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大米蛋白的酶水解机制研究——Ⅱ酶水解过程中蛋白质的组分变化
被引量：
7
1
作者
王章存
刘卫东
+2 位作者
申瑞玲
郑坚强
姚惠源
《中国粮油学报》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2007年第4期5-8,13,共5页
凝胶色谱和高效液相色谱分析表明,大米蛋白在碱性蛋白酶Alcalase水解过程中,其可溶性蛋白组分的相对分子质量(Mr.)分布范围相对稳定,但Mr.1350u以下小分子组分的相对含量不断增加;十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析显示...
凝胶色谱和高效液相色谱分析表明,大米蛋白在碱性蛋白酶Alcalase水解过程中,其可溶性蛋白组分的相对分子质量(Mr.)分布范围相对稳定,但Mr.1350u以下小分子组分的相对含量不断增加;十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析显示,随着酶水解反应的进行,Mr.为57、39、26、22ku的亚基逐渐消失,而29ku和13ku两个亚基的含量相应增加,且这两个亚基表现出可抵抗酶水解的特性。氨基酸分析表明,酶解后残余物蛋白中胱氨酸、蛋氨酸等含硫氨基酸的含量显著高于可溶性蛋白中的含量。圆二色光谱(CD)分析显示,酶水解前后大米蛋白的二级结构发生显著变化,在残余物蛋白质组分中自由回转的比例高达71.3%,α-螺旋结构完全消失。
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关键词
大米蛋白
酶
水解机制
亚基
圆二色光谱
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职称材料
基于ESI-CID-MS/MS离子碎片峰特征的香菇多糖水解机制及系列香菇寡糖的制备
被引量：
5
2
作者
张洪涛
朱莉
+1 位作者
张爽
詹晓北
《高等学校化学学报》
SCIE
EI
CAS
CSCD
北大核心
2014年第11期2329-2334,共6页
将香菇多糖和0.02 mol/L三氟乙酸(TFA)溶液按照1 mg∶200μL比例混合并于100℃水解,然后利用快速蛋白液相色谱(FPLC)技术对分别水解2,4,6 h的水解产物中不同聚合度寡糖的组成与丰度进行分析,从而确定最佳水解时间;用确定的最佳时间对水...
将香菇多糖和0.02 mol/L三氟乙酸(TFA)溶液按照1 mg∶200μL比例混合并于100℃水解,然后利用快速蛋白液相色谱(FPLC)技术对分别水解2,4,6 h的水解产物中不同聚合度寡糖的组成与丰度进行分析,从而确定最佳水解时间;用确定的最佳时间对水解残留多糖重复水解3次,直至多糖沉淀消失为止,然后分别对水解产物进行FPLC分离并依次收集每批次的七糖.对七糖进行ESI-CID-MS/MS分析,结合β-1,3-二糖、七糖及β-1,6-葡聚寡糖二糖的ESI-CID-MS/MS质谱特征,可获得每次水解产物中寡糖的结构信息,进而获得香菇多糖的水解机制;最后用P4凝胶柱对水解产物进行色谱分离,获得具有不同聚合度的全序列寡糖.结果表明,香菇多糖的最佳水解时间为4 h,在不同批次的水解过程中香菇寡糖的结构由β-1,3/1,6-寡糖过渡为纯β-1,3-寡糖.
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关键词
香菇多糖
葡聚寡糖
水解机制
电喷雾碰撞诱导串联质谱
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职称材料
青鳞鱼肌肉蛋白复合酶水解机制研究
被引量：
4
3
作者
邓尚贵
杨萍
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2004年第3期67-75,共9页
本文研究了海水鱼青鳞鱼(Harengula Zunasi Bleeker)肌肉蛋白由木瓜蛋白酶和风味酶复合而成的复合酶水解机制。当水解时间固定为120min时,采用正交试验法优选得到复合酶水解的适宜条件为酶浓度为7.5×103IU/g蛋白质、温度为45℃、pH...
本文研究了海水鱼青鳞鱼(Harengula Zunasi Bleeker)肌肉蛋白由木瓜蛋白酶和风味酶复合而成的复合酶水解机制。当水解时间固定为120min时,采用正交试验法优选得到复合酶水解的适宜条件为酶浓度为7.5×103IU/g蛋白质、温度为45℃、pH6.5和底物浓度为5.5g蛋白质%。在此适宜的水解条件下,蛋白质水解度与水解时间的关系曲线类似于已公开发表的沙丁鱼、小龙虾、鲱鱼及鲑鱼的酶水解曲线;在30～210min的水解时间内,水解机理可以用三个线性方程式来描述:DH%=0.026×水解时间+8.85 (r=0.98)、产物游离氨基酸总量TFAA =0.16×水解时间+38.76 (r=0.99)和产物平均链长MLPL=-0.019×水解时间+10.79 (r=-0.96)。产物游离氨基酸分析结果揭示了复合酶对胱氨酸、苯丙氨酸和酪氨酸结合的肽键有最高特异性,而对色氨酸、脯氨酸、天门冬氨酸、丝氨酸、甘氨酸和谷氨酸有最低特异性; 同时,在210min之前达到最大水解力(HC)的游离氨基酸或多或少又参与了新的肽键的形成,揭示复合酶对青鳞鱼肌肉蛋白质不仅具有水解作用而且还有合成作用。水解产物含氮量分析表明复合酶水解产物经离心、0.45 μm和0.22 μm微孔过滤所得到的三种类型的水解产物的含氮化合物在分子大小方面有一定的差异。
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关键词
青鳞鱼
肌肉蛋白
复合酶
水解机制
木瓜蛋白酶
风味酶
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职称材料
题名
大米蛋白的酶水解机制研究——Ⅱ酶水解过程中蛋白质的组分变化
被引量：
7
1
作者
王章存
刘卫东
申瑞玲
郑坚强
姚惠源
机构
郑州轻工业学院食品与生物工程学院
郑州牧业工程高等专科学校
江南大学食品学院
出处
《中国粮油学报》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2007年第4期5-8,13,共5页
基金
国家十五科技攻关项目(2001BA501A03)
文摘
凝胶色谱和高效液相色谱分析表明,大米蛋白在碱性蛋白酶Alcalase水解过程中,其可溶性蛋白组分的相对分子质量(Mr.)分布范围相对稳定,但Mr.1350u以下小分子组分的相对含量不断增加;十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析显示,随着酶水解反应的进行,Mr.为57、39、26、22ku的亚基逐渐消失,而29ku和13ku两个亚基的含量相应增加,且这两个亚基表现出可抵抗酶水解的特性。氨基酸分析表明,酶解后残余物蛋白中胱氨酸、蛋氨酸等含硫氨基酸的含量显著高于可溶性蛋白中的含量。圆二色光谱(CD)分析显示,酶水解前后大米蛋白的二级结构发生显著变化,在残余物蛋白质组分中自由回转的比例高达71.3%,α-螺旋结构完全消失。
关键词
大米蛋白
酶
水解机制
亚基
圆二色光谱
Keywords
rice protein, enzymatic hydrolysis, mechanism, subunit, circular dichroism spectrum
分类号
TS210.1 [轻工技术与工程—粮食、油脂及植物蛋白工程]
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职称材料
题名
基于ESI-CID-MS/MS离子碎片峰特征的香菇多糖水解机制及系列香菇寡糖的制备
被引量：
5
2
作者
张洪涛
朱莉
张爽
詹晓北
机构
江南大学生物工程学院糖化学与生物技术教育部重点实验室
江苏瑞光生物科技有限公司
江南大学食品科学与技术国家重点实验室
出处
《高等学校化学学报》
SCIE
EI
CAS
CSCD
北大核心
2014年第11期2329-2334,共6页
基金
国家自然科学基金(批准号:31201384,3117164)
国家博士后科学基金(批准号:2012M20996)
+3 种基金
江苏省博士后基金和江苏省资助博士后基金(批准号:1301011B)
国家建设高水平大学公派研究生项目(批准号:2008679005)
高等学校学科创新引智计划(批准号:111-2-06)
中央高校基本科研业务费专项资金(批准号:JUSRP1007)资助~~
文摘
将香菇多糖和0.02 mol/L三氟乙酸(TFA)溶液按照1 mg∶200μL比例混合并于100℃水解,然后利用快速蛋白液相色谱(FPLC)技术对分别水解2,4,6 h的水解产物中不同聚合度寡糖的组成与丰度进行分析,从而确定最佳水解时间;用确定的最佳时间对水解残留多糖重复水解3次,直至多糖沉淀消失为止,然后分别对水解产物进行FPLC分离并依次收集每批次的七糖.对七糖进行ESI-CID-MS/MS分析,结合β-1,3-二糖、七糖及β-1,6-葡聚寡糖二糖的ESI-CID-MS/MS质谱特征,可获得每次水解产物中寡糖的结构信息,进而获得香菇多糖的水解机制;最后用P4凝胶柱对水解产物进行色谱分离,获得具有不同聚合度的全序列寡糖.结果表明,香菇多糖的最佳水解时间为4 h,在不同批次的水解过程中香菇寡糖的结构由β-1,3/1,6-寡糖过渡为纯β-1,3-寡糖.
关键词
香菇多糖
葡聚寡糖
水解机制
电喷雾碰撞诱导串联质谱
Keywords
Lentinan
Gluco-oligosaccharide
Mechanism of hydrolysis
Electrospray ionization-collision induce dissociation-tandem mass spectrometry（ESI-CID-MS /MS）
分类号
O629.1 [理学—有机化学]
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职称材料
题名
青鳞鱼肌肉蛋白复合酶水解机制研究
被引量：
4
3
作者
邓尚贵
杨萍
机构
华南理工大学食品生物工程学院
湛江海洋大学食品科学与工程系
出处
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2004年第3期67-75,共9页
基金
广东省科技厅重点资助项目(2KM06002S)
文摘
本文研究了海水鱼青鳞鱼(Harengula Zunasi Bleeker)肌肉蛋白由木瓜蛋白酶和风味酶复合而成的复合酶水解机制。当水解时间固定为120min时,采用正交试验法优选得到复合酶水解的适宜条件为酶浓度为7.5×103IU/g蛋白质、温度为45℃、pH6.5和底物浓度为5.5g蛋白质%。在此适宜的水解条件下,蛋白质水解度与水解时间的关系曲线类似于已公开发表的沙丁鱼、小龙虾、鲱鱼及鲑鱼的酶水解曲线;在30～210min的水解时间内,水解机理可以用三个线性方程式来描述:DH%=0.026×水解时间+8.85 (r=0.98)、产物游离氨基酸总量TFAA =0.16×水解时间+38.76 (r=0.99)和产物平均链长MLPL=-0.019×水解时间+10.79 (r=-0.96)。产物游离氨基酸分析结果揭示了复合酶对胱氨酸、苯丙氨酸和酪氨酸结合的肽键有最高特异性,而对色氨酸、脯氨酸、天门冬氨酸、丝氨酸、甘氨酸和谷氨酸有最低特异性; 同时,在210min之前达到最大水解力(HC)的游离氨基酸或多或少又参与了新的肽键的形成,揭示复合酶对青鳞鱼肌肉蛋白质不仅具有水解作用而且还有合成作用。水解产物含氮量分析表明复合酶水解产物经离心、0.45 μm和0.22 μm微孔过滤所得到的三种类型的水解产物的含氮化合物在分子大小方面有一定的差异。
关键词
青鳞鱼
肌肉蛋白
复合酶
水解机制
木瓜蛋白酶
风味酶
Keywords
muscle protein
Harengula Zunasi bleeker
enzymolysis
compound enzyme
mechanism
分类号
TS254.1 [轻工技术与工程—水产品加工及贮藏工程]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
大米蛋白的酶水解机制研究——Ⅱ酶水解过程中蛋白质的组分变化
王章存
刘卫东
申瑞玲
郑坚强
姚惠源
《中国粮油学报》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2007
7
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下载PDF
职称材料
2
基于ESI-CID-MS/MS离子碎片峰特征的香菇多糖水解机制及系列香菇寡糖的制备
张洪涛
朱莉
张爽
詹晓北
《高等学校化学学报》
SCIE
EI
CAS
CSCD
北大核心
2014
5
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
青鳞鱼肌肉蛋白复合酶水解机制研究
邓尚贵
杨萍
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2004
4
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职称材料
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