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重组人TGF-β1对TGF-β1基因启动活性的影响 被引量:1
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作者 包广宇 高春芳 +1 位作者 仲人前 孔宪涛 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期332-335,共4页
目的:探讨TGF β1对人TGF β1基因自身启动子活性的影响。方法:以人全血基因组DNA为模板,PCR扩增获得TGF β1基因转录起始位点上游5′端- 132 8~+812bp和+2 2 7~+812bp的片段,以此作为启动子与含氯霉素乙酰基转移酶(CAT)报告基因而不... 目的:探讨TGF β1对人TGF β1基因自身启动子活性的影响。方法:以人全血基因组DNA为模板,PCR扩增获得TGF β1基因转录起始位点上游5′端- 132 8~+812bp和+2 2 7~+812bp的片段,以此作为启动子与含氯霉素乙酰基转移酶(CAT)报告基因而不含启动子的pCAT enhancer质粒构建成重组质粒,并将其转染至大鼠星状细胞株nFSC中,细胞在DMEM培养基中进行培养,用不同浓度的TGF β1进行干涉,测定并比较细胞的CAT表达水平。结果:不同浓度的TGF β1对大鼠的肝脏星状细胞的增殖具有抑制作用,而且这种抑制作用在实验用的浓度范围内具有剂量依赖关系;浓度为2 5ng/mlTGF β1可以使转染phTGF0 5 85、phTGF1 12 0、phTGF1 4 2 3、phTGF1 6 80、phTGF2 14 0质粒的大鼠肝星状细胞的CAT活性分别增加2~5倍。结论:TGF β1在大鼠nFSC细胞中对TGF β1启动子活性具有自身促进作用,为进一步研究TGF β1的调节机制提供了依据。 展开更多
关键词 TGF-Β1 启动子 氯霉素乙酰基转移酶
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多种细胞因子对转化生长因子β_1转录的调控作用
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作者 包广宇 丁秀芝 谷鸿喜 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期782-784,788,共4页
目的:探讨细胞因子TNF-α、IFN-γ、IFN-α、PDGF-BB、bFGF对TGF-β1启动活性的影响。方法:以人基因组DNA为模板,PCR扩增获得含有人TGF-β1基因启动子序列的-1328~+812bp片段,与氯霉素乙酰基转移酶(CAT)报告基因构建重组体phTGF2.14,... 目的:探讨细胞因子TNF-α、IFN-γ、IFN-α、PDGF-BB、bFGF对TGF-β1启动活性的影响。方法:以人基因组DNA为模板,PCR扩增获得含有人TGF-β1基因启动子序列的-1328~+812bp片段,与氯霉素乙酰基转移酶(CAT)报告基因构建重组体phTGF2.14,将其瞬时转染大鼠nFSC细胞,加入细胞因子进行干预,测定CAT活性。结果:10ng/mlTNF-α可以使重组体的CAT活性升高3.24倍;浓度为1000U/ml的IFN-γ、IFN-α使phTGF2.14的CAT活性分别降低至对照的(42±12)%、(58±6)%;浓度为10ng/ml的PDGF-BB、bFGF对TGF-β1基因启动子的活性没有影响;IFN-γ、IFN-α和TNF-α联合应用TGF-β1基因启动子的活性分别为对照的1.32和1.46倍。结论:TNF-α可促进TGF-β1基因启动子的活性;IFN-γ、IFN-α则对TGF-β1基因启动子的启动活性有抑制作用;IFN-γ、IFN-α可以阻断TNF-α对TGF-β1基因启动子的促进作用;PDGF-BB、bFGF对TGF-β1基因启动子的启动活性无影响,此研究为进一步研究细胞因子在纤维化疾病的相互作用机制提供了依据。 展开更多
关键词 TGF-Β1 基因 启动子 细胞因子 氯霉素乙酰基转移酶
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