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农杆菌介导的水稻遗传转化的优化研究
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作者 周晓佟 《北方水稻》 2025年第5期18-23,共6页
目的:对农杆菌介导的水稻遗传转化实施优化。方法:以籼稻品种9311成熟胚、明恢86以及粳稻品种日本晴为水稻遗传转化优化的研究材料。试验中使用的农杆菌菌株为LBA4404,采用的质粒为pCAMBIA1301A-At MYB44。配制多种溶液后,制备农杆菌感... 目的:对农杆菌介导的水稻遗传转化实施优化。方法:以籼稻品种9311成熟胚、明恢86以及粳稻品种日本晴为水稻遗传转化优化的研究材料。试验中使用的农杆菌菌株为LBA4404,采用的质粒为pCAMBIA1301A-At MYB44。配制多种溶液后,制备农杆菌感受态细胞。使用制备好的农杆菌感受态细胞将质粒pCAMBIA1301A-At MYB44导入农杆菌菌株LBA4404中。应用导入后的菌液对三种水稻实施侵染,实现其遗传转化。提取遗传转化后水稻植株的DNA分子并实施PCR检测。结果:优化后DNA提取量、DNA纯度、DNA完整性均更高。优化后对于籼稻品种的遗传转化效果更好。优化后PCR条带更加清晰,同时其出现非特异性条带的情况不明显PCR检测阳性率更高。结论:在研究中成功实现了对于农杆菌介导的水稻遗传转化的优化,具有重大现实意义。 展开更多
关键词 农杆菌 质粒 水稻遗传转化 DNA分子提取 PCR检测
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甘露糖阳性选择系统在水稻遗传转化中的应用研究进展 被引量:1
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作者 王彩芬 付永彩 《中国稻米》 2008年第4期22-24,共3页
甘露糖阳性选择系统是近几年应用较多的一种植物转基因安全筛选体系,该体系是以大肠杆菌6-磷酸甘露糖异构酶基因pmi为筛选标记基因,D-甘露糖为筛选剂进行筛选。本文简要综述了甘露糖阳性选择系统在水稻转基因研究中的应用情况。
关键词 6-磷酸甘露糖异构酶基因 筛选标记基因 水稻遗传转化
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CRISPR/Cas9技术敲除水稻BR降解相关基因的研究
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作者 叶照楠 何璐 +2 位作者 张琳琳 李飞飞 刘文真 《湖南农业科学》 2017年第9期1-5,共5页
油菜素内酯(BR)是一种常见的植物类激素,在植物的生长发育过程中起重要的调控作用,对水稻株型改良和抗逆性有重要作用。研究首先构建了水稻4个BR降解相关基因的CRISPR/Cas9载体;然后利用农杆菌介导法,将构建好的4个BR降解相关基因的CRIS... 油菜素内酯(BR)是一种常见的植物类激素,在植物的生长发育过程中起重要的调控作用,对水稻株型改良和抗逆性有重要作用。研究首先构建了水稻4个BR降解相关基因的CRISPR/Cas9载体;然后利用农杆菌介导法,将构建好的4个BR降解相关基因的CRISPR/Cas9载体分别转化水稻中花11的愈伤组织,用50 mg/L的潮霉素作为筛选标记,共获得395株转基因植株。其中,有270株属于野生型,61株属于杂合子类型,64株属于突变类型;64株突变体中有39株是杂合突变体,25株是纯合突变体,纯合突变的概率为6.25%。4个基因均获得了突变材料,但不同基因的突变效率不同,其中转LW26的植株突变率高达41%。 展开更多
关键词 油菜素内酯(BR)相关基因 CRISPR/Cas9系统 水稻遗传转化 靶位点鉴定
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