水稻胚乳特异性启动子Gt1的克隆及其功能验证 被引量：21

1

作者 张宪银 薛庆中 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期110-114,共5页

以水稻品种“密阳 4 6”的 DNA为模板 ,用 PCR方法从水稻谷蛋白基因 Gt1上游序列扩增出特异性条带 ,并克隆出种子特异性启动子。经鉴定 ,它的长度为 92 9bp,与 Takaiwa(1987)报道的序列仅有 12个核苷酸的差异 ,已知的功能部位序列没有... 以水稻品种“密阳 4 6”的 DNA为模板 ,用 PCR方法从水稻谷蛋白基因 Gt1上游序列扩增出特异性条带 ,并克隆出种子特异性启动子。经鉴定 ,它的长度为 92 9bp,与 Takaiwa(1987)报道的序列仅有 12个核苷酸的差异 ,已知的功能部位序列没有发生改变。用它构建了带动报告基因 Gus表达的双元载体 ,并用农杆菌介导法转化水稻得到了转基因植株。对 Gus基因表达检测结果表明 ,由该启动子序列引导 Gus基因能在胚乳中表达 ,而其它组织中都未表达 。 展开更多

关键词 水稻 转基因 胚乳特异性启动子 谷蛋白基因 基因克隆 品质改良

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蔗糖合酶基因启动子克隆及其转基因水稻植物中特异性表达 被引量：13

2

作者 李永春 张宪银 薛庆中 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期586-590,共5页

以水稻品种“明恢 6 3”基因组 DNA为模板 ,用 PCR方法克隆出水稻蔗糖合酶基因起始密码子以前 (包括第一内含子 )的上游序列 RSP1及其不包括第一内含子的上游调控序列 RSP2。测序结果显示 ,在重要的功能区段上 ,克隆的序列与 Wang(1992 ... 以水稻品种“明恢 6 3”基因组 DNA为模板 ,用 PCR方法克隆出水稻蔗糖合酶基因起始密码子以前 (包括第一内含子 )的上游序列 RSP1及其不包括第一内含子的上游调控序列 RSP2。测序结果显示 ,在重要的功能区段上 ,克隆的序列与 Wang(1992 )等的报道基本一致。构建了由 RSP1和 RSP2驱动报告基因 Gus的植物表达载体 ,并用于农杆菌介导法水稻遗传转化。对水稻品种“秀水 11”转基因植株各部位的 GUS组织化学分析表明 :RSP1和 RSP2都可以驱动Gus基因在根、茎、叶及颖壳中高效特异表达 ,但在胚和胚乳中不表达。作者认为 。 展开更多

关键词 蔗糖合酶基因 启动子 克隆 转基因 水稻 植物 特异性表达

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水稻种胚特异性启动子OsESP1的克隆及其表达特性 被引量：12

3

作者 房孝良 刘炜 +1 位作者 安静 王庆国 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期1904-1909,共6页

以水稻品种"中花11"基因组DNA为模板,通过PCR的方法,对水稻基因OsESG1上游调控序列扩增,获得长度约为1.4kb的特异性条带,命名为OsESP1。以OsESP1与带有GUS报告基因的植物表达载体连接,经农杆菌介导转化获得转基因水稻阳性植... 以水稻品种"中花11"基因组DNA为模板,通过PCR的方法,对水稻基因OsESG1上游调控序列扩增,获得长度约为1.4kb的特异性条带,命名为OsESP1。以OsESP1与带有GUS报告基因的植物表达载体连接,经农杆菌介导转化获得转基因水稻阳性植株。结合组织化学染色法,检测GUS报告基因的表达特性,结果表明,由OsESP1所调控的GUS报告基因仅在水稻种胚中特异表达,而在其他组织中均未被检测到,初步证明OsESP1为水稻种胚特异性启动子。 展开更多

关键词 水稻 种胚特异性启动子 表达特性分析 GUS报告基因

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水稻花粉组织特异性启动子捕获实验 被引量：4

4

作者 方华舟 涂知明 《生物学杂志》 CAS CSCD 2007年第5期37-39,共3页

组织特异性启动子是细胞分化、基因特异性表达、基因工程研究及实际应用中的重要工具。一个由带有UidA基因而无启动子的pPLGUS改造成的质粒通过基因枪转化进水稻材料中,对转基因材料的多种不同组织进行了X-gluc显色检测GUS活性。对获得... 组织特异性启动子是细胞分化、基因特异性表达、基因工程研究及实际应用中的重要工具。一个由带有UidA基因而无启动子的pPLGUS改造成的质粒通过基因枪转化进水稻材料中,对转基因材料的多种不同组织进行了X-gluc显色检测GUS活性。对获得的15个独立转化株后代进行筛选,初步观察到其中多株GUS阳性。通过连续三代遗传分析,证明至少3株水稻花粉组织特异性启动子被成功捕获,为进一步研究应用奠定了基础。 展开更多

关键词 水稻 花粉 组织特异性启动子 捕获 UidA基因

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水稻茎叶特异性启动子研究进展 被引量：3

5

作者 陈爱敏 《现代农业科技》 2012年第17期16-17,19,共3页

实现目的基因在转基因水稻中的定点、定时、定量表达以及提高转基因水稻的生物安全性一直是转基因水稻研究者追求的目标。水稻茎叶特异性启动子可以驱动目的基因在茎叶中优势表达,使其获得抗虫、抗病能力及对逆境的耐受性。综述了水稻... 实现目的基因在转基因水稻中的定点、定时、定量表达以及提高转基因水稻的生物安全性一直是转基因水稻研究者追求的目标。水稻茎叶特异性启动子可以驱动目的基因在茎叶中优势表达,使其获得抗虫、抗病能力及对逆境的耐受性。综述了水稻茎叶特异性启动子的特点及其种类,并对其提高转基因水稻安全性的现实意义进行了展望。 展开更多

关键词 水稻 茎叶特异性启动子 目的基因 转基因 安全性

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种子胚特异性启动子的克隆及其功能验证 被引量：1

6

作者 巩艳青 夏阳 《山东林业科技》 2007年第3期9-12,共4页

以水稻品种日本晴DNA为模板,用PCR的方法从水稻胚特异性表达基因OsESG上游序列扩增出特异性条带,克隆出种子胚特异性启动子,长度为1.1kb,且已知的功能部位序列没有发生改变。用它构建了带动报告基因GUS表达的双元载体,并用农杆菌介导法... 以水稻品种日本晴DNA为模板,用PCR的方法从水稻胚特异性表达基因OsESG上游序列扩增出特异性条带,克隆出种子胚特异性启动子,长度为1.1kb,且已知的功能部位序列没有发生改变。用它构建了带动报告基因GUS表达的双元载体,并用农杆菌介导法转化水稻得到了转基因植株。对GUS基因的表达检测表明,由该启动子序列引导的GUS基因仅在胚中特异性表达,而其它组织中都未表达,证实该启动子具有胚特异性表达的功能。 展开更多

关键词 水稻 胚特异性启动子 报告基因GUS 转基因

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小麦高分子量谷蛋白1Dx2基因启动子的克隆及功能鉴定 被引量：3

7

作者 范三红 金伟波 +1 位作者 郭蔼光 杨淑慎 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2005年第5期95-99,共5页

以小偃6号基因组DNA为模板,利用聚合酶链式反应扩增到1kb左右的核酸序列,将其克隆到pMD18-T载体上。经测序鉴定及序列分析后得知,该片段为小麦高分子量谷蛋白基因(HMW-GS1Dx2)上游启动子及信号肽编码区,共1050bp。将其与β-葡糖苷酸酶(G... 以小偃6号基因组DNA为模板,利用聚合酶链式反应扩增到1kb左右的核酸序列,将其克隆到pMD18-T载体上。经测序鉴定及序列分析后得知,该片段为小麦高分子量谷蛋白基因(HMW-GS1Dx2)上游启动子及信号肽编码区,共1050bp。将其与β-葡糖苷酸酶(GUS)基因编码序列融合,用基因枪法将构建的嵌合基因转入小麦未成熟种子及叶片,检测其瞬时表达活性。组织化学检测表明,由该启动子驱动的GUS融合基因能在种子中表达,而在叶片中却未见表达,从而证实此HMW-GS1Dx2启动子具有在小麦胚乳中高效表达的活性,为小麦胚乳生物反应器的研究奠定了基础。 展开更多

关键词 小麦 高分子量麦谷蛋白 启动子 胚乳特异性 瞬时表达 1Dx2基因 基因克隆 功能鉴定

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小麦avenin-like type-B基因启动子的分离及表达载体的构建

8

作者 宋斐 陈泠 +4 位作者 孙杨柳 王菲菲 汪越胜 杨广笑 何光源 《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期1-4,共4页

根据已知的小麦ALP type-B基因序列,采用反向PCR技术,从小麦品种鄂恩1号(En1)中克隆得到了ALP type-B基因的上游启动子序列1664 bp。通过PLACE和plantCARE等数据库对所克隆的启动子进行生物信息学分析,发现该启动子除具备启动子的基本... 根据已知的小麦ALP type-B基因序列,采用反向PCR技术,从小麦品种鄂恩1号(En1)中克隆得到了ALP type-B基因的上游启动子序列1664 bp。通过PLACE和plantCARE等数据库对所克隆的启动子进行生物信息学分析,发现该启动子除具备启动子的基本元件如TATA-box、CAAT-box等外,还含有胚乳特异性表达的特有元件如Endosperm motif、GCN4-like motif(GLM)、RY motif和G-box等。用ALP type-B启动子置换质粒pBI121上的35S启动子,将其与gus基因连接构建植物表达载体。 展开更多

关键词 小麦 胚乳特异性基因 启动子 植物表达载体

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HPV45-L1和HPV58-L1蛋白植物表达载体的构建及水稻转基因植株的鉴定 被引量：2

9

作者 王聚财 刘运超 +6 位作者 陈玉梅 孟凤丽 王爱萍 张二芹 许倩茹 邓瑞广 张改平 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2017年第2期55-60,共6页

利用水稻胚乳细胞生物反应器,构建含有HPV45-L1和HPV58-L1基因的重组植物表达载体,为HPV-45L1和HPV58-L1蛋白的表达提供一种新的高效、低廉的表达方式。利用PCR技术克隆人乳头瘤病毒HPV45-L1和HPV58-L1蛋白编码基因,将其重组于中间载体p... 利用水稻胚乳细胞生物反应器,构建含有HPV45-L1和HPV58-L1基因的重组植物表达载体,为HPV-45L1和HPV58-L1蛋白的表达提供一种新的高效、低廉的表达方式。利用PCR技术克隆人乳头瘤病毒HPV45-L1和HPV58-L1蛋白编码基因,将其重组于中间载体pMP3和植物表达载体pCAMBIA-1300中,构建含HPV45-L1和HPV58-L1基因的植物表达载体pCAMBIA-1300-pMP3-HPV45-L1、pCAMBIA-1300-pMP3-HPV58-L1,随后采用根癌农杆菌侵染水稻愈伤组织介导的水稻遗传转化,获得HPV-L1转基因水稻植株。PCR检测结果表明,HPV45-L1和HPV58-L1基因已整合到水稻基因组中,说明已成功构建水稻胚乳特异性表达载体。 展开更多

关键词 人乳头瘤病毒 转基因水稻 水稻胚乳特异性启动子 根癌农杆菌

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未来水稻或可不吸收重金属

10

《农家致富》 2013年第10期19-19,共1页

目前．全国多处地方都被曝光水稻的重金属超标。中国科学院华南植物园的张美博士等科研人员完成了“公开一种水稻重金属诱导型组织特异性启动子MTP11P及其应用”的研究。

关键词 重金属 水稻 组织特异性启动子 吸收 华南植物园 中国科学院 科研人员 诱导型

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鸡传染性法氏囊病病毒VP2基因植物表达载体的构建 被引量：2

11

作者 吴建祥 于涟 龚辉 《浙江农业大学学报》 CSCD 北大核心 2003年第6期644-648,共5页

以含鸡传染性法氏囊病病毒(杭州分离株,HZ96)VP2基因的质粒PBS为模板,根据其序列设计引物进行PCR扩增,得到1.5kb左右长的VP2基因产物;用Kpn 和Sal 酶切纯化的PCR产物;将纯化的酶切产物在T4DNA连接酶的作用下定向克隆到植物表达载体Cambi... 以含鸡传染性法氏囊病病毒(杭州分离株,HZ96)VP2基因的质粒PBS为模板,根据其序列设计引物进行PCR扩增,得到1.5kb左右长的VP2基因产物;用Kpn 和Sal 酶切纯化的PCR产物;将纯化的酶切产物在T4DNA连接酶的作用下定向克隆到植物表达载体Cambia1301水稻胚乳特异性启动子GT1下游,并经PCR、酶切和测序鉴定。植物重组表达载体经三亲交配已导入根癌农杆菌中。 展开更多

关键词 鸡传染性法氏囊病病毒 VP2基因 植物表达载体 水稻胚乳特异性启动子gtl

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小麦及其近缘物种中类燕麦储藏蛋白Avenin-like基因的克隆综述

12

作者 孙杨柳 《安徽农业科学》 CAS 2015年第8期40-42,共3页

介绍了小麦的品质及品质的形成、小麦的储藏蛋白及储藏蛋白的分类。综述了近年来关于类燕麦储藏蛋白Avenin-like基因发现、Avenin-like基因的胚乳特异性表达的时空表达模式以及Avenin-like基因的启动子的作用元件和时空表达特异性研究。

关键词 Avenin-like基因 胚乳特异性表达 启动子

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遗传 育种

13

《麦类文摘》 2000年第3期63-65,共3页

W001478 大麦 BLZ2(一种种子特异蛋白)与BLZ1的活体互作及其对大麦胚乳 B-大麦醇溶蛋白启动子类似 GCN4结构区转录的激活[刊,英]/O(?)ate,L.…∥Journal of BiologicalChemistry.-1999,274(14).-9175～9182[WBTA,1999,16(5),3855]W0014... W001478 大麦 BLZ2(一种种子特异蛋白)与BLZ1的活体互作及其对大麦胚乳 B-大麦醇溶蛋白启动子类似 GCN4结构区转录的激活[刊,英]/O(?)ate,L.…∥Journal of BiologicalChemistry.-1999,274(14).-9175～9182[WBTA,1999,16(5),3855]W001479 高通量蓝光刺激在一种氰细菌聚球藻属(菌株 PCC7942)表达的高等植物叶绿体psbA 启动子的转录[刊,英]/Tsinoremas,N.F.…∥Plant and Cell Physiology.-1999,40(4).-448～452[WBTA,1999,16(5),3858]W001480 大麦和小麦中 AFLP 标记向序列特异性 PCR 标记的转换[刊,英]/Shan,X.… 展开更多

关键词 大麦叶 启动子 大麦醇溶蛋白 序列特异性 高等植物 特异蛋白 遗传 大麦胚乳 叶绿体 育种

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