根系可分泌表达枯草芽孢杆菌纤溶酶B a c illu s s u b tilis f i b r i n o l y t i c e n z y m e,B S F E的转基因烟草在0、8、16和24h的光照条件下,在25℃、30℃和昼30℃鲆?25℃、16h?8h光暗培养条件下和通气与不通气的水培处理下,...根系可分泌表达枯草芽孢杆菌纤溶酶B a c illu s s u b tilis f i b r i n o l y t i c e n z y m e,B S F E的转基因烟草在0、8、16和24h的光照条件下,在25℃、30℃和昼30℃鲆?25℃、16h?8h光暗培养条件下和通气与不通气的水培处理下,其水培液B S F E活性呈抛物线型变化趋势.延长光照时间可加快其根系向水培液中分泌B S F E,峰值出现提前,但培养后期水培液B S F E活性急剧降低.四个时间处理相比,8、16h光照处理能维持该转基因烟草根系B S F E分泌的较高水平.建议生产中使用16h以上光照培养,适当缩短培养液更新周期,以8～10d为宜.昼30℃鲆?25℃培养条件下水培液B S F E活性在峰值出现前介于30℃和25℃培养条件之间,而峰值出现后则高于30℃和25℃培养条件,说明温度对器官生长、代谢的影响是造成3种温度处理下水培液B S F E活性差异的主要原因.通气处理可提高该转基因烟草根系B S F E的分泌水平.但在1～15d的培养期内,通气处理与不通气处理间不存在显著差异.这说明通气处理对短时间培养并不必要.展开更多
以从牛肉酱中筛选的1株高产纤溶酶的枯草芽孢杆菌为材料,进行发酵产酶。其发酵液经过硫酸铵盐析、Sephadex G-100凝胶过滤、C M SepharoseCL-6B离子交换层析和电泳制备,得到电泳纯的枯草芽孢杆菌纤溶酶;其分子质量为32.5ku;pI10.9～11.8...以从牛肉酱中筛选的1株高产纤溶酶的枯草芽孢杆菌为材料,进行发酵产酶。其发酵液经过硫酸铵盐析、Sephadex G-100凝胶过滤、C M SepharoseCL-6B离子交换层析和电泳制备,得到电泳纯的枯草芽孢杆菌纤溶酶;其分子质量为32.5ku;pI10.9～11.8;具有直接溶解纤维蛋白和激活纤溶酶原的双重作用;胰蛋白酶对此酶无降解作用,对其纤溶活性无影响;该酶在pH4.0～13.0稳定,对温度的适应范围较广。展开更多
对蜡状芽孢杆菌Bc-05菌株的发酵上清液经硫酸铵分级沉淀、DEAE Sepharose Fast Flow阴离子交换层析所获得的纤溶酶进行性质研究.结果表明:经纤维蛋白平板法检测该酶有直接水解纤维蛋白和激活纤溶酶原的双重作用,最适作用温度37℃,最适pH...对蜡状芽孢杆菌Bc-05菌株的发酵上清液经硫酸铵分级沉淀、DEAE Sepharose Fast Flow阴离子交换层析所获得的纤溶酶进行性质研究.结果表明:经纤维蛋白平板法检测该酶有直接水解纤维蛋白和激活纤溶酶原的双重作用,最适作用温度37℃,最适pH=8.0,在pH=8.0条件下25℃和37℃放置24 h酶活力仍保持77.52%和78.96%,该酶体外对兔血凝块有明显的溶解作用;Ca2+,Mn2+离子对该酶具有激活作用,而Cu2+,Fe3+完全抑制其纤溶活性,PMSF,EDTA和DTT对该酶有抑制作用,说明活性中心含有二硫键、金属离子和丝氨酸;测其N端10个氨基酸序列为NH2-Val-Thr-Pro-Thr-Asn-Ala-Val-Asn-Thr-Gly,与其他生物来源的纤溶酶相比较没有同源性.展开更多
文摘根系可分泌表达枯草芽孢杆菌纤溶酶B a c illu s s u b tilis f i b r i n o l y t i c e n z y m e,B S F E的转基因烟草在0、8、16和24h的光照条件下,在25℃、30℃和昼30℃鲆?25℃、16h?8h光暗培养条件下和通气与不通气的水培处理下,其水培液B S F E活性呈抛物线型变化趋势.延长光照时间可加快其根系向水培液中分泌B S F E,峰值出现提前,但培养后期水培液B S F E活性急剧降低.四个时间处理相比,8、16h光照处理能维持该转基因烟草根系B S F E分泌的较高水平.建议生产中使用16h以上光照培养,适当缩短培养液更新周期,以8～10d为宜.昼30℃鲆?25℃培养条件下水培液B S F E活性在峰值出现前介于30℃和25℃培养条件之间,而峰值出现后则高于30℃和25℃培养条件,说明温度对器官生长、代谢的影响是造成3种温度处理下水培液B S F E活性差异的主要原因.通气处理可提高该转基因烟草根系B S F E的分泌水平.但在1～15d的培养期内,通气处理与不通气处理间不存在显著差异.这说明通气处理对短时间培养并不必要.
文摘以从牛肉酱中筛选的1株高产纤溶酶的枯草芽孢杆菌为材料,进行发酵产酶。其发酵液经过硫酸铵盐析、Sephadex G-100凝胶过滤、C M SepharoseCL-6B离子交换层析和电泳制备,得到电泳纯的枯草芽孢杆菌纤溶酶;其分子质量为32.5ku;pI10.9～11.8;具有直接溶解纤维蛋白和激活纤溶酶原的双重作用;胰蛋白酶对此酶无降解作用,对其纤溶活性无影响;该酶在pH4.0～13.0稳定,对温度的适应范围较广。
文摘对蜡状芽孢杆菌Bc-05菌株的发酵上清液经硫酸铵分级沉淀、DEAE Sepharose Fast Flow阴离子交换层析所获得的纤溶酶进行性质研究.结果表明:经纤维蛋白平板法检测该酶有直接水解纤维蛋白和激活纤溶酶原的双重作用,最适作用温度37℃,最适pH=8.0,在pH=8.0条件下25℃和37℃放置24 h酶活力仍保持77.52%和78.96%,该酶体外对兔血凝块有明显的溶解作用;Ca2+,Mn2+离子对该酶具有激活作用,而Cu2+,Fe3+完全抑制其纤溶活性,PMSF,EDTA和DTT对该酶有抑制作用,说明活性中心含有二硫键、金属离子和丝氨酸;测其N端10个氨基酸序列为NH2-Val-Thr-Pro-Thr-Asn-Ala-Val-Asn-Thr-Gly,与其他生物来源的纤溶酶相比较没有同源性.
