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氯胺-T氧化C5、体外组装补体膜攻击复合物及其鉴定
1
作者
周镜然
朱锡华
+2 位作者
白云
姜曼
黎万玲
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2002年第10期1229-1230,共2页
目的 利用氧化的方法在无酶解反应发生的情况下获得活化形式的C5 ,进而实现以纯化的补体终末成分体外组装补体膜攻击复合物 (MAC)。方法 以蛋氨酸氧化剂氯氨 T与纯化的C5相互作用后 ,加入C6组装具溶血活性的C5 6复合物。以此复合物与...
目的 利用氧化的方法在无酶解反应发生的情况下获得活化形式的C5 ,进而实现以纯化的补体终末成分体外组装补体膜攻击复合物 (MAC)。方法 以蛋氨酸氧化剂氯氨 T与纯化的C5相互作用后 ,加入C6组装具溶血活性的C5 6复合物。以此复合物与NHS或纯化的后续终末补体成分组装MAC ,检测复合物的溶血活性。结果 反应性溶破实验证实 ,氯胺 T氧化C5与C6组装形成功能C5 6复合物 ,后者可与NHS或纯化的补体终末成分C7～C9体外组装具溶血活性的MAC ,并且所形成的C5 6复合物在 2 4h达到最大的溶血活性 ,48h仍保持稳定。结论 氯胺 T在不裂解C5的条件下产生了C5b样活性分子 ,该分子能与C6组装形成稳定的活性复合物 ,并可与其它补体终末成分组装产生活性MAC。
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关键词
C5
补体膜攻击复合物
补体终末成分
氯氨-t
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职称材料
抗人CD40 mAb 5H6的^125I标记及其与卵巢癌细胞株HO8910体外结合的生物学特性
被引量：
5
2
作者
罗先富
章斌
+5 位作者
马泓冰
汤琳
周璇
徐颖
吴翼伟
张学光
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第6期590-593,共4页
目的:研究抗人CD40单克隆抗体(mAb)5H6的125I标记及与卵巢癌细胞株HO8910体外结合的生物学特性。方法:氯氨-T法125I标记mAb5H6(125I-5H6),纸层析法测定125I-5H6的标记率和放射化学纯度,三氯醋酸沉淀法分析125I-5H6体外稳定性,细胞结合...
目的:研究抗人CD40单克隆抗体(mAb)5H6的125I标记及与卵巢癌细胞株HO8910体外结合的生物学特性。方法:氯氨-T法125I标记mAb5H6(125I-5H6),纸层析法测定125I-5H6的标记率和放射化学纯度,三氯醋酸沉淀法分析125I-5H6体外稳定性,细胞结合饱和实验进行Scatchard分析,lindmo法及其改良方法计算125I-5H6的免疫活性分数,细胞结合实验分析125I-5H6同HO8910细胞的内化和滞留。结果:(1)mAb5H6的125I标记率为(85.4±5.2)%,放射化学纯度为(99.2±0.5)%。(2)125I-5H6存放于4℃磷酸缓冲液中7d后其放射化学纯度为(80.3±4.7)%,在37℃血浆中存放24h后其放射化学纯度为(95.3±0.8)%。(3)125I-5H6与HO8910细胞亲和力Kd=(0.711±0.06)nmol/L,最大结合位点数(Bmax)=(2.17±0.08)×105个/细胞。(4)125I-5H6免疫活性分数达(38.6±5.4)%。(5)4℃2h125I-5H6同HO8910细胞滞留率为(89.8±6.0)%,37℃2h125I-5H6同HO8910细胞内化率达(54.9±2.6)%。结论:氯氨-T法进行125I-5H6标记具有良好的标记率和放射化学纯度,以及良好的体外稳定性和较高的免疫活性分数,且125I-5H6与HO8910细胞具有很高的亲和力,可用于动物体内实验。
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关键词
^125I标记
氯氨-t
法
CD40
卵巢肿瘤
单克隆抗体
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职称材料
题名
氯胺-T氧化C5、体外组装补体膜攻击复合物及其鉴定
1
作者
周镜然
朱锡华
白云
姜曼
黎万玲
机构
第三军医大学基础医学部全军免疫学研究所
出处
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2002年第10期1229-1230,共2页
基金
国家自然科学基金资助项目 ( 397890 10 )
国家重点基础研究发展规划资助项目 ("973"项目 ) (G19990 54 2 0 0 )
文摘
目的 利用氧化的方法在无酶解反应发生的情况下获得活化形式的C5 ,进而实现以纯化的补体终末成分体外组装补体膜攻击复合物 (MAC)。方法 以蛋氨酸氧化剂氯氨 T与纯化的C5相互作用后 ,加入C6组装具溶血活性的C5 6复合物。以此复合物与NHS或纯化的后续终末补体成分组装MAC ,检测复合物的溶血活性。结果 反应性溶破实验证实 ,氯胺 T氧化C5与C6组装形成功能C5 6复合物 ,后者可与NHS或纯化的补体终末成分C7～C9体外组装具溶血活性的MAC ,并且所形成的C5 6复合物在 2 4h达到最大的溶血活性 ,48h仍保持稳定。结论 氯胺 T在不裂解C5的条件下产生了C5b样活性分子 ,该分子能与C6组装形成稳定的活性复合物 ,并可与其它补体终末成分组装产生活性MAC。
关键词
C5
补体膜攻击复合物
补体终末成分
氯氨-t
Keywords
Membrane attack complex
terminal component of complement
chloramine T
分类号
R392 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
抗人CD40 mAb 5H6的^125I标记及其与卵巢癌细胞株HO8910体外结合的生物学特性
被引量：
5
2
作者
罗先富
章斌
马泓冰
汤琳
周璇
徐颖
吴翼伟
张学光
机构
苏州大学医学生物技术研究所
苏州大学附属第一医院核医学科
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第6期590-593,共4页
基金
国家自然科学基金资助项目(30571690)
国家高新技术研究发展计划(863)资助项目(2006AA02A254)
教育部博士点专项基金资助项目(20050285014)
文摘
目的:研究抗人CD40单克隆抗体(mAb)5H6的125I标记及与卵巢癌细胞株HO8910体外结合的生物学特性。方法:氯氨-T法125I标记mAb5H6(125I-5H6),纸层析法测定125I-5H6的标记率和放射化学纯度,三氯醋酸沉淀法分析125I-5H6体外稳定性,细胞结合饱和实验进行Scatchard分析,lindmo法及其改良方法计算125I-5H6的免疫活性分数,细胞结合实验分析125I-5H6同HO8910细胞的内化和滞留。结果:(1)mAb5H6的125I标记率为(85.4±5.2)%,放射化学纯度为(99.2±0.5)%。(2)125I-5H6存放于4℃磷酸缓冲液中7d后其放射化学纯度为(80.3±4.7)%,在37℃血浆中存放24h后其放射化学纯度为(95.3±0.8)%。(3)125I-5H6与HO8910细胞亲和力Kd=(0.711±0.06)nmol/L,最大结合位点数(Bmax)=(2.17±0.08)×105个/细胞。(4)125I-5H6免疫活性分数达(38.6±5.4)%。(5)4℃2h125I-5H6同HO8910细胞滞留率为(89.8±6.0)%,37℃2h125I-5H6同HO8910细胞内化率达(54.9±2.6)%。结论:氯氨-T法进行125I-5H6标记具有良好的标记率和放射化学纯度,以及良好的体外稳定性和较高的免疫活性分数,且125I-5H6与HO8910细胞具有很高的亲和力,可用于动物体内实验。
关键词
^125I标记
氯氨-t
法
CD40
卵巢肿瘤
单克隆抗体
Keywords
iodine-125 labeling
chloramine
-t
method
CD40
ovary tumor
monoclonal antibody
分类号
R392.11 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
氯胺-T氧化C5、体外组装补体膜攻击复合物及其鉴定
周镜然
朱锡华
白云
姜曼
黎万玲
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2002
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
抗人CD40 mAb 5H6的^125I标记及其与卵巢癌细胞株HO8910体外结合的生物学特性
罗先富
章斌
马泓冰
汤琳
周璇
徐颖
吴翼伟
张学光
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2008
5
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