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水貂阿留申病毒纳米PCR检测方法的建立与初步应用 被引量:6
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作者 杨瑞梅 张传美 +1 位作者 张洪亮 单虎 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期2288-2293,共6页
为建立便捷、灵敏的水貂阿留申病病毒(AMDV)纳米PCR检测方法,根据AMDV NS1基因的保守序列设计一对特异性引物,对纳米PCR反应的退火温度、胶体金浓度进行了优化;测序检测扩增基因是否发生变异;对特异性和灵敏度进行了评估。结果表明,... 为建立便捷、灵敏的水貂阿留申病病毒(AMDV)纳米PCR检测方法,根据AMDV NS1基因的保守序列设计一对特异性引物,对纳米PCR反应的退火温度、胶体金浓度进行了优化;测序检测扩增基因是否发生变异;对特异性和灵敏度进行了评估。结果表明,此纳米PCR的最佳退火温度为51℃,普通PCR为55℃;加入胶体金最佳浓度在0.2~0.8nmol·L-1,纳米PCR与普通PCR产物测序相似性大于99%。特异性检测表明该纳米PCR方法只扩增AMDV而不能扩增犬瘟热病毒和水貂肠炎细小病毒。在粪尿样品检测中该纳米PCR敏感性比普通PCR高10倍。检测40份临床样品,结果表明该方法比对流免疫电泳检测敏感性提高,从而为用粪、尿等低病毒样品检测水貂阿留申病提供了一种新的有效方法。 展开更多
关键词 水貂阿留申病毒 纳米PCR 检测
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水貂阿留申病病毒分子生物学研究进展 被引量:7
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作者 李艳伍 张瑞 +1 位作者 姜平 贾赟 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2009年第9期100-104,共5页
水貂阿留申病病毒是一种在水貂中广泛存在的重要病原体。该病毒属阿留申病毒属,主要编码4种蛋白(结构蛋白VP1、VP2和非结构蛋白NS1、NS2)。VP1蛋白在协助病毒产生感染性方面起着重要作用;VP2蛋白是该病毒的主要免疫原性抗原,能体外中和... 水貂阿留申病病毒是一种在水貂中广泛存在的重要病原体。该病毒属阿留申病毒属,主要编码4种蛋白(结构蛋白VP1、VP2和非结构蛋白NS1、NS2)。VP1蛋白在协助病毒产生感染性方面起着重要作用;VP2蛋白是该病毒的主要免疫原性抗原,能体外中和病毒;NS1和NS2对病毒在宿主细胞中的复制起重要的调节作用。该病毒的分子生物学诊断技术主要有核酸杂交技术、PCR和基因芯片检测技术。 展开更多
关键词 水貂阿留申病毒 结构蛋白 非结构蛋白 分子生物学诊断技术
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水貂阿留申病病毒VP2截短基因的原核表达
3
作者 李晶 时坤 +2 位作者 曾范利 宋继伟 杜锐 《动物医学进展》 北大核心 2015年第4期15-18,共4页
为获得水貂阿留申病病毒G株(ADV-G株)VP2截短基因表达的蛋白,将ADV-G株VP2基因的主要抗原区片段克隆至原核表达载体pGEX-4T-1中,通过不同浓度的IPTG,不同诱导时间以及加入不同的化学分子伴侣(甘油、葡萄糖、蔗糖、二甲基亚砜、乙醇)进... 为获得水貂阿留申病病毒G株(ADV-G株)VP2截短基因表达的蛋白,将ADV-G株VP2基因的主要抗原区片段克隆至原核表达载体pGEX-4T-1中,通过不同浓度的IPTG,不同诱导时间以及加入不同的化学分子伴侣(甘油、葡萄糖、蔗糖、二甲基亚砜、乙醇)进行诱导表达,确定目的蛋白表达的最佳条件。经SDS-PAGE和Western blot分析,表明终浓度为1mmol/L的IPTG诱导6h目的蛋白的表达量最高,分子质量约为53ku。SDS-PAGE分析表明,葡萄糖和乙醇抑制了目的蛋白的表达,而蔗糖、甘油和二甲基亚砜提高了目的蛋白的表达量,获得的目的蛋白具有良好的反应原性。 展开更多
关键词 水貂阿留申病毒 VP2截短基因 原核表达
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水貂阿留申病病毒单克隆抗体的研制和初步应用
4
作者 华育平 王金生 《中国畜禽传染病》 CSCD 1990年第6期49-52,共4页
以 Sp2/0骨髓瘤细胞与以水貂阿留申病病毒抗原免疫的 BALB/C 鼠脾细胞融合,建立了 FA_2和 SD_3二个杂交瘤细胞株.其分泌的单克隆抗体(McAb),用 ELISA 和IF 方法测定证明,具有抗水貂阿留申病病毒的特异性.聚丙烯酰胺凝胶电泳仅出现一条带... 以 Sp2/0骨髓瘤细胞与以水貂阿留申病病毒抗原免疫的 BALB/C 鼠脾细胞融合,建立了 FA_2和 SD_3二个杂交瘤细胞株.其分泌的单克隆抗体(McAb),用 ELISA 和IF 方法测定证明,具有抗水貂阿留申病病毒的特异性.聚丙烯酰胺凝胶电泳仅出现一条带.用兔抗鼠免疫球蛋白标准血清做免疫双扩散试验,均属 IgG_1亚类.染色体计数、克隆培养及抗体分泌的动力学变化结果都表明,其遗传特性稳定,具有分泌较高滴度抗体能力.以酶联 McAb 做ELISA,对17份貂血清进行检测,其结果与 PPA-ELISA结果基本一致.初步证明.此 McAb 具有实际应用价值. 展开更多
关键词 水貂 阿留申 单克隆抗体 病毒
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水貂阿留申病病毒研究进展 被引量:1
5
作者 汪婷婷 马青霞 +7 位作者 刘宏莹 许立慧 刘莹玉 宫庆龙 李健明 时坤 冷雪 杜锐 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期3354-3363,共10页
水貂阿留申病(Aleutian mink disease,AMD)是由水貂阿留申病病毒(Aleutian mink disease virus,AMDV)引起的水貂的重要传染性疾病之一,深入开展对AMDV的研究对于该病的防控有重要意义。AMDV基因组全长约为4.8 kb,主要编码2种结构蛋白和... 水貂阿留申病(Aleutian mink disease,AMD)是由水貂阿留申病病毒(Aleutian mink disease virus,AMDV)引起的水貂的重要传染性疾病之一,深入开展对AMDV的研究对于该病的防控有重要意义。AMDV基因组全长约为4.8 kb,主要编码2种结构蛋白和3种非结构蛋白,它们在病毒复制、增殖及致病过程中发挥重要作用。AMDV的复制依赖于代谢活跃的细胞,对于幼貂,病毒感染肺泡Ⅱ型细胞会造成急性致死性肺炎,感染巨噬细胞则会引起成年水貂患高丙种球蛋白血症和免疫复合物介导的肾小球肾炎等慢性进行性疾病。笔者从AMDV侵入细胞的受体途径、诱导细胞凋亡途径及病毒复制等方面对其致病机理进行阐述。AMDV在全世界范围内广泛流行,现有的检测方法主要分为血清学诊断方法和分子生物学诊断方法。目前,尚未开发出安全有效的针对AMDV的商品化疫苗,随着生物学技术的快速发展,在灭活疫苗、DNA疫苗和亚单位疫苗的研制上有所进展;抗病毒的新方法,如筛选AMDV耐受貂,提高水貂免疫力和靶向适配体技术为AMD的防控提供了新思路。文章从AMDV编码蛋白功能、病毒细胞嗜性与复制、临床表现与致病机制、诊断方法及防治措施等方面对近年来国内外AMDV的研究进展进行总结,旨在为AMDV安全有效疫苗和防治药物的研发提供参考。 展开更多
关键词 水貂阿留申病毒(amdv) 分子蛋白 细胞嗜性 机制 防治措施
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不同毒力水貂阿留申病毒在猫肾细胞中的增殖特性及凋亡特性的比较研究 被引量:2
6
作者 王心舞 冷雪 杜锐 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2017年第9期2783-2791,共9页
试验旨在对不同毒力水貂阿留申病毒(Aleutian mink disease virus,AMDV)在猫肾细胞(feline kidney cell,CRFK)中的增殖规律及其诱导细胞凋亡情况进行比较研究。将标准毒株AMDV-G及分离到的野毒株AMDVDL124、AMDV-DL125、AMDV-QD2、AMDV-... 试验旨在对不同毒力水貂阿留申病毒(Aleutian mink disease virus,AMDV)在猫肾细胞(feline kidney cell,CRFK)中的增殖规律及其诱导细胞凋亡情况进行比较研究。将标准毒株AMDV-G及分离到的野毒株AMDVDL124、AMDV-DL125、AMDV-QD2、AMDV-QD3、AMDV-ZJ3接种CRFK细胞,应用间接免疫荧光、实时荧光定量PCR、TCID50测定技术研究病毒在细胞中的复制及表达情况,同时检测病毒诱导的细胞凋亡情况。间接免疫荧光结果显示,5株野毒株荧光着色趋势差异不大,均在感染后12h出现荧光,随感染时间延长荧光增多,AMDV-G荧光出现时间比野毒株晚,但病毒感染后72h几乎所有细胞均出现荧光;实时荧光定量PCR结果显示,基因组复制趋势大致相同,AMDV-DL125感染后3h复制开始,AMDV-G感染后24h复制才开始并呈快速增长趋势,但感染后72h均达到峰值。TCID_(50)检测结果表明,0~12h为病毒感染潜伏期,AMDV-G感染后60h达到峰值,野毒株均在感染后72h达到峰值,但是6株病毒均能在感染后48~72h维持较高的感染滴度,其后随细胞崩解而降低。SPSS 23.0统计软件分析凋亡检测结果显示,与对照组相比,野毒株感染细胞后2~12h诱导细胞凋亡差异显著(P<0.05),AMDV-G诱导细胞凋亡差异明显低于野毒株,但是诱导细胞凋亡时间较野毒株长,在感染后24h仍对细胞凋亡有较明显的诱导作用,但是各病毒诱导的细胞凋亡主要集中在2~12h。该结果为AMDV的培养、鉴定及致病机理研究提供一定参考。 展开更多
关键词 水貂阿留申病毒(amdv) 猫肾细胞(CPFK) 增殖特性 凋亡特性
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用牛痘重组病毒表达水貂阿留申病细小病毒衣壳蛋白 被引量:1
7
作者 Clem.,DL 吴威 《国外特种经济动植物》 1993年第3期16-19,F003,共5页
关键词 水貂 阿留申 病毒 衣壳蛋白
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水貂阿留申细小病毒的致病机制、鉴定及防治方法 被引量:1
8
作者 卞大伟 《山东畜牧兽医》 2017年第4期62-65,共4页
水貂阿留申细小病毒(Aleutianminkdiseaseparvovirus,AMDV)是感染水貂的自主复制型细小病毒,是引起水貂阿留申病的病原。AMDV感染水貂后会产生抗体依赖的病毒感染增强作用(Antibody-dependentenhancement,ADE),还没有效果较好的疫... 水貂阿留申细小病毒(Aleutianminkdiseaseparvovirus,AMDV)是感染水貂的自主复制型细小病毒,是引起水貂阿留申病的病原。AMDV感染水貂后会产生抗体依赖的病毒感染增强作用(Antibody-dependentenhancement,ADE),还没有效果较好的疫苗进行防控。本文主要对AMDV的致病机制及目前的鉴定和防治方法进行综述。水貂阿留申细小病毒是感染水貂的自主复制型细小病毒,给世界范围的水貂养殖业造成巨大损失[1]。 展开更多
关键词 水貂阿留申 细小病毒 机制 防治 鉴定 病毒感染 MDV感染 增强作用
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水貂阿留申病细小病毒在成年水貂淋巴组织树状滤泡细胞和巨噬细胞内…
9
作者 Mori,S 吴威 《国外特种经济动植物》 1993年第4期1-3,共3页
关键词 水貂 阿留申 病毒 淋巴组织
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水貂阿留申病诊断技术的进展 被引量:1
10
作者 李俚 胡哲 +4 位作者 孙金辉 关东嵩 方孟颀 王晓钧 路义鑫 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2018年第11期58-60,共3页
水貂阿留申病(AMD)是由水貂阿留申病毒(AMDV)引起的一种能够引起自身免疫紊乱的慢性进行性传染病。引起该病的病毒可感染各个年龄段的水貂,依据感染毒株类型的不同,病症呈多样性。对新生仔貂而言,AMDV引起的死亡率几乎可达到100%;而对... 水貂阿留申病(AMD)是由水貂阿留申病毒(AMDV)引起的一种能够引起自身免疫紊乱的慢性进行性传染病。引起该病的病毒可感染各个年龄段的水貂,依据感染毒株类型的不同,病症呈多样性。对新生仔貂而言,AMDV引起的死亡率几乎可达到100%;而对于成年水貂,该病通常引起水貂的持续感染,并表现为终生病毒血症、高蛋白血症、动脉血管炎和由病毒抗体复合体诱导的肾小球肾炎及肝炎等。临床上还没有能够防治AMD的有效疫苗和药物,因此目前防控该病的手段主要为水貂新引入前的检疫、场址的彻底消毒,以及感染貂群中病畜的扑杀。大多数情况下,水貂感染AMD后没有典型的临床症状,确诊主要依赖于实验室的检测。本文对近年来国内外AMD的主要诊断方法及特点进行综述,以期为新水貂引入前的检疫、环境消毒效果的评价及感染貂场AMD的防控提供方法依据。 展开更多
关键词 水貂阿留申 诊断技术 持续感染 阿留申病毒 病毒血症 临床症状 消毒效果 肾小球肾炎
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阿留申病细小病毒的分离及VP2基因遗传衍生分析 被引量:8
11
作者 华育平 马建 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第9期960-963,共4页
The samples of minks from several main mink farming areas were detected by the methods of counter immunoelectrophoresis(CIEP)and polymerase chain reaction (PCR)and some data about Aleutian mink disease parvovirus(ADV)... The samples of minks from several main mink farming areas were detected by the methods of counter immunoelectrophoresis(CIEP)and polymerase chain reaction (PCR)and some data about Aleutian mink disease parvovirus(ADV)infection in farmed mink was obtained. Partial VP2 genes,which include a hypervariable region, of 16 ADV strains isolated were separately amplified by PCR and sequenced. Comparison and analysis of these genes sequences and the related sequences of ADV-G,ADV-Utah1 and ADV-K that reported in the USA and European had been completed. The result shows that : firstly, the closed relationship exists between domestic ADV isolates and foreign ones,and the domestic AD maybe introduced from foreign countries. Secondly, the ADV isolates we obtained have a high genetic diversity. DL1, DL2, MS3 and MS5 may be some new types of ADV because of so obvious differences compared with foreign isolates in the genes sequences. 展开更多
关键词 水貂阿留申病毒 VP2基因 遗传变异
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水貂阿留申病的诊治 被引量:1
12
作者 周春凤 张志亭 《养殖技术顾问》 2008年第2期50-50,共1页
水貂阿留申病是由阿留申病病毒引起的一种传染病。该病毒属细小病毒科,在水貂中主要引发两种不同类型的疾病。成年水貂感染病毒后,表现出典型的水貂阿留申病,以体内产生高水平的血清丙种球蛋白,浆细胞增多,持续性病毒血症及由免疫... 水貂阿留申病是由阿留申病病毒引起的一种传染病。该病毒属细小病毒科,在水貂中主要引发两种不同类型的疾病。成年水貂感染病毒后,表现出典型的水貂阿留申病,以体内产生高水平的血清丙种球蛋白,浆细胞增多,持续性病毒血症及由免疫复合物沉积引发的严重肾小球肾炎并伴有动脉炎、肝炎、卵巢炎或睾丸炎等主要症状。而新生幼貂感染该病后,病毒在病貂体内肺泡Ⅱ型细胞中迅速大量繁殖,表现出一种急性致死性的间质性肺炎。 展开更多
关键词 阿留申 水貂 细小病毒 诊治 丙种球蛋白 肾小球肾炎 免疫复合物 间质性肺炎
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水貂阿留申病防制的研究进展
13
作者 李长生 王喜萍 《中国动物检疫》 CAS 2000年第12期38-40,共3页
水貂阿留申病防制是水貂养殖领域的世界性难题。该病临床特征是全身性淋巴细胞增殖、血清γ-球蛋白增高、肾肿大、动脉性血管炎和肝炎、持续性毒血症。多年来,人们对水貂阿留申病防制的研究主要集中于对该病的诊断和淘汰,经历了碘凝... 水貂阿留申病防制是水貂养殖领域的世界性难题。该病临床特征是全身性淋巴细胞增殖、血清γ-球蛋白增高、肾肿大、动脉性血管炎和肝炎、持续性毒血症。多年来,人们对水貂阿留申病防制的研究主要集中于对该病的诊断和淘汰,经历了碘凝集反应,对流免疫电泳技术两个主要阶段。近年来,通过研究阿留申病循环免疫复合物的测定、抗体消长规律、免疫机制、试用免疫接种,使最终攻破阿留申病防制难关出现曙光。 展开更多
关键词 水貂 阿留申 防制 阿留申病毒 机理 症状
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水貂阿留申病诊断技术研究进展 被引量:3
14
作者 韦韬 吴艳虹 +3 位作者 丛丽 赵永强 马瑞芳 邵西群 《动物医学进展》 北大核心 2019年第6期78-82,共5页
水貂阿留申病是水貂养殖业的重要疫病,目前无疫苗预防,主要通过发展诊断技术,淘汰感染貂防控该病。论文总结了在貂场应用的基因与抗体检测技术,基因检测具有高灵敏度和特异性,能够检测到动物带毒感染,不同类型的基因检测技术对变异性强... 水貂阿留申病是水貂养殖业的重要疫病,目前无疫苗预防,主要通过发展诊断技术,淘汰感染貂防控该病。论文总结了在貂场应用的基因与抗体检测技术,基因检测具有高灵敏度和特异性,能够检测到动物带毒感染,不同类型的基因检测技术对变异性强的阿留申病毒检测各有所长;抗体检测是水貂阿留申病的主要检测方式,研究者不断创新和改进原有技术,趋向对阿留申病的规模化精准检测,但单一的抗体检测方法淘汰感染貂具有局限性。论文通过对两类检测技术分析,建议采用基因与抗体的联合检测方法,从感染貂群中区分耐受貂或抗性貂,期望为国内高感染率貂场的检测和选种提供参考。 展开更多
关键词 水貂阿留申 阿留申病毒 诊断
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狐脑炎及水貂阿留申病问答
15
作者 闫新华 《特种经济动植物》 2007年第8期20-20,共1页
狐脑炎有何临床特征和流行特点?怎样预防? 答:狐脑炎是由犬腺病毒感染引起的一种急性、热性传染病,病狐大多数呈现脑炎症状,于阵发性抽搐和麻痹死亡,病程1~2天,死亡率在10%~40%。另一种类型是肝炎型,也称传染性肝炎,表现肝极度肿... 狐脑炎有何临床特征和流行特点?怎样预防? 答:狐脑炎是由犬腺病毒感染引起的一种急性、热性传染病,病狐大多数呈现脑炎症状,于阵发性抽搐和麻痹死亡,病程1~2天,死亡率在10%~40%。另一种类型是肝炎型,也称传染性肝炎,表现肝极度肿大,质地脆、土黄色,全身皮下和脂肪黄染,病程较长,无治愈率。本病幼龄狐多发,一般呈散在发生, 展开更多
关键词 脑炎 阿留申 传染性肝炎 水貂 病毒感染 热性传染 流行特点
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水貂阿留申病发病机理的研究进展 被引量:4
16
作者 马建 华育平 《动物医学进展》 CSCD 2005年第1期39-42,共4页
水貂阿留申病是由阿留申病病毒引起的一种可对水貂养殖业造成严重损失的传染病。该病困扰动物医学界多年 ,始终未得到攻克。近年来随着分子生物学技术的发展 ,国内外学者对该病分子水平的发病机理有了更多的认识 ,研究内容主要集中在与... 水貂阿留申病是由阿留申病病毒引起的一种可对水貂养殖业造成严重损失的传染病。该病困扰动物医学界多年 ,始终未得到攻克。近年来随着分子生物学技术的发展 ,国内外学者对该病分子水平的发病机理有了更多的认识 ,研究内容主要集中在与水貂阿留申病发病密切相关的抗病毒抗体、病毒核酸的晚启动子P3 6及其顺式作用元件(cis acting)、结构蛋白VP2等方面。文章对以上研究进展进行了详细的归纳总结与分析 ,并在此基础上提出了尝试使用反义RNA或干扰RNA对该病进行预防、治疗的设想 ,以期今后对阿留申病的继续深入研究能有所帮助。 展开更多
关键词 水貂阿留申 机理 病毒抗体 晚启动子P36 结构蛋白VP2
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貉群携带多种病毒传染水貂
17
作者 John R.Corbam William J.Foreyt 陈克斌 《特产研究》 2003年第2期64-64,共1页
水貂饲养者应该认识到浣熊能传染犬瘟热、阿留申病及水貂病毒性肠炎病.由于浣熊是狂犬病的主要传染源,毛皮兽饲养者应自身保护好,防止咬伤或抓伤.浣熊的活动范围在1~20平方英里,行走的距离相当长.有记录显示,它们每天能行走50多英里.... 水貂饲养者应该认识到浣熊能传染犬瘟热、阿留申病及水貂病毒性肠炎病.由于浣熊是狂犬病的主要传染源,毛皮兽饲养者应自身保护好,防止咬伤或抓伤.浣熊的活动范围在1~20平方英里,行走的距离相当长.有记录显示,它们每天能行走50多英里.据密西根州官方公布,该州拥有浣熊的数量达几百万只.不容质疑,在其它州,浣熊的数量也很多.(本文略有删节) 展开更多
关键词 水貂 犬瘟热 阿留申病毒 病毒性肠炎 狂犬 症状 诊断 传播 传染
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水貂阿留申病的检测技术总结 被引量:3
18
作者 毕世坤 薛强 《山东畜牧兽医》 2003年第5期42-42,共1页
关键词 水貂 阿留申 检测技术 血清 抗原 电泳 对流电泳免疫法 病毒
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水貂阿留申病 被引量:3
19
作者 黄永凯 周煜 孔德军 《云南畜牧兽医》 2006年第5期41-41,共1页
关键词 阿留申 水貂 病毒性传染 丙种球蛋白 遗传性疾 繁殖机能 病毒血症 秋冬季节
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水貂阿留申病的危害及防控对策 被引量:1
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作者 曲文燕 李永芳 《山东畜牧兽医》 2019年第2期76-77,共2页
水貂阿留申病是由阿留申病毒感染水貂引起的以终生毒血症、全身淋巴细胞增殖、肾小球肾炎为特征的一种慢性病毒病。各品系水貂都可以感染,是世界公认的水貂的三大疫病之一。该病既可以通过飞沫、粪便、尿液、血液、配种等水平传播,又可... 水貂阿留申病是由阿留申病毒感染水貂引起的以终生毒血症、全身淋巴细胞增殖、肾小球肾炎为特征的一种慢性病毒病。各品系水貂都可以感染,是世界公认的水貂的三大疫病之一。该病既可以通过飞沫、粪便、尿液、血液、配种等水平传播,又可以通过母婴垂直传播。 展开更多
关键词 水貂阿留申 防控 危害 淋巴细胞增殖 病毒感染 肾小球肾炎 水平传播 垂直传播
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