阻断泛素-蛋白酶体通路诱导白血病细胞凋亡及机制探讨 被引量：5

1

作者 兰雨 张学敏 +3 位作者 胡美茹 杨怡 杨平地 沈倍奋 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2001年第2期105-109,共5页

泛素 蛋白酶体系统是真核细胞内降解调节因子等各种短寿蛋白的重要途径。本实验就阻断泛素化通路诱发白血病细胞凋亡及其机制进行了初步探讨。应用MTT法显示蛋白酶体抑制剂Z LLL CHO对多种白血病细胞系呈剂量依赖性的细胞杀伤作用。流... 泛素 蛋白酶体系统是真核细胞内降解调节因子等各种短寿蛋白的重要途径。本实验就阻断泛素化通路诱发白血病细胞凋亡及其机制进行了初步探讨。应用MTT法显示蛋白酶体抑制剂Z LLL CHO对多种白血病细胞系呈剂量依赖性的细胞杀伤作用。流式细胞仪检测提示细胞出现凋亡 ,并经DNA琼脂糖凝胶电泳和形态学观察得到进一步证实。通过对M 0 7e细胞裂解物做免疫印迹检测 ,发现在Z LLL CHO作用过程中Bcl 2蛋白被酶解及caspase 3酶原发生降解 ,色敏比色法检测显示caspase 3在凋亡过程中被激活。而同为bcl 2高表达的白血病细胞系KG 1a对Z LLL CHO诱导凋亡不敏感 ,提示不同细胞对阻断泛素化通路敏感与否与Bcl 2蛋白表达量无关 ,而可能与细胞内caspase 3的激活及bcl 展开更多

关键词 泛素-蛋白酶体通路 蛋白酶体抑制剂 细胞凋亡 白血病 CASPASE-3

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泛素-蛋白酶体通路在细胞生存和肿瘤发生中的作用 被引量：3

2

作者 白勇 孙安盛 +3 位作者 顾振纶 周文轩 梁中琴 郭次仪 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期1268-1271,共4页

泛素-蛋白酶体通路在正常细胞和病变细胞的蛋白降解中起着十分重要的作用。在肿瘤的发生发展中,该通路与肿瘤细胞周期失控和自噬等方面有着紧密的内在联系。该文综述了最近几年在肿瘤发生和发展中与泛素—蛋白酶体通路相关的最新研究进... 泛素-蛋白酶体通路在正常细胞和病变细胞的蛋白降解中起着十分重要的作用。在肿瘤的发生发展中,该通路与肿瘤细胞周期失控和自噬等方面有着紧密的内在联系。该文综述了最近几年在肿瘤发生和发展中与泛素—蛋白酶体通路相关的最新研究进展,通过对泛素—蛋白酶体通路某些异常蛋白的深入探讨,为肿瘤的药物治疗提供新的思路,为抗肿瘤新药研发提供更多的分子理论依据。 展开更多

关键词 泛素-蛋白酶体通路 CDKS P27 p53 PTEN NF—κB 自噬

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泛素-蛋白酶体通路 被引量：4

3

作者 肖炳燚 李桂源 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期230-232,共3页

泛素 蛋白酶体通路介导的细胞蛋白降解是一个复杂、缜密的调控过程 ,同时在细胞周期、基因转录及表达、抗原提呈和炎症演进等方面发挥调控作用 ,尤其是通过降解细胞各通路的抑制因子或 /和激活因子发挥上调或下调作用 ;而且泛素 蛋白... 泛素 蛋白酶体通路介导的细胞蛋白降解是一个复杂、缜密的调控过程 ,同时在细胞周期、基因转录及表达、抗原提呈和炎症演进等方面发挥调控作用 ,尤其是通过降解细胞各通路的抑制因子或 /和激活因子发挥上调或下调作用 ;而且泛素 蛋白酶体通路的异常与诸多疾病如恶性肿瘤、神经变性疾病、遗传性疾病、炎症、心肌病的致病机制有关。对于细胞应用该通路降解靶蛋白机制的阐明 。 展开更多

关键词 泛素-蛋白酶体通路 细胞周期 基因转录 炎症 细胞蛋白降解

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撒坝猪源大肠埃希氏菌HPI对泛素蛋白酶体介导的TLR4/NF-κB信号通路关键因子表达的影响 被引量：1

4

作者 邓静 王喜 +7 位作者 卫朝辉 赵维薇 单春兰 张博 万全 赵汝 高利波 高洪 《动物医学进展》 北大核心 2021年第4期1-5,共5页

为探讨撒坝猪源大肠埃希氏菌(E.coli)的耶尔森强毒力岛(HPI)对泛素蛋白酶体(UPS)介导的TLR4/NF-κB信号通路关键因子的影响,将猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)分为5组,空白对照组、HPI阳性株感染组、HPI阴性株感染组、HPI阳性株+MG-132组、HPI... 为探讨撒坝猪源大肠埃希氏菌(E.coli)的耶尔森强毒力岛(HPI)对泛素蛋白酶体(UPS)介导的TLR4/NF-κB信号通路关键因子的影响,将猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)分为5组,空白对照组、HPI阳性株感染组、HPI阴性株感染组、HPI阳性株+MG-132组、HPI阴性株+MG-132组。于试验后的第4、6、12、24 h收集各组细胞,用试剂盒检测泛素蛋白酶体活性,荧光定量PCR法检测TLR4、MyD88、NF-κB和IκB-α的mRNA水平,ELISA法检测NF-κB、IκB-α及炎性因子IL-1和TNF-α含量。结果显示,IPEC-J2细胞感染E.coli后,与空白对照组相比,感染组中泛素蛋白酶体活性水平、TLR4、MyD88、NF-κB和IκB-α的mRNA水平及细胞炎性因子IL-1和TNF-α的蛋白含量总体上调,且HPI阳性株感染组均高于HPI阴性株感染组;用E.coli HPI感染经MG-132处理后的IPEC-J2细胞,泛素蛋白酶体活性下降,TLR4/NF-κB信号通路中关键因子的转录水平及炎性因子的蛋白含量下降,且低于空白对照组。试验结果表明撒坝猪源E.coli HPI能激活泛素蛋白酶体介导的TLR4/NF-κB信号通路,可通过上调TLR4、MyD88、NF-κB和IκB-α的mRNA水平,促进炎性因子IL-1和TNF-α的释放,诱发炎症反应。 展开更多

关键词 撒坝猪 大肠埃希氏菌 耶尔森强毒力岛 泛素蛋白酶体 TLR4/NF-κB信号通路

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泛素-蛋白酶体通路的转化研究进展 被引量：5

5

作者 宋长征 《济南大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2013年第3期325-330,共6页

泛素-蛋白酶体通路(UPP)负责细胞内大部分蛋白质的降解,在调整细胞周期、控制信号转导和调节细胞凋亡过程中起着至关重要的作用,并成为肿瘤治疗的靶标。该通路的转化研究促成第一代蛋白酶抑制剂的研发,以及临床应用治疗血液系统恶性肿... 泛素-蛋白酶体通路(UPP)负责细胞内大部分蛋白质的降解,在调整细胞周期、控制信号转导和调节细胞凋亡过程中起着至关重要的作用,并成为肿瘤治疗的靶标。该通路的转化研究促成第一代蛋白酶抑制剂的研发,以及临床应用治疗血液系统恶性肿瘤患者。 展开更多

关键词 泛素-蛋白酶体通路 转化研究 蛋白酶体抑制剂 肿瘤治疗 转化医学

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地塞米松对COPD大鼠膈肌泛素-蛋白酶体通路调控机制的研究

6

作者 范伟 刘朝晖 +2 位作者 张溪林 梁志科 曾祥富 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2012年第11期1771-1774,共4页

目的:探讨地塞米松对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠膈肌泛素-蛋白酶体通路中E2-14K、MAFbx、MuRF-1蛋白表达的影响,分析其调控机制。方法:SD大鼠42只,随机分为对照组13只、模型组15只及干预组14只。采用气管内注入脂多糖加反复熏香烟法复... 目的:探讨地塞米松对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠膈肌泛素-蛋白酶体通路中E2-14K、MAFbx、MuRF-1蛋白表达的影响,分析其调控机制。方法:SD大鼠42只,随机分为对照组13只、模型组15只及干预组14只。采用气管内注入脂多糖加反复熏香烟法复制COPD大鼠动物模型。蛋白免疫印记方法测定大鼠膈肌内E2-14K、MAFbx、MuRF-1的表达。酶联免疫吸附法测定大鼠血清及膈肌中的TNF-α水平。分析TNF-α及与E2-14K、MAFbx、MuRF-1的相关性。结果:成功建立COPD大鼠模型;COPD大鼠膈肌中E2-14K、MAFbx、MuRF-1蛋白的表达均较对照组明显升高(P<0.01),干预组膈肌中E2-14K、MAFbx、MuRF-1较模型组降低(P<0.01);TNF-α水平与E2-14K、MAFbx、MuRF-1呈显著正相关(P<0.01)。结论:COPD大鼠膈肌中泛素-蛋白酶体通路的表达与TNF-α水平有关,地塞米松降低COPD大鼠膈肌泛素-蛋白酶体表达可能与下调TNF-α的抗炎作用有关。 展开更多

关键词 肺疾病 慢性阻塞性 膈肌 泛素-蛋白酶体通路 肿瘤坏死因子-Α

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肝细胞癌相关因子与泛素-蛋白酶体通路关系的研究

7

作者 王帅 初亮 +1 位作者 胡晓薇 姚继红 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2009年第9期1068-1073,共6页

肝细胞癌因为其治疗方法的局限性,成为世界上致死率最高的恶性肿瘤疾病之一。泛素-蛋白酶体通路(ubiquitin-proteasome pathway,UPP)是调节多种细胞生物学过程的重要机制,也是恶性肿瘤相关疾病调节异常的潜在靶点。本文就泛素-蛋白酶体... 肝细胞癌因为其治疗方法的局限性,成为世界上致死率最高的恶性肿瘤疾病之一。泛素-蛋白酶体通路(ubiquitin-proteasome pathway,UPP)是调节多种细胞生物学过程的重要机制,也是恶性肿瘤相关疾病调节异常的潜在靶点。本文就泛素-蛋白酶体通路与肝细胞癌发生相关因子[乙型肝炎病毒(HBV)、P27、NF-κB等]的关系加以综述,以寻找新的方法对肝细胞癌的发生发展加以干预。 展开更多

关键词 肝细胞癌 泛素-蛋白酶体通路 乙型肝炎病毒 P27 核因子-ΚB

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泛素-蛋白酶体抑制剂MG132对糖尿病大鼠视网膜上Smad7表达的影响 被引量：3

8

作者 苟文军 刘思源 覃冬 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2012年第11期1014-1016,1020,共4页

目的探讨泛素-蛋白酶体抑制剂MG132对链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱导的糖尿病(diabetes mellitus,DM)大鼠模型视网膜上Smad7表达的影响,研究Smad7的表达与糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)的关系,为预防及早期治疗DR提... 目的探讨泛素-蛋白酶体抑制剂MG132对链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱导的糖尿病(diabetes mellitus,DM)大鼠模型视网膜上Smad7表达的影响,研究Smad7的表达与糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)的关系,为预防及早期治疗DR提供一种新思路。方法选择60只健康的雄性Wistar大鼠随机分为3组:正常对照组、DM+MG132组和DM组。采用一次性腹腔注射50mg.kg-1STZ的方法建立DM大鼠模型。自DM模型建立后第3天起,DM+MG132组大鼠每天给予0.1mg.kg-1MG132DMSO液腹腔注射,正常对照组和DM组每天给予0.1mg.kg-1DMSO液腹腔注射。于造模后8周和12周时处死各组大鼠,然后摘出眼球,制成眼杯,采用免疫组化的方法检测各组大鼠视网膜上Smad7蛋白的表达。各指标均采用均数±标准差表示,多组间均数比较采用单因素方差分析,组间的多重比较采用q检验法,以P<0.05为差异有统计学意义。结果在正常对照组大鼠视网膜上Smad7蛋白高表达;DM组造模后8周和12周时大鼠视网膜上Smad7的光密度(optical densi-ty,OD)值分别是0.3408±0.0007、0.1193±0.0028,明显低于正常对照组(分别为0.8793±0.0015和0.9605±0.0021)(均为P<0.01);DM+MG132组造模后8周和12周时大鼠视网膜上Smad7的OD值分别是0.4864±0.0015、0.5904±0.0122,亦明显低于正常对照组(均为P<0.01);DM+MG132组造模后8周和12周时大鼠视网膜上Smad7的表达较DM组明显增加(均为P<0.01)。结论泛素-蛋白酶体抑制剂MG132能够有效抑制Smad7的表达,对DM大鼠视网膜具有保护作用,因此有望成为DR的新的治疗手段。 展开更多

关键词 泛素-蛋白酶体抑制剂 糖尿病视网膜病变 TGF-β Smads信号转导通路 SMAD7

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癌性恶病质肌肉蛋白降解与ATP-泛素-蛋白酶体途径 被引量：2

9

作者 周伟 江志伟 黎介寿 《肠外与肠内营养》 CAS 2003年第4期229-231,235,共4页

癌性恶病质病人骨骼肌蛋白的大量丢失 ,可降低病人生存质量 ,缩短生存时间。大量研究发现 ,恶病质状态下骨骼肌蛋白降解通过ATP 泛素 蛋白酶体途径。作者主要综述ATP 泛素

关键词 癌性恶病质 ATP-泛素-蛋白酶体途径 肌肉蛋白 生存质量 蛋白降解通路

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泛素-蛋白酶体系统在昆虫先天免疫中的调控作用

10

作者 杨洋 李明 +1 位作者 罗开珺 叶辉 《环境昆虫学报》 CSCD 北大核心 2015年第3期634-644,共11页

完善的先天免疫系统使得昆虫成为分布最广、适应性最强、物种多样性最丰富的动物类群。在长期的进化过程中,昆虫建立了一套安全有效的先天免疫系统,一方面在面对外界微生物攻击的时候及时有效的发生免疫应答反应;另一方面通过免疫抑制... 完善的先天免疫系统使得昆虫成为分布最广、适应性最强、物种多样性最丰富的动物类群。在长期的进化过程中,昆虫建立了一套安全有效的先天免疫系统,一方面在面对外界微生物攻击的时候及时有效的发生免疫应答反应;另一方面通过免疫抑制来调控适度免疫应答,避免对自身发动攻击和控制环境共生菌刺激引起的免疫应答信号通路的持续激活。泛素-蛋白酶体系统在昆虫先天免疫中具有重要的调控作用,在Toll和IMD信号通路中,通过对免疫应答通路中信号分子的泛素化修饰加工,促进或抑制抗菌肽的表达,从而使免疫反应达到一个平衡。本文通过对泛素-蛋白酶体系统在Toll和IMD信号通路中的免疫应答和免疫抑制方面的研究进行综述,阐明了该系统在昆虫先天免疫中的调控作用,将有助于开展农业害虫与其天敌之间相互关系的深入研究,揭示其免疫调控机理,为开发生物农药,进行生物防控提供理论依据。 展开更多

关键词 泛素-蛋白酶体系统 昆虫先天免疫 Toll和IMD信号通路 免疫应答 免疫抑制

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饲料中添加丙氨酰对仔猪mTOR和泛素/蛋白酶体系统信号通路的影响

11

作者 Zhang B L Lin M +6 位作者 Yu C N Li J L Zhang L Zhou P Yang W W Gao F Zhou G H 《饲料博览》 2016年第10期53-53,共1页

试验旨在探讨丙氨酰-谷氨酰胺双肽(Ala-Gln)、游离丙氨酸和谷氨酰胺复合物(Ala+Gln)对仔猪雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路和泛素-蛋白酶体系统(UPP)信号通路的影响。将180头仔猪随机分配,共3个处理组,每组3个重复,每个重复20头,饲料中分... 试验旨在探讨丙氨酰-谷氨酰胺双肽(Ala-Gln)、游离丙氨酸和谷氨酰胺复合物(Ala+Gln)对仔猪雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路和泛素-蛋白酶体系统(UPP)信号通路的影响。将180头仔猪随机分配,共3个处理组,每组3个重复,每个重复20头,饲料中分别添加Ala 0.62%、Ala-Gln 0.5%、Ala 0.21%+Gln 0.34%,为期28 d。结果表明,Ala-Gln显著提高仔猪的平均日增重,降低料重比(P<0.05);显著增加肝和骨骼肌中Gln和谷氨酸的浓度,降低谷氨酰胺合成酶活性(P<0.05);谷氨酰胺酶和谷氨酸脱氢酶的表达显著增加(P<0.05);肝和骨骼肌中的eI F-4E结合蛋白1(4E-BP1)和核糖体蛋白S5激酶1(S6K1)的磷酸化表达增加。Ala+Gln组对mT OR、4E-BP1和S6K1的磷酸化表达无显著影响(P>0.05)。试验结果表明,饲料中添加Ala-Gln可改善仔猪的生长性能,提高谷氨酰胺代谢,增强肝和骨骼肌中蛋白质合成信号并降低蛋白质在肌肉中的降解信号。 展开更多

关键词 泛素-蛋白酶体系统 谷氨酰胺 信号通路 MTOR 仔猪 饲料 雷帕霉素 随机分配

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转化生长因子-β／Smads信号转导通路的泛素化调节在糖尿病视网膜病变中的作用 被引量：3

12

作者 苟文军(综述) 吕红彬(审校) 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期902-904,共3页

糖尿病视网膜病变（DR）是糖尿病常见和严重的并发症之一，参与的细胞因子和调节因子众多，其发病机制一直是DR防治研究的热点。研究证实，转化生长因子-β（TGF-β）参与了DR的发生和发展，Smads蛋白则能介导TGF-β／Smads信号通路的... 糖尿病视网膜病变（DR）是糖尿病常见和严重的并发症之一，参与的细胞因子和调节因子众多，其发病机制一直是DR防治研究的热点。研究证实，转化生长因子-β（TGF-β）参与了DR的发生和发展，Smads蛋白则能介导TGF-β／Smads信号通路的激活，进而参与DR的病理过程，而泛素一蛋白酶体途径（UPP）中的泛素连接酶Smurf则参与了TGF-β／Smads信号通路的降解调节。目前，相关研究已经取得了较大进展，就UPP对TGF-β／Smads信号转导通路的降解调节在DR中的作用进行综述。 展开更多

关键词 糖尿病视网膜病变 泛素一蛋白酶体途径 转化生长因子-Β Smads信号传导通路

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榄香烯对肿瘤恶病质小鼠细胞因子TNF-ɑ IL-6和骨骼肌UPP信号通路的调节作用 被引量：6

13

作者 尹爱凝 李宏林 姚娓 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2021年第9期440-445,共6页

目的:研究通过建立肿瘤恶病质小鼠模型,研究榄香烯对肿瘤恶病质骨骼肌萎缩的缓解作用及其可能的机制。方法:C57BL/6小鼠皮下注射Lewis肺腺癌肿瘤细胞建立肿瘤恶病质模型。随机分为健康组、恶病质模型组、醋酸甲地孕酮组和榄香烯组。榄... 目的:研究通过建立肿瘤恶病质小鼠模型,研究榄香烯对肿瘤恶病质骨骼肌萎缩的缓解作用及其可能的机制。方法:C57BL/6小鼠皮下注射Lewis肺腺癌肿瘤细胞建立肿瘤恶病质模型。随机分为健康组、恶病质模型组、醋酸甲地孕酮组和榄香烯组。榄香烯口服乳等治疗14 d后,测量小鼠每日饮食量、肿瘤重量、去瘤体重、腓肠肌和胫骨前肌重量、肝脏重量,H&E染色检测腓肠肌肌丝横截面积,ELISA法检测血清IL-6和TNF-α水平,Western Blot检测腓肠肌中MAFBx、MURF-1的蛋白表达水平。结果:榄香烯组小鼠饮食量、去瘤体重及腓肠肌加胫骨前肌总重量较恶病质模型组增加,腓肠肌横截面积较恶病质模型组面积增大,IL-6及TNF-α水平较恶病质模型组明显下降,MAFBx、MURF-1的蛋白表达水平明显低于恶病质模型组(P<0.05)。同时,相对于醋酸甲地孕酮组,榄香烯组小鼠腓肠肌横截面积增大,IL-6及TNF-α水平降低,MAFBx、MURF-1的蛋白表达受到抑制(P<0.05)。结论:榄香烯可减轻肿瘤恶病质的骨骼肌萎缩,其机制可能与减少小鼠的能量消耗、降低血清TNF-α和IL-6水平、降低骨骼肌MAFBx、MURF-1的蛋白表达水平、调节UPP信号通路的活性有关。 展开更多

关键词 肿瘤恶病质 榄香烯 骨骼肌消耗 细胞因子 泛素-蛋白酶体信号通路

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芍药苷对α-突触核蛋白降解通路的影响 被引量：7

14

作者 张永进 王敏 +3 位作者 徐晶 张謦芝 李秀明 蔡增林 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2015年第19期3136-3139,共4页

目的:探讨芍药苷对α-突触核蛋白的降解途径-自噬和泛素-蛋白酶体通路的影响。方法:PC12细胞用或不用MPP+(0.5 mmol/L)处理24 h,然后用芍药苷(50μmol/L)或雷帕霉素(0.2μg/m L)处理24h,MTT法检测细胞增殖活性,Western印迹检测α-突触... 目的:探讨芍药苷对α-突触核蛋白的降解途径-自噬和泛素-蛋白酶体通路的影响。方法:PC12细胞用或不用MPP+(0.5 mmol/L)处理24 h,然后用芍药苷(50μmol/L)或雷帕霉素(0.2μg/m L)处理24h,MTT法检测细胞增殖活性,Western印迹检测α-突触核蛋白、微管相关蛋白轻链3(LC3-Ⅱ)和E1的蛋白质表达水平,共聚焦显微镜观察α-突触核蛋白和LC3-Ⅱ在细胞内的荧光强度及共定位情况。结果:(1)与MPP+组相比,雷帕霉素和芍药苷处理后细胞过氧化氢酶和超氧化物歧化酶活力均显著下降(P<0.001),细胞形态恢复正常;(2)MPP+处理导致LC3-Ⅱ和E1表达水平升高,雷帕霉素处理后LC3-Ⅱ增高而E1水平下降,芍药苷处理既显著上调LC3-Ⅱ(自噬)也上调了E1的表达(泛素-蛋白酶体途径)(P<0.001),促进了α-突触核蛋白的降解;(3)MPP+增强细胞内α-突触核蛋白和LC3-Ⅱ的荧光强度,芍药苷处理后α-突触核蛋白的荧光强度下降。结论:本研究结果表明芍药苷同时显著上调自噬和泛素蛋白酶体途径,促进了α-突触核蛋白的降解,减少细胞损伤。 展开更多

关键词 芍药苷 Α-突触核蛋白 泛素-蛋白酶体通路 自噬

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MG-132对高氧肺损伤中细胞凋亡的保护作用及对p38信号通路的影响 被引量：2

15

作者 黄宇戈 封志纯 +1 位作者 余彦亮 肖芳芳 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期931-934,共4页

目的探讨泛素蛋白酶体抑制剂MG-132对高氧诱导的大鼠损伤肺组织中细胞凋亡及p38信号通路激活的保护作用。方法将26只SD大鼠随机分为四组:正常对照组(n=5)、MG-132对照组(n=5)、高氧组(n=8)和MG-132高氧组(n=8)。制备高氧肺损伤动物模型,... 目的探讨泛素蛋白酶体抑制剂MG-132对高氧诱导的大鼠损伤肺组织中细胞凋亡及p38信号通路激活的保护作用。方法将26只SD大鼠随机分为四组:正常对照组(n=5)、MG-132对照组(n=5)、高氧组(n=8)和MG-132高氧组(n=8)。制备高氧肺损伤动物模型,MG-132处理组给予蛋白酶体抑制剂0.5 mg/kg,1次/d,腹腔注射。所有大鼠行肺组织病理学检查;采用TUNEL法检测细胞凋亡;免疫组织化学法检测泛素化蛋白和p38蛋白的表达。结果高氧暴露的SD大鼠肺组织可见水肿、大量炎症细胞浸润等急性炎症反应。高氧组的凋亡指数、p38MAPK表达均高于正常对照组和MG-132高氧组(P<0.05或P<0.01)。结论高氧可以导致肺组织细胞发生凋亡,可能是通过激活p38MAPK信号通路来调控的。蛋白酶体抑制剂MG-132可以减轻高氧引起的肺损伤,可能对p38MAPK信号通路有抑制作用。 展开更多

关键词 泛素蛋白酶体抑制 高氧 凋亡 P38信号通路

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蛋白酶体抑制剂MG132诱导人血管平滑肌细胞凋亡及其机制研究

16

作者 郭芳 屈顺林 +2 位作者 孙文清 何慧 杨向东 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2009年第5期487-492,共6页

目的:观察蛋白酶体抑制剂MG132对人脐静脉血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMC)的致凋亡作用及其对凋亡相关的天冬氨酸特异的半胱氨酸蛋白酶3(caspase 3)表达的影响。方法:采用多个浓度(2.5、5、10μmol/L)的蛋白酶体抑制... 目的:观察蛋白酶体抑制剂MG132对人脐静脉血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMC)的致凋亡作用及其对凋亡相关的天冬氨酸特异的半胱氨酸蛋白酶3(caspase 3)表达的影响。方法:采用多个浓度(2.5、5、10μmol/L)的蛋白酶体抑制剂MG132处理人脐静脉VSMC 24 h和48 h;流式细胞术分析细胞凋亡率;RT-PCR检测泛素-蛋白酶体途径(ubiquitin-proteasome pathway,UPP)相关基因泛素、泛素活化酶(E1)、泛素缀合酶(E2)、泛素连接酶(E3)、26S蛋白酶体和caspase3基因转录水平;免疫细胞化学检测细胞caspase 3蛋白表达。结果:蛋白酶体抑制剂MG132处理48 h后细胞凋亡率增加;细胞内UPP相关的基因mRNA表达降低,而caspase 3 mRNA表达增高;免疫细胞化学检测细胞caspase 3蛋白表达水平升高。结论:蛋白酶体抑制剂MG132能够诱导人脐静脉VSMC凋亡,其作用呈量-效关系;MG132诱导VSMC凋亡与下调UPP相关基因和上调caspase3基因及蛋白的表达有关。 展开更多

关键词 人脐静脉血管平滑肌细胞 泛素-蛋白酶体通路 抑制剂 凋亡 天冬氨酸特异的半胱氨酸蛋白酶3

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桃叶珊瑚苷通过PINK1/Parkin通路促进缺血性脑卒中大鼠线粒体自噬

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作者 李洁 李元 +5 位作者 周美云 邓炎尧 林芳波 万慧伟 宋炯 梁俊俊 《神经解剖学杂志》 北大核心 2025年第3期335-341,共7页

目的:探讨桃叶珊瑚苷(AU)调节PTEN诱导激酶蛋白1(PINK1)/细胞质E3-泛素连接酶(Parkin)信号通路对缺血性脑卒中(IS)大鼠海马线粒体自噬的影响。方法:通过大脑中动脉阻塞法(MCAO)建立IS大鼠模型,并随机分为IS组、低剂量AU组(AU-L)、中剂... 目的:探讨桃叶珊瑚苷(AU)调节PTEN诱导激酶蛋白1(PINK1)/细胞质E3-泛素连接酶(Parkin)信号通路对缺血性脑卒中(IS)大鼠海马线粒体自噬的影响。方法:通过大脑中动脉阻塞法(MCAO)建立IS大鼠模型,并随机分为IS组、低剂量AU组(AU-L)、中剂量AU组(AU-M)、高剂量AU组(AU-H)以及高剂量AU联合3-MA组(AU-H+3-MA),以不结扎的大鼠为Sham组,Zea Longa评分评估大鼠神经功能;TTC染色检测脑梗塞体积比;制备海马组织切片,透射电镜观察海马线粒体超微结构、免疫组化检测线粒体自噬蛋白-微管相关蛋白轻链3B(LC3B)、p62变化;TUNEL法检测海马组织凋亡;Western blot检测海马组织中PINK1/Parkin相关蛋白表达。结果:IS大鼠神经功能评分增加(P<0.05),TTC染色观察到脑梗死,同时观察到海马组织中线粒体自噬蛋白p62表达上调(P<0.05),LC3B表达下调(P<0.05),自噬小体数量减少(P<0.05),海马组织中细胞凋亡增加(P<0.05),海马组织中PINK1、ARKIN蛋白表达下调(P<0.05),AU干预后,可降低大鼠神经功能评分,减轻脑梗塞体积百分比,同时下调海马组织中p62阳性表达(P<0.05),上调LC3B阳性表达(P<0.05),增加自噬小体数量(P<0.05),降低海马组织中细胞凋亡(P<0.05),上调海马组织中PINK1、ARKIN蛋白表达(P<0.05),3-MA阻断了AU的治疗作用,加重大鼠神经损伤。结论:AU通过激活PINK1/Parkin信号通路,促进海马线粒体自噬,改善IS大鼠神经损伤。 展开更多

关键词 缺血性脑卒中(IS) PTEN诱导激酶蛋白1(PINK1)/细胞质E3-泛素连接酶(Parkin)信号通路 线粒体自噬 桃叶珊瑚苷(AU) 大鼠

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电针调控杏仁核神经信号通路对创伤后应激障碍大鼠恐惧消退的影响 被引量：1

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作者 宋凯 张虹 《世界中医药》 北大核心 2024年第23期3619-3624,3631,共7页

目的:探究电针对创伤后应激障碍(PTSD)大鼠恐惧消退的干预作用,以及对杏仁核含WW结构域的E3泛素蛋白连接酶2(WWP2)/抑癌基因磷酸酶和张力蛋白同源蛋白(PTEN)/蛋白激酶B(AKT)信号通路关键蛋白及突触可塑性蛋白突触素(SYN)、生长相关蛋白-... 目的:探究电针对创伤后应激障碍(PTSD)大鼠恐惧消退的干预作用,以及对杏仁核含WW结构域的E3泛素蛋白连接酶2(WWP2)/抑癌基因磷酸酶和张力蛋白同源蛋白(PTEN)/蛋白激酶B(AKT)信号通路关键蛋白及突触可塑性蛋白突触素(SYN)、生长相关蛋白-43(GAP-43)表达的影响。方法:雄性斯泼累格·多雷(SD)大鼠被随机分为空白组、模型组、电针组,每组8只。采用增强的连续单一应激法构建PTSD模型,随后电针治疗21 d,通过旷场实验、场景化条件化恐惧反应实验、蛋白免疫印迹实验、免疫共沉淀实验、免疫组织化学实验评价电针的干预效应。结果:与空白组比较,模型组大鼠活动距离、穿越中央格数量及直立次数均少(P<0.05),造模成功;与模型组比较,电针组大鼠上述指标均改善(P<0.05)。与模型组比较,电针组大鼠在恐惧消退训练期和恐惧重建检测阶段大鼠的僵直时间百分比低(P<0.05)。与空白组比较,模型组大鼠杏仁核WWP2、磷酸化AKT蛋白表达低(P<0.05),PTEN蛋白表达高(P<0.05)。电针组上述蛋白表达变化逆转(P<0.05),PTEN与WWP2的结合能力上升。与空白组比较,模型组大鼠杏仁核组织中SYN、GAP-43蛋白阳性表达低(P<0.05),电针组杏仁核组织中SYN、GAP-43蛋白阳性表达高(P<0.05)。结论:电针可有效改善PTSD大鼠的自主活动和探索行为,促进恐惧记忆的消退,以上作用与杏仁核WWP2/PTEN/AKT信号通路的调控及突触可塑性有关。 展开更多

关键词 创伤后应激障碍 恐惧记忆 杏仁核 电针 杏仁核含WW结构域的E3泛素蛋白连接酶2(WWP2)/抑癌基因磷酸酶和张力蛋白同源蛋白(PTEN)/蛋白激酶B(AKT)信号通路 突触可塑性 突触可塑性蛋白突触素 生长相关蛋白-43

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泛素结合酶E2C通过特异性结合β-微管蛋白参与调控肝细胞癌进展 被引量：7

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作者 刘梦 朱怡卿 +3 位作者 黄金凤 肖邦 陈美婷 王芳 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期14-20,共7页

目的筛选泛素结合酶E2C(UBE2C)的底物蛋白,并探讨其在肝细胞癌进展中的作用。方法构建带有Halotag标签的UBE2C过表达质粒,将UBE2C与Halotag在人高转移肝癌细胞系HCCLM3中融合表达,通过Halolink树脂沉淀UBE2C结合的底物蛋白,并联合SDS-P... 目的筛选泛素结合酶E2C(UBE2C)的底物蛋白,并探讨其在肝细胞癌进展中的作用。方法构建带有Halotag标签的UBE2C过表达质粒,将UBE2C与Halotag在人高转移肝癌细胞系HCCLM3中融合表达,通过Halolink树脂沉淀UBE2C结合的底物蛋白,并联合SDS-PAGE和质谱对底物蛋白进行鉴定。在人肝癌细胞系Huh-7中过表达UBE2C,通过qRT-PCR、蛋白质印迹分析和细胞免疫荧光实验检测UBE2C过表达对其底物蛋白表达的影响,利用细胞核质分离结合蛋白质印迹分析及TOP flash/FOP flash荧光素酶报告基因实验检测UBE2C过表达对Wnt信号通路的影响,并进一步通过qRT-PCR和蛋白质印迹分析验证UBE2C过表达对Wnt信号通路下游基因表达的影响。结果Halotag共沉淀产物经SDS-PAGE和银染后所获得差异条带的质谱鉴定结果显示,β-微管蛋白是UBE2C结合的底物蛋白。与对照组相比,过表达UBE2C降低了Huh-7细胞中β-微管蛋白在蛋白水平的表达(P<0.01),但对其在mRNA水平的表达没有影响(P>0.05)。同时,过表达UBE2C促进了β-联蛋白入核(P<0.05),提高了TOP flash/FOP flash荧光素酶活性(P<0.01),增强了Wnt信号通路下游基因JNK、细胞周期蛋白D1和基质金属蛋白酶7的表达(P均<0.05)。结论UBE2C通过特异性结合β-微管蛋白降低肝癌细胞中β-微管蛋白水平,从而提高Wnt信号通路活性,促进其下游基因表达,进而参与调控肝细胞癌的进展。 展开更多

关键词 肝细胞癌 泛素结合酶E2C Β-微管蛋白 WNT信号通路

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高糖作用的肾小球系膜细胞SnoN/Ski蛋白表达及泛素化降解 被引量：4

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作者 南庆玲 阳诚 徐勇 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期506-511,共6页

目的:观察高糖作用的大鼠肾小球系膜细胞内核转录共抑制因子SnoN/Ski及泛素连接酶Arkadia的表达变化,初步探讨SnoN/Ski泛素化降解在糖尿病肾病中的作用。方法:将体外培养的大鼠肾小球系膜细胞分别设正常对照组、高糖甲组(培养基含20 mmo... 目的:观察高糖作用的大鼠肾小球系膜细胞内核转录共抑制因子SnoN/Ski及泛素连接酶Arkadia的表达变化,初步探讨SnoN/Ski泛素化降解在糖尿病肾病中的作用。方法:将体外培养的大鼠肾小球系膜细胞分别设正常对照组、高糖甲组(培养基含20 mmol/L葡萄糖)、高糖乙组(培养基含30 mmol/L葡萄糖)、高糖+MG132组(30 mmol/L葡萄糖培养基中预先加入0.5μmol/L特异性泛素蛋白酶体抑制剂MG132)和甘露醇组。用蛋白免疫印迹技术和免疫荧光染色-激光共聚焦显微镜检测各组细胞SnoN/Ski及Arkadia蛋白的表达。结果:(1)正常系膜细胞中SnoN/Ski蛋白大量表达,Arkadia蛋白表达较弱。(2)高糖作用后SnoN/Ski蛋白表达减弱,Arkadia蛋白表达增强(P<0.05)。(3)与高糖组比较,高糖加入MG132后SnoN/Ski蛋白表达增加,Arkadia蛋白表达减弱(P<0.01)。(4)甘露醇组与正常组比较SnoN/Ski及Arkadia蛋白表达均无明显差异(P>0.05)。结论:(1)高糖可通过泛素蛋白酶体途径降解SnoN/Ski蛋白致其低表达。(2)E3连接酶Arkadia参与了高糖诱导的SnoN/Ski的泛素化降解。 展开更多

关键词 SnoN/Ski 泛素-蛋白酶体通路 Arkadia 糖尿病肾病

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