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水动力尾静脉注射介导Akt/β-catenin/Yap质粒转染建立小鼠肝癌模型
被引量:
1
1
作者
蒋雨薇
宋海燕
+6 位作者
李怡萍
汤凯悦
徐娇雅
SULAIMAN Andrew
MCGARRY Sarah
WANG Lisheng
郑培永
《临床与实验病理学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第10期1185-1190,共6页
目的通过应用水动力尾静脉注射(hydrodynamic tail vein injection,HTVi)Sleeping Beauty(SB)质粒及促癌基因质粒,构建一种新型小鼠肝癌模型。方法6周龄雄性C57BL/6J小鼠,按照体重随机分为对照组和模型组。将冻存的SB、Akt、β-catenin...
目的通过应用水动力尾静脉注射(hydrodynamic tail vein injection,HTVi)Sleeping Beauty(SB)质粒及促癌基因质粒,构建一种新型小鼠肝癌模型。方法6周龄雄性C57BL/6J小鼠,按照体重随机分为对照组和模型组。将冻存的SB、Akt、β-catenin、Yap质粒转化入感受态E.coli DH5α大肠杆菌,于LB培养基扩增后提取质粒。每只模型组小鼠尾静脉快速注射上述质粒混合溶液2 mL,包含SB质粒5μg,Akt、β-catenin、Yap质粒分别15μg,对照组小鼠给予等量PBS尾静脉注射。继续饲养8周后处死小鼠,观察小鼠情况,记录体重、肝重。观察小鼠肝脏病理学变化,并应用Western blot法检测小鼠肝组织中Akt、β-catenin、Yap基因表达水平。结果高压注射质粒8周后,对照组小鼠活动度好,皮毛光亮;小鼠肝脏形态正常;肝组织HE染色显示,对照组小鼠肝小叶结构完整。模型组小鼠活动减少,皮毛无光泽。与对照组比较,模型组小鼠体重下降、肝重增加、肝体比显著上调;模型组小鼠肝脏体积增大,质地较硬,表面出现颗粒状、结节样改变;肝组织HE染色显示,模型组小鼠肝组织结构紊乱,并出现多个肿瘤结节。此外,与对照组相比,模型组小鼠肝组织中Akt、β-catenin、Yap基因表达均明显上调。结论应用水动力尾静脉注射SB质粒及Akt/β-catenin/Yap质粒的方法可成功建立小鼠肝癌模型,为肝癌发病机制及药物研发提供快速、经济的动物模型。
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关键词
肝肿瘤
动物模型
水动力尾静脉注射
SB质粒
癌基因
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职称材料
基于“睡美人”转座系统观察OGT抑制剂HLY838对肝癌的治疗作用
2
作者
梁惠钧
黄露义
+1 位作者
汪凯
唐霓
《重庆医科大学学报》
北大核心
2025年第1期30-36,共7页
目的:利用“睡美人”转座系统和快速大容量尾静脉注射法,建立肝癌动物模型,并观察O-连接N-乙酰氨基葡萄糖转移酶(O-linked N-acetylglucosamine transferase,OGT)抑制剂(R)-3-(2-甲氧基苯基)-1-(噻吩-2-基甲基)哌嗪-2,5-二酮[(R)-3-(2me...
目的:利用“睡美人”转座系统和快速大容量尾静脉注射法,建立肝癌动物模型,并观察O-连接N-乙酰氨基葡萄糖转移酶(O-linked N-acetylglucosamine transferase,OGT)抑制剂(R)-3-(2-甲氧基苯基)-1-(噻吩-2-基甲基)哌嗪-2,5-二酮[(R)-3-(2methoxyphenyl)-1-(thiophen-2-ylmethyl)piperazine-2,5dione,HLY838]对肝癌的治疗效果。方法:将6~8周龄雄性C57BL/6J小鼠随机分为3组,分别将插入神经母细胞瘤ras病毒同源物(neuroblastoma RAS viraloncogene homolog,NRAS)的NRASV12转座子质粒、表达β-连环蛋白(β-catenin)基因转座子质粒、表达Yes相关蛋白(Yes-associated protein,YAP)基因的转座子质粒pT3-EF1aH Yap S127A与转座酶SB100质粒的混合溶液经尾静脉快速注射至小鼠体内,饲养8~16周后处死小鼠,观察肝脏成瘤情况以及肝脏病理学变化。肝癌模型建成后,腹腔注射HLY838,观察对肝癌的治疗效果。结果:高压注射质粒8~16周后,小鼠肝脏体积增大,表面出现颗粒状、结节样改变;苏木精-伊红染色(hematoxylin-eosin staining,HE)染色显示肝组织结构紊乱,出现多个肿瘤结节。pT3-EF1aH YAP S127A组成瘤率高、时间短,但肿瘤较小;pT/CAGGS-NrasV组肿瘤结节大小适中,但成瘤时间较长;pT3-N90-β-catenin组肿瘤主要为肝细胞癌。HLY838治疗组小鼠肝肿瘤结节数变少,小鼠肝肿瘤负担减轻。结论:应用水动力大容量尾静脉注射质粒的方法可快速建立小鼠肝癌模型,成功率较高。OGT抑制剂HLY838对小鼠肝癌有较好的抗肿瘤效果。
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关键词
肝肿瘤
动物模型
“睡美人”转座系统
水动力尾静脉注射
(R)-3-(2-甲氧基苯基)-1-(噻吩-2-基甲基)哌嗪-2
5-二酮
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职称材料
题名
水动力尾静脉注射介导Akt/β-catenin/Yap质粒转染建立小鼠肝癌模型
被引量:
1
1
作者
蒋雨薇
宋海燕
李怡萍
汤凯悦
徐娇雅
SULAIMAN Andrew
MCGARRY Sarah
WANG Lisheng
郑培永
机构
上海中医药大学附属龙华医院脾胃病研究所
中加联合脾胃病研究中心
Department of Biochemistry
出处
《临床与实验病理学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第10期1185-1190,共6页
基金
上海市中医药新型交叉学科资助计划。
文摘
目的通过应用水动力尾静脉注射(hydrodynamic tail vein injection,HTVi)Sleeping Beauty(SB)质粒及促癌基因质粒,构建一种新型小鼠肝癌模型。方法6周龄雄性C57BL/6J小鼠,按照体重随机分为对照组和模型组。将冻存的SB、Akt、β-catenin、Yap质粒转化入感受态E.coli DH5α大肠杆菌,于LB培养基扩增后提取质粒。每只模型组小鼠尾静脉快速注射上述质粒混合溶液2 mL,包含SB质粒5μg,Akt、β-catenin、Yap质粒分别15μg,对照组小鼠给予等量PBS尾静脉注射。继续饲养8周后处死小鼠,观察小鼠情况,记录体重、肝重。观察小鼠肝脏病理学变化,并应用Western blot法检测小鼠肝组织中Akt、β-catenin、Yap基因表达水平。结果高压注射质粒8周后,对照组小鼠活动度好,皮毛光亮;小鼠肝脏形态正常;肝组织HE染色显示,对照组小鼠肝小叶结构完整。模型组小鼠活动减少,皮毛无光泽。与对照组比较,模型组小鼠体重下降、肝重增加、肝体比显著上调;模型组小鼠肝脏体积增大,质地较硬,表面出现颗粒状、结节样改变;肝组织HE染色显示,模型组小鼠肝组织结构紊乱,并出现多个肿瘤结节。此外,与对照组相比,模型组小鼠肝组织中Akt、β-catenin、Yap基因表达均明显上调。结论应用水动力尾静脉注射SB质粒及Akt/β-catenin/Yap质粒的方法可成功建立小鼠肝癌模型,为肝癌发病机制及药物研发提供快速、经济的动物模型。
关键词
肝肿瘤
动物模型
水动力尾静脉注射
SB质粒
癌基因
Keywords
liver neoplasms
animal model
hydrodynamic tail vein injection
SB plasmid
oncogene
分类号
R735.2 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
基于“睡美人”转座系统观察OGT抑制剂HLY838对肝癌的治疗作用
2
作者
梁惠钧
黄露义
汪凯
唐霓
机构
重庆医科大学感染性疾病分子生物学教育部重点实验室
出处
《重庆医科大学学报》
北大核心
2025年第1期30-36,共7页
基金
国家自然科学基金资助项目(编号:82272975)。
文摘
目的:利用“睡美人”转座系统和快速大容量尾静脉注射法,建立肝癌动物模型,并观察O-连接N-乙酰氨基葡萄糖转移酶(O-linked N-acetylglucosamine transferase,OGT)抑制剂(R)-3-(2-甲氧基苯基)-1-(噻吩-2-基甲基)哌嗪-2,5-二酮[(R)-3-(2methoxyphenyl)-1-(thiophen-2-ylmethyl)piperazine-2,5dione,HLY838]对肝癌的治疗效果。方法:将6~8周龄雄性C57BL/6J小鼠随机分为3组,分别将插入神经母细胞瘤ras病毒同源物(neuroblastoma RAS viraloncogene homolog,NRAS)的NRASV12转座子质粒、表达β-连环蛋白(β-catenin)基因转座子质粒、表达Yes相关蛋白(Yes-associated protein,YAP)基因的转座子质粒pT3-EF1aH Yap S127A与转座酶SB100质粒的混合溶液经尾静脉快速注射至小鼠体内,饲养8~16周后处死小鼠,观察肝脏成瘤情况以及肝脏病理学变化。肝癌模型建成后,腹腔注射HLY838,观察对肝癌的治疗效果。结果:高压注射质粒8~16周后,小鼠肝脏体积增大,表面出现颗粒状、结节样改变;苏木精-伊红染色(hematoxylin-eosin staining,HE)染色显示肝组织结构紊乱,出现多个肿瘤结节。pT3-EF1aH YAP S127A组成瘤率高、时间短,但肿瘤较小;pT/CAGGS-NrasV组肿瘤结节大小适中,但成瘤时间较长;pT3-N90-β-catenin组肿瘤主要为肝细胞癌。HLY838治疗组小鼠肝肿瘤结节数变少,小鼠肝肿瘤负担减轻。结论:应用水动力大容量尾静脉注射质粒的方法可快速建立小鼠肝癌模型,成功率较高。OGT抑制剂HLY838对小鼠肝癌有较好的抗肿瘤效果。
关键词
肝肿瘤
动物模型
“睡美人”转座系统
水动力尾静脉注射
(R)-3-(2-甲氧基苯基)-1-(噻吩-2-基甲基)哌嗪-2
5-二酮
Keywords
liver tumor
animal model
Sleeping Beauty transposition system
hydrodynamic tail vein injection
(R)-3-(2methoxyphenyl)-1-(thiophen-2-ylmethyl)piperazine-2,5dione
分类号
R735.7 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
水动力尾静脉注射介导Akt/β-catenin/Yap质粒转染建立小鼠肝癌模型
蒋雨薇
宋海燕
李怡萍
汤凯悦
徐娇雅
SULAIMAN Andrew
MCGARRY Sarah
WANG Lisheng
郑培永
《临床与实验病理学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2020
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
基于“睡美人”转座系统观察OGT抑制剂HLY838对肝癌的治疗作用
梁惠钧
黄露义
汪凯
唐霓
《重庆医科大学学报》
北大核心
2025
0
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