氨基酸转运载体2 (ASCT2)对胃癌细胞增殖的影响及其潜在机制 被引量：1

1

作者 周楚灵 王晓庆 +1 位作者 姜英华 刘锋 《复旦学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期149-156,共8页

目的研究氨基酸转运载体2 (amino-acid transporter 2,ASCT2)对胃癌发生发展的影响及其潜在调控分子机制。方法使用瞬时过表达上调ASCT2,短发夹RNA (short hairpin RNA,shRNA)干扰技术下调ASCT2。Western blot法检测过表达或干扰ASCT2... 目的研究氨基酸转运载体2 (amino-acid transporter 2,ASCT2)对胃癌发生发展的影响及其潜在调控分子机制。方法使用瞬时过表达上调ASCT2,短发夹RNA (short hairpin RNA,shRNA)干扰技术下调ASCT2。Western blot法检测过表达或干扰ASCT2后蛋白质水平及哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)信号通路的蛋白质水平变化;使用细胞荧光免疫检测过表达或干扰ASCT2后ASCT2和Ki67的表达情况;使用平板克隆与MTT法检测ASCT2对胃癌细胞增殖的影响。结果相比于胃黏膜上皮细胞系GES1,ASCT2在人类胃癌细胞系MGC803、SGC7901、AGS、BGC823、HGC27、MKN28和MKN45中具有高转录以及蛋白质表达水平,在AGS、SGC7901和MGC803中成功过表达和沉默ASCT2。在AGS和SGC7901中过表达ASCT2后,Ki67的荧光强度大幅增加。沉默ASCT2显著抑制SGC7901 (P=0.008,P<0.001)和MGC803(P<0.001,P=0.067)细胞的生长及克隆形成;过表达ASCT2则显著促进SGC7901 (P=0.001,P=0.003)和MGC803 (P=0.002,P=0.014)细胞的生长及克隆形成。在AGS、SGC7901和MGC803中过表达ASCT2后,mTOR信号通路被激活并上调下游基因的表达;而沉默ASCT2后,抑制mTOR信号通路与其下游基因的表达。结论 ASCT2能通过mTOR信号通路显著促进胃癌细胞的生长。 展开更多

关键词 氨基酸转运载体2(asct2) 胃癌 MTOR信号通路 细胞增殖

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猪氨基酸转运载体b^(0,＋)AT-2的分子克隆及其序列分析 被引量：1

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作者 职爱民 冯定远 +7 位作者 周响艳 黄志毅 邹仕庚 王修启 左建军 叶慧 王小兰 刘准 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期595-601,共7页

本研究克隆了b0,+AT-2的全长cDNA序列。基于NCBI发布的人和鼠b0,+AT序列,应用生物学软件进行序列比对后在同源区设计引物,获取cDNA片段;再利用RACE技术克隆了其全长cDNA序列。生物信息学分析显示:猪b0,+AT-2的全长1 488 bp,包括90 bp的... 本研究克隆了b0,+AT-2的全长cDNA序列。基于NCBI发布的人和鼠b0,+AT序列,应用生物学软件进行序列比对后在同源区设计引物,获取cDNA片段;再利用RACE技术克隆了其全长cDNA序列。生物信息学分析显示:猪b0,+AT-2的全长1 488 bp,包括90 bp的3′非翻译区(UTR)和126 bp的5′UTR;编码区(CDS)编码423个氨基酸残基,分别和人、鼠b0,+AT以及猪b0,+AT-1有75.1%、71.9%和86.6%的同源性。 展开更多

关键词 氨基酸转运载体 b0 +AT-2 SLC7A9 克隆 序列分析

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N-氨甲酰谷氨酸、脯氨酸及腐胺对仔猪空肠和回肠Na^(+)依赖性中性氨基酸转运载体2表达及营养感应信号的调控作用 被引量：1

3

作者 王婧 李光燃 +3 位作者 肖玉欣 邓远坤 唐宇龙 谭碧娥 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第8期4615-4625,共11页

本研究旨在探讨Na^(+)依赖性中性氨基酸转运载体2(SNAT2)介导多胺及其前体物质对仔猪肠黏膜营养感应信号的调控作用。试验选取32头哺乳仔猪,随机分为4组,每组8头猪,自出生当日开始,每日2次分别灌服生理盐水(对照组)、腐胺(5 mg/kg BW)... 本研究旨在探讨Na^(+)依赖性中性氨基酸转运载体2(SNAT2)介导多胺及其前体物质对仔猪肠黏膜营养感应信号的调控作用。试验选取32头哺乳仔猪,随机分为4组,每组8头猪,自出生当日开始,每日2次分别灌服生理盐水(对照组)、腐胺(5 mg/kg BW)、脯氨酸(25 mg/kg BW)和N-氨甲酰谷氨酸(NCG,8 mg/kg BW)。14日龄断奶,断奶第3天采血后屠宰,采集空肠和回肠样品。结果表明:与对照组相比,灌服腐胺、脯氨酸和NCG显著提高仔猪平均日增重(P<0.05);灌服腐胺和NCG显著提高空肠和回肠黏膜SNAT2的蛋白表达水平(P<0.05);灌服脯氨酸和NCG显著提高了空肠黏膜氨基酸转运感应相关基因[质子耦合氨基酸转运蛋白1(PAT1)、钙感应受体(CasR)、磷脂酶Cβ2(PLCβ2)和味觉受体1家族成员3(T1R3)]的mRNA相对表达量(P<0.05),NCG还显著上调哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路相关基因[促分裂原活化蛋白激酶3(MAP4K3)和mTOR]的mRNA相对表达量(P<0.05);灌服NCG显著提高了血清中胆囊收缩素(CCK)含量(P<0.05)及空肠黏膜CCK受体mRNA相对表达量(P<0.05)。综上所述,NCG可通过上调仔猪肠道氨基酸转运载体相关基因的表达,调节氨基酸感应途径信号分子的释放和基因表达。 展开更多

关键词 仔猪 肠道 氨基酸感应 Na^(+)依赖性中性氨基酸转运载体2 多胺

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草鱼碱性氨基酸转运载体y^＋ LAT2 cDNA基因克隆与表达

4

作者 杨吉轩 谭青松 +1 位作者 朱文欢 陈忱 《水生态学杂志》 北大核心 2013年第3期54-61,共8页

利用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和cDNA末端快速扩增(RACE)方法,克隆y+LAT2基因cDNA序列,并利用实时荧光定量PCR探讨y+LAT2在草鱼(Ctenopharyngodon idellus)各组织中的表达情况以及饥饿对其mRNA的影响。结果表明,获得的y+LAT2基因的c... 利用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和cDNA末端快速扩增(RACE)方法,克隆y+LAT2基因cDNA序列,并利用实时荧光定量PCR探讨y+LAT2在草鱼(Ctenopharyngodon idellus)各组织中的表达情况以及饥饿对其mRNA的影响。结果表明,获得的y+LAT2基因的cDNA序列片段为1849bp,含1371bp的核心序列,编码456个氨基酸。预测草鱼氨基酸序列与斑马鱼(Danio rerio)的同源性高达96.5%,与哺乳动物和两栖动物的同源性在78%～83%,构建的系统进化树与传统形态学分类一致。在草鱼的肌肉、脑、鳃、心、肾脏、肝、后肠、中肠、前肠、脾脏组织均检测到y+LAT2基因的表达。草鱼脾脏、肾脏以及前肠、中肠的y+LAT2 mRNA表达水平对禁食的反应不同,在短期饥饿(14d)期间,其y+LAT2 mRNA表达水平均呈下降趋势。草鱼碱性氨基酸转运载体y+LAT2基因全长cDNA序列的获得,有利于进一步探讨鱼类氨基酸的吸收转运机制。 展开更多

关键词 草鱼 碱性氨基酸转运载体 y+LAT2 基因克隆

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视神经挫伤对大鼠视网膜谷氨酰胺合酶和兴奋性氨基酸转运蛋白-2表达的影响 被引量：3

5

作者 黄正如 陈海英 +3 位作者 徐明 陆炯 叶凯 管怀进 《眼科新进展》 CAS 2008年第9期657-660,共4页

目的通过谷氨酰胺合酶(glutamine synthetase,GS)、兴奋性氨基酸转运蛋白-2(GLT-1)表达的改变,研究视神经挫伤后视网膜谷氨酸代谢变化的机制。方法建立大鼠右眼视神经挫伤模型48只。术后1d、7d、14d以高效液相色谱分析检测大鼠玻璃体谷... 目的通过谷氨酰胺合酶(glutamine synthetase,GS)、兴奋性氨基酸转运蛋白-2(GLT-1)表达的改变,研究视神经挫伤后视网膜谷氨酸代谢变化的机制。方法建立大鼠右眼视神经挫伤模型48只。术后1d、7d、14d以高效液相色谱分析检测大鼠玻璃体谷氨酸浓度;通过免疫组织化学检测大鼠视网膜GS、GLT-1的表达。结果视神经挫伤后1d、7d、14d,大鼠玻璃体谷氨酸浓度升高,与对侧眼比较差异具有统计学意义(P=0.0011、P=0.0000、P=0.0000)。视神经挫伤后1d,GS高表达(P=0.0054);挫伤后7d,GS表达与对侧眼比较差异无统计学意义(P=0.1379);挫伤后14d,GS低表达(P=0.0333)。视神经挫伤后1d、7d,GLT-1的表达与对照组的差异无统计学意义(P=0.1985、0.6537);但挫伤后14d,GLT-1低表达(P=0.0403)。结论视神经挫伤后玻璃体谷氨酸浓度升高,与视网膜GS、GLT-1的表达降低有关。 展开更多

关键词 视神经挫伤 谷氨酸 谷氨酰胺合酶 兴奋性氨基酸转运蛋白-2

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脑摄取平衡时丙泊酚对犬脑不同区域兴奋性氨基酸转运体2mRNA的影响 被引量：1

6

作者 李洋 林春水 +3 位作者 古妙宁 杨晶晶 范钦 陈莺 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2012年第21期3524-3527,共4页

目的:探讨丙泊酚对犬脑不同区域兴奋性氨基酸转运体2(EAAT2)mRNA表达的影响。方法:18只健康杂种犬,雌雄不限,12～18个月,体重10～12kg,随机分为对照组(C组)、低剂量组(L组)和高剂量组(H组),每组6只。L组15s内静脉注入丙泊酚5.5mg/kg诱导... 目的:探讨丙泊酚对犬脑不同区域兴奋性氨基酸转运体2(EAAT2)mRNA表达的影响。方法:18只健康杂种犬,雌雄不限,12～18个月,体重10～12kg,随机分为对照组(C组)、低剂量组(L组)和高剂量组(H组),每组6只。L组15s内静脉注入丙泊酚5.5mg/kg诱导,55mg/(kg.h)恒速静注维持;H组15s内注入丙泊酚7.0mg/kg诱导,70mg/(kg.h)恒速静注维持。静注50min时取颈内动、静脉血各2mL后静注10%KCl注射液2mg/kg处死L组和H组动物。采用高效液相色谱-紫外法(HPLC-UV)检测动、静脉血浆丙泊酚浓度。C组不给予任何干预措施,快速静注10%KCl2mg/kg处死。3组均于无菌条件下解剖获取下丘脑、底丘脑、背侧丘脑、海马、脑桥、顶叶以及额叶组织,qRT-PCR方法检测脑组织EAAT2 mRNA的表达水平。结果:丙泊酚静注50min时,L组和H组丙泊酚血浆浓度(动脉-动脉,静脉-静脉比较)差异显著(P<0.01),而两组颈内动脉和静脉丙泊酚血浆浓度比较差异均无统计学意义(P>0.05)。下丘脑、海马和顶叶EAAT2 mRNA的相对表达量,在L组和H组均较C组明显升高,差异显著(P<0.05);L组和H组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。背侧丘脑等其他脑区EAAT2 mRNA的相对表达量3组之间差异无显著性(P>0.05)。结论:丙泊酚恒速静注50min,犬脑摄取达到平衡状态;此时丙泊酚可显著上调下丘脑、海马和顶叶EAAT2 mRNA的表达,但不同剂量对其表达的影响差异无显著性。 展开更多

关键词 二异丙酚 兴奋性氨基酸转运体2 脑 静脉麻醉

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兴奋性氨基酸转运体2在神经退行性变中的作用 被引量：3

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作者 许保磊 王蓉 《中国比较医学杂志》 CAS 2012年第10期67-71,共5页

谷氨酸是脑内必需的兴奋性神经递质之一,兴奋性氨基酸转运体(Excitatory amino acid transporterEAAT)2是最主要的谷氨酸转运体,负责脑内90%以上的谷氨酸再摄取,调节突触间隙的谷氨酸浓度。EAAT2功能紊乱导致胞外谷氨酸过量积聚,在多种... 谷氨酸是脑内必需的兴奋性神经递质之一,兴奋性氨基酸转运体(Excitatory amino acid transporterEAAT)2是最主要的谷氨酸转运体,负责脑内90%以上的谷氨酸再摄取,调节突触间隙的谷氨酸浓度。EAAT2功能紊乱导致胞外谷氨酸过量积聚,在多种神经退行性疾病的发病过程中起重要作用,如阿尔茨海默病、亨廷顿舞蹈病、肌萎缩侧索硬化等。对于人EAAT2启动子的研究发现,NF-kB在星形胶质细胞中对EAAT2表达起关键作用。通过筛选1 040种FDA批准的化合物,发现多种β-内酰胺类抗生素如头孢曲松钠等是EAAT2的转录激活剂,可以增加EAAT2的蛋白表达水平,产生神经保护作用。 展开更多

关键词 谷氨酸 兴奋性氨基酸转运体2 神经退行性变 NF-KB 头孢曲松钠

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氨基酸转运载体B0AT1(SLC6A19)新型抑制剂的鉴定,作为诱导蛋白质限制和治疗2型糖尿病的潜在目标

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作者 查翠芳(译) 王文策(校) 无 《广东饲料》 2018年第11期51-51,共1页

中性氨基酸转运载体B0AT1最近被确定为是治疗2型糖尿病及相关代谢失调的靶点。B0AT1介导所有钠依赖性中性氨基酸的摄取。B0AT1需要collectrin(TMEM27)的共表达来在表层表达并发挥催化活性。本研究旨在建立鉴定和评估新型B0AT1的抑制剂... 中性氨基酸转运载体B0AT1最近被确定为是治疗2型糖尿病及相关代谢失调的靶点。B0AT1介导所有钠依赖性中性氨基酸的摄取。B0AT1需要collectrin(TMEM27)的共表达来在表层表达并发挥催化活性。本研究旨在建立鉴定和评估新型B0AT1的抑制剂的方法。CHO细胞系可稳定表达collectrin和B0AT1。利用高通量筛选以及荧光探针手段检测B0AT1摄取氨基酸期间细胞膜的去极化情况。在进行功能分析的同时,基于与B0AT1高度同源的果蝇多巴胺转运载体的高分辨率结构,使用AutoDock4对计算机模拟化合物进行筛选。我们测定了一系列新型B0AT1转运蛋白抑制剂。Benztropine是转运蛋白的竞争性抑制剂,其IC 50为44±9μmol。该化合物对相关转运体具有选择性,并阻断了小鼠小肠翻转模型中中性氨基酸摄取。本研究建立的方法可以广泛用于鉴定新的转运抑制剂。利用该方法能够可研究上皮转运、诱导蛋白质限制或通过药物化学进一步开发化合物。 展开更多

关键词 氨基酸转运载体 2型糖尿病 抑制剂 蛋白质 鉴定 治疗 诱导 中性氨基酸

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Na^+-依赖性谷氨酰胺载体ASCT2的生物学功能及表皮生长因子的调控作用 被引量：4

9

作者 黄骞 李宁 +4 位作者 朱维铭 李秋荣 王斌 石斌 黎介寿 《肠外与肠内营养》 CAS 2006年第6期329-334,341,共7页

目的:Na+-依赖性中性氨基酸载体ASCT2,是一种广谱的氨基酸载体,它的生理功能主要是转运肠腔内谷氨酰胺、丙氨酸、丝氨酸和半胱氨酸等中性氨基酸。本研究拟对ASCT2载体转运特性及表皮生长因子对其的调控机制作一探讨。方法:体外培养Caco-... 目的:Na+-依赖性中性氨基酸载体ASCT2,是一种广谱的氨基酸载体,它的生理功能主要是转运肠腔内谷氨酰胺、丙氨酸、丝氨酸和半胱氨酸等中性氨基酸。本研究拟对ASCT2载体转运特性及表皮生长因子对其的调控机制作一探讨。方法:体外培养Caco-2细胞,观察ASCT2对核素标记谷氨酰胺的转运特性、动力学特征及底物特异性;利用ASCT2多克隆抗体及TaqMan实时定量PCR方法,研究表皮生长因子对ASCT2功能的调控作用。结果:Caco-2细胞中Na+-依赖性3H-L-谷氨酰胺(50μmol)的转运速率为(635±80.1)pmol/(mgprotein·min),大部分中性氨基酸如丙氨酸、丝氨酸、半胱氨酸等可对其产生竞争性抑制;在表皮生长因子(100μg/L)孵育下,可以提高其转运活性约100%(P<0.01),Western-blot及real-timePCR显示其蛋白及mRNA表达增高。结论:谷氨酰胺载体ASCT2对核素标记谷氨酰胺具有强大的转运活性,对中性氨基酸底物具有亲和特异性;表皮生长因子对其转运活性、蛋白表达、mRNA丰度具有上调作用。 展开更多

关键词 肠上皮细胞 谷氨酰胺载体 asct2 表皮生艮因子

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小肽转运载体2及其在乳腺泌乳中的作用 被引量：5

10

作者 周苗苗 吴跃明 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期603-608,共6页

作为一种潜在的重要的乳腺小肽转运系统,PepT2在乳腺氨基酸氮转运、降低乳汁药物分布以及乳腺疾病治疗方面都起到重要作用。对PepT2在乳腺中作用的深入研究在泌乳生理和临床治疗上都有着非常重要的意义。本文主要从PepT2的蛋白质结构与... 作为一种潜在的重要的乳腺小肽转运系统,PepT2在乳腺氨基酸氮转运、降低乳汁药物分布以及乳腺疾病治疗方面都起到重要作用。对PepT2在乳腺中作用的深入研究在泌乳生理和临床治疗上都有着非常重要的意义。本文主要从PepT2的蛋白质结构与功能、底物转运特性、表达调控以及其在泌乳生理中的作用4个方面进行简要综述。 展开更多

关键词 小肽转运载体2 乳腺 生理意义

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小肽转运载体(PepT1和PepT2)研究进展 被引量：4

11

作者 范淳 陈代文 +1 位作者 余冰 杨玫 《饲料工业》 2007年第1期11-15,共5页

由小肽转运载体介导的小肽吸收对动物的生长和发育有着特殊的作用,因此,对小肽转运载体的深入研究在生理、药理和临床上都有着非常重要的意义。文中主要从小肽转运载体(PepT1和PepT2)的蛋白质分子结构与功能、主要的组织分布和影响其活... 由小肽转运载体介导的小肽吸收对动物的生长和发育有着特殊的作用,因此,对小肽转运载体的深入研究在生理、药理和临床上都有着非常重要的意义。文中主要从小肽转运载体(PepT1和PepT2)的蛋白质分子结构与功能、主要的组织分布和影响其活性的因素三方面进行简要综述。 展开更多

关键词 小肽转运载体 PepT1 PepT2 组织分布 活性调控

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小鼠乳腺发育泌乳过程中L型氨基酸转运载体1的表达研究 被引量：2

12

作者 林叶 胡红柳 侯晓明 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第4期143-147,共5页

为阐明L型氨基酸转运载体1(L-type amino acid transporter 1,LAT1)的表达与乳腺发育和泌乳功能之间的关系,采用荧光定量RT-PCR技术和激光共聚焦显微技术对青春期、妊娠期、泌乳期和退化期小鼠乳腺中LAT1及其辅因子4F2抗原重链(4F2hc)... 为阐明L型氨基酸转运载体1(L-type amino acid transporter 1,LAT1)的表达与乳腺发育和泌乳功能之间的关系,采用荧光定量RT-PCR技术和激光共聚焦显微技术对青春期、妊娠期、泌乳期和退化期小鼠乳腺中LAT1及其辅因子4F2抗原重链(4F2hc)表达含量和部位的变化进行研究。结果表明,青春期乳腺导管发育缓慢,LAT1和4F2hc在导管上皮细胞膜、肌上皮细胞膜及乳腺脂肪细胞膜上均低水平表达;妊娠期导管上皮细胞增殖分化加速,LAT1和4F2hc在乳腺小叶导管上皮细胞膜基底侧表达,表达水平上调;泌乳期乳蛋白合成和分泌旺盛,LAT1和4F2hc在腺泡上皮细胞膜的基底侧表达,表达量达到峰值;退化期乳腺组织功能性结构消退,乳腺对氨基酸的需求降低,LAT1和4F2hc的表达下降。提示,LAT1/4F2hc是小鼠乳腺组织中转运氨基酸的载体形式,LAT1和4F2hc的表达变化与乳腺发育、泌乳、退化的生理过程中氨基酸的需要量相关。 展开更多

关键词 乳腺发育 氨基酸转运 LAT1 4F2hc 表达

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必需氨基酸上调乳腺腺泡中L型氨基酸转运载体1的表达 被引量：1

13

作者 林叶 侯晓明 +2 位作者 田雷 齐帮若 李庆章 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第3期83-86,共4页

为探讨泌乳乳腺中必需氨基酸与L型氨基酸转运载体1(L-type amino acid transporter 1,LAT1)表达之间的关系,本研究通过体外构建奶牛乳腺泌乳模型,采用免疫印迹方法检测生理浓度的必需氨基酸对乳腺腺泡中LAT1及其辅因子4F2重链(4F2heavy ... 为探讨泌乳乳腺中必需氨基酸与L型氨基酸转运载体1(L-type amino acid transporter 1,LAT1)表达之间的关系,本研究通过体外构建奶牛乳腺泌乳模型,采用免疫印迹方法检测生理浓度的必需氨基酸对乳腺腺泡中LAT1及其辅因子4F2重链(4F2heavy chain,4F2hc)表达变化的影响。结果表明,生理浓度的必需氨基酸显著上调体外培养的奶牛乳腺腺泡中LAT1和4F2hc的表达,提示LAT1是奶牛乳腺上皮细胞内负责转运必需氨基酸的主要转运载体,LAT1和4F2hc的表达受必需氨基酸的诱导。 展开更多

关键词 乳腺腺泡 必需氨基酸 L型氨基酸转运载体1(LAT1) 4F2重链(4F2hc)

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葡萄糖转运蛋白-2逆转录病毒表达载体构建/包装及其鉴定

14

作者 方芳 凌贤龙 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第11期1207-1209,共3页

目的构建葡萄糖转运蛋白-2(glucose transporter-2,GLUT-2)基因逆转录病毒表达载体及其稳定产毒细胞系,为新型"人工胰岛β细胞"的构建奠定基础。方法质粒pCB7/GLUT2经EcoRⅠ、BamHⅠ双酶切,克隆至逆转录病毒载体PLXSN,构建成... 目的构建葡萄糖转运蛋白-2(glucose transporter-2,GLUT-2)基因逆转录病毒表达载体及其稳定产毒细胞系,为新型"人工胰岛β细胞"的构建奠定基础。方法质粒pCB7/GLUT2经EcoRⅠ、BamHⅠ双酶切,克隆至逆转录病毒载体PLXSN,构建成重组逆转录病毒表达载体pL-GLUT2-SN,经酶切及测序鉴定;转pL-GLUT2-SN至包装细胞系PA317,G418抗性筛选,检测上清病毒滴度,挑选滴度较高的稳定产毒细胞克隆行PCR及RT-PCR鉴定。结果建立GLUT-2基因逆转录病毒表达载体pL-GLUT2-SN,经酶切及测序证实目的基因插入位点及读码框架正确;所建稳定产毒细胞克隆PA317/GLUT2,其最高病毒滴度达7.1×105CFU/ml,PCR及RT-PCR证实GLUT-2基因整合入其中并稳定表达。结论成功构建GLUT-2基因逆转录病毒表达载体及其稳定产毒细胞系,为"人工胰岛β细胞"的构建奠定了基础。 展开更多

关键词 葡萄糖转运蛋白-2 逆转录病毒载体 PA317细胞 包装 鉴定

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谷氨酰胺转运蛋白ASCT2的研究进展 被引量：1

15

作者 梁宝瑜 金春 +4 位作者 高俪原 李余佳 王桭屹 张峰 郑仕中 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期22-25,共4页

谷氨酰胺在细胞蛋白质和能量代谢中起着核心作用。谷氨酰胺必需通过细胞膜上特异性载体的转运才能进入细+胞内发挥作用,其中Na依赖性谷氨酰胺载体2(alanine-serine-cysteine transporter2,ASCT2)最为重要。ASCT2不仅在正常组织器官中广... 谷氨酰胺在细胞蛋白质和能量代谢中起着核心作用。谷氨酰胺必需通过细胞膜上特异性载体的转运才能进入细+胞内发挥作用,其中Na依赖性谷氨酰胺载体2(alanine-serine-cysteine transporter2,ASCT2)最为重要。ASCT2不仅在正常组织器官中广泛表达,而且在肿瘤中的表达明显增加,以满足肿瘤急剧增加的谷氨酰胺需求。ASCT2生物学功能的调控与人类健康密切相关。ASCT2的N糖基化位点是N163和N212,对ASCT2转运到膜上至关重要,但对ASCT2的内在转运功能影响不大。ASCT2与其他蛋白间的相互作用和翻译后修饰对ASCT2的稳定性、转运活性具有重要调节作用。该文主要总结ASCT2生物学功能调控及其对疾病治疗的意义。 展开更多

关键词 谷氨酰胺 asct2 转运蛋白 代谢 调控 抑制剂

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HMBi对绒山羊绒毛品质及氨基酸转运载体基因表达的影响 被引量：2

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作者 李录明 张恩平 李碧波 《家畜生态学报》 北大核心 2019年第8期14-19,47,共7页

试验旨在研究蛋氨酸羟基类似物异丙酯(HMBi)对哺乳期母羊和羔羊绒毛品质以及哺乳羔羊体内含硫氨基酸转运载体相关基因表达量的影响。选取27对年龄、体重、分娩日期相近且均产单羔的哺乳初期陕北白绒山羊母羊及其初生羔羊,随机分为3组(每... 试验旨在研究蛋氨酸羟基类似物异丙酯(HMBi)对哺乳期母羊和羔羊绒毛品质以及哺乳羔羊体内含硫氨基酸转运载体相关基因表达量的影响。选取27对年龄、体重、分娩日期相近且均产单羔的哺乳初期陕北白绒山羊母羊及其初生羔羊,随机分为3组(每组3个重复,每个重复3对母子),对照组饲喂基础日粮,试验组在基础日粮中分别添加2%和4%的HMBi。预试期10d,正试期60d。结果表明:(1)试验母羊绒毛和粗毛长度随HMBi添加水平提高有增加趋势,其中4%组母羊绒毛长度显著大于对照组(P<0.05);各组试验羔羊绒毛、粗毛长度及绒毛细度均无显著性差异(P>0.05);(2)母羊饲喂不同水平HMBi对其哺乳羔羊皮肤内SLC3A2基因的表达量和空肠内SLC1A5基因的表达量有显著影响(P<0.05),SLC38A2和SLC6A19基因的表达量在各处理组之间无显著差异(P>0.05);(3)在不同组织中,4种基因的肝脏表达量最高,皮肤表达量最低;在小肠不同区段,SLC3A2基因表达量由高到低依次为十二指肠、空肠、回肠,SLC38A2、SLC1A5和SLC6A19基因表达量由高到低依次为空肠、十二指肠、回肠。综上,哺乳期绒山羊饲粮中添加HMBi可提高母羊绒毛生长速度,但对其哺乳羔羊绒毛品质无明显影响;根据4种氨基酸转运载体相关基因表达量的表达规律,可以推测出:肝脏是氨基酸代谢较为活跃的场所;小肠中的十二指肠和空肠可能是肠道游离氨基酸被吸收的主要部位,而在回肠的吸收量较少。 展开更多

关键词 绒山羊 2-羟基-4-甲硫基丁酸异丙酯 氨基酸转运载体基因

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氨基胍对内毒素活化小鼠巨噬细胞L-arginine转运及CAT-2表达影响的实验研究

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作者 黄传江 黄骞 +3 位作者 宋添谋 吴性江 李秋荣 李宁 《肠外与肠内营养》 CAS 北大核心 2011年第3期154-157,共4页

目的:通过氨基胍(AG)干预内毒素活化小鼠巨噬细胞RAW264.7模型,观察NO的产生、左旋精氨酸(L-Arg)转运以及碱性氨基酸转运体-2(CAT-2)mRNA的表达,旨在研究氨基胍对L-Arg跨膜转运及CAT-2表达的影响。方法:实验分为四组,即对照组,LPS对照组... 目的:通过氨基胍(AG)干预内毒素活化小鼠巨噬细胞RAW264.7模型,观察NO的产生、左旋精氨酸(L-Arg)转运以及碱性氨基酸转运体-2(CAT-2)mRNA的表达,旨在研究氨基胍对L-Arg跨膜转运及CAT-2表达的影响。方法:实验分为四组,即对照组,LPS对照组,AG组,AG+LPS组。接种RAW264.7细胞于培养板后,37℃、5%CO2培养箱培养24 h,将AG组和AG+LPS组换以含AG 1 mmol/L的DMEM培养液,30 min后四组均换以新鲜DMEM培养液,其中LPS对照组和AG+LPS组加入LPS,继续培养18 h,检测细胞合成NO水平、L-Arg摄取率和CAT-2 mRNA表达。结果:与对照组比较,AG预处理后的RAW264.7细胞,经LPS活化后NO水平、L-Arg摄取率、CAT-2 mRNA水平显著降低。结论:AG作为一种特异的诱生型一氧化氮合酶(iNOS)抑制剂,不仅可抑制iNOS的活性,而且还可以从基因水平上抑制L-Arg转运体CAT-2的表达,进而阻断L-Arg的跨膜转运和NO合成。 展开更多

关键词 氨基胍 左旋精氨酸 碱性氨基酸转运体-2

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L-精氨酸转运体-2的siRNA表达载体的构建及鉴定

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作者 黄传江 黄骞 +2 位作者 罗冰 吴性江 李宁 《肠外与肠内营养》 CAS 北大核心 2012年第2期95-98,共4页

目的:构建氨基酸转运体-2(CAT-2)的靶向小分子干扰RNA(siRNA)表达载体质粒,并测序鉴定,为下一步研究靶向siRNA对CAT-2蛋白表达和L-argine/iNOS/NO通路的影响建立基础。方法:根据L-精氨酸转运体CAT-2的mRNA序列及siRNA设计原则,并经BLAS... 目的:构建氨基酸转运体-2(CAT-2)的靶向小分子干扰RNA(siRNA)表达载体质粒,并测序鉴定,为下一步研究靶向siRNA对CAT-2蛋白表达和L-argine/iNOS/NO通路的影响建立基础。方法:根据L-精氨酸转运体CAT-2的mRNA序列及siRNA设计原则,并经BLAST比对,设计合成4对siRNA寡聚单链DNA,退火成双链dsDNA,用载体构建试剂盒BLOCK-iTTMPol II miR RNAi Expression Vector Kit with EmGFP进行重组质粒构建,将4对dsDNA分别插入到siRNA表达载体pcDNATM6.2-GW/EmGFPmiR中,构建4个siRNA表达质粒,并转化至感受态细菌DH5。筛选阳性克隆并提取重组质粒后测序分析。结果:CAT-2的siRNA重组载体质粒测序结果证实表达载体构建成功。结论:L-精氨酸转运体CAT-2 siRNA表达载体质粒成功构建,为下一步研究靶向siRNA对CAT-2蛋白表达和L-arg/iNOS/NO通路的影响建立基础。 展开更多

关键词 左旋精氨酸 氨基酸转运体-2 靶向小分子干扰RNA

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应用RNA干扰技术检测ASCT2功能 被引量：4

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作者 周济宏 胡心宝 +2 位作者 洪志坚 李幼生 黎介寿 《医学研究生学报》 CAS 2011年第11期1124-1128,共5页

目的谷氨酰胺(glutamine,GLN)是肠道细胞的主要氧化燃料,必须通过载体的转运才能进入细胞内,其中载体ASCT2起重要作用,文中将应用RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术研究肠黏膜上皮细胞株(intestinal epithelial cell,IEC)-6细胞膜GLN... 目的谷氨酰胺(glutamine,GLN)是肠道细胞的主要氧化燃料,必须通过载体的转运才能进入细胞内,其中载体ASCT2起重要作用,文中将应用RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术研究肠黏膜上皮细胞株(intestinal epithelial cell,IEC)-6细胞膜GLN载体ASCT2的转运功能。方法体外培养IEC-6,RNAi慢病毒颗粒进行细胞感染,3 d后荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)表达情况,5 d后采用RT-PCR检测载体ASCT2的mRNA表达,7 d后采用Western blot检测其蛋白表达,同时测定[3 H]-L-GLN摄取率。结果病毒转染细胞中均有GFP表达,载体ASCT2的mRNA表达下降60%,蛋白表达几近消失,[3H]-L-GLN摄取率下降15%。结论通过慢病毒载体介导的RNAi这一方便有效的方法,证实了ASCT2载体在整个细胞的GLN转运中起15%以上的作用。 展开更多

关键词 肠黏膜上皮细胞株 [3H]-谷氨酰胺 谷氨酰胺载体 asct2

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含赖氨酸二肽对奶牛乳蛋白合成和乳腺氨基酸转运相关基因表达的影响 被引量：4

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作者 周苗苗 崔景香 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2016年第5期1156-1161,共6页

试验旨在研究含赖氨酸二肽对奶牛乳腺组织中乳蛋白合成和氨基酸转运的影响。在体外培养的奶牛乳腺组织培养液中添加不同含赖氨酸二肽(赖氨酸-赖氨酸(KK)、赖氨酸—组氨酸(KH)、赖氨酸—苯丙氨酸(KF)、赖氨酸—亮氨酸(KL)和赖氨酸—苏氨... 试验旨在研究含赖氨酸二肽对奶牛乳腺组织中乳蛋白合成和氨基酸转运的影响。在体外培养的奶牛乳腺组织培养液中添加不同含赖氨酸二肽(赖氨酸-赖氨酸(KK)、赖氨酸—组氨酸(KH)、赖氨酸—苯丙氨酸(KF)、赖氨酸—亮氨酸(KL)和赖氨酸—苏氨酸(KT)),分别等量取代培养液中0、5%、10%、15%和20%的游离赖氨酸(赖氨酸总浓度为210μg/mL)进行培养,试验结束后收集乳腺组织用于基因表达检测。结果显示,同游离氨基酸替代量为0组相比,KH替代Lys比例为15%,KF替代比例为10%,KK、KL和KT替代比例为5%时,αs1酪蛋白(CSN1S1)mRNA丰度最高(P<0.05);KK替代Lys比例为5%、10%、15%和20%,KH替代比例为10%和15%,KF替代比例为15%,KL替代比例为5%、20%及KT替代比例为5%、10%和15%时,均显著促进了奶牛乳腺组织中小肽转运载体2(SLC15A2)的基因表达(P<0.05);KH替代Lys比例为15%,KK、KL替代比例分别为10%,KF、KT替代比例分别为5%时,赖氨酸转运载体B0+(SLC6A14)的mRNA丰度最高(P<0.05);KH替代Lys的15%、20%,KK替代比例为5%、10%和15%,KL替代比例为5%和10%时,显著促进了雷帕霉素靶蛋白(mTOR)基因的表达(P<0.05)。结果提示,奶牛乳腺摄取赖氨酸二肽能促进氨基酸的吸收和乳蛋白的合成。 展开更多

关键词 赖氨酸二肽 αs1酪蛋白 小肽转运载体2 赖氨酸转运载体B0+ 奶牛乳腺组织

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