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题名氨氧化亚硝化螺菌蔗糖合酶的性质研究及应用
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作者
冯鑫
赵丽婷
顾正华
李由然
石贵阳
丁重阳
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机构
糖化学与生物技术教育部重点实验室(江南大学)
粮食发酵工艺与技术国家工程实验室(江南大学)
江南大学生物工程学院
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出处
《食品与发酵工业》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第24期102-108,共7页
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文摘
尿苷二磷酸(uridine diphosphate,UDP)-葡萄糖是核苷酸依赖性糖基转移酶(“Leloir”glycosyltransferases,GTs,EC 2.4)进行糖基化反应的重要糖供体。蔗糖合酶(sucrose synthase,SuSy)可以利用蔗糖和UDP为底物,通过一步反应可逆生成UDP-葡萄糖和果糖。该文对来源于氨氧化亚硝化螺菌蔗糖合酶(Nitrosospira multiformis,NmSuSy)的基因在大肠杆菌中进行了异源表达、纯化、酶学性质分析以及功能研究。通过克服可逆反应的热力学和动力学限制实现了UDP-葡萄糖的大量合成。结果表明,该酶的分子质量为89 kDa,最适反应pH为6.5,在pH 6~7.5内有较好的稳定性。最适反应温度为55℃,温度低于40℃时具有较好的稳定性。在最佳反应条件pH 6、温度40℃、1 mol/L蔗糖、100 mmol/L UDP下反应,100 mg/L的NmSuSy催化反应1 h可生成35.8 mmol/L(20.2 g/L)的UDP-葡萄糖,反应6 h即可达到平衡状态,生成41.5 mmol/L(23.5 g/L)的UDP-葡萄糖。该研究为后续进一步实现UDP-葡萄糖的高效合成奠定了理论基础,为糖生物学的研究提供了更为经济的供体底物原料。
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关键词
氨氧化亚硝化螺菌
蔗糖合酶
UDP-葡萄糖
糖异源表达
酶学性质
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Keywords
Nitrosospira multiformis
sucrose synthase
UDP-glucose
heterologous expression
enzymatic properties
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分类号
Q936
[生物学—微生物学]
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