卡那霉素加入浓度的增加,银簇的橙色荧光逐渐加深,根据荧光颜色深度可对卡那霉素进行可视化半定量检测。该方法具有灵敏度高、选择性好的优点,可用于复杂食品样品中痕量卡那霉素的定量检测。
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关键词
DNA模板
银纳米
簇
(AgNCs)
卡那霉素
可视
化
检测
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职称材料
基于硼酸酯的^(19)F磁共振分子探针的设计合成及活体深组织活性氧物种的激活响应成像
3
作者
李奥
李凌轩
+5 位作者
左翠翠
陈传凯
樊一凡
步逸凡
林泓域
高锦豪
《高等学校化学学报》
SCIE
EI
CAS
CSCD
北大核心
2022年第12期114-123,共10页
活性氧簇(ROS),如过氧化氢,在生物体内的各种生理和病理过程中发挥着重要作用.生物体内活性氧簇水平的异常与多种疾病(炎症、肿瘤和器官损伤等)密切相关,使ROS监测成为研究和诊断这些疾病的重要工具.目前,实现活体内深组织中的活性氧簇...
活性氧簇(ROS),如过氧化氢,在生物体内的各种生理和病理过程中发挥着重要作用.生物体内活性氧簇水平的异常与多种疾病(炎症、肿瘤和器官损伤等)密切相关,使ROS监测成为研究和诊断这些疾病的重要工具.目前,实现活体内深组织中的活性氧簇成像仍然面临挑战.本文设计并合成了一种响应型的^(19)F磁共振成像(MRI)探针(Gd-DPBF),并将其用于实现对活体内通用活性氧簇的检测和成像.该探针由钆螯合物通过活性氧簇响应的芳香硼酸酯键与含氟砌块相连接构成.体外和体内成像实验结果证实,该探针可以实现在活体荷瘤小鼠中针对肿瘤中高表达的活性氧进行检测和成像,展示了其在生物体内对活性氧簇相关生理过程进行深组织、零生物背景成像方面的潜力.
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关键词
响应型^(19)F磁共振成像
分子探针
活性氧簇的可视化检测
基于反应的指示剂置换分析
肿瘤成像
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职称材料
题名
基于重组酶聚合酶扩增-CRISPR/Cas12a的沙门氏菌可视化检测方法的建立
1
作者
黄建飞
陈晶
张倩
肖承荣
吴燕蕙
赖心田
机构
深圳市计量质量检测研究院
出处
《食品安全质量检测学报》
2025年第8期122-130,共9页
基金
深圳市科创计划资助项目(KCXFZ20211020165404007)。
文摘
目的建立基于重组酶聚合酶扩增-CRISPR/Cas12a的沙门氏菌可视化检测方法。方法本研究将重组酶聚合酶扩增(recombinase polymerase amplification,RPA)技术与成簇规律间隔短回文重复序列及其相关蛋白12a(clustered regularly interspaced short palindromic repeats/associated protein 12a,CRISPR/Cas12a)系统相结合,以沙门氏菌invA作为目标基因,设计并合成RPA引物和CRISPR引导RNA(CRISPR-derived RNA,crRNA),通过荧光法和试纸条两种方法读取结果。对优化的RPA-CRISPR/Cas12检测体系进行特异性和灵敏度实验,并应用于食品样本检测。结果本研究成功研制纳米金核酸试纸条,建立的RPA-CRISPR/Cas12a体系可在1.5 h内特异性完成沙门氏菌的检测,灵敏度为80 CFU/mL。利用此方法对21个食品样本进行检测,荧光法、试纸条法与国家标准法检测结果完全一致,沙门氏菌检出率为4.8%。结论本研究建立的沙门氏菌RPA-CRISPR/Cas12a可视化检测方法具有高特异性和灵敏度,在沙门氏菌的现场快速检测方面具有应用价值。
关键词
沙门氏菌
成
簇
规律间隔短回文重复序列及其相关蛋白12a
试纸条
重组酶聚合酶扩增
可视
化
检测
Keywords
Salmonella
clustered regularly interspaced short palindromic repeats/associated protein 12a
test strip
recombinase polymerase amplification
visual detection
分类号
TS207.4 [轻工技术与工程—食品科学]
O657 [理学—分析化学]
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职称材料
题名
基于DNA模板合成的银簇建立“点亮型”荧光法检测卡那霉素
被引量:
1
2
作者
林碧霞
蒙佩怡
陈梦玲
吴峻宇
冷江东
黄月梅
杨诗意
俞英
机构
华南师范大学广州市生物医药分析化学重点实验室
出处
《分析测试学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第9期1051-1058,共8页
基金
国家自然科学基金资助项目(21575043,21275056)
广州市创新平台开放共享专项项目(15180001)
文摘
以DNA为模板合成弱荧光的银纳米簇。利用DNA模板中的适配体序列识别目标卡那霉素后,形成发夹结构使适配体序列上的G碱基和C碱基靠近银簇,导致银簇荧光增强。同时,DNA二级结构的改变使银纳米粒子形成小的银纳米簇也促使银簇的荧光增强。据此建立“点亮型”荧光法对卡那霉素进行定量分析。银簇荧光增强比值与卡那霉素浓度在0.075~8.0μmol/L范围内呈线性关系,线性方程为F/F0=0.616 8C+0.927 6,检出限为36 nmol/L。卡那霉素在牛奶和蜂蜜样品中的回收率为92.4%~112%。此外,随着卡那霉素加入浓度的增加,银簇的橙色荧光逐渐加深,根据荧光颜色深度可对卡那霉素进行可视化半定量检测。该方法具有灵敏度高、选择性好的优点,可用于复杂食品样品中痕量卡那霉素的定量检测。
关键词
DNA模板
银纳米
簇
(AgNCs)
卡那霉素
可视
化
检测
Keywords
DNA template
silver nanoclusters(AgNCs)
kanamycin
visual detection
分类号
O657.3 [理学—分析化学]
TQ460.72 [医药卫生—药物分析学]
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职称材料
题名
基于硼酸酯的^(19)F磁共振分子探针的设计合成及活体深组织活性氧物种的激活响应成像
3
作者
李奥
李凌轩
左翠翠
陈传凯
樊一凡
步逸凡
林泓域
高锦豪
机构
厦门大学化学化工学院化学生物学系
出处
《高等学校化学学报》
SCIE
EI
CAS
CSCD
北大核心
2022年第12期114-123,共10页
基金
国家自然科学基金(批准号:22125702,22077107,92059109)
福建省自然科学基金(批准号:2020J02001)
+1 种基金
厦门市青年创新基金(批准号:3502Z20206051)
中国博士后科学基金(批准号:2022M712657)资助。
文摘
活性氧簇(ROS),如过氧化氢,在生物体内的各种生理和病理过程中发挥着重要作用.生物体内活性氧簇水平的异常与多种疾病(炎症、肿瘤和器官损伤等)密切相关,使ROS监测成为研究和诊断这些疾病的重要工具.目前,实现活体内深组织中的活性氧簇成像仍然面临挑战.本文设计并合成了一种响应型的^(19)F磁共振成像(MRI)探针(Gd-DPBF),并将其用于实现对活体内通用活性氧簇的检测和成像.该探针由钆螯合物通过活性氧簇响应的芳香硼酸酯键与含氟砌块相连接构成.体外和体内成像实验结果证实,该探针可以实现在活体荷瘤小鼠中针对肿瘤中高表达的活性氧进行检测和成像,展示了其在生物体内对活性氧簇相关生理过程进行深组织、零生物背景成像方面的潜力.
关键词
响应型^(19)F磁共振成像
分子探针
活性氧簇的可视化检测
基于反应的指示剂置换分析
肿瘤成像
Keywords
Activatable^(19)F MRI
Molecular probe
Visualizing reactive oxygen species
Reaction-based indicated assay(RIA)
Tumor imaging
分类号
O657 [理学—分析化学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
基于重组酶聚合酶扩增-CRISPR/Cas12a的沙门氏菌可视化检测方法的建立
黄建飞
陈晶
张倩
肖承荣
吴燕蕙
赖心田
《食品安全质量检测学报》
2025
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
基于DNA模板合成的银簇建立“点亮型”荧光法检测卡那霉素
林碧霞
蒙佩怡
陈梦玲
吴峻宇
冷江东
黄月梅
杨诗意
俞英
《分析测试学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
基于硼酸酯的^(19)F磁共振分子探针的设计合成及活体深组织活性氧物种的激活响应成像
李奥
李凌轩
左翠翠
陈传凯
樊一凡
步逸凡
林泓域
高锦豪
《高等学校化学学报》
SCIE
EI
CAS
CSCD
北大核心
2022
0
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