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牛乳铁素的制备纯化与氨基酸序列分析 被引量:3
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作者 胡志和 冯飞 +1 位作者 刘传国 庞广昌 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第7期166-170,共5页
对牛乳铁素的制备和分离纯化方法进行研究。牛乳铁蛋白经胃蛋白酶水解,其产物经不同分离介质进行分离纯化,用毛细管电泳检测其纯度。用氨基酸分析仪确定其氨基酸组成,并进行适合度检验。结果表明,采用Butyl-Toyopearl650M树脂分离,其纯... 对牛乳铁素的制备和分离纯化方法进行研究。牛乳铁蛋白经胃蛋白酶水解,其产物经不同分离介质进行分离纯化,用毛细管电泳检测其纯度。用氨基酸分析仪确定其氨基酸组成,并进行适合度检验。结果表明,采用Butyl-Toyopearl650M树脂分离,其纯度为95.6%。纯化出的产物氨基酸组成和序列与已知的牛乳铁素无显著差异。 展开更多
关键词 乳铁蛋白 乳铁素 分离纯化 氨基酸序列分析
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棉铃虫卵内半胱氨酸蛋白酶的分离纯化、氨基酸序列分析及蛋白酶鉴定 被引量:2
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作者 张志宏 赵小凡 王金星 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期840-843,共4页
采用阴离子交换层析法 ,从棉铃虫Helicoverpaarmigera卵母细胞中分离纯化到一种半胱氨酸蛋白酶 ,SDS PAGE电泳显示为一条带 ,分子量约为 2 9kDa ,原位水解电泳表明其具有蛋白水解活性。对其进行了部分氨基酸序列测定 ,初步确定这种蛋白... 采用阴离子交换层析法 ,从棉铃虫Helicoverpaarmigera卵母细胞中分离纯化到一种半胱氨酸蛋白酶 ,SDS PAGE电泳显示为一条带 ,分子量约为 2 9kDa ,原位水解电泳表明其具有蛋白水解活性。对其进行了部分氨基酸序列测定 ,初步确定这种蛋白酶属于半胱氨酸蛋白酶类中的组织蛋白酶B类。 展开更多
关键词 棉铃虫卵 半胱氨酸蛋白酶 分离纯化 氨基酸序列分析 蛋白酶鉴定
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鸡淋巴信号活化分子CD150基因的扩增、表达和氨基酸序列分析 被引量:1
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作者 方文秀 谭磊 +6 位作者 孙英杰 宋翠萍 刘炜玮 廖瑛 丁铲 仇旭升 吴艳涛 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2021年第3期93-100,共8页
CD150蛋白是副黏病毒的重要受体,能够促进病毒与宿主细胞结合并感染。本研究旨在克隆鸡CD150基因后进行原核表达,并对获得的氨基酸序列进行详细分析,为后续基因功能研究奠定基础。从原代鸡胚成纤维细胞(CEF)中扩增得到CD150 CDS序列,将... CD150蛋白是副黏病毒的重要受体,能够促进病毒与宿主细胞结合并感染。本研究旨在克隆鸡CD150基因后进行原核表达,并对获得的氨基酸序列进行详细分析,为后续基因功能研究奠定基础。从原代鸡胚成纤维细胞(CEF)中扩增得到CD150 CDS序列,将其克隆入pMD19-T载体中进行测序鉴定,将其在pET-28b原核表达载体中表达,并制备多克隆抗体,最后,通过生物信息学软件对CD150进行氨基酸序列分析。结果显示:成功克隆大小为999 bp的鸡CD150基因;鸡CD150蛋白以包涵体形式表达;所制备的多克隆抗体能够特异性结合鸡淋巴细胞表面的CD150蛋白;二级结构中α-螺旋占25.83%,β-折叠占23.42%,无规则卷曲占50.75%;跨膜区分析可知,CD150蛋白包括胞外区、胞内区和跨膜区;三级结构以β-折叠为主,包括V和C2两个结构域,不同物种V结构域中存在7个完全保守的氨基酸位点。本研究成功克隆、表达了鸡CD150蛋白,并制备多克隆抗体,为鸡CD150蛋白生物学功能研究检测及其在鸡组织中的表达和分布提供数据支持。 展开更多
关键词 鸡CD150 基因克隆 原核表达 多克隆抗体 氨基酸序列分析
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基于K中心方法的氨基酸序列聚类分析 被引量:1
4
作者 王敞 陈增强 +1 位作者 孙青林 袁著祉 《计算机工程》 CAS CSCD 北大核心 2003年第8期42-43,共2页
针对氨基酸序列的聚类问题,提出了基于K中心方法的解决方案。该方案把K中心方法、动态规划方法和生物学研究中的一些新理论有机地融合在了一起。通过实验,该方案具有很强的适用性和很好的聚类效果,是数据挖掘方法在生物信息学研究中... 针对氨基酸序列的聚类问题,提出了基于K中心方法的解决方案。该方案把K中心方法、动态规划方法和生物学研究中的一些新理论有机地融合在了一起。通过实验,该方案具有很强的适用性和很好的聚类效果,是数据挖掘方法在生物信息学研究中一次有益的探索。 展开更多
关键词 氨基酸序列聚类分析 数据挖掘 K中心聚类方法 动态规划 生物信息学
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神经酰胺代谢酶SGMS2对NDV复制和增殖的影响
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作者 冯亦亦 代军 +6 位作者 谭磊 孙英杰 宋翠萍 廖瑛 丁铲 仇旭升 刘秀梵 《中国动物传染病学报》 北大核心 2025年第2期146-155,共10页
鞘磷脂(SM)和神经酰胺(Cer)是新城疫病毒(NDV)囊膜的主要磷脂成分。鞘磷脂合成酶2(SGMS2)是SM合成调控酶。前期研究发现NDV感染的DF-1中鸡SGMS2基因显著上调,表明该变化与NDV感染有关。本研究通过克隆获得了鸡SGMS2基因,进行生物信息学... 鞘磷脂(SM)和神经酰胺(Cer)是新城疫病毒(NDV)囊膜的主要磷脂成分。鞘磷脂合成酶2(SGMS2)是SM合成调控酶。前期研究发现NDV感染的DF-1中鸡SGMS2基因显著上调,表明该变化与NDV感染有关。本研究通过克隆获得了鸡SGMS2基因,进行生物信息学分析发现:与人和鼠同源性分别为93.0%和92.4%;跨膜区在不同物种间高度保守,高达96.8%。通过qPCR检测细胞和组织中鸡SGMS2 mRNA表达情况,发现均处于恒定状态。NDV感染后,鸡SGMS2表达水平发生剧烈变动,病毒含量高的组织中,其表达量大幅下调。通过qPCR和Western blot检测转染pCMV6-FLAG-ch-SGMS2质粒的DF-1细胞,发现病毒NP的mRNA和蛋白水平显著下降,说明过量表达SGMS2抑制NDV的增殖作用。本研究为揭示鸡SGMS2蛋白功能奠定理论基础,也为阐明鸡SGMS2对NDV增殖的作用提供理论依据。 展开更多
关键词 鸡鞘磷脂合成酶2 基因克隆与表达 氨基酸序列分析 新城疫病毒
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东曹销售新的肽序列
6
作者 孙国凤 《生物技术通报》 CAS CSCD 1991年第2期8-8,共1页
东曹公司从8月中旬开始销售从美国波顿仪器公司引进的以气相肽序列(爱德曼分解装置)"PI-2020"为核心的氨基酸序列分析系统.东曹公司在液相色谱仪等与生物技术研究和生产有关的仪器方面已取得成绩.但是生物技术专用的研究仪器... 东曹公司从8月中旬开始销售从美国波顿仪器公司引进的以气相肽序列(爱德曼分解装置)"PI-2020"为核心的氨基酸序列分析系统.东曹公司在液相色谱仪等与生物技术研究和生产有关的仪器方面已取得成绩.但是生物技术专用的研究仪器的商品化这还是第一次.作为生物技术产业的途径首先想把引进的产品作为核心系统加以商业化. 展开更多
关键词 东曹 序列 生物技术产业 核心系统 波顿 液相色谱仪 德曼 氨基酸序列分析 氨基酸分析 市场占有率
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Tropic1808基因的原核表达及其表达产物的生物活性 被引量:10
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作者 崔学芝 顾晓松 +2 位作者 张沛云 王志刚 姚登兵 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期569-573,共5页
Tropic180 8基因是新近获得的一个鼠源性的cDNA .Tropic180 8基因开放阅读框架片段通过PCR方法从质粒中扩增后 ,重组入表达载体pET 2 1a中 ,转化大肠杆菌BL2 1(DE3 ) .用IPTG诱导目的蛋白的表达 ,SDS PAGE并凝胶图象分析确定目的蛋白表... Tropic180 8基因是新近获得的一个鼠源性的cDNA .Tropic180 8基因开放阅读框架片段通过PCR方法从质粒中扩增后 ,重组入表达载体pET 2 1a中 ,转化大肠杆菌BL2 1(DE3 ) .用IPTG诱导目的蛋白的表达 ,SDS PAGE并凝胶图象分析确定目的蛋白表达水平占细菌总蛋白的 14%以上 .表达蛋白在N端融合有 16个氨基酸 ,将表达蛋白电转移至PVDF膜 .氨基酸序列分析表明 ,其N端第 17~ 2 5位氨基酸序列与Tropic180 8基因编码序列一致 .利用融合部分含T7·Tag ,通过亲和层析纯化表达蛋白 ,经Westernblot检测为目的蛋白 ,加入到无血清培养的新生SD大鼠背根神经节 (DRG)中 ,观察到表达蛋白对DRG具有促进存活和促进突起生长的作用 . 展开更多
关键词 Tropic1808基因 原核表达 氨基酸序列分析 背根神经节 生物活性 神经再生
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白曲耐酸性α-淀粉酶的分离和纯化 被引量:10
8
作者 张文学 杨瑞 +1 位作者 胡承 木田建次 《四川大学学报(工程科学版)》 EI CAS CSCD 2002年第2期51-56,共6页
从白曲霉菌A .Kawachii的米曲粗抽出液中 ,通过乙醇沉淀、离子交换层析、凝胶过滤层析等方式 ,获得了两个耐酸性α -淀粉酶比活性极高的组分 ,经SDS -PAGE分析 ,推断其组分A分子量为 85 ,0 0 0 ,组分B分子量为10 4 ,0 0 0。两组分均为... 从白曲霉菌A .Kawachii的米曲粗抽出液中 ,通过乙醇沉淀、离子交换层析、凝胶过滤层析等方式 ,获得了两个耐酸性α -淀粉酶比活性极高的组分 ,经SDS -PAGE分析 ,推断其组分A分子量为 85 ,0 0 0 ,组分B分子量为10 4 ,0 0 0。两组分均为糖蛋白 ,且能被枯草杆菌蛋白酶 (Subtilisin)适度降解。其N -末端 10 - 12残基的氨基酸序列与黑曲霉A .niger的耐酸性α -淀粉酶N -末端氨基酸序列极为相似。借此推断 ,A .Kawachii的白曲中至少有两种以上的耐酸性α 展开更多
关键词 酸性Α-淀粉酶 米曲 白曲霉菌 氨基酸序列分析 分离 纯化 发酵制备
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变链素研究进展 被引量:5
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作者 李颂 刘天佳 《国外医学(口腔医学分册)》 CAS 2003年第5期341-343,共3页
细菌素是由某些细菌产生的一种抗菌性多肽,变异链球菌产生的细菌素称变链素。目前已有多种变链素被分离纯化,并完成氨基酸序列和基因序列分析。本文介绍了细菌素的新概念和6种不同变链素的研究现状。
关键词 变链素 细菌素 变异链球菌 氨基酸序列分析 基因序列分析
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聚集素蛋白与神经变性疾病 被引量:1
10
作者 马建芳 陈生弟 《中国现代神经疾病杂志》 CAS 2006年第4期304-307,共4页
关键词 糖蛋白 聚集素 神经变性疾病 SERTOLI细胞 血清蛋白质 氨基酸序列分析 聚集作用 载脂蛋白 睾酮抑制 细胞凋亡
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骨肉瘤相关新分子5D3Ag的研究 被引量:1
11
作者 何大为 刘军 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期108-110,共3页
目的 :自建的抗人骨肉瘤单克隆抗体mAb5D3经鉴定有很好的骨肉瘤细胞特异性 ,并且已利用单抗纯化出相应的骨肉瘤相关抗原 5D3Ag纯品 ,研究目的是测定 5D3Ag氨基酸序列 ,鉴定 5D3Ag是否为一新发现的骨肉瘤相关抗原。方法 :用SDS PAGE法分... 目的 :自建的抗人骨肉瘤单克隆抗体mAb5D3经鉴定有很好的骨肉瘤细胞特异性 ,并且已利用单抗纯化出相应的骨肉瘤相关抗原 5D3Ag纯品 ,研究目的是测定 5D3Ag氨基酸序列 ,鉴定 5D3Ag是否为一新发现的骨肉瘤相关抗原。方法 :用SDS PAGE法分析 5D3Ag纯度和分子量 ,并做免疫印迹分析 ,用半干式转移法将 5D3Ag转移到氨基酸测序膜上 ,测定其氨基酸序列 ,在蛋白质序列中比较分析 ,初步推断此抗原的性质及是否为新发现的骨肉瘤相关抗原。结果 :5D3Ag经SDS PAGE分析达到了电泳纯 ,分子量为 4 3kD ;WesternBlot分析显示 5D3Ag可以与mAb5D3结合 ;5D3AgN端 10个氨基酸序列为 :门冬酰胺、谷氨酰胺、甘氨酸、丝氨酸、组氨酸、甘氨酸、丝氨酸、谷氨酸、丙氨酸、谷氨酰胺 (NQGSHGSEAQ)。结论 :5D3Ag从其分子量来看与以往文献所报道的骨肉瘤相关抗原的分子量都不相同 ;氨基酸序列结果查询分析 ,与蛋白质库中已知的蛋白质同源性很低 ,由此推断 5D3Ag可能是一种新的骨肉瘤相关抗原。 展开更多
关键词 骨肉瘤 单克隆抗体 骨肉瘤相关抗原 氨基酸序列分析
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多肽研究(Ⅳ)——α-人心房肽片段的快原子轰击质谱(FAB-MS)研究
12
作者 梁伟升 彭师奇 +7 位作者 蔡孟深 程铁明 张京利 戴敦华 钟明乃 李金祥 陈冀胜 张肇康 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS 1988年第4期353-357,共5页
采用FAB-MS测定α-人心房肽片段的氨基酸序列。通过分析碎片离子的m/z值,可以明确表达各肽段的氨基酸序列。在分子离子区都是[M+H]^(+)峰,所有片段羰基的α断裂都有肽键断裂和碳碳键断裂两种方式。
关键词 α-人心房肽 快原子轰击质谱 氨基酸序列分析
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不同来源葡萄糖氧化酶的分离纯化及其生物催化特性 被引量:4
13
作者 王文婷 赵伟 +2 位作者 章魁普 黎亮 郭美锦 《华东理工大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期484-491,共8页
采用离子交换层析法对4种不同来源的葡萄糖氧化酶(Glucose oxidase,GOD,EC 1.1.3.4)进行分离纯化,纯化后酶的相对分子质量约为130kDu,为双亚基酶。纯化后的4种酶的酶学性质相对稳定,对pH有较宽的响应范围。温度为20~50℃时,随着温度... 采用离子交换层析法对4种不同来源的葡萄糖氧化酶(Glucose oxidase,GOD,EC 1.1.3.4)进行分离纯化,纯化后酶的相对分子质量约为130kDu,为双亚基酶。纯化后的4种酶的酶学性质相对稳定,对pH有较宽的响应范围。温度为20~50℃时,随着温度的升高酶活降低且稳定性较好;温度为55℃时稳定性较差;而在60℃时则失活。金属离子如Fe2+、Co2+、Mg2+和Cu2+对4种酶都有较强的抑制作用,Fe2+的抑制尤其明显,而螯合剂EDTA可以激活酶的活性。在30℃、pH为7.0的条件下,以不同浓度(20~100mmol/L)的葡萄糖为底物分别测定4种酶的米氏常数(Km)和催化常数(Kcat)。通过光谱和色谱对4种葡萄糖氧化酶进行检测,虽然氨基酸组成有明显不同,但二维结构基本一致,而GOD前体goxC和修饰蛋白如过氧化氢酶、过氧化氢酶前体和Pc16g04630等可能是提高GOD催化效率和工业应用的分子基础。 展开更多
关键词 葡萄糖氧化酶 纯化 生物催化特性 氨基酸序列分析
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真菌源壳聚糖酶的纯化及其特征(英文)
14
作者 丁基喆 姜泰兴 李载昌 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期141-145,共5页
真菌壳聚糖酶类催化水解壳聚糖,它们在自然界的碳氮循环以及用于处理海洋食品和生产药用寡聚壳聚糖等工业上均有非常重要的意义。自1981年来,已有一些真菌源壳聚糖酶获得了纯化、明确了其特性,并作了序列分析。本文从以下3个方面阐述了... 真菌壳聚糖酶类催化水解壳聚糖,它们在自然界的碳氮循环以及用于处理海洋食品和生产药用寡聚壳聚糖等工业上均有非常重要的意义。自1981年来,已有一些真菌源壳聚糖酶获得了纯化、明确了其特性,并作了序列分析。本文从以下3个方面阐述了真菌壳聚糖酶的近期研究进展:1)从Aspergil-lus fumigatus KH-94,Fusarium solani,Mucor rouxii A·B,Penicillum islandicum,P.spinulosum,Rhodotorula gracilis,Trichoderma reesei,A.oryzae,A.fumigatus Y2K和A.fumigatus S-26等真菌中获得的胞内壳聚糖酶的纯化及其特性;2)从T.reesei,A.oryzae,A.fumigatus and Cordyceps sp.MET 1504等真菌中获得的胞外壳聚糖酶的纯化及其特性;3)从T.reesei,Metarhizium anisopliae,A.oryzae and A.fumigatus S-26等真菌中获得的壳聚糖酶氨基酸序列的分析。 展开更多
关键词 真菌 壳聚糖酶 纯化 特性 氨基酸序列分析
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激素和活性多肤
15
《生物技术通报》 CAS CSCD 1989年第2期81-82,共2页
通过重组 DNA 技术生产后,从大肠杆菌提取液中纯比出人胰岛素 B 链。IPTG 化学诱导产生大量的β-半乳糖苷酶 B 链的杂交多肽。用 CNBr 裂解此融合蛋白、然后用 Se-phadex G-50进行分子过滤、DEAE-Se-phadex A-25离子交换柱层析和用 RP-... 通过重组 DNA 技术生产后,从大肠杆菌提取液中纯比出人胰岛素 B 链。IPTG 化学诱导产生大量的β-半乳糖苷酶 B 链的杂交多肽。用 CNBr 裂解此融合蛋白、然后用 Se-phadex G-50进行分子过滤、DEAE-Se-phadex A-25离子交换柱层析和用 RP-C18的 HPLC 层析而纯化之。对此高度纯化的肽类进行氨基酸序列分析,测定特性。它表明与标准的人 B 链完全相同。 展开更多
关键词 离子交换柱层析 Β-半乳糖苷酶 化学诱导 人胰岛素 DEAE 融合蛋白 氨基酸序列分析 DNA 丙烯酸胺 标准品
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日本从貉体内分离出一株犬瘟热病毒新毒株
16
作者 史同瑞 《畜牧兽医科技信息》 2001年第7期10-10,共1页
最近几年日本的免疫和非免疫家犬均有犬瘟热发病的报道。而野生犬科动物,如貉也报道有犬瘟热发生。去年,日本学者K.Ohashi从貉体内分离出一株新的犬瘟热病毒。试验采集了75只貉的血清,并应用ELISA方法检测血清中抗Onderstepoort毒株抗体... 最近几年日本的免疫和非免疫家犬均有犬瘟热发病的报道。而野生犬科动物,如貉也报道有犬瘟热发生。去年,日本学者K.Ohashi从貉体内分离出一株新的犬瘟热病毒。试验采集了75只貉的血清,并应用ELISA方法检测血清中抗Onderstepoort毒株抗体,结果有37份血清呈阳性。 展开更多
关键词 犬瘟热病毒 体内分离 日本学者 ELISA方法 犬科动物 氨基酸序列分析 热发生 临床症状 免疫 疫苗株
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美国成功地合成禽霍乱保护性抗原
17
作者 徐辉 《畜牧兽医科技信息》 1997年第20期6-6,共1页
多杀性巴氏杆菌可表达一种独特的抗原,当该抗原在体内增殖后可诱导机体对所有多杀性巴氏杆菌血清型的保护性免疫反应,但以前的研究只能提纯到少量的抗原。最近美国乔治亚大学家禽诊断和研究中心的“多杀性巴氏杆菌交叉保护抗原的克隆和... 多杀性巴氏杆菌可表达一种独特的抗原,当该抗原在体内增殖后可诱导机体对所有多杀性巴氏杆菌血清型的保护性免疫反应,但以前的研究只能提纯到少量的抗原。最近美国乔治亚大学家禽诊断和研究中心的“多杀性巴氏杆菌交叉保护抗原的克隆和表达”研究小组对该抗原成功地进行了氨基酸序列分析,破译了该抗原基因的编码。并通过大肠杆菌对该保护性抗原进行了克隆。 展开更多
关键词 多杀性巴氏杆菌 禽霍乱 保护性抗原 保护性免疫反应 保护抗原 克隆和表达 抗原基因 氨基酸序列分析 血清型 肠杆菌
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