离子交换层析分离纯化重组人血清白蛋白 被引量：7

1

作者 朱家文 武斌 +3 位作者 陈葵 罗凌丽 周武 李水龙 《华东理工大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期341-345,350,共6页

通过层析实验 ,比较了几种阴离子交换剂在不同温度、p H值、离子强度、进样流速、进样浓度下对人血清白蛋白的吸附与脱附性能 ,研究了它们对人血清白蛋白和卵清蛋白的分离能力 ,并考察了柱层析过程中吸附载体对重组人血清白蛋白和杂蛋... 通过层析实验 ,比较了几种阴离子交换剂在不同温度、p H值、离子强度、进样流速、进样浓度下对人血清白蛋白的吸附与脱附性能 ,研究了它们对人血清白蛋白和卵清蛋白的分离能力 ,并考察了柱层析过程中吸附载体对重组人血清白蛋白和杂蛋白的分离选择性。实验结果表明 :牌号为DEAE Sepharose FF的载体不仅对重组人血清白蛋白具有良好的分离度 。 展开更多

关键词 分离纯化 重组人血清白蛋白 离子交换层析 阴离子交换剂 穿透曲线 分离度 基因工程 分离能力

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重组生长激素与人血清白蛋白治疗肝硬化低蛋白血症的疗效比较 被引量：4

2

作者 王若伦 叶晓光 《广州医学院学报》 2001年第3期10-12,共3页

目的 :比较应用重组人生长激素 (rhGH)和人血清蛋白 (HSA)治疗肝硬化低蛋白血症的疗效。方法 :分别对 6 6例住院肝硬化患者应用rhGH4 5U皮下注射 ,每天 1次 ,共 10次 ,或 2 0 %HSA5 0mL ,静脉滴注 ,每天 1次 ,共 10次。在治疗前后动态... 目的 :比较应用重组人生长激素 (rhGH)和人血清蛋白 (HSA)治疗肝硬化低蛋白血症的疗效。方法 :分别对 6 6例住院肝硬化患者应用rhGH4 5U皮下注射 ,每天 1次 ,共 10次 ,或 2 0 %HSA5 0mL ,静脉滴注 ,每天 1次 ,共 10次。在治疗前后动态观察临床表现和检测各项肝功能指标。结果 :无论应用rhGH或HSA ,患者在治疗后精神、睡眠、食欲都有好转 ,腹胀减轻 ,腹水和下肢浮肿消退或减轻。ALT和AST明显下降 ,肝功能恢复正常。白蛋白含量有明显的升高达至正常水平。结论 :和HSA比较 ,rhGH治疗肝硬化低蛋白血症同样有较好的疗效 ,能明显提高白蛋白含量并有较长的疗效 ,费用较低 。 展开更多

关键词 肝硬化 低蛋白血症 重组人生长激素 人血清白蛋白 RHGH HSA

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在水稻上种出“人血清白蛋白” 被引量：2

3

作者 杨代常 《中国农村科技》 2016年第6期30-33,共4页

人血白蛋白具有多种临床应用价值,是我国的一线大宗临床用药,广泛地用于肝硬化腹水、烧伤烫伤、手术后体液的补充、失血过多导致的休克、脑水肿、癌症和艾滋病人放化疗的辅助治疗等.由于1克HSA可保留18毫升的水,每5克的HSA保留循环内水... 人血白蛋白具有多种临床应用价值,是我国的一线大宗临床用药,广泛地用于肝硬化腹水、烧伤烫伤、手术后体液的补充、失血过多导致的休克、脑水肿、癌症和艾滋病人放化疗的辅助治疗等.由于1克HSA可保留18毫升的水,每5克的HSA保留循环内水分的能力约相当于100毫升血浆或200毫升全血的功能,在战场上可用于补充因失血导致的体液流失。 展开更多

关键词 人血清白蛋白 水稻 人血白蛋白 临床应用 临床用药 辅助治疗 HSA 肝硬化

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非诱导型基因重组工程菌发酵产人血清白蛋白各种参数的变化规律 被引量：1

4

作者 战伟超 李辰雨 +1 位作者 徐世艾 林剑 《中国酿造》 CAS 北大核心 2015年第7期74-78,共5页

以无甲醇诱导型基因重组人血清白蛋白的毕赤氏酵母(Pichia pastoris)NCY-1为实验菌株,在10 L机械搅拌通风发酵罐水平和3 L摇瓶水平的基础上研究了该菌株发酵过程中参数的变化规律及铵根离子(NH4+)对发酵液中重组人血清白蛋白(r HSA)的... 以无甲醇诱导型基因重组人血清白蛋白的毕赤氏酵母(Pichia pastoris)NCY-1为实验菌株,在10 L机械搅拌通风发酵罐水平和3 L摇瓶水平的基础上研究了该菌株发酵过程中参数的变化规律及铵根离子(NH4+)对发酵液中重组人血清白蛋白(r HSA)的影响。研究结果表明:发酵液中的r HSA的含量随菌体浓度的增加而增加;30 h后菌体进入稳定期,此时流加10 g/L的葡糖糖有利于发酵液中r HSA的表达,流加后发酵液中的r HSA最高产量可达到185 mg/L;发酵液中存在活性较高的蛋白酶,在发酵后期分解r HSA,但发酵液中铵离子(NH4+)质量浓度为3.0 g/L时能较好的抑制r HSA的分解。 展开更多

关键词 非甲醇诱导型重组酵母 毕赤氏酵母 硫酸铵:重组人血清白蛋白

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一种转基因猪血中重组人血清白蛋白分离纯化新方法 被引量：3

5

作者 余谦 王勇 +3 位作者 钱小红 秦伟捷 张普民 张养军 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期539-545,共7页

基因工程技术已经成为研究和生产重组人血清白蛋白(rHSA)替代人血清白蛋白(HSA)的重点技术,而白蛋白的纯化则是该技术的关键。本文主要介绍了从转基因猪血中纯化rHSA的一种新方法,即热乙醇沉淀与多级色谱分离相结合的rHSA纯化方法。热... 基因工程技术已经成为研究和生产重组人血清白蛋白(rHSA)替代人血清白蛋白(HSA)的重点技术,而白蛋白的纯化则是该技术的关键。本文主要介绍了从转基因猪血中纯化rHSA的一种新方法,即热乙醇沉淀与多级色谱分离相结合的rHSA纯化方法。热乙醇沉淀法可从猪血浆中获得rHSA粗提取液,此时rHSA的纯度可达69.5%,回收率达51.3%。进一步采用多级色谱分离法,即阴离子交换色谱和反相色谱法进一步纯化,得到rHSA的最终纯度约为100.0%,总回收率为41.1%。该方法为从转基因猪血浆中大规模纯化用于临床和生化研究的高纯度rHSA提供可能,同时也为rHSA替代HSA奠定了基础。 展开更多

关键词 重组人血清白蛋白(rHSA ) 纯化 热乙醇沉淀法 多级色谱分离法

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基因重组人血清白蛋白项目迈向产业化

6

《黑龙江科技信息》 2012年第31期I0002-I0002,共1页

10月11日，国家重大项目“基因重组人血清白蛋白”产业化启动暨签约仪式在上海张江举行，这标志着该项目进入了中试阶段，有望把沪产“基因重组人血清白蛋白”推向市场。

关键词 重组人血清白蛋白 产业化 基因 重大项目

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人血清白蛋白与PTH(1-34)融合蛋白在毕赤酵母中的分泌表达及鉴定 被引量：3

7

作者 陈静 孙红颖 +2 位作者 杨颖 王学芬 陈枢青 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 2008年第2期126-133,共8页

目的:在毕赤酵母中高效分泌表达人血清白蛋白与PTH(1-34)融合蛋白。方法:利用PCR技术获得HSA和PTH(1-34)基因,以柔性连接肽相连插入到表达载体pPIC9,重组质粒线性化后,用化学法转化毕赤酵母GS115,经组氨酸缺陷型培养板和PCR鉴定筛选得... 目的:在毕赤酵母中高效分泌表达人血清白蛋白与PTH(1-34)融合蛋白。方法:利用PCR技术获得HSA和PTH(1-34)基因,以柔性连接肽相连插入到表达载体pPIC9,重组质粒线性化后,用化学法转化毕赤酵母GS115,经组氨酸缺陷型培养板和PCR鉴定筛选得到转化子。在启动子AOX1和α交配因子信号肽的作用下,分泌表达融合蛋白HSA-PTH(1-34)。PCR法和电泳鉴定表达验证阳性转化子,并观测不同时间点的表达量。Western blot验证其免疫活性,在兔肾皮质细胞膜中测定腺苷酸环化酶的激活产生cAMP的量来检测融合蛋白的生物学活性。结果:PCR鉴定重组转化子验证了融合基因的成功整合,用甲醇诱导表达,蛋白电泳分析表明融合基因得到高效表达,HSA-PTH(1-34)同时具有HSA和PTH(1-34)的抗原性,且能激活兔肾皮质细胞中的腺苷酸环化酶产生cAMP,但活性低于PTH(1-34)。结论:在毕赤酵母中成功表达了具有生物学活性的人血清白蛋白与PTH(1-34)融合蛋白。 展开更多

关键词 毕赤酵母 甲状旁腺激素肽(1—34) 血清白蛋白 质粒 重组 遗传 人甲状旁腺激素(1—34) 融合蛋白 分泌表达

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黄芪注射液联合精蛋白锌重组赖脯胰岛素综合治疗早期糖尿病肾病随机平行对照研究 被引量：4

8

作者 刘成彬 陈嘉斌 《实用中医内科杂志》 2018年第8期45-48,共4页

[目的]观察黄芪注射液联合精蛋白锌重组赖脯胰岛素综合治疗早期糖尿病肾病疗效。[方法]使用随机平行对照方法,将120例住院患者按随机数字表方法随机分为两组,饮食指导、运动干预,控制血脂。对照组60例精蛋白锌重组赖脯胰岛素,胰岛素泵... [目的]观察黄芪注射液联合精蛋白锌重组赖脯胰岛素综合治疗早期糖尿病肾病疗效。[方法]使用随机平行对照方法,将120例住院患者按随机数字表方法随机分为两组,饮食指导、运动干预,控制血脂。对照组60例精蛋白锌重组赖脯胰岛素,胰岛素泵皮下注射给药,0.5~0.8U/kg·d^(-1),胰岛素全天给药量40%为基础量,60%为餐前剂量,早餐及晚餐前给药。治疗组60例黄芪注射液30mL+100mL生理盐水,静滴,1次/d;精蛋白锌重组赖脯胰岛素治疗同对照组。连续治疗7d为1疗程。观测临床表现、24h尿微量白蛋白、尿β2微球蛋白、微量白蛋白/尿肌酐、N-乙酰-β-D氨基葡萄糖苷酶、糖化白蛋白、血清胱抑素C、不良反应。连续治疗1疗程(21d),判定疗效。[结果]GA、Cys-C、mALB、UACR、Uβ2MG、NAG两组均有改善(P<0.01),治疗组改善优于对照组(P<0.05,P<0.01)。[结论]黄芪注射液联合精蛋白锌重组赖脯胰岛素综合治疗早期糖尿病肾病,疗效满意,无严重不良反应,值得推广。 展开更多

关键词 早期糖尿病肾病 肾病 胰岛素泵 黄芪注射液 精蛋白锌重组赖脯胰岛素/优泌乐25 24h尿微量白蛋白 尿β2微球蛋白 微量白蛋白 N-乙酰-β-D氨基葡萄糖苷酶 糖化白蛋白 血清胱抑素C 中西医结合治疗 随机平行对照研究

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我国成功研制稻米生产人血清白蛋白技术

9

《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第12期122-122,共1页

我国人血清白蛋白每年临床需要110-120t，目前血浆供应不足，市场缺口高达60-80t.武汉大学通过4年的研究，建立了水稻胚乳细胞生物反应器技术平台。利用该技术平台在稻米中生产人血清白蛋白，大约33hm^2水稻就可以提取1000kg人血清白蛋白。

关键词 人血清白蛋白 稻米生产 技术平台 生物反应器 武汉大学 胚乳细胞 水稻

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HSA/IL1ra融合蛋白的纯化及生物学活性研究

10

作者 沈其 陈枢青 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期260-264,共5页

目的:纯化HSA/IL1ra融合蛋白并对其生物学活性进行检测。方法:采用亲和层析及离子交换层析分离纯化HSA/IL1ra融合蛋白,检测其对IL1引起的对A375 S2的杀伤保护作用。结果:获得的HSA/IL1ra融合蛋白HPLC纯度在98%以上,并且具有与天然IL1ra... 目的:纯化HSA/IL1ra融合蛋白并对其生物学活性进行检测。方法:采用亲和层析及离子交换层析分离纯化HSA/IL1ra融合蛋白,检测其对IL1引起的对A375 S2的杀伤保护作用。结果:获得的HSA/IL1ra融合蛋白HPLC纯度在98%以上,并且具有与天然IL1ra相似的、对IL1杀伤A375 S2细胞的保护作用。结论:获得高纯度的HSA/IL1ra融合蛋白并且具有相应的生物学活性。 展开更多

关键词 受体 白细胞介素1/拮抗剂和抑制剂 血清白蛋白 重组融合蛋白质类/分离和提纯 重组融合蛋白质类/生物合成 黑色素瘤

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HSA转基因水稻二重微滴数字PCR定量检测方法研究 被引量：1

11

作者 李晓飞 姚晓青 +4 位作者 闫晓红 李俊 朱莉 吴刚 罗军玲 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期1098-1107,共10页

重组人血清白蛋白(HSA,Human serum albumin)基因工程水稻是我国自主研发的可规模化生产水稻重组人血清白蛋白(OsrHSA)的转基因品系,具有极高的推广价值和应用前景,但是目前缺乏对其进行精准定量检测的方法。微滴数字PCR(ddPCR,droplet ... 重组人血清白蛋白(HSA,Human serum albumin)基因工程水稻是我国自主研发的可规模化生产水稻重组人血清白蛋白(OsrHSA)的转基因品系,具有极高的推广价值和应用前景,但是目前缺乏对其进行精准定量检测的方法。微滴数字PCR(ddPCR,droplet digital PCR)是近年来新兴的前沿PCR技术,不依赖标准物质即可实现对DNA分子的绝对定量,在转基因产品定量领域被广泛应用。本研究基于ddPCR平台建立了适用于重组人血清白蛋白基因工程水稻(114-7-2品系)的二重ddPCR精准定量检测方法。通过对引物探针的特异性进行验证、对引物探针工作浓度和反应退火温度进行优化,获得最佳反应条件。进而对该方法检测限、定量限和结果重复性做了测定。最后通过对不同含量的重组人血清白蛋白转基因水稻样品进行定量检测,分析比较传统实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)和二重ddPCR的优劣,结果表明本研究建立的转基因水稻HSA/PLD二重ddPCR方法稳定性更好、灵敏度高、成本低廉,精准可靠,适用于不依赖标准物质的精准定量HSA转基因水稻转化体含量分析,可取代qRT-PCR方法进行HSA转基因水稻的绝对定量检测,完善了我国转基因水稻成分精确定量检测技术体系。 展开更多

关键词 基因工程水稻 水稻重组人血清白蛋白(osrhsa) 微滴数字PCR 绝对定量 转基因

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重组毕氏酵母发酵过程的结构模型 被引量：5

12

作者 周海英 袁景淇 +2 位作者 邓建慧 任乐民 易静 《上海交通大学学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2002年第10期1443-1447,共5页

分析了毕氏酵母 ( Pichia pastoris)以甘油和甲醇为碳源时的代谢途径 .建立了胞内物质流和能量流的平衡方程——结构模型 .经过适当的降维 ,解得比碳源消耗速率、比氧消耗速率、比乙酰辅酶 A生成速率、细胞比生长速率等关键反应速率 .... 分析了毕氏酵母 ( Pichia pastoris)以甘油和甲醇为碳源时的代谢途径 .建立了胞内物质流和能量流的平衡方程——结构模型 .经过适当的降维 ,解得比碳源消耗速率、比氧消耗速率、比乙酰辅酶 A生成速率、细胞比生长速率等关键反应速率 .结合反应器模型获得操作变量与过程状态变量间的关系 .用实验数据对模型进行了初步验证 .结果表明 。 展开更多

关键词 发酵过程 代谢途径 毕氏酵母 重组人血清白蛋白 结构模型 生长动力学

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重组毕氏酵母结构模型的改进及实验验证 被引量：2

13

作者 任海涛 袁景淇 +1 位作者 邓建慧 贺秉坤 《上海交通大学学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2004年第4期551-554,共4页

对早先建立的甲醇营养型重组毕氏醇母(Pichiapastoris)结构模型的产物生成部分进行了动态改进.甲醇流加初期蛋白生成所需的酶系尚处于诱导期,为了描述该酶系浓度和活性从低到高对产物比生成速率的影响,引入了一阶闭环调节器模型加以逼近... 对早先建立的甲醇营养型重组毕氏醇母(Pichiapastoris)结构模型的产物生成部分进行了动态改进.甲醇流加初期蛋白生成所需的酶系尚处于诱导期,为了描述该酶系浓度和活性从低到高对产物比生成速率的影响,引入了一阶闭环调节器模型加以逼近,同时考虑了细胞体积增大对胞内酶系浓度的稀释作用.设计了6次实验以验证模型的有效性.结果表明,该模型能对细胞生长和蛋白生成给出满意的描述,同时,各罐批间参数变化不是很大,表明该模型具有较强的鲁棒性. 展开更多

关键词 毕氏酵母 重组人血清白蛋白 结构模型 模型验证

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基因工程菌Pichia pastoris连续培养的生长及抑制动力学 被引量：7

14

作者 吴康华 郭美锦 +2 位作者 庄英萍 储炬 张嗣良 《华东理工大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期605-609,共5页

在同一稀释率μ(μ=0 .1 4h-1)下用不同浓度的甘油流加进行连续培养 ,研究甘油浓度对基因工程菌毕赤酵母 ( Pichia pastori)生长的影响。结果表明甘油浓度对细胞生物量 ( DCW和WCW)、底物得率系数 ( YX/ S)、底物比消耗速率 ( qs)、呼吸... 在同一稀释率μ(μ=0 .1 4h-1)下用不同浓度的甘油流加进行连续培养 ,研究甘油浓度对基因工程菌毕赤酵母 ( Pichia pastori)生长的影响。结果表明甘油浓度对细胞生物量 ( DCW和WCW)、底物得率系数 ( YX/ S)、底物比消耗速率 ( qs)、呼吸熵 ( RQ)与二氧化碳释放率 ( CER)都有影响 ,在低甘油残留浓度 ( <63.3g/L)下 ,甘油是激活剂 ,菌体生长符合 Monod方程 ,Ks=1 9.62 g/L,甘油激活常数 Ka=1 9.45 g/L;而在高甘油残留浓度 ( >63.3g/L )下甘油是抑制剂 ,菌体生长特征符合 Haldance方程 ,Ks=0 .0 1 4g/L,KI=1 5 6.67g/L。毕赤酵母生长的甘油抑制浓度为 5 5 .42 展开更多

关键词 基因工程菌 毕赤酵母 连续培养 生长动力学 重组人血清白蛋白 抑制动力学 甘油浓度

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