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抗人脂多糖结合蛋白氨基端片段抗体dsFv V_L链的构建、表达和鉴定被引量：1: 1; 作者葛晓冬邹佳 +1 位作者杨艳丽刘友生《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第14期1364-1367,共4页; 目的将抗人脂多糖结合蛋白氨基端片段(NH-LBP)抗体的Fv L链引入半胱氨酸(Cys),并表达、纯化。方法应用mega-primer PCR方法,在抗NH-LBP单克隆Fab抗体的轻链基因骨架区中引入编码Cys的基因序列,将目的序列放入载体pET-28a(+),于工程菌BL2... 展开更多; 关键词脂多糖结合蛋白氨基端片段二硫键稳定性Fv抗体半胱氨酸; 在线阅读下载PDF 职称材料

甲状旁腺素氨基端1-34片段不同作用方式对人成骨样细胞SaoS-2的影响被引量：5: 2; 作者李梅孟迅吾 +3 位作者周学瀛邢小平夏维波刘怀成《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期30-33,共4页; 目的观察人甲状旁腺素氨基端1-34片段(hPTH1-34)不同作用方式对人成骨样细胞(SaoS-2细胞)功能的影响,探讨hPTH1-34促进骨合成代谢的分子生物学机制。方法以48h为一个周期,每个周期分别采用50ng/ml的hPTH1-34进行连续刺激(刺激48h/周期)... 展开更多; 关键词甲状旁腺素氨基端1-34片段环磷酸腺苷 C-FOS原癌基因; 在线阅读下载PDF 职称材料

人酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶N端片段在大肠杆菌中的表达: 3; 作者叶治家程天民 +1 位作者江智红李伯良《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第3期156-159,共4页; 目的：重组表达人ＡＣＡＴ的Ｎ端片段。方法：将编码ＡＣＡＴ氨基末端包含第一个跨膜区（１～１９６ａａ）的ｃＤＮＡ片段克隆至不同的大肠杆菌表达载体中，构建了多种大肠杆菌表达质粒，再转化至大肠杆菌中进行表达研究。结果和结论：... 展开更多; 关键词酰基辅酶氨基端片段基因表达大肠杆菌 ACAT; 在线阅读下载PDF 职称材料

人源噬菌体抗体库的构建及抗人NH-LBP抗体的筛选与鉴定被引量：11: 4; 作者葛晓冬刘友生 +3 位作者王晓东王长松邓军李红《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期180-184,共5页; 　目的: 构建人源噬菌体抗体库并制备抗人脂多糖结合蛋白氨基端片段 (NH- LBP)的单克隆抗体 (mAb)。方法:以噬菌体展示系统(pComb3H/VCSM13)建立人源噬菌体抗体库(Fab), 并以昆虫细胞sf21在无血清培养基 (SF 900Ⅱ )中,通过BAC- TO- BA... 展开更多; 关键词人脂多糖结合蚩白氨基端片段人源噬菌体抗体库昆虫细胞; 在线阅读下载PDF 职称材料

人源抗NH-LBP Fab抗体的制备和初步鉴定被引量：2: 5; 作者葛晓冬邹佳 +2 位作者刘友生杨艳丽段光杰《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期359-362,共4页; 目的构建人源抗脂多糖结合蛋白氨基端片段(NH-LBP)Fab抗体的原核表达载体,并制备高稳定性Fab抗体。方法用PCR方法,从可溶性表达抗NH-LBP抗体的重组质粒pComb3H-Fab中扩增出VH链和VL链基因序列,分别构建表达质粒pET-28a(+)-VH和pET-28a(+... 展开更多; 关键词脂多糖结合蛋白氨基端片段(NH-LBP) 人源抗体Fab 高效表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

国产rhPTH1-34治疗绝经后骨质疏松症的有效性和安全性:随机对照、多中心临床研究被引量：4: 6; 作者李梅章振林 +18 位作者林华程群屠重棋唐海游利郑淑慧徐勉金小岚余卫胡伟伟朱秀芬朱汉民石锐陈浩陈琳高尚聚杜鹃程莹夏维波《中华骨质疏松和骨矿盐疾病杂志》 CSCD 北大核心 2022年第2期135-141,共7页; 目的以原研特立帕肽和鲑鱼降钙素为阳性对照,观察国产基因重组人甲状旁腺素氨基端1-34片段(recombinant human parathyroid hormone N-terminal 1-34 fragment,rhPTH1-34)治疗绝经后骨质疏松症的有效性和安全性。方法纳入绝经后骨质... 展开更多; 关键词甲状旁腺素氨基端1-34片段特立帕肽绝经后骨质疏松骨密度; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名抗人脂多糖结合蛋白氨基端片段抗体dsFv V_L链的构建、表达和鉴定被引量：1: 1; 作者葛晓冬邹佳杨艳丽刘友生; 机构第三军医大学西南医院病理学研究所; 出处《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第14期1364-1367,共4页; 基金国家自然科学基金(30400426) 第三军医大学科研创新基金(2004)~~; 文摘目的将抗人脂多糖结合蛋白氨基端片段(NH-LBP)抗体的Fv L链引入半胱氨酸(Cys),并表达、纯化。方法应用mega-primer PCR方法,在抗NH-LBP单克隆Fab抗体的轻链基因骨架区中引入编码Cys的基因序列,将目的序列放入载体pET-28a(+),于工程菌BL21star(DE3)中表达及TALON柱芯亲合纯化,通过ELISA法初步鉴定其与NH-LBP的结合力。结果dsFv VL链的Thr21替换为Cys,扩增出基因片段长约为650bp,经BL21star(DE3)菌表达出相对分子质量约为28×103的目的蛋白,与NH-LBP具有一定的结合力。结论抗体轻链中成功引入了Cys。; 关键词脂多糖结合蛋白氨基端片段二硫键稳定性Fv抗体半胱氨酸; Keywords N terminal fragment of human lipopolysaccharide binding protein disulfide stabilized Fv frag ments cysteine; 分类号 R392-33 [医药卫生—免疫学] R392.11 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名甲状旁腺素氨基端1-34片段不同作用方式对人成骨样细胞SaoS-2的影响被引量：5: 2; 作者李梅孟迅吾周学瀛邢小平夏维波刘怀成; 机构中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院内分泌科; 出处《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期30-33,共4页; 基金国家自然科学基金(39370747) 中国医学科学院基金(91006)资助~~; 文摘目的观察人甲状旁腺素氨基端1-34片段(hPTH1-34)不同作用方式对人成骨样细胞(SaoS-2细胞)功能的影响,探讨hPTH1-34促进骨合成代谢的分子生物学机制。方法以48h为一个周期,每个周期分别采用50ng/ml的hPTH1-34进行连续刺激(刺激48h/周期)或间歇刺激(分别刺激1、3、6、12、24h/周期)SaoS-2细胞。采用“金氏”化学法、放射免疫法和竞争蛋白结合法测定碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素(BGP)和环磷酸腺苷(cAMP)浓度;c-fos基因表达水平采用逆转录-聚合酶链反应技术(RT-PCR)进行半定量分析。结果hPTH1-34每周期间歇刺激3、6h呈时间依赖性显著增加ALP产生(与对照比,P<0.01;与连续刺激比,P<0.05或P<0.01)和cAMP浓度(与对照和连续刺激比,均P<0.05),并迅速促进c-fos基因表达。未观察到BGP对hPTH1-34刺激的明显反应。结论hPTH1-34对骨合成代谢的促进作用取决于间歇刺激方式,以每48小时间歇刺激3、6h作用最显著。蛋白激酶A信号途径是hPTH1-34发挥作用的主要途径,c-fos基因可能是重要的细胞内第三信使。; 关键词甲状旁腺素氨基端1-34片段环磷酸腺苷 C-FOS原癌基因; Keywords human parathyroid hormone1-34 cyclic adenosine monophosphate protooncogene c-fos; 分类号 Q343.15 [生物学—遗传学] R681 [医药卫生—骨科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶N端片段在大肠杆菌中的表达: 3; 作者叶治家程天民江智红李伯良; 机构第三军医大学预防医学系防原医学教研室; 出处《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第3期156-159,共4页; 文摘目的：重组表达人ＡＣＡＴ的Ｎ端片段。方法：将编码ＡＣＡＴ氨基末端包含第一个跨膜区（１～１９６ａａ）的ｃＤＮＡ片段克隆至不同的大肠杆菌表达载体中，构建了多种大肠杆菌表达质粒，再转化至大肠杆菌中进行表达研究。结果和结论：在详细摸索表达条件的基础上，经温敏诱导，成功地在大肠杆菌ＡＲ６８中表达了Ｎ端融合ｐｒｏｔｅｉｎＡＢＣｄｏｍａｉｎ的人ＡＣＡＴ氨基末端包含第一个跨膜区的片段，表达量约２０ｍｇ／Ｌ菌液。为进一步表达完整的ＡＣＡＴ蛋白。; 关键词酰基辅酶氨基端片段基因表达大肠杆菌 ACAT; Keywords acyl coA cholesterolacyltransferase N terminal fragment gene expression; 分类号 Q552 [生物学—生物化学] Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人源噬菌体抗体库的构建及抗人NH-LBP抗体的筛选与鉴定被引量：11: 4; 作者葛晓冬刘友生王晓东王长松邓军李红; 机构第三军医大学西南医院病理学研究所; 出处《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期180-184,共5页; 基金国家自然科学基金资助项目(No. 30271342); 文摘　目的: 构建人源噬菌体抗体库并制备抗人脂多糖结合蛋白氨基端片段 (NH- LBP)的单克隆抗体 (mAb)。方法:以噬菌体展示系统(pComb3H/VCSM13)建立人源噬菌体抗体库(Fab), 并以昆虫细胞sf21在无血清培养基 (SF 900Ⅱ )中,通过BAC- TO- BAC杆状病毒表达系统来表达NH -LBP。再以NH -LBP为抗原, 从人源噬菌体抗体库中筛选可产生抗NH- LBPmAb的菌株并进行鉴定。结果: 昆虫细胞sf21可表达人源NH- LBP, 经亲和纯化柱芯 (TALON)有效纯化后, 获得约8mg的NH- LBP。成功地建立人源噬菌体抗体库, 库容达5. 0×108 CFU。经 8轮筛选后, 抗体库被富集 1. 85×104 倍。经ELISA法鉴定, 获得 3株可产生抗NH -LBPmAb的菌株(核酸序列及氨基酸序列见GenBank中的: AY337713,AY337714 )。结论: 以昆虫细胞sf21表达NH LBP及以其为抗原制备噬菌体mAb是可行的。本研究为进一步建立抗NH- LBP的二硫键稳定的Fv抗体 ( disulfidestabilizedFvfrag ments, dsFv), 研究人体内LBP的变化规律和过度炎症反应的防治奠定了基础。; 关键词人脂多糖结合蚩白氨基端片段人源噬菌体抗体库昆虫细胞; Keywords fragment of human lipopolysaccharide-binding protein human phage antibody library insect cell; 分类号 R392.11 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人源抗NH-LBP Fab抗体的制备和初步鉴定被引量：2: 5; 作者葛晓冬邹佳刘友生杨艳丽段光杰; 机构第三军医大学第一附属医院病理科; 出处《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期359-362,共4页; 基金国家自然科学基金资助项目(30400426) 第三军医大学校科研基金(2004年); 文摘目的构建人源抗脂多糖结合蛋白氨基端片段(NH-LBP)Fab抗体的原核表达载体,并制备高稳定性Fab抗体。方法用PCR方法,从可溶性表达抗NH-LBP抗体的重组质粒pComb3H-Fab中扩增出VH链和VL链基因序列,分别构建表达质粒pET-28a(+)-VH和pET-28a(+)-VL,并于工程菌BL21(DE3)star中分别表达及TALON柱芯亲和纯化,将抗体片段VH和VL共同复性,通过二硫键形成Fab抗体,再采用ELISA法初步鉴定其与NH-LBP的结合力。结果扩增出VL链和VH基因片段长约为650bp和700bp,经BL21star表达出相对分子质量(Mr)约为28000和30000的目的蛋白,共同折叠后所获得Fab抗体与NH-LBP具有较高的结合力。结论成功地制备抗NH-LBPFab抗体,为临床抗炎研究提供了条件。; 关键词脂多糖结合蛋白氨基端片段(NH-LBP) 人源抗体Fab 高效表达; 分类号 R392.11 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名国产rhPTH1-34治疗绝经后骨质疏松症的有效性和安全性:随机对照、多中心临床研究被引量：4: 6; 作者李梅章振林林华程群屠重棋唐海游利郑淑慧徐勉金小岚余卫胡伟伟朱秀芬朱汉民石锐陈浩陈琳高尚聚杜鹃程莹夏维波; 机构中国医学科学院上海交通大学附属第六人民医院骨质疏松和骨病专科南京大学医学院附属鼓楼医院骨科复旦大学附属华东医院骨质疏松科四川大学华西医院骨科首都医科大学附属北京友谊医院骨科上海市第一人民医院内分泌科河北省人民医院骨科昆明医科大学第二附属医院内分泌科中国人民解放军西部战区总医院内分泌科中国医学科学院; 出处《中华骨质疏松和骨矿盐疾病杂志》 CSCD 北大核心 2022年第2期135-141,共7页; 文摘目的以原研特立帕肽和鲑鱼降钙素为阳性对照,观察国产基因重组人甲状旁腺素氨基端1-34片段(recombinant human parathyroid hormone N-terminal 1-34 fragment,rhPTH1-34)治疗绝经后骨质疏松症的有效性和安全性。方法纳入绝经后骨质疏松症女性214例,按照1∶1∶1∶0.5比例,随机分为4组:rhPTH1-3420μg组(n=59)及40μg组(n=62)分别每天注射国产rhPTH1-3420及40μg;降钙素组(n=61)给予鼻喷鲑鱼降钙素200 IU;特立帕肽组(n=32)给予原研特立帕肽注射20μg/d;疗程均为24周。观察治疗前后腰椎(L1-4)和髋部骨密度(bone mineral density,BMD)的变化率,骨转换生化指标的变化率,包括血清Ⅰ型前胶原N-端肽(procollagen typeⅠN-terminal propeptide,P1NP)和Ⅰ型胶原交联C-末端肽(β-cross linked C-telopeptide of typeⅠcollagen,β-CTX),以及药物治疗的安全性。结果治疗24周后,rhPTH1-3420μg及40μg组L1-4 BMD较基线分别增加3.42%和4.82%,特立帕肽组L1-4 BMD增加3.66%(均P<0.05),rhPTH1-34治疗组间骨密度变化率无明显差异;降钙素组腰椎骨密度变化率为-0.01%,骨密度无明显增加(P>0.05)。国产及原研特立帕肽的疗效均优于鼻喷降钙素组。国产与原研rhPTH1-3420μg组治疗24周使血清P1NP分别升高534.22%和277.86%,使β-CTX水平分别升高247.88%和202.25%(均P<0.001),P1NP增幅大于β-CTX。国产与原研rhPTH1-34组的安全性较好。结论每天皮下注射20μg国产rhPTH1-34治疗24周能够显著提升腰椎BMD,促进骨形成,疗效及安全性与原研特立帕肽相当,且优于降钙素鼻喷剂。; 关键词甲状旁腺素氨基端1-34片段特立帕肽绝经后骨质疏松骨密度; Keywords recombinant human parathyroid hormone N-terminal 1-34 fragment teriparatide postmenopausal osteoporosis bone mineral density; 分类号 R681 [医药卫生—骨科学] R972 [医药卫生—药品]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	抗人脂多糖结合蛋白氨基端片段抗体dsFv V_L链的构建、表达和鉴定	葛晓冬邹佳杨艳丽刘友生	《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2007	1	在线阅读下载PDF 职称材料
2	甲状旁腺素氨基端1-34片段不同作用方式对人成骨样细胞SaoS-2的影响	李梅孟迅吾周学瀛邢小平夏维波刘怀成	《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心	2004	5	在线阅读下载PDF 职称材料
3	人酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶N端片段在大肠杆菌中的表达	叶治家程天民江智红李伯良	《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心	1999	0	在线阅读下载PDF 职称材料
4	人源噬菌体抗体库的构建及抗人NH-LBP抗体的筛选与鉴定	葛晓冬刘友生王晓东王长松邓军李红	《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2005	11	在线阅读下载PDF 职称材料
5	人源抗NH-LBP Fab抗体的制备和初步鉴定	葛晓冬邹佳刘友生杨艳丽段光杰	《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2007	2	在线阅读下载PDF 职称材料
6	国产rhPTH1-34治疗绝经后骨质疏松症的有效性和安全性:随机对照、多中心临床研究	李梅章振林林华程群屠重棋唐海游利郑淑慧徐勉金小岚余卫胡伟伟朱秀芬朱汉民石锐陈浩陈琳高尚聚杜鹃程莹夏维波	《中华骨质疏松和骨矿盐疾病杂志》 CSCD 北大核心	2022	4	在线阅读下载PDF 职称材料