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沙漠小球藻GTD4C-2胞内酸性糖的提取优化、纯化及抗氧化活性分析
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作者 张凯月 周永顺 +3 位作者 韩凯 王璐 陈福龙 高剑峰 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期1112-1120,共9页
本研究通过中心复合设计,采用响应曲面法优化沙漠小球藻GTD4C-2(Chlorella sp.GTD4C-2)胞内多糖(intracellular polysaccharide,IPSs)提取工艺。得到最佳提取条件:提取时间:1 h;提取温度:80℃;固液比(g/mL):1∶25。通过最佳提取条件,提... 本研究通过中心复合设计,采用响应曲面法优化沙漠小球藻GTD4C-2(Chlorella sp.GTD4C-2)胞内多糖(intracellular polysaccharide,IPSs)提取工艺。得到最佳提取条件:提取时间:1 h;提取温度:80℃;固液比(g/mL):1∶25。通过最佳提取条件,提取的IPSs进行离子色谱分离纯化,而后采用高效凝胶色谱、气相色谱与质谱联用和傅里叶红外技术对IPSs进行结构分析。此外,还对其进行DPPH和羟基自由基清除能力检测。得到分子量稳定的IPS-2和IPS-3两种酸性糖,分子量分别为53.1 kDa和25.6 kDa;硫酸基含量分别为(5.69±0.11)%和(8.46±0.03)%;且单糖组成均为葡萄糖、半乳糖。体外抗氧化能力(以V C为阳性对照):V C>IPSs>IPS-3>IPS-2。从沙漠小球藻中分离得到的多糖具有抗氧化能力,且粗提IPSs抗氧化活性强于IPS-2和IPS-3。沙漠小球藻多糖在食品,药品和保健品等方面具有广阔的应用前景。 展开更多
关键词 沙漠小球藻 工艺优化 响应曲面 多糖 抗氧化活性
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沙漠小球藻转植物表达载体的表达预测 被引量:1
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作者 汪文伦 王丹 +3 位作者 牟云 许万云 胡梦薇 高剑峰 《江苏农业科学》 北大核心 2016年第6期41-45,共5页
以建立小球藻(沙漠小球藻)表达系统为目的,为利用小球藻重组表达外源蛋白,以及GFP荧光特性研究沙漠中的小球藻生理及理化性质提供基础方法;同时也探索植物表达载体p CAMBIA2300-35S-OCS能否在沙漠小球藻中表达。通过菌落PCR验证E.coli ... 以建立小球藻(沙漠小球藻)表达系统为目的,为利用小球藻重组表达外源蛋白,以及GFP荧光特性研究沙漠中的小球藻生理及理化性质提供基础方法;同时也探索植物表达载体p CAMBIA2300-35S-OCS能否在沙漠小球藻中表达。通过菌落PCR验证E.coli DH5α是否含有目的基因(GFP基因)的重组植物表达载体p CAMBIA2300-35S-GFP-OCS,然后从E.coli DH5α中提取也构建完成的重组植物表达载体pCAMBIA2300-35S-GFP-OCS;利用电转化的方法将重组植物表达载体p CAMBIA2300-35S-GFP-OCS转入到小球藻细胞中;将电转的小球藻在含有100 mg/L卡那霉素的BBM固体培养基中筛选出单克隆,将单克隆在含有15 mg/L卡那霉素的BBM液体培养基中扩大培养,然后利用PCR和RT-PCR预测绿色荧光蛋白基因(GFP基因)的存在与否和表达情况,再利用SDS-PAGE和荧光倒置显微镜观察绿色荧光蛋白表达情况。通过SDS-PAGE和荧光倒置显微镜观察结果表明绿色荧光蛋白(GFP)在小球藻中表达成功。试验结果表明重组植物表达pCAMBIA2300-35S-OCS能够在小球藻中表达外源蛋白,以及利用GFP的荧光特性研究小球藻的生理生化差异;也为小球藻在沙漠环境上的应用提供基础。 展开更多
关键词 沙漠小球藻 电转化 植物表达载体 绿色荧光蛋白
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持续盐胁迫对沙漠小球藻生长的影响
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作者 李红 谭君 +1 位作者 牟云 高剑峰 《生物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期60-63,共4页
为探究不同盐胁迫水平下持续盐胁迫对TLD2A1、TLD6B、GTD7c-2和TGD8A1等4株沙漠小球藻生长的影响,研究不同NaCl添加量、不同胁迫时间下4株小球藻的OD_(680)值、致死率、生物量、比生长速率的变化,筛选出对盐胁迫响应显著的小球藻,优化了... 为探究不同盐胁迫水平下持续盐胁迫对TLD2A1、TLD6B、GTD7c-2和TGD8A1等4株沙漠小球藻生长的影响,研究不同NaCl添加量、不同胁迫时间下4株小球藻的OD_(680)值、致死率、生物量、比生长速率的变化,筛选出对盐胁迫响应显著的小球藻,优化了其NaCl添加量的梯度。结果表明:除了添加0.2 mol/L NaCl胁迫下生物量增大外,随着NaCl添加量的增大,4株小球藻的OD_(680)值、生物量、比生长速率受到的抑制程度均逐渐增大,致死率逐渐增大;随胁迫时间的延长,OD_(680)值、致死率、生物量逐渐增大,比生长速率先增大后减小。总体而言,GTD7c-2耐盐,GTD8A1盐胁迫后生长不稳定,TLD2A1最不耐盐,TLD6B受盐胁迫的响应最明显。 展开更多
关键词 沙漠小球藻 持续盐胁迫 生长 影响 比较
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模拟持续干旱胁迫对4株沙漠小球藻生长的影响及比较研究
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作者 李红 谭君 +1 位作者 牟云 高剑峰 《石河子大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2022年第4期497-502,共6页
沙漠小球藻(Chlorella sp.)生长在极其干旱的环境中,为探究持续干旱胁迫对沙漠来源小球藻生长的影响。以新疆古尔班通古特、塔克拉玛干沙漠分离的4株小球藻菌株(TLD2A1、TLD6B、GTD7c-2、GTD8A1)为研究对象,测定了PEG-6000浓度、不同干... 沙漠小球藻(Chlorella sp.)生长在极其干旱的环境中,为探究持续干旱胁迫对沙漠来源小球藻生长的影响。以新疆古尔班通古特、塔克拉玛干沙漠分离的4株小球藻菌株(TLD2A1、TLD6B、GTD7c-2、GTD8A1)为研究对象,测定了PEG-6000浓度、不同干旱胁迫持续时间对小球藻的OD_(680)值、致死率、生物量、比生长速率的影响,筛选出对干旱胁迫耐受性最优的小球藻菌株,优化了菌株的PEG-6000浓度梯度。研究表明,随着PEG-6000浓度的增大,4株小球藻的OD_(680)值、生物量、比生长速率的下降程度均逐渐增大,致死率显著增大(P<0.05);随胁迫时间的延长,OD_(680)值、致死率、生物量逐渐增大,比生长速率先增大后减小(P<0.05)。总体而言,GTD7c-2干旱胁迫后生长不稳定;TLD2A1耐旱,但生物量、比生长速率最小;TLD6B生长速率最大,受干旱胁迫的响应最明显。本研究阐明了模拟持续干旱胁迫对4株沙漠小球藻生长的影响,将为后期沙漠小球藻耐干旱胁迫的生理学和分子生物学研究提供材料和基础,也为小球藻耐旱藻种的选育应用提供参考依据。 展开更多
关键词 持续干旱胁迫 沙漠小球藻 生长 影响 筛选
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水胁迫下沙漠小球藻蛋白质组学分析
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作者 谭君 牟云 +3 位作者 周光普 周永顺 徐杰 高剑峰 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第10期207-216,共10页
通过研究小球藻(Chlorella sp.)在干旱胁迫下的蛋白质组变化,从蛋白质表达水平解释小球藻对干旱胁迫的响应机理。以20%的PEG 6000胁迫处理0、6、12、18、24和30 d,提取小球藻总蛋白,利用双向电泳和质谱鉴定技术分析差异蛋白。共鉴定29... 通过研究小球藻(Chlorella sp.)在干旱胁迫下的蛋白质组变化,从蛋白质表达水平解释小球藻对干旱胁迫的响应机理。以20%的PEG 6000胁迫处理0、6、12、18、24和30 d,提取小球藻总蛋白,利用双向电泳和质谱鉴定技术分析差异蛋白。共鉴定29个差异蛋白,按功能可分为7类:光合作用、能量合成和转化、物质代谢、抗氧化、转运和细胞结构、抗逆和功能未知蛋白质。这些蛋白的表达变化影响着沙漠小球藻的油脂积累,对干旱胁迫应答起到了至关重要的作用,并直接或间接地参与了沙漠小球藻细胞内的光合作用和油脂合成。 展开更多
关键词 沙漠小球藻 干旱胁迫 蛋白质组 差异表达蛋白
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三株小球藻抗旱性能评价
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作者 韩凯 周永顺 +3 位作者 张凯月 王路 高剑峰 陈福龙 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期244-254,共11页
【目的】研究沙漠小球藻(desert Chlorella)应对干旱胁迫的生理响应,分离培养抗旱能力强的小球藻,为沙漠微藻资源的开发和生产奠定基础。【方法】以2株分离自新疆塔克拉玛干沙漠和古尔班通古特沙漠中的小球藻和1株购买自中国科学院淡水... 【目的】研究沙漠小球藻(desert Chlorella)应对干旱胁迫的生理响应,分离培养抗旱能力强的小球藻,为沙漠微藻资源的开发和生产奠定基础。【方法】以2株分离自新疆塔克拉玛干沙漠和古尔班通古特沙漠中的小球藻和1株购买自中国科学院淡水藻种库普通淡水小球藻(Chlorella vulgaris)为材料,使用Bold’s Basal Medium(BBM)作为培养基,通过聚乙二醇(PEG6000)模拟不同程度干旱胁迫,测定3株小球藻在干旱胁迫下的生长速度和生理生化指标,并通过主成分分析、隶属函数、抗旱性综合度量值等方法评价3株小球藻抗旱能力。【结果】干旱胁迫能使小球藻细胞密度(OD_(680))和生物量(干重)下降,叶绿素a、叶绿素b含量降低,丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性上升,但是可溶性糖、蛋白质、脯氨酸(Pro)含量和过氧化氢酶(CAT)活性则因胁迫程度和时间的变化而不同,主成分分析显示糖、Pro、SOD、CAT、叶绿素b在小球藻抗干旱过程中发挥重要作用;根据抗旱系数分析,重度干旱时沙漠小球藻可溶性糖、蛋白质、Pro、SOD、CAT比普通时作用更强。【结论】综合评价显示3株小球藻的抗旱性强弱依次为:沙漠小球藻TLD 6B>沙漠小球藻GTD 8A1>普通小球藻FACHB-2338,且沙漠小球藻在生长速度、糖含量、蛋白质含量方面相比普通小球藻更具有优势。 展开更多
关键词 沙漠小球藻 干旱胁迫 生理指标 隶属函数分析 主成分分析 抗旱性评价
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