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汉麻仁多肽对高尿酸血症斑马鱼的降尿酸作用及其氨基酸序列分析 被引量:1
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作者 魏连会 董艳 +5 位作者 石杰 李国巍 张正海 姬妍茹 杨庆丽 潘静 《中国油脂》 北大核心 2025年第2期57-62,共6页
为促进汉麻仁多肽在功能食品及特医食品领域的应用,利用斑马鱼模型研究汉麻仁多肽的降尿酸作用及可能的机制,分析降尿酸活性肽组分的氨基酸序列。采用10mmol/L尿酸酶活性抑制剂氧嗪酸钾和50μmol/L尿酸合成前体黄嘌呤钠盐饲喂斑马鱼20h... 为促进汉麻仁多肽在功能食品及特医食品领域的应用,利用斑马鱼模型研究汉麻仁多肽的降尿酸作用及可能的机制,分析降尿酸活性肽组分的氨基酸序列。采用10mmol/L尿酸酶活性抑制剂氧嗪酸钾和50μmol/L尿酸合成前体黄嘌呤钠盐饲喂斑马鱼20h,建立斑马鱼高尿酸血症模型。以别嘌呤醇为阳性对照,以不同质量浓度的汉麻仁多肽饲喂斑马鱼,测定斑马鱼的尿酸荧光强度、次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖基转移酶(HPRT1)和有机阴离子转运蛋白(OAT1)基因的mRNA表达,利用液相色谱-串联质谱技术对降尿酸活性肽组分氨基酸序列进行分析。结果表明:汉麻仁多肽能够通过上调HPRT1和OAT1基因表达,有效降低高尿酸斑马鱼的尿酸水平;汉麻仁多肽活性组分中丰度较高的8个峰对应的肽段分子质量分别为499.23、578.24、628.27、653.29、715.31、918.43、982.41、1128.49Da,其氨基酸序列分别为PGTPE、MPDDV、TTSYTG、TPHWN、NNGDSPL、DDFNPRR、NPHDEFQP、YHSYLCKTD。综上,汉麻仁多肽可作为功能性成分用于降尿酸相关功能食品和保健品的开发。 展开更多
关键词 汉麻仁多肽 斑马鱼 高尿酸血症 降尿酸 氨基酸序列
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非洲猪瘟病毒p30蛋白氨基酸序列分段表达及反应原性分析
2
作者 周俊明 倪艳秀 +5 位作者 范宝超 祝昊丹 朱雪蛟 王丹丹 胡屹屹 李彬 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2024年第10期1875-1881,共7页
为比较非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)p30蛋白氨基酸序列中不同片段的反应原性,探究p30蛋白氨基酸序列中可能的抗原优势片段。本研究通过PCR、克隆技术将p30蛋白氨基酸序列中不同片段的编码基因分别插入表达质粒pET32a,... 为比较非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)p30蛋白氨基酸序列中不同片段的反应原性,探究p30蛋白氨基酸序列中可能的抗原优势片段。本研究通过PCR、克隆技术将p30蛋白氨基酸序列中不同片段的编码基因分别插入表达质粒pET32a,经IPTG诱导、Ni柱纯化、透析后,获得p30蛋白氨基酸序列中8~101 aa片段(P-1#)、58~101 aa片段(P-2#)、101~158 aa片段(P-3#)、8~194 aa片段(P-4#),用酶联免疫吸附试验(ELISA)分析p30蛋白氨基酸序列中不同片段与p30蛋白免疫兔血清和ASFV阳性猪血清的反应原性。结果显示,上述片段均获得诱导表达及纯化,表达形式有可溶性表达(P-1#、P-3#)和包涵体表达(P-2#、P-4#)。各片段以1.0 mg/L包被时,p30免疫兔血清与p30蛋白氨基酸序列中4种片段均能发生免疫反应,ASFV阳性猪血清与P-4#、P-1#反应较佳,与P-3#反应中等,与P-2#反应最弱。综上,p30蛋白氨基酸序列中不同片段反应原性的差异为认识p30抗原优势区域提供了数据,这将有助于非洲猪瘟血清学诊断抗原的科学筛选。 展开更多
关键词 非洲猪瘟病毒 p30蛋白 氨基酸序列片段 反应原性
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猪釉基质蛋白的提取及N末端氨基酸序列分析 被引量:49
3
作者 束蓉 李超伦 +3 位作者 刘正 王洪海 陈佩丽 刘文 《口腔医学纵横》 CSCD 1999年第2期67-68,共2页
目的:从猪牙胚提取釉基质蛋白并做氨基酸测序,为进一步研究釉基质蛋白诱导牙周组织再生的生物活性奠定基础。方法:选择乙酸提取法获得釉基质蛋白,采用SDS-PAGE电泳和印迹膜测序法分析N末端氨基酸序列。结果:提取的釉基质... 目的:从猪牙胚提取釉基质蛋白并做氨基酸测序,为进一步研究釉基质蛋白诱导牙周组织再生的生物活性奠定基础。方法:选择乙酸提取法获得釉基质蛋白,采用SDS-PAGE电泳和印迹膜测序法分析N末端氨基酸序列。结果:提取的釉基质蛋白分子量条带主要位于20KDa以下,优势条带为20KDa、13KDa、5KDa。20KDa、5KDa釉基质蛋白N末端前10个氨基酸残基均为:Met、Pro、Leu、Pro、Pro、His、Pro、Gly、His、Pro。结论:乙酸提取法可获得典型的釉原蛋白。印迹膜测序法简易、快速、敏感。 展开更多
关键词 釉基质蛋白 氨基酸序列 提取 SDS-PAGE 牙周病
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竹叶青蛇毒凝血酶样酶氨基酸序列报道 被引量:6
4
作者 张云 李文辉 +2 位作者 高荣 熊郁良 王婉瑜 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1998年第1期77-81,共5页
蛇毒凝血酶样酶可作为蛋白酶结构与功能研究的良好模型,并已广泛用于各种血栓疾病的诊断和治疗,因而测定其一级结构具有重要意义.利用逆转录与聚合酶链反应相结合的RT-PCR法,扩增出竹叶青蛇毒凝血酶样酶(TSV-TEL1)... 蛇毒凝血酶样酶可作为蛋白酶结构与功能研究的良好模型,并已广泛用于各种血栓疾病的诊断和治疗,因而测定其一级结构具有重要意义.利用逆转录与聚合酶链反应相结合的RT-PCR法,扩增出竹叶青蛇毒凝血酶样酶(TSV-TEL1)的cDNA;将扩增的cDNA片段克隆入pGEM-T载体中,经末端终止法测定核苷酸序列,推导出竹叶青蛇毒凝血酶样酶的全序列.竹叶青蛇毒凝血酶样酶由234个氨基酸组成并含有1个位于Asn20的N-型糖基结合位点.竹叶青蛇毒凝血酶样酶序列与其它蛇种来源凝血酶样酶具有较大相似性,其与黄绿烙铁头蛇毒凝血酶样酶序列相似度为84%,与美洲矛头蝮蛇毒凝血酶样酶序列相似度为68%,而与牛凝血酶B链序列相似度仅为25%. 展开更多
关键词 竹叶青 蛇毒 蛋白酶 凝血酶 氨基酸序列
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玉米降血糖活性肽制备分离及其氨基酸序列分析 被引量:14
5
作者 胡宇航 戴军 +3 位作者 陈尚卫 朱松 张学军 张平 《食品与机械》 CSCD 北大核心 2017年第6期147-152,共6页
以水解度(DH)和游离氨基酸含量为指标优化玉米蛋白粉的酶水解工艺,结果显示,在pH 8.5,60℃条件下经过正交试验得到最适组合为:酶底物比3.5g/100g,水解时间2h,料液比120(g/mL),在该条件下其DH为27.02%,多肽含量为85.23%。同时,还优化... 以水解度(DH)和游离氨基酸含量为指标优化玉米蛋白粉的酶水解工艺,结果显示,在pH 8.5,60℃条件下经过正交试验得到最适组合为:酶底物比3.5g/100g,水解时间2h,料液比120(g/mL),在该条件下其DH为27.02%,多肽含量为85.23%。同时,还优化了玉米肽的脱色工艺,最佳条件为:温度50℃,pH 3.5,活性炭用量1.5g/100mL,脱色时间45min,该条件下玉米肽得率为77.86%,脱色率为87.27%。将脱色脱盐后的玉米多肽经过凝胶色谱分离得到3个组分。体外降血糖活性结果显示,CP1促进正常HepG2细胞葡萄糖消耗效果最优,并且其α-糖苷酶抑制活性也最高(34.64%);CP1经过RP—HPLC制备柱纯化得到含量较高的14个组分,其中CP1-13的α-糖苷酶抑制活性最強,达到39.50%。经UPLC—Q—TOF—MS/MS测定,其氨基酸序列为A-P-A-L-L-P-F。 展开更多
关键词 玉米肽 水解 降血糖活性 氨基酸序列
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汉麻籽抗氧化肽的制备与氨基酸序列分析 被引量:8
6
作者 魏连会 董艳 +2 位作者 石杰 宋淑敏 孙兴荣 《中国油脂》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期36-40,共5页
为开发具有较好抗氧化活性的植物源蛋白肽,采用木瓜蛋白酶和中性蛋白酶复合酶法水解汉麻籽粕获得汉麻籽蛋白水解物,经膜分离技术得到4种不同分子质量的多肽组分。通过DPPH自由基清除率、总还原力的测定,评价不同多肽组分的抗氧化活性,... 为开发具有较好抗氧化活性的植物源蛋白肽,采用木瓜蛋白酶和中性蛋白酶复合酶法水解汉麻籽粕获得汉麻籽蛋白水解物,经膜分离技术得到4种不同分子质量的多肽组分。通过DPPH自由基清除率、总还原力的测定,评价不同多肽组分的抗氧化活性,并对抗氧化活性最强的多肽组分进行氨基酸序列分析。结果显示:低分子质量的汉麻籽多肽组分具有更好的抗氧化活性,其中HP-Ⅳ组分(分子质量<1 kDa)的抗氧化活性最强;HP-Ⅳ组分中丰度较高的6个肽段的分子质量分别为364.84、539.77、630.30、662.33、718.90、827.41 Da,氨基酸序列分别为NRDDMRER、ANQLDQFSR、NPEDEFEQLRREGGRG、NHNNQLDLTPR、TVNSYNLPILRF、VSLLDTSNVNNQLDDNPRRFY。汉麻籽蛋白水解物,尤其是分子质量小于1 kDa的多肽组分可作为功能性成分用于抗氧化相关功能食品和保健品的开发。 展开更多
关键词 汉麻籽多肽 抗氧化活性 氨基酸序列
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高等植物F3′HcDNA及其氨基酸序列的生物信息学分析 被引量:5
7
作者 苏丽 赵昶灵 +2 位作者 杨晓娜 李会容 李云 《云南农业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期316-326,共11页
用生物信息学方法对GenBank中拟南芥、油菜、大豆、矮牵牛和高梁等的类黄酮3′-羟化酶基因的cD-NA序列及其编码氨基酸序列的结构、理化性质、信号肽、疏水性/亲水性、亚细胞定位、跨膜结构域、功能域和进化关系进行了初步预测和分析。... 用生物信息学方法对GenBank中拟南芥、油菜、大豆、矮牵牛和高梁等的类黄酮3′-羟化酶基因的cD-NA序列及其编码氨基酸序列的结构、理化性质、信号肽、疏水性/亲水性、亚细胞定位、跨膜结构域、功能域和进化关系进行了初步预测和分析。结果表明:不同植物类黄酮3′-羟化酶基因cDNA序列的相似性为69.5%,其起始密码子均为ATG,终止密码子均为TAA、TAG或TGA,包括5,′3′非翻译区和一个开放阅读框;不同植物类黄酮3′-羟化酶基因cDNA序列编码的氨基酸序列的理化性质基本一致,相似性为72.5%,含有6段保守氨基酸序列,是"PPGR"、"AGTDT"、"RPPN"、"AYNY"、"IKALLL"、"TPLS";在进化关系上可划分为两大类;不同植物类黄酮3′-羟化酶具有一个跨膜结构域、定位于内质网上,并有一段与细胞色素P450功能区相匹配的功能域;类黄酮3′-羟化酶属具转运肽的亲水性稳定分泌蛋白,其二级结构为α-β型,α-螺旋和无规卷曲为最主要的结构元件,延伸链和β-转角散布于整个结构。可为类黄酮3′-羟化酶基因的克隆和遗传操作提供理论参考。 展开更多
关键词 高等植物 类黄酮3′-羟化酶基因 CDNA序列 氨基酸序列 生物信息学分析
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反相高效液相色谱-质谱联用法测定抑菌肽功能单元的氨基酸序列 被引量:4
8
作者 陈兵 王雅珍 +2 位作者 黄微薇 王艳梅 马宇亮 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期522-527,共6页
测定乳酸菌发酵液中小分子抑菌肽抑菌功能单元的氨基酸组成序列对于深入理解其抑菌原理并实际应用有重要意义。作者利用AssayMAP Bravo蛋白纯化系统平台,采用色谱-质谱联用法将相对分子质量为3 500的抑菌肽样品经过凝胶过滤色谱分离纯化... 测定乳酸菌发酵液中小分子抑菌肽抑菌功能单元的氨基酸组成序列对于深入理解其抑菌原理并实际应用有重要意义。作者利用AssayMAP Bravo蛋白纯化系统平台,采用色谱-质谱联用法将相对分子质量为3 500的抑菌肽样品经过凝胶过滤色谱分离纯化,两步反相高效液相色谱分离纯化和二维质谱鉴定,得到高纯度、高抑菌活性的三个抑菌功能单元,氨基酸组成序列分别为Phe-Tyr-Pro-Ser-Tyr-Ala,Asn-Glu-Arg-His和Lys-Glu-Ile-Thr-Pro-Ser-Glu-Arg,即该小肽的功能单元由三个短肽组成。结果表明,利用该方法,能够有效地提取并检测该小分子抑菌肽,其在氨基酸组成上与Nisin不同。 展开更多
关键词 小分子抑菌肽 凝胶过滤色谱 反相高效液相色谱 二维质谱 氨基酸序列
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尖吻蝮蛇蛇毒纤溶酶的分离纯化及氨基酸序列测定 被引量:3
9
作者 郑颖 沈居仁 +1 位作者 范泉水 邱薇 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期469-471,共3页
目的:从尖吻蝮蛇蛇毒中分离纯化出高纯度的纤溶酶并对其进行初步性质研究和氨基酸序列分析。方法:采用DEAE-Sepharose FF离子交换和两次Superdex75PG凝胶过滤,从尖吻蝮蛇蛇毒中纯化出可直接溶解纤维蛋白原的蛋白酶。结果:分离到的纤溶... 目的:从尖吻蝮蛇蛇毒中分离纯化出高纯度的纤溶酶并对其进行初步性质研究和氨基酸序列分析。方法:采用DEAE-Sepharose FF离子交换和两次Superdex75PG凝胶过滤,从尖吻蝮蛇蛇毒中纯化出可直接溶解纤维蛋白原的蛋白酶。结果:分离到的纤溶酶相对分子质量为25kD,HPLC分析纯度在97%以上,氨基酸序列分析其N末端为MSTEF QRYME IVVNHS MVKKY NGDSD KIKAW。结论:采用此工艺可从尖吻蛇毒中分离出高比活的纤溶酶,为进一步研究其药理作用奠定了基础。 展开更多
关键词 尖吻蝮蛇蛇毒 纤溶酶 纯化 氨基酸序列
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牛乳铁素的制备纯化与氨基酸序列分析 被引量:3
10
作者 胡志和 冯飞 +1 位作者 刘传国 庞广昌 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第7期166-170,共5页
对牛乳铁素的制备和分离纯化方法进行研究。牛乳铁蛋白经胃蛋白酶水解,其产物经不同分离介质进行分离纯化,用毛细管电泳检测其纯度。用氨基酸分析仪确定其氨基酸组成,并进行适合度检验。结果表明,采用Butyl-Toyopearl650M树脂分离,其纯... 对牛乳铁素的制备和分离纯化方法进行研究。牛乳铁蛋白经胃蛋白酶水解,其产物经不同分离介质进行分离纯化,用毛细管电泳检测其纯度。用氨基酸分析仪确定其氨基酸组成,并进行适合度检验。结果表明,采用Butyl-Toyopearl650M树脂分离,其纯度为95.6%。纯化出的产物氨基酸组成和序列与已知的牛乳铁素无显著差异。 展开更多
关键词 乳铁蛋白 乳铁素 分离纯化 氨基酸序列分析
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氨基酸序列中同源序列的识别↑ 被引量:3
11
作者 吕慧英 郭东伟 +1 位作者 周春光 梁艳春 《小型微型计算机系统》 EI CSCD 北大核心 2000年第6期646-649,共4页
在现代分子生物学的研究中 ,对氨基酸序列进行序列分析是一个热门研究课题 .本文介绍了如何使用计算机技术对氨基酸序列的同源序列进行识别 ,给出了一种动态规划算法对两个序列识别的方法 ,以及各种改进的算法对多个序列识别的方法 ,并... 在现代分子生物学的研究中 ,对氨基酸序列进行序列分析是一个热门研究课题 .本文介绍了如何使用计算机技术对氨基酸序列的同源序列进行识别 ,给出了一种动态规划算法对两个序列识别的方法 ,以及各种改进的算法对多个序列识别的方法 ,并根椐实验结果对各种算法进行了讨论和评价 . 展开更多
关键词 同源序列 特征提取 分子生物学 氨基酸序列
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孔石莼质体蓝素的柱色谱纯化及其N-端氨基酸序列的分析测定 被引量:2
12
作者 刘振宇 吴祖建 +1 位作者 林奇英 谢联辉 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期275-278,共4页
通过DEAE—Sepharose Fast Flow阴离子交换柱和Sephadex G-75凝胶过滤柱分离纯化得到了孔石莼(Ulva pertusa)的质体蓝素。其步骤为:将孔石莼样品以0.02mol/L磷酸盐缓冲液(pH7.2)进行匀浆,然后离心去除沉淀,将上清液用硫酸铵分... 通过DEAE—Sepharose Fast Flow阴离子交换柱和Sephadex G-75凝胶过滤柱分离纯化得到了孔石莼(Ulva pertusa)的质体蓝素。其步骤为:将孔石莼样品以0.02mol/L磷酸盐缓冲液(pH7.2)进行匀浆,然后离心去除沉淀,将上清液用硫酸铵分级盐析获得饱和度为40%~80%的盐析蛋白;通过DEAE-Sepharose柱色谱,在含有0~1.0mol/L NaCl的0.0lmoVL磷酸盐缓冲液线性梯度洗脱下,盐析蛋白有3个主要的洗脱峰,然后在Sephadex G-75凝胶过滤色谱柱中进一步纯化。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS—PAGE)显示,该蛋白质被纯化为单一条带。根据蛋白质电泳迁移率,纯化蛋白质的相对分子质量约为10000。该蛋白质不含糖。纯化的蛋白质经电转移至聚偏二氟乙烯(PVDF)膜后,以Edman降解法进行N-端氨基酸序列测定,前20个氨基酸残基序列为AAIVKLGPDDGSLAFVPSKI。通过对相关蛋白质数据库的检索,发现该序列与3种已报道的海藻的质体蓝素具有较高的序列同源性,其同源性分别为85%,85%和90%。据此,认为孔石莼的质体蓝素已获得纯化,其N-端20个氨基酸残基与已报道的海藻质体蓝素的氨基酸残基有较大的同源性,也存在着一定的变异。 展开更多
关键词 柱色谱 质体蓝素 孔石莼 纯化 N-端氨基酸序列
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磷脂酶A_1(Lecitase Ultra)的氨基酸序列分析及催化机理 被引量:2
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作者 张康逸 张丽霞 +2 位作者 王兴国 屈凌波 刘元法 《中国粮油学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2016年第2期70-74,80,共6页
研究磷脂酶A_1(Lecitase Ultra)的纯化、酶蛋白的氨基酸序列及活性中心的氨基酸残基组成,并推导水解磷脂酰胆碱(Pc)的机理。超滤法和RP-HPLC纯化酶液,除去了山梨醇和山梨醇盐,纯度97.7%;基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI SYNAPT ... 研究磷脂酶A_1(Lecitase Ultra)的纯化、酶蛋白的氨基酸序列及活性中心的氨基酸残基组成,并推导水解磷脂酰胆碱(Pc)的机理。超滤法和RP-HPLC纯化酶液,除去了山梨醇和山梨醇盐,纯度97.7%;基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI SYNAPT Q-TOF MS)和二级质谱(MS/MS)对酶蛋白进行分析,确定了氨基酸序列组成;数据库(http://www.matrixscience.com)比对,发现氨基酸序列信息与棉状嗜热丝孢菌(T.lanuginosus)脂肪酶和尖孢镰刀菌(F.oxysporum)脂肪酶高度吻合,序列中1-284是T.lanuginosus脂肪酶的氨基酸序列,序列中285-339是F.oxysporum脂肪酶的氨基酸序列;Lecitase Ultra和Sn-1-C16:0/sn-2-C2:0-PC的分子对接证实了酶活中心的三联体"Ser-His-Asp"催化机理。 展开更多
关键词 磷脂酶A_1 氨基酸序列 二级质谱 催化机理
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苦瓜中植物胰岛素的分离及其氨基酸序列测定 被引量:4
14
作者 盛清凯 姚惠源 徐华军 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2004年第7期129-131,共3页
采用有机酸、醇提取 ,SephadexG 5 0筛分、RP HPLC色谱分离 ,从苦瓜中分离出植物胰岛素 。
关键词 苦瓜 植物胰岛素 分离 氨基酸序列 测定 有机酸 醇提取 反相高效液相色谱技术
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棉铃虫卵内半胱氨酸蛋白酶的分离纯化、氨基酸序列分析及蛋白酶鉴定 被引量:2
15
作者 张志宏 赵小凡 王金星 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期840-843,共4页
采用阴离子交换层析法 ,从棉铃虫Helicoverpaarmigera卵母细胞中分离纯化到一种半胱氨酸蛋白酶 ,SDS PAGE电泳显示为一条带 ,分子量约为 2 9kDa ,原位水解电泳表明其具有蛋白水解活性。对其进行了部分氨基酸序列测定 ,初步确定这种蛋白... 采用阴离子交换层析法 ,从棉铃虫Helicoverpaarmigera卵母细胞中分离纯化到一种半胱氨酸蛋白酶 ,SDS PAGE电泳显示为一条带 ,分子量约为 2 9kDa ,原位水解电泳表明其具有蛋白水解活性。对其进行了部分氨基酸序列测定 ,初步确定这种蛋白酶属于半胱氨酸蛋白酶类中的组织蛋白酶B类。 展开更多
关键词 棉铃虫卵 半胱氨酸蛋白酶 分离纯化 氨基酸序列分析 蛋白酶鉴定
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家蚕酪氨酸羟化酶的氨基酸序列分析和重组表达 被引量:1
16
作者 刘春 周梦婷 +4 位作者 谭祥 吕金凤 李栋 聂红毅 夏庆友 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期467-473,共7页
酪氨酸羟化酶参与昆虫体色和斑纹黑色素合成以及免疫黑化反应等重要生理过程。为了研究家蚕(Bombyx mori)酪氨酸羟化酶的生物学功能,采用生物信息学方法对家蚕与其它物种的酪氨酸羟化酶氨基酸序列进行比对分析,结果显示不同物种之间的... 酪氨酸羟化酶参与昆虫体色和斑纹黑色素合成以及免疫黑化反应等重要生理过程。为了研究家蚕(Bombyx mori)酪氨酸羟化酶的生物学功能,采用生物信息学方法对家蚕与其它物种的酪氨酸羟化酶氨基酸序列进行比对分析,结果显示不同物种之间的酪氨酸羟化酶具有保守性,在昆虫物种之间尤其保守;家蚕酪氨酸羟化酶含有保守的功能位点,如铁原子结合位点His331、His336、Glu376,底物蝶呤结合位点Gly293、Leu294、Leu295、Phe300、Glu332、Tyr371和Glu376。构建重组质粒p29-Bmth,利用原核表达系统实现了家蚕酪氨酸羟化酶蛋白的重组表达,通过高效液相色谱分析证明纯化获得的重组家蚕酪氨酸羟化酶蛋白具有酪氨酸羟化活性,测定其活性为0.81 U,比活性为0.13 U/mg。研究结果为深入研究家蚕酪氨酸羟化酶的生理功能奠定了基础。 展开更多
关键词 家蚕 酪氨酸羟化酶 氨基酸序列 功能位点 原核表达 纯化 酶活性
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一种新的氨基酸序列进化距离及其应用 被引量:1
17
作者 解小莉 梁丽萍 +1 位作者 杜俊莉 袁志发 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期271-278,共8页
在选择的思想下,建立了蛋白质氨基酸序列的进化动力学方程,提出了一个新的蛋白质氨基酸序列的进化距离———选择进化距离,该距离统一了前人提出的各种氨基酸序列的进化距离;将该动力学方程转换为线性模型后,利用最小二乘法可实现模型... 在选择的思想下,建立了蛋白质氨基酸序列的进化动力学方程,提出了一个新的蛋白质氨基酸序列的进化距离———选择进化距离,该距离统一了前人提出的各种氨基酸序列的进化距离;将该动力学方程转换为线性模型后,利用最小二乘法可实现模型中参数b的估计;最后,通过17个物种的细胞色素b的氨基酸序列说明了该选择进化距离的计算方法,并根据自展法比较了不同进化距离得到的物种进化树。结果表明,利用选择进化距离构建的进化树与其他几种进化距离得到的进化树的拓扑结构一致。选择进化距离为估计蛋白质氨基酸序列的进化距离提供了新方法。 展开更多
关键词 氨基酸序列 进化距离 动力学方程 估计
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杀天牛毒蛋白的分离纯化及其N-末端氨基酸序列的测定 被引量:1
18
作者 李建庆 张永安 +1 位作者 杨忠岐 袁锋 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2008年第3期171-175,共5页
【目的】从白僵菌代谢物中分离对天牛有毒性的蛋白,并测定其N-末端氨基酸序列。【方法】从球孢白僵菌培养滤液中分离蛋白类代谢物,以重要林业害虫松墨天牛幼虫为试虫筛选毒蛋白,对筛选的毒蛋白进行PAGE电泳后转至PVDF膜上,测定其末端氨... 【目的】从白僵菌代谢物中分离对天牛有毒性的蛋白,并测定其N-末端氨基酸序列。【方法】从球孢白僵菌培养滤液中分离蛋白类代谢物,以重要林业害虫松墨天牛幼虫为试虫筛选毒蛋白,对筛选的毒蛋白进行PAGE电泳后转至PVDF膜上,测定其末端氨基酸序列。【结果】从白僵菌代谢物中共分离出5种毒蛋白,其中毒性最强的是PrBb4蛋白,其对松墨天牛幼虫的致死率为56.67%。PrBb4蛋白N-末端起始的5个氨基酸序列为谷氨酸(Glu)→脯氨酸(Pro)→丝氨酸(Ser)→异亮氨酸(Ile)→缬氨酸(Val)。【结论】白僵菌代谢物中含杀天牛毒蛋白PrBb4,其N-末端氨基酸序列为Glu→Pro→Ser→Ile→Val。 展开更多
关键词 白僵菌 代谢物 毒蛋白 氨基酸序列 松墨天牛
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重组人肿瘤坏死因子的纯化及N-端氨基酸序列测定 被引量:1
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作者 刘韧 汪江淮 +2 位作者 王涛 田昆仑 刘萍 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第3期269-271,共3页
目的:应用现有实验条件制备高纯度的TNF-α,为进一步的研究工作提供物质保障。方法:发酵后的细菌经破碎、盐析、透析和离子交换层析,制备高纯度的TNF-α。结果:纯化后的TNF-α其表现分子量(Mr)为17×103... 目的:应用现有实验条件制备高纯度的TNF-α,为进一步的研究工作提供物质保障。方法:发酵后的细菌经破碎、盐析、透析和离子交换层析,制备高纯度的TNF-α。结果:纯化后的TNF-α其表现分子量(Mr)为17×103u,纯度大于95%,比活性为3.44×107U/mg。结论:本实验采用的纯化方法是成功的,所制备的TNF-α与Sigma公司的产品相比,各项指标均达到其公布的参数。 展开更多
关键词 肿瘤坏死因子 纯化 氨基酸序列 N-端氨基酸
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基于K中心方法的氨基酸序列聚类分析 被引量:1
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作者 王敞 陈增强 +1 位作者 孙青林 袁著祉 《计算机工程》 CAS CSCD 北大核心 2003年第8期42-43,共2页
针对氨基酸序列的聚类问题,提出了基于K中心方法的解决方案。该方案把K中心方法、动态规划方法和生物学研究中的一些新理论有机地融合在了一起。通过实验,该方案具有很强的适用性和很好的聚类效果,是数据挖掘方法在生物信息学研究中... 针对氨基酸序列的聚类问题,提出了基于K中心方法的解决方案。该方案把K中心方法、动态规划方法和生物学研究中的一些新理论有机地融合在了一起。通过实验,该方案具有很强的适用性和很好的聚类效果,是数据挖掘方法在生物信息学研究中一次有益的探索。 展开更多
关键词 氨基酸序列聚类分析 数据挖掘 K中心聚类方法 动态规划 生物信息学
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