泛素-蛋白酶体抑制剂MG132对糖尿病大鼠视网膜上Smad7表达的影响 被引量：3

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作者 苟文军 刘思源 覃冬 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2012年第11期1014-1016,1020,共4页

目的探讨泛素-蛋白酶体抑制剂MG132对链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱导的糖尿病(diabetes mellitus,DM)大鼠模型视网膜上Smad7表达的影响,研究Smad7的表达与糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)的关系,为预防及早期治疗DR提... 目的探讨泛素-蛋白酶体抑制剂MG132对链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱导的糖尿病(diabetes mellitus,DM)大鼠模型视网膜上Smad7表达的影响,研究Smad7的表达与糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)的关系,为预防及早期治疗DR提供一种新思路。方法选择60只健康的雄性Wistar大鼠随机分为3组:正常对照组、DM+MG132组和DM组。采用一次性腹腔注射50mg.kg-1STZ的方法建立DM大鼠模型。自DM模型建立后第3天起,DM+MG132组大鼠每天给予0.1mg.kg-1MG132DMSO液腹腔注射,正常对照组和DM组每天给予0.1mg.kg-1DMSO液腹腔注射。于造模后8周和12周时处死各组大鼠,然后摘出眼球,制成眼杯,采用免疫组化的方法检测各组大鼠视网膜上Smad7蛋白的表达。各指标均采用均数±标准差表示,多组间均数比较采用单因素方差分析,组间的多重比较采用q检验法,以P<0.05为差异有统计学意义。结果在正常对照组大鼠视网膜上Smad7蛋白高表达;DM组造模后8周和12周时大鼠视网膜上Smad7的光密度(optical densi-ty,OD)值分别是0.3408±0.0007、0.1193±0.0028,明显低于正常对照组(分别为0.8793±0.0015和0.9605±0.0021)(均为P<0.01);DM+MG132组造模后8周和12周时大鼠视网膜上Smad7的OD值分别是0.4864±0.0015、0.5904±0.0122,亦明显低于正常对照组(均为P<0.01);DM+MG132组造模后8周和12周时大鼠视网膜上Smad7的表达较DM组明显增加(均为P<0.01)。结论泛素-蛋白酶体抑制剂MG132能够有效抑制Smad7的表达,对DM大鼠视网膜具有保护作用,因此有望成为DR的新的治疗手段。 展开更多

关键词 泛素-蛋白酶体抑制剂 糖尿病视网膜病变 TGF-β Smads信号转导通路 SMAD7

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蛋白酶体抑制剂MG132对慢性缺氧致小鼠记忆损伤的作用及其机制

2

作者 董华平 李鹏 +6 位作者 李晓栩 周思敏 肖衡 谢佳新 黄沛 吴玉 钟志凤 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期449-458,共10页

目的探讨蛋白酶体抑制剂MG132对慢性缺氧所致小鼠记忆功能损伤的作用及其机制。方法(1)利用低氧工作站构建小鼠中脑多巴胺能神经元MN9D细胞缺氧损伤模型。将MN9D细胞分为常氧组及缺氧12 h、24 h和48 h组,观察缺氧对MN9D细胞中酪氨酸羟化... 目的探讨蛋白酶体抑制剂MG132对慢性缺氧所致小鼠记忆功能损伤的作用及其机制。方法(1)利用低氧工作站构建小鼠中脑多巴胺能神经元MN9D细胞缺氧损伤模型。将MN9D细胞分为常氧组及缺氧12 h、24 h和48 h组,观察缺氧对MN9D细胞中酪氨酸羟化酶(TH)、泛素的K48链(Ub-K48)和Ub-K63表达的影响;将MN9D细胞分为常氧组、缺氧组、缺氧+MG132(25、50、100、200)μmol/L组,观察MG132对缺氧细胞中上述蛋白表达的影响。(2)利用低压舱建立低压缺氧小鼠记忆功能损伤模型。将C57小鼠随机分为常氧组、缺氧3 d组、缺氧21 d组,每组10只,观察低压低氧对小鼠中脑黑质致密部(SNc)TH、Ub-K48和Ub-K63表达的影响;将小鼠随机分为常氧组、缺氧21 d组、缺氧21 d+MG132组,每组8只,观察MG132对缺氧所致小鼠空间记忆损伤的影响。(3)采用Western blotting检测不同缺氧时长及MG132预处理再低氧处理的MN9D细胞中TH、Ub-K48和Ub-K63的蛋白表达水平;采用新物体识别测试检测各组小鼠记忆功能,免疫荧光染色检测SNc区TH阳性免疫反应面积百分比,Western blotting检测小鼠SNc区TH、Ub-K48和Ub-K63表达水平。结果(1)与常氧组比较,缺氧24 h组MN9D细胞中Ub-K48和Ub-K63表达水平增高(P<0.05),TH表达水平降低(P<0.05);各缺氧组Ub-K48/TH和Ub-K63/TH表达水平均增高(P<0.05)。与缺氧组比较,缺氧+MG132100μmol/L组和缺氧+MG132200μmol/L组MN9D细胞中Ub-K48/TH和Ub-K63/TH表达水平降低(P<0.05)。(2)与常氧组比较,缺氧3 d组和缺氧21 d组小鼠中脑SNc区TH表达水平降低(P<0.001),Ub-K48/TH和Ub-K63/TH表达水平升高(P<0.05);缺氧21 d组小鼠新物体识别指数降低(P<0.01),SNc区多巴胺能神经元TH阳性免疫反应面积百分比降低(P<0.05)。与缺氧21 d组比较,缺氧21 d+MG132组小鼠新物体识别指数升高(P<0.01)。结论蛋白酶体抑制剂MG132可改善慢性缺氧所致小鼠记忆损伤,其机制可能与抑制Ub-K48和Ub-K63,上调多巴胺能神经元TH表达有关。 展开更多

关键词 缺氧 记忆损伤 蛋白酶体抑制剂 酪氨酸羟化酶 泛素赖氨酸48位点

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蛋白酶体抑制剂PS-341对多发性骨髓瘤骨髓间充质干细胞多种细胞因子表达的影响 被引量：7

3

作者 林如峰 陆化 +5 位作者 刘澎 沈文怡 张建富 吴雨洁 费小明 李建勇 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2006年第1期61-64,共4页

为了探讨蛋白酶体抑制剂PS-341(bortezomib,velcade)对多发性骨髓瘤(MM)患者间充质干细胞(MSC)细胞因子分泌的影响,用含10%FBS的RPMI1640培养液培养11例MM患者MSC,细胞数达5-10×105时以终浓度50nmol/L的PS-341作用4小时,用逆转录... 为了探讨蛋白酶体抑制剂PS-341(bortezomib,velcade)对多发性骨髓瘤(MM)患者间充质干细胞(MSC)细胞因子分泌的影响,用含10%FBS的RPMI1640培养液培养11例MM患者MSC,细胞数达5-10×105时以终浓度50nmol/L的PS-341作用4小时,用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测IL-6、IL-1β、SCF细胞因子表达。结果表明:PS-341作用后MM病人MSC细胞因子的表达有显著下降,IL-6、IL-1β、SCF的表达与对照组比较,其显著性检验结果分别为P<0.05、P<0.01、P<0.05,其中IL-1β尤为明显;难治复发组与缓解组比较,IL-1β的表达有显著差异,完全缓解(CR)组IL-1β表达受抑制更明显,IL-6、SCF两组间表达无明显差异;PS-341治疗的1例患者MSC在PS-341作用后IL-1β未见表达;IL-1β的表达与否对IL-6、SCF的表达无影响。结论:蛋白酶体抑制剂PS-341下调MM患者MSC IL-6、IL-1β、SCF细胞因子的表达。 展开更多

关键词 蛋白酶体抑制剂PS-341 多发性骨髓瘤 间充质干细胞 白介素-6 白介素-1Β 干细胞因子

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蛋白酶体抑制剂MG-132对高氧肺损伤的影响及其机制 被引量：2

4

作者 黄宇戈 封志纯 +1 位作者 余彦亮 肖芳芳 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期970-973,978,共5页

目的探讨蛋白酶体抑制剂MG-132对高氧肺损伤的影响及作用机制。方法(1)30只SD大鼠随机分为空气对照组、高氧组和高氧+MG-132组。(2)建立高氧肺损伤大鼠模型。(3)进行肺损伤病理评分、肺湿/干重比例测定。检测泛素肺组织泛素化蛋白及NF-... 目的探讨蛋白酶体抑制剂MG-132对高氧肺损伤的影响及作用机制。方法(1)30只SD大鼠随机分为空气对照组、高氧组和高氧+MG-132组。(2)建立高氧肺损伤大鼠模型。(3)进行肺损伤病理评分、肺湿/干重比例测定。检测泛素肺组织泛素化蛋白及NF-κBp65的表达。检测蛋白酶体20S及肺组织匀浆髓过氧化物酶(MPO)活性,检测肺组织TNF-α、IL-6表达。结果(1)高氧组肺损伤明显,肺湿/干重比例、肺损伤病理评分均增高(P<0.01),MG-132能使肺湿/干重比例、肺损伤病理评分降低(P<0.01)。(2)免疫组化和Western blotting结果均显示高氧组泛素化蛋白表达增强(P<0.01),MG-132增强其表达(P<0.01)。(3)高氧组蛋白酶体20S活性较空气对照组明显升高(P<0.01),MG-132抑制其活性(P<0.01)。(4)高氧组MPO活性、NF-κB表达均较空气组增强(P<0.01),同时TNF-α、IL-6表达也增强(P<0.01)。而高氧+MG-I32组均降低(P<0.01)。结论(1)MG-132可以减轻高氧引起的肺损伤。(2)MG-I32可能通过抑制NF-κB/炎性因子通路而实现保护作用。 展开更多

关键词 高氧肺损伤 蛋白酶体抑制剂 泛素蛋白酶途径 髓过氧化物酶 核转录因子-ΚB 肿瘤坏死因子α 白细胞介素6

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不同剂量蛋白酶体抑制剂MG-132在诱导K562细胞株凋亡中的作用 被引量：4

5

作者 邵庆文 薛天阳 +1 位作者 高吉照 许伟 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2009年第3期574-578,共5页

本研究探讨不同剂量蛋白酶体抑制剂MG-132对人慢性粒细胞白血病急性红白血病细胞株K562的干预作用。应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测不同剂量(0、2、4、8、16、32μmol/L)的MG-132作用48小时对K562细胞株增殖的影响;应用免疫细胞组... 本研究探讨不同剂量蛋白酶体抑制剂MG-132对人慢性粒细胞白血病急性红白血病细胞株K562的干预作用。应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测不同剂量(0、2、4、8、16、32μmol/L)的MG-132作用48小时对K562细胞株增殖的影响;应用免疫细胞组织化学法检测相同条件下MG-132对K562细胞株中的核因子-κB(NF-κB)及糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)表达的影响;采用流式细胞术检测相同条件下MG-132对K562细胞株凋亡的影响。结果表明:不同剂量的MG-132作用48小时后K562细胞株的抑制率呈剂量依赖性,实验组的抑制率明显高于对照组,以32μmol/L剂量组的抑制率最高,为(45.24±4.12)%;K562细胞株中的NF-κB、GR的表达水平均表现出对MG-132剂量的依赖性,NF-κB的表达水平实验组明显低于对照组,以32μmol/L剂量组表达最低,为63.60±2.95。GR在16μmol/L剂量组表达最高,为75.62±2.70。K562细胞株的凋亡率亦表现出对MG-132剂量的依赖性,而且在实验组明显高于对照组,以32μmol/L剂量组的凋亡率最高,为(21.37±2.02)%。结论:MG-132可能是通过下调NF-κB、上调GR的表达诱导了K562细胞的凋亡和抑制,其效应表现为剂量的依赖性。 展开更多

关键词 K562细胞 蛋白酶体抑制剂 MG-132 细胞凋亡 核因子-κB 糖皮质激素受体

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泛素蛋白酶体抑制剂在急性髓系白血病中的研究进展

6

作者 肖方楠 张明英 周圆 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期868-875,共8页

泛素蛋白酶体系统(UPS)在真核生物蛋白质循环中具有重要生物学作用,出现异常可导致肿瘤的发生。目前包括白血病在内的多种肿瘤患者体内均检测到高水平的泛素蛋白酶体活性。泛素蛋白酶体抑制剂通过影响泛素蛋白酶体系统的E3连接酶、去泛... 泛素蛋白酶体系统(UPS)在真核生物蛋白质循环中具有重要生物学作用,出现异常可导致肿瘤的发生。目前包括白血病在内的多种肿瘤患者体内均检测到高水平的泛素蛋白酶体活性。泛素蛋白酶体抑制剂通过影响泛素蛋白酶体系统的E3连接酶、去泛素化酶以及蛋白质降解活性位点能够有效地杀伤肿瘤细胞。临床上已经将相关泛素蛋白酶体抑制剂用于治疗血液系统肿瘤,但在急性髓系白血病中的应用相对较少。本文对影响蛋白质泛素化降解不同阶段的抑制剂在急性髓系白血病中的研究进展进行相关总结,为研发急性髓系白血病有效疗法提供新思路。 展开更多

关键词 泛素蛋白酶体系统 急性髓系白血病 泛素蛋白酶体抑制剂

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阻断泛素-蛋白酶体通路诱导白血病细胞凋亡及机制探讨 被引量：5

7

作者 兰雨 张学敏 +3 位作者 胡美茹 杨怡 杨平地 沈倍奋 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2001年第2期105-109,共5页

泛素 蛋白酶体系统是真核细胞内降解调节因子等各种短寿蛋白的重要途径。本实验就阻断泛素化通路诱发白血病细胞凋亡及其机制进行了初步探讨。应用MTT法显示蛋白酶体抑制剂Z LLL CHO对多种白血病细胞系呈剂量依赖性的细胞杀伤作用。流... 泛素 蛋白酶体系统是真核细胞内降解调节因子等各种短寿蛋白的重要途径。本实验就阻断泛素化通路诱发白血病细胞凋亡及其机制进行了初步探讨。应用MTT法显示蛋白酶体抑制剂Z LLL CHO对多种白血病细胞系呈剂量依赖性的细胞杀伤作用。流式细胞仪检测提示细胞出现凋亡 ,并经DNA琼脂糖凝胶电泳和形态学观察得到进一步证实。通过对M 0 7e细胞裂解物做免疫印迹检测 ,发现在Z LLL CHO作用过程中Bcl 2蛋白被酶解及caspase 3酶原发生降解 ,色敏比色法检测显示caspase 3在凋亡过程中被激活。而同为bcl 2高表达的白血病细胞系KG 1a对Z LLL CHO诱导凋亡不敏感 ,提示不同细胞对阻断泛素化通路敏感与否与Bcl 2蛋白表达量无关 ,而可能与细胞内caspase 3的激活及bcl 展开更多

关键词 泛素-蛋白酶体通路 蛋白酶体抑制剂 细胞凋亡 白血病 CASPASE-3

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蛋白酶体抑制剂MG132诱导HepG2细胞凋亡及其机制研究 被引量：4

8

作者 何慧 郭芳 +3 位作者 屈顺林 任重 刘俊文 杨向东 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第7期795-798,共4页

目的观察蛋白酶体抑制剂MG132对人肝癌细胞HepG2的致凋亡作用,并从泛素蛋白酶体途径(UPP)相关基因E1、E2和E3及天冬氨酸特异的半胱氨酸蛋白酶3(Caspase3)表达初步探讨MG132的致细胞凋亡机制。方法采用多个浓度(2、5、10μmol·L-1)... 目的观察蛋白酶体抑制剂MG132对人肝癌细胞HepG2的致凋亡作用,并从泛素蛋白酶体途径(UPP)相关基因E1、E2和E3及天冬氨酸特异的半胱氨酸蛋白酶3(Caspase3)表达初步探讨MG132的致细胞凋亡机制。方法采用多个浓度(2、5、10μmol·L-1)的蛋白酶体抑制剂MG132处理HepG2细胞;流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡率,DNA琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡;逆转录聚合酶链反应(RTPCR)检测UPP相关基因E1、E2、E3和凋亡相关基因Caspase3的转录水平;免疫细胞化学检测Caspase3蛋白表达。结果对照组HepG2细胞凋亡率低于5%,在2、5和10μmol·L-1MG132作用下,细胞凋亡率分别为42.9%、66.1%、72.8%,MG132诱导HepG2细胞凋亡具有量效关系;RTPCR检测发现细胞内UPP相关基因E1、E2、E3mRNA表达下降,而凋亡相关基因Caspase3mRNA表达上调;免疫组化检测Caspase3蛋白表达水平升高。结论蛋白酶体抑制剂MG132能够诱导HepG2细胞凋亡,其机制可能与MG132抑制UPP活性,使细胞内Caspase3蛋白降解减少,同时上调Caspase3基因转录,促进细胞凋亡。 展开更多

关键词 泛素-蛋白酶体途径 蛋白酶体抑制剂 肝癌细胞 凋亡 CASPASE-3

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蛋白酶体抑制剂MG132对Raji细胞凋亡、细胞周期及UBE1基因表达的影响 被引量：2

9

作者 刘勇 龙捷 +3 位作者 莫祥兰 苏祖兰 邵春奎 谢晓斌 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期321-326,共6页

【目的】探讨蛋白酶体抑制剂MG132对人Burkitt's淋巴瘤Raji细胞凋亡、细胞周期及泛素活化酶(UBE1)基因表达的影响。【方法】5μmol/L的MG132处理Raji细胞24h,形态学观察细胞生长情况;流式细胞术AnnexinV-FITC/PI双染法分析细胞凋亡... 【目的】探讨蛋白酶体抑制剂MG132对人Burkitt's淋巴瘤Raji细胞凋亡、细胞周期及泛素活化酶(UBE1)基因表达的影响。【方法】5μmol/L的MG132处理Raji细胞24h,形态学观察细胞生长情况;流式细胞术AnnexinV-FITC/PI双染法分析细胞凋亡、PI单染法分析细胞周期;荧光定量RT-PCR检测UBE1基因mRNA表达,Westernblot检测UBE1蛋白表达。【结果】MG132处理组细胞生长缓慢,死亡及凋亡多见,细胞凋亡率(26.06±1.10)%较对照组(0.30±0.26)%上升(P<0.05),G2/M期细胞比率(33.2±1.2)%较对照组(12.5±1.1)%升高(P<0.05);MG132处理组UBE1mRNA表达量(0.35±0.05)较对照组(1.00±0.08)下降(P<0.05),抑制率为65%;UBE1蛋白表达量(0.93±0.07)较对照组(1.62±0.22)下调(P<0.05),蛋白表达率为(58±6)%。【结论】蛋白酶体抑制剂MG132可诱导Raji细胞发生凋亡和G2/M期阻滞,同时抑制UBE1的mRNA和蛋白表达,机制仍待深入研究。 展开更多

关键词 泛素-蛋白酶体途径 蛋白酶体抑制剂 淋巴瘤 RAJI细胞

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蛋白酶体抑制剂调控癌性恶病质的实验研究 被引量：5

10

作者 佴永军 江志伟 黎介寿 《肠外与肠内营养》 CAS 北大核心 2010年第2期101-105,共5页

目的:探讨蛋白酶体抑制剂对恶病质小鼠炎症细胞因子的合成和调控作用。方法:采用C26结肠癌细胞接种小鼠皮下,诱导恶病质模型,每天监测小鼠体重、食物摄入量和肿瘤体积,于肿瘤接种后第6、9、12和15天,每天给予荷瘤鼠腹腔注射生理盐水和... 目的:探讨蛋白酶体抑制剂对恶病质小鼠炎症细胞因子的合成和调控作用。方法:采用C26结肠癌细胞接种小鼠皮下,诱导恶病质模型,每天监测小鼠体重、食物摄入量和肿瘤体积,于肿瘤接种后第6、9、12和15天,每天给予荷瘤鼠腹腔注射生理盐水和不同剂量的蛋白酶体抑制Bortezomib(0.1、0.5和1.0mg/kg),第16天处死小鼠,检测肿瘤组织NF-κB活性、IL-6以及血清IL-6和IL-10水平。结果:第16天时,生理盐水组出现显著的体重和去瘤体重的下降(P<0.01)、腓肠肌萎缩及附睾脂肪的降解(P<0.01),同时血清IL-6、IL-10和肿瘤组织IL-6水平显著升高(P<0.01)。Bortezomib不同程度地抑制了去瘤体重、腓肠肌和附睾脂肪的降解。Bortezomib剂量依赖性地抑制了肿瘤组织NF-κB的激活及IL-6的合成,以1.0mg/kg组最显著。0.5mg/kg组显著抑制了血清IL-6水平的升高(P<0.01)。0.5和1.0mg/kg组明显抑制肿瘤生长(P<0.01)。结论:蛋白酶体抑制剂通过抑制肿瘤组织NF-κB的激活,从而抑制癌性炎性反应和组织成分降解,改善恶病质。 展开更多

关键词 蛋白酶体抑制剂 核因子-ΚB 恶病质 白细胞介素-6

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泛素-蛋白酶体通路的转化研究进展 被引量：5

11

作者 宋长征 《济南大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2013年第3期325-330,共6页

泛素-蛋白酶体通路(UPP)负责细胞内大部分蛋白质的降解,在调整细胞周期、控制信号转导和调节细胞凋亡过程中起着至关重要的作用,并成为肿瘤治疗的靶标。该通路的转化研究促成第一代蛋白酶抑制剂的研发,以及临床应用治疗血液系统恶性肿... 泛素-蛋白酶体通路(UPP)负责细胞内大部分蛋白质的降解,在调整细胞周期、控制信号转导和调节细胞凋亡过程中起着至关重要的作用,并成为肿瘤治疗的靶标。该通路的转化研究促成第一代蛋白酶抑制剂的研发,以及临床应用治疗血液系统恶性肿瘤患者。 展开更多

关键词 泛素-蛋白酶体通路 转化研究 蛋白酶体抑制剂 肿瘤治疗 转化医学

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泛素-蛋白酶体系统在昆虫先天免疫中的调控作用

12

作者 杨洋 李明 +1 位作者 罗开珺 叶辉 《环境昆虫学报》 CSCD 北大核心 2015年第3期634-644,共11页

完善的先天免疫系统使得昆虫成为分布最广、适应性最强、物种多样性最丰富的动物类群。在长期的进化过程中,昆虫建立了一套安全有效的先天免疫系统,一方面在面对外界微生物攻击的时候及时有效的发生免疫应答反应;另一方面通过免疫抑制... 完善的先天免疫系统使得昆虫成为分布最广、适应性最强、物种多样性最丰富的动物类群。在长期的进化过程中,昆虫建立了一套安全有效的先天免疫系统,一方面在面对外界微生物攻击的时候及时有效的发生免疫应答反应;另一方面通过免疫抑制来调控适度免疫应答,避免对自身发动攻击和控制环境共生菌刺激引起的免疫应答信号通路的持续激活。泛素-蛋白酶体系统在昆虫先天免疫中具有重要的调控作用,在Toll和IMD信号通路中,通过对免疫应答通路中信号分子的泛素化修饰加工,促进或抑制抗菌肽的表达,从而使免疫反应达到一个平衡。本文通过对泛素-蛋白酶体系统在Toll和IMD信号通路中的免疫应答和免疫抑制方面的研究进行综述,阐明了该系统在昆虫先天免疫中的调控作用,将有助于开展农业害虫与其天敌之间相互关系的深入研究,揭示其免疫调控机理,为开发生物农药,进行生物防控提供理论依据。 展开更多

关键词 泛素-蛋白酶体系统 昆虫先天免疫 Toll和IMD信号通路 免疫应答 免疫抑制

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蛋白酶体抑制剂MG132诱导人血管平滑肌细胞凋亡及其机制研究

13

作者 郭芳 屈顺林 +2 位作者 孙文清 何慧 杨向东 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2009年第5期487-492,共6页

目的:观察蛋白酶体抑制剂MG132对人脐静脉血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMC)的致凋亡作用及其对凋亡相关的天冬氨酸特异的半胱氨酸蛋白酶3(caspase 3)表达的影响。方法:采用多个浓度(2.5、5、10μmol/L)的蛋白酶体抑制... 目的:观察蛋白酶体抑制剂MG132对人脐静脉血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMC)的致凋亡作用及其对凋亡相关的天冬氨酸特异的半胱氨酸蛋白酶3(caspase 3)表达的影响。方法:采用多个浓度(2.5、5、10μmol/L)的蛋白酶体抑制剂MG132处理人脐静脉VSMC 24 h和48 h;流式细胞术分析细胞凋亡率;RT-PCR检测泛素-蛋白酶体途径(ubiquitin-proteasome pathway,UPP)相关基因泛素、泛素活化酶(E1)、泛素缀合酶(E2)、泛素连接酶(E3)、26S蛋白酶体和caspase3基因转录水平;免疫细胞化学检测细胞caspase 3蛋白表达。结果:蛋白酶体抑制剂MG132处理48 h后细胞凋亡率增加;细胞内UPP相关的基因mRNA表达降低,而caspase 3 mRNA表达增高;免疫细胞化学检测细胞caspase 3蛋白表达水平升高。结论:蛋白酶体抑制剂MG132能够诱导人脐静脉VSMC凋亡,其作用呈量-效关系;MG132诱导VSMC凋亡与下调UPP相关基因和上调caspase3基因及蛋白的表达有关。 展开更多

关键词 人脐静脉血管平滑肌细胞 泛素-蛋白酶体通路 抑制剂 凋亡 天冬氨酸特异的半胱氨酸蛋白酶3

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蛋白酶体及其介导的泛素-蛋白酶体途径对宰后秦川牛肉蛋白的降解作用 被引量：1

14

作者 胡丽筠 张倩 +4 位作者 陈雪妍 王金霞 李荣 李亚蕾 罗瑞明 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2023年第24期112-117,共6页

以宰后4℃条件下不同贮藏期的秦川牛背最长肌为研究对象,通过注射蛋白酶体抑制剂MG-132,测定宰后贮藏过程中蛋白的降解情况、蛋白酶体活性、泛素蛋白含量以及微观结构变化,探究蛋白酶体介导的泛素-蛋白酶体途径(ubiquitin-proteasome pa... 以宰后4℃条件下不同贮藏期的秦川牛背最长肌为研究对象,通过注射蛋白酶体抑制剂MG-132,测定宰后贮藏过程中蛋白的降解情况、蛋白酶体活性、泛素蛋白含量以及微观结构变化,探究蛋白酶体介导的泛素-蛋白酶体途径(ubiquitin-proteasome pathway,UPP)对宰后秦川牛肉贮藏过程的影响,为宰后牛肉品质的精确调控途径提供理论支撑。主要研究结果:随着贮藏时间的延长,MG-132组中的蛋白酶体活性低于对照组,总可溶性蛋白含量、泛素蛋白含量高于对照组;十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳结果显示,MG-132组总可溶性蛋白在40~250 kDa之间的蛋白条带整体深于对照组;MG-132组的牛背最长肌结构保留较好,Z线以及明暗带的边界都比对照组清晰,且总可溶性蛋白与泛素蛋白含量变化呈显著正相关(P<0.05)。综上所述,MG-132抑制宰后秦川牛肉中蛋白酶体活性以及UPP中泛素化蛋白的降解,进而改变宰后秦川牛肉中蛋白的降解,减少肌肉结构的破坏,说明UPP对宰后肉质的形成具有潜在作用,蛋白酶体可以单独降解蛋白,破坏宰后牛肉肌原纤维结构,还可以通过介导UPP影响宰后牛肉蛋白的降解,最终影响宰后牛肉的品质。 展开更多

关键词 牛 蛋白酶体抑制剂MG-132 蛋白酶体 泛素-蛋白酶体途径

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泛素蛋白酶体途径及其在体外受精中的作用研究进展 被引量：1

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作者 王洋 金一 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2018年第2期338-348,共11页

泛素蛋白酶体途径(ubiquitin proteasome pathway,UPP)是生物体内最主要的蛋白质降解途径,与多种疾病有关,在生物体内具有十分重要的作用,主要降解错误折叠的、多余的蛋白质。UPP是一个循环途径,其主要作用起始于泛素(ubiquitin,Ub)的激... 泛素蛋白酶体途径(ubiquitin proteasome pathway,UPP)是生物体内最主要的蛋白质降解途径,与多种疾病有关,在生物体内具有十分重要的作用,主要降解错误折叠的、多余的蛋白质。UPP是一个循环途径,其主要作用起始于泛素(ubiquitin,Ub)的激活,是受泛素激活酶(ubiquitin-activating enzyme,E1,酵母菌中是UbE1)、泛素结合酶(ubiquitin-conjugating enzyme,E2,UbE2)、泛素连接酶(ubiquitin-protein ligase,E3,UbE3)和去泛素化酶(deubiquitinating enzymes,DUBs)调控的级联过程,最终使被多聚泛素化(polyubiquitination,polyubiquitination,PolyUb)标记的蛋白底物在UPP的蛋白水解核心——26S蛋白酶体内被降解成寡肽,寡肽可以进入新的蛋白循环,Ub则由DUBs去除进入下一个UPP循环。UPP在海鞘类和一些哺乳类体外受精(in vitro fertilization,IVF)过程中具有十分重要的作用,能够参与精子获能和顶体反应(acrosomal reaction,AR),促进精子顶体胞吐,在精卵结合时降解透明带(zona pellucida,ZP)蛋白,辅助精子穿透卵母细胞ZP,促进精子与卵母细胞ZP的融合,从而促使IVF的成功。通过在IVF液中添加一些UPP相关的抗体或抑制剂能够抑制IVF过程中的多精入卵,提高IVF率。作者综述了UPP的主要组成成分及其对IVF的辅助作用及相关抗体的研究进展,以期为今后研究UPP循环在生物体内的作用机制、与生物体内各种疾病的关系、在IVF过程中的作用机制及抑制多精入卵等提供一定的理论依据。 展开更多

关键词 泛素蛋白酶体途径(UPP) 泛素 体外受精(IVF) 抑制剂

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视网膜色素上皮细胞中蛋白酶体活性的下降促进IL-6表达的研究 被引量：2

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作者 秦廷玉 高莎莎 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2016年第9期813-817,共5页

目的探讨当视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)细胞的蛋白酶体活性下降时促进白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)表达的机制。方法将人RPE细胞系分成两组培养,第一组只加DMEM,第二组加入DMEM(内含成分同上)和10μmol·L... 目的探讨当视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)细胞的蛋白酶体活性下降时促进白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)表达的机制。方法将人RPE细胞系分成两组培养,第一组只加DMEM,第二组加入DMEM(内含成分同上)和10μmol·L^(-1)的蛋白酶体抑制剂MG132,首先收集1 h、4 h、8 h等时间点的RPE细胞,测IL-6 mRNA含量。再分别在2 h、4 h、6 h、8 h、10 h、12 h等时间点,收集上清液,测IL-6和单核细胞趋化蛋白-1(mono-cyte chemo-attractant protein-1,MCP-1)的含量。然后测定MG132是否可以激活调控IL-6分泌的两条主要细胞信号通路——P38-丝裂原激活的蛋白激酶(P38 mitogen-activated protein kinase,P38 MAPK)途径和c-Jun氨基端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)途径。再在细胞培养液中加入这些细胞信号通路的抑制剂,测上清中IL-6的含量,观察哪个信号通路的抑制剂可以抵消MG132促进IL-6分泌的作用。结果 MG132增加了RPE细胞IL-6的mRNA水平和蛋白质水平的表达,却降低了MCP-1的分泌。MG132可以激活调控IL-6分泌的两条主要细胞信号通路——P38 MAPK和JNK。P38 MAPK的抑制剂SB203580加入RPE培养液后不仅可以降低RPE细胞产生IL-6的基础分泌,而且可以抵消MG132促进IL-6分泌的作用;而当加入JNK的抑制剂SP600125后,虽然也可以降低IL-6的基础分泌,但却不能抵消MG132促进IL-6分泌的作用。结论在RPE中,蛋白酶体活性的下降可以激活P38 MAPK细胞信号通路,从而促进IL-6的产生。 展开更多

关键词 视网膜色素上皮细胞 白细胞介素-6 蛋白酶体抑制剂 P38丝裂原激活蛋白激酶 c—Jun氨基端激酶

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HeLa细胞中泛素蛋白酶体系统对新城疫病毒复制的影响 被引量：4

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作者 曲昱蓉 詹媛 +4 位作者 仇旭升 谭磊 孙英杰 宋翠萍 丁铲 《中国动物传染病学报》 CAS 2014年第2期13-19,共7页

本文主要对细胞的泛素-蛋白酶体系统是否参与新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)的复制过程进行了研究。用NDV感染HeLa细胞,对细胞样品进行Western blot实验,并检测细胞26S蛋白酶体的三种蛋白水解活性变化。同时使用多种泛素-蛋... 本文主要对细胞的泛素-蛋白酶体系统是否参与新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)的复制过程进行了研究。用NDV感染HeLa细胞,对细胞样品进行Western blot实验,并检测细胞26S蛋白酶体的三种蛋白水解活性变化。同时使用多种泛素-蛋白酶体系统相关的抑制剂处理细胞并做NDV感染,测定细胞上清中病毒TCID50值,比较药物处理与DMSO处理对病毒增殖的影响。结果表明,HeLa细胞在感染NDV后,细胞内泛素化蛋白水平降低,而26S蛋白酶体的三种蛋白水解活性都显著升高;使用泛素-蛋白酶体系统抑制剂后NDV的增殖受到了明显的抑制,证明NDV在HeLa细胞内的增殖与细胞自身的泛素-蛋白酶体系统关系密切。 展开更多

关键词 新城疫病毒 泛素-蛋白酶体系统 蛋白酶体抑制剂 复制

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去泛素化酶抑制剂Au(PPh3)PT对胃癌细胞活力和凋亡的影响及机制 被引量：1

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作者 张培全 黄擎天 +1 位作者 龙惠丹 李小芬 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2021年第1期25-29,共5页

目的探讨去泛素化酶抑制剂Au(PPh3)PT对胃癌细胞的毒性作用及机制。方法MTS方法检测Au(PPh3)PT对胃癌细胞MGC⁃803和SGC⁃7901活力的影响;倒置荧光显微镜观察或流式细胞术检测Au(PPh3)PT诱导胃癌细胞凋亡情况;Western blot方法分析Au(PPh3... 目的探讨去泛素化酶抑制剂Au(PPh3)PT对胃癌细胞的毒性作用及机制。方法MTS方法检测Au(PPh3)PT对胃癌细胞MGC⁃803和SGC⁃7901活力的影响;倒置荧光显微镜观察或流式细胞术检测Au(PPh3)PT诱导胃癌细胞凋亡情况;Western blot方法分析Au(PPh3)PT对凋亡相关蛋白及泛素化蛋白的影响。结果Au(PPh3)PT明显抑制胃癌细胞的活力,呈浓度和时间依赖性。1.0μmol/L和1.5μmol/L的Au(PPh3)PT作用24 h,胃癌细胞凋亡率显著增加(P<0.05)。Au(PPh3)PT引起凋亡相关蛋白caspase⁃3、caspase⁃8、caspase⁃9前体减少,活化带增多及PARP切割带出现,诱导胃癌细胞总的及K48⁃链接的泛素化蛋白聚集增多。结论Au(PPh3)PT明显抑制胃癌细胞的活力及诱导其凋亡,作用机制与caspase系统激活和蛋白酶体抑制有关。 展开更多

关键词 去泛素化酶抑制剂 Au(PPh3)PT 胃癌细胞 凋亡 蛋白酶体抑制

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泛素连接酶FBW7的肿瘤抑制作用和机制 被引量：2

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作者 郭晓强 沈永青 +1 位作者 王越甲 段相林 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期998-1006,共9页

泛素-蛋白酶体系统是一个主要的蛋白质降解调节通路,在细胞分裂过程中发挥着重要作用,其成员在肿瘤中频繁存在着表达异常现象.FBW7又名AGO、hCDC4、FBXW7和SEL-10,是一种拥有7串联WD40重复结构域的F-box蛋白,可作为SCF型泛素连接酶(E3)... 泛素-蛋白酶体系统是一个主要的蛋白质降解调节通路,在细胞分裂过程中发挥着重要作用,其成员在肿瘤中频繁存在着表达异常现象.FBW7又名AGO、hCDC4、FBXW7和SEL-10,是一种拥有7串联WD40重复结构域的F-box蛋白,可作为SCF型泛素连接酶(E3)复合物的底物识别亚基发挥作用.FBW7是一种肿瘤抑制蛋白,其基因在多种肿瘤包括直肠癌、胃癌、卵巢癌和白血病中存在着基因突变或缺失.FBW7可直接结合和靶向作用多种转录激活因子或原癌基因,如周期蛋白E、c-Myc、c-Jun、Notch、MCL1、KLF5和mTOR等并对其进行泛素化修饰和随后的26S蛋白酶体降解.肿瘤抑制蛋白FBW7的研究对肿瘤发生机制的理解具有重要意义,同时也为肿瘤的诊断和治疗提供了新的靶点.本文综述了FBW7的特征、肿瘤抑制作用及机制. 展开更多

关键词 泛素-蛋白酶体系统 泛素连接酶 FBW7 肿瘤抑制蛋白

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MG132对人晶状体上皮细胞增生、移行和上皮-间充质转化的抑制作用

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作者 冯雪亮 雷在枝 李冰 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期497-501,共5页

背景 晶状体后囊膜混浊（PCO）发生的主要病理机制是白内障术后后囊膜残留的晶状体上皮细胞（LECs）的增生、移行和分化,研究发现蛋白酶体抑制剂MG132可抑制牛LECs的增生,但对人LECs的生物学影响尚不明确. 目的 研究蛋白酶体抑制剂MG13... 背景 晶状体后囊膜混浊（PCO）发生的主要病理机制是白内障术后后囊膜残留的晶状体上皮细胞（LECs）的增生、移行和分化,研究发现蛋白酶体抑制剂MG132可抑制牛LECs的增生,但对人LECs的生物学影响尚不明确. 目的 研究蛋白酶体抑制剂MG132对体外培养的人LECs增生、移行和上皮-间充质转化（EMT）的抑制作用.方法 收集白内障超声乳化摘出术中连续环形撕囊的囊膜片用组织块培养法进行原代培养并传代,取第2代或第3代LECs进行常规消化,调整细胞密度至5×105个/ml,以200 μl/孔接种至96孔板常规培养24 h,分别加入成纤维细胞生长因子-2（FGF-2）、MG132或MG132＋FGF-2,以基础培养液培养的细胞作为对照组,培养24 h后用MTT法测定吸光度（A490）值,计算LECs的增生率.在移行能力测定中,应用传代的人LECs分别加入FGF-2、MG132或MG132＋FGF-2,以基础培养液培养的细胞作为对照组,用无菌棉棒在细胞层中划出细胞裸露区,继续培养24 h,计数移行至裸露区的细胞,评估细胞移行率.在传代的人LECs培养液中分别加入转化生长因子-β2（TGF-β2）、MG132或MG132＋TGF-β2,以基础培养液培养的细胞作为对照组,培养24 h后用免疫组织化学法检测细胞质中纤维连接蛋白（FN）的表达. 结果 对照组、FGF-2组、MG132组和MG132＋FGF-2组的LECs增生值（A490）分别为0.582±0.020、0.723 ±0.010、0.434±0.011和0.465±0.008,总体差异有统计学意义（F=110.482,P＜0.01）,FGF-2组LECs增生值明显高于对照组,MG132组和MG132＋FGF-2组的LECs增生值明显低于对照组,差异均有统计学意义（P＜0.05）.对照组、FGF-2组、MG132组和MG132＋FGF-2组LECs移行数目分别为8.67±1.08、11.58±1.59、2.67±0.09和2.75±0.09,差异有统计学意义（F=34.301,P＜0.01）,其中FGF-2组LECs的移行数明显多于对照组,而MG132组和MG132＋FGF-2组LECs移行数明显少于对照组,差异均有统计学意义（P＜0.05）.与对照组比较,MG132组LECs的增生率和移行率分别降低25.4％和75.0％,FGF-2组LECs增生率和移行率分别增加24.2％和33.6％,MG132＋FGF-2组LECs的增生率和移行率分别下降20.1％和68.3％.对照组、TGF-β2组、MG132组和MG132＋TGF-β2组LECs中FN表达量（A值）分别为1.242±0.023、2.329±0.113、1.043±0.021和1.163±0.018,差异有统计学意义（F=113.752,P＜0.01）,TGF-β2组LECs中FN表达量明显高于对照组,而MG132组和MG132＋TGF-β2组明显低于对照组,差异均有统计学意义（P＜0.05）.TGF-β2可以诱导人LECs转分化,FN表达增强;MG132与TGF-β2同时存在时可以减弱人LECs转分化,FN表达下降. 结论 MG132抑制体外培养的人LECs的增生与移行,并可阻止TGF-β2诱导的人LECs的EMT. 展开更多

关键词 蛋白酶体抑制剂 MG132 成纤维细胞生长因子 晶状体上皮细胞 增生 移行 上皮-间充质转化

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