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水貂阿留申病病毒分子生物学研究进展 被引量:7
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作者 李艳伍 张瑞 +1 位作者 姜平 贾赟 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2009年第9期100-104,共5页
水貂阿留申病病毒是一种在水貂中广泛存在的重要病原体。该病毒属阿留申病毒属,主要编码4种蛋白(结构蛋白VP1、VP2和非结构蛋白NS1、NS2)。VP1蛋白在协助病毒产生感染性方面起着重要作用;VP2蛋白是该病毒的主要免疫原性抗原,能体外中和... 水貂阿留申病病毒是一种在水貂中广泛存在的重要病原体。该病毒属阿留申病毒属,主要编码4种蛋白(结构蛋白VP1、VP2和非结构蛋白NS1、NS2)。VP1蛋白在协助病毒产生感染性方面起着重要作用;VP2蛋白是该病毒的主要免疫原性抗原,能体外中和病毒;NS1和NS2对病毒在宿主细胞中的复制起重要的调节作用。该病毒的分子生物学诊断技术主要有核酸杂交技术、PCR和基因芯片检测技术。 展开更多
关键词 水貂阿留申病病毒 结构蛋白 非结构蛋白 分子生物学诊断技术
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水貂阿留申病病毒VP2截短基因的原核表达
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作者 李晶 时坤 +2 位作者 曾范利 宋继伟 杜锐 《动物医学进展》 北大核心 2015年第4期15-18,共4页
为获得水貂阿留申病病毒G株(ADV-G株)VP2截短基因表达的蛋白,将ADV-G株VP2基因的主要抗原区片段克隆至原核表达载体pGEX-4T-1中,通过不同浓度的IPTG,不同诱导时间以及加入不同的化学分子伴侣(甘油、葡萄糖、蔗糖、二甲基亚砜、乙醇)进... 为获得水貂阿留申病病毒G株(ADV-G株)VP2截短基因表达的蛋白,将ADV-G株VP2基因的主要抗原区片段克隆至原核表达载体pGEX-4T-1中,通过不同浓度的IPTG,不同诱导时间以及加入不同的化学分子伴侣(甘油、葡萄糖、蔗糖、二甲基亚砜、乙醇)进行诱导表达,确定目的蛋白表达的最佳条件。经SDS-PAGE和Western blot分析,表明终浓度为1mmol/L的IPTG诱导6h目的蛋白的表达量最高,分子质量约为53ku。SDS-PAGE分析表明,葡萄糖和乙醇抑制了目的蛋白的表达,而蔗糖、甘油和二甲基亚砜提高了目的蛋白的表达量,获得的目的蛋白具有良好的反应原性。 展开更多
关键词 水貂阿留申病病毒 VP2截短基因 原核表达
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水貂阿留申病病毒研究进展 被引量:1
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作者 汪婷婷 马青霞 +7 位作者 刘宏莹 许立慧 刘莹玉 宫庆龙 李健明 时坤 冷雪 杜锐 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期3354-3363,共10页
水貂阿留申病(Aleutian mink disease,AMD)是由水貂阿留申病病毒(Aleutian mink disease virus,AMDV)引起的水貂的重要传染性疾病之一,深入开展对AMDV的研究对于该病的防控有重要意义。AMDV基因组全长约为4.8 kb,主要编码2种结构蛋白和... 水貂阿留申病(Aleutian mink disease,AMD)是由水貂阿留申病病毒(Aleutian mink disease virus,AMDV)引起的水貂的重要传染性疾病之一,深入开展对AMDV的研究对于该病的防控有重要意义。AMDV基因组全长约为4.8 kb,主要编码2种结构蛋白和3种非结构蛋白,它们在病毒复制、增殖及致病过程中发挥重要作用。AMDV的复制依赖于代谢活跃的细胞,对于幼貂,病毒感染肺泡Ⅱ型细胞会造成急性致死性肺炎,感染巨噬细胞则会引起成年水貂患高丙种球蛋白血症和免疫复合物介导的肾小球肾炎等慢性进行性疾病。笔者从AMDV侵入细胞的受体途径、诱导细胞凋亡途径及病毒复制等方面对其致病机理进行阐述。AMDV在全世界范围内广泛流行,现有的检测方法主要分为血清学诊断方法和分子生物学诊断方法。目前,尚未开发出安全有效的针对AMDV的商品化疫苗,随着生物学技术的快速发展,在灭活疫苗、DNA疫苗和亚单位疫苗的研制上有所进展;抗病毒的新方法,如筛选AMDV耐受貂,提高水貂免疫力和靶向适配体技术为AMD的防控提供了新思路。文章从AMDV编码蛋白功能、病毒细胞嗜性与复制、临床表现与致病机制、诊断方法及防治措施等方面对近年来国内外AMDV的研究进展进行总结,旨在为AMDV安全有效疫苗和防治药物的研发提供参考。 展开更多
关键词 水貂阿留申病病毒(AMDV) 分子蛋白 细胞嗜性 机制 防治措施
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水貂阿留申病毒纳米PCR检测方法的建立与初步应用 被引量:6
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作者 杨瑞梅 张传美 +1 位作者 张洪亮 单虎 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期2288-2293,共6页
为建立便捷、灵敏的水貂阿留申病病毒(AMDV)纳米PCR检测方法,根据AMDV NS1基因的保守序列设计一对特异性引物,对纳米PCR反应的退火温度、胶体金浓度进行了优化;测序检测扩增基因是否发生变异;对特异性和灵敏度进行了评估。结果表明,... 为建立便捷、灵敏的水貂阿留申病病毒(AMDV)纳米PCR检测方法,根据AMDV NS1基因的保守序列设计一对特异性引物,对纳米PCR反应的退火温度、胶体金浓度进行了优化;测序检测扩增基因是否发生变异;对特异性和灵敏度进行了评估。结果表明,此纳米PCR的最佳退火温度为51℃,普通PCR为55℃;加入胶体金最佳浓度在0.2~0.8nmol·L-1,纳米PCR与普通PCR产物测序相似性大于99%。特异性检测表明该纳米PCR方法只扩增AMDV而不能扩增犬瘟热病毒和水貂肠炎细小病毒。在粪尿样品检测中该纳米PCR敏感性比普通PCR高10倍。检测40份临床样品,结果表明该方法比对流免疫电泳检测敏感性提高,从而为用粪、尿等低病毒样品检测水貂阿留申病提供了一种新的有效方法。 展开更多
关键词 水貂阿留申病病毒 纳米PCR 检测
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阿留申病细小病毒的分离及VP2基因遗传衍生分析 被引量:8
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作者 华育平 马建 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第9期960-963,共4页
The samples of minks from several main mink farming areas were detected by the methods of counter immunoelectrophoresis(CIEP)and polymerase chain reaction (PCR)and some data about Aleutian mink disease parvovirus(ADV)... The samples of minks from several main mink farming areas were detected by the methods of counter immunoelectrophoresis(CIEP)and polymerase chain reaction (PCR)and some data about Aleutian mink disease parvovirus(ADV)infection in farmed mink was obtained. Partial VP2 genes,which include a hypervariable region, of 16 ADV strains isolated were separately amplified by PCR and sequenced. Comparison and analysis of these genes sequences and the related sequences of ADV-G,ADV-Utah1 and ADV-K that reported in the USA and European had been completed. The result shows that : firstly, the closed relationship exists between domestic ADV isolates and foreign ones,and the domestic AD maybe introduced from foreign countries. Secondly, the ADV isolates we obtained have a high genetic diversity. DL1, DL2, MS3 and MS5 may be some new types of ADV because of so obvious differences compared with foreign isolates in the genes sequences. 展开更多
关键词 水貂阿留申病病毒 VP2基因 遗传变异
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