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益气清热膏通过内质网应激途径保护氨基核苷嘌呤霉素大鼠模型足细胞损伤的机制研究 被引量：6
1
作者 杨丽平 刘咏梅 +5 位作者 占永立 刘慧洁 孙雪艳 张浩军 路晓光 李平 《中国中西医结合肾病杂志》 2016年第8期667-671,I0001,共6页
目的:研究益气清热膏对氨基核苷嘌呤霉素大鼠模型(PAN)蛋白尿水平、足细胞损伤的作用,并从调节内质网应激途径的主要分子伴侣:糖调节蛋白78(glucose regulated protein,GRP78)和GRP94的表达探讨益气清热膏的作用机制。方法:24只雄性Wis... 目的:研究益气清热膏对氨基核苷嘌呤霉素大鼠模型(PAN)蛋白尿水平、足细胞损伤的作用,并从调节内质网应激途径的主要分子伴侣:糖调节蛋白78(glucose regulated protein,GRP78)和GRP94的表达探讨益气清热膏的作用机制。方法:24只雄性Wistar大鼠按随机数字表分为假手术组、PAN模型组、益气清热膏组、蒙诺组,每组各6只。除假手术组予等量生理盐水外,其余各组均采用颈静脉插管注射嘌呤霉素氨基核苷(PA)(40 mg/kg)法制备PAN肾病大鼠模型。分别于造模前(0天)、造模后第9天和第14天检测大鼠24 h尿蛋白定量,第15天处死各组大鼠,取肾组织行电镜检查;Western Blot和实时定量逆转录多聚酶链反应(real time-PCR)法检测大鼠肾组织中GRP78和GRP94表达。结果:(1)与假手术组比较,益气清热膏可以降低造模后第9天和第14天大鼠24 h尿蛋白定量(P<0.01)。(2)超微病理:模型组出现广泛足突融合、消失,足突基底部肿胀,足细胞内线粒体肿胀,内皮窗孔凌乱。益气清热膏可以明显改善大鼠足细胞损伤。(3)real-time PCR法和Western blot检测肾皮质GRP78和GRP94的表达。模型组GRP78和GRP94的mRNA水平和蛋白水平显著升高,益气清热膏可以显著降低两者mRNA和蛋白表达水平(P<0.05)。结论:益气清热膏可显著降低PAN模型大鼠尿蛋白水平,修复足细胞损伤,其机制可能与益气清热膏降低肾组织GRP78和GRP94表达,从而抑制内质网应激,修复肾组织蛋白质合成有关,具体机制需要进一步研究证实。 展开更多
关键词 益气清热膏 氨基核苷嘌呤霉素模型 内质网应激 糖调节蛋白
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嘌呤霉素氨基核苷诱发肾病综合征大鼠模型的改良制作研究 被引量：4
2
作者 罗月会 李平 +2 位作者 巩跃文 赵静波 赵世萍 《中国中西医结合肾病杂志》 2010年第2期104-108,I0002,共6页
目的:在嘌呤霉素氨基核苷模型经典制作方法的基础上进行多次尾静脉追加,制作更适合慢性肾脏病药理学研究的实验性大鼠模型。方法:Wistar大鼠42只,6周龄,雄性,随机分为对照组、颈静脉给药组和追加给药组,每组14只,各组分别于造模后第30... 目的:在嘌呤霉素氨基核苷模型经典制作方法的基础上进行多次尾静脉追加,制作更适合慢性肾脏病药理学研究的实验性大鼠模型。方法:Wistar大鼠42只,6周龄,雄性,随机分为对照组、颈静脉给药组和追加给药组,每组14只,各组分别于造模后第30天和第56天处死动物。颈静脉给药组行颈静脉插管术缓慢推注嘌呤霉素氨基核苷(40 mg/kg),追加给药组在颈静脉给药(40 mg/kg)后第13、16、19天再进行3次小剂量尾静脉追加(5 mg/kg)。对照组给等容积0.9%生理盐水。造模后第5、10、15、20、28、42、56天时检测24 h尿蛋白。实验结束时对比两组模型的肾脏组织病理改变和血清总蛋白(TP)、白蛋白(Alb)、三酰甘油(TG)、胆固醇(TC)、肌酐(Scr)和尿素氮(BUN)水平。结果:颈静脉给药组在造模后第5天出现蛋白尿,10 d左右尿蛋白达到高峰(均值264.1 mg/24 h),随后尿蛋白急剧下降,约在第20天降至接近正常水平。追加给药组尿蛋白出现一个持续增高的平台期(均值维持在略高于150 mg/24 h的水平),末次追加后约10 d(颈静脉给药后第28天)开始缓慢下降,于第56天时接近正常。光镜所见:在30 d和56 d时,追加给药组大鼠的肾小球局灶节段性硬化和间质纤维化、炎性浸润等组织病理学指标较颈静脉给药组改变显著,其中两组之间间质纤维化的差异有统计学意义(P<0.05)。第30天血清生化结果显示,追加给药组大鼠TG、TC(P<0.05)、Scr(P<0.05)升高较明显,而颈静脉给药组变化则不明显。结论:对嘌呤霉素氨基核苷经典模型进行多次小剂量尾静脉追加,可以造成大鼠慢性肾脏病变。改良后的模型能够节约研究时限和研究成本,更适用于开展慢性肾脏病药理学研究。 展开更多
关键词 慢性肾脏病 嘌呤霉素氨基核苷 大鼠模型 颈静脉给药 尾静脉追加
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嘌呤霉素氨基核苷大鼠模型的研究进展 被引量：2
3
作者 闫静 王彬 李平 《中国中西医结合肾病杂志》 2005年第9期550-552,共3页
关键词 嘌呤霉素氨基核苷 大鼠模型 局灶节段性肾小球硬化 微小病变型肾病 syndrome 动物模型 给药途径 造模方法 发病机制
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嘌呤霉素氨基核苷肾病大鼠模型的病理机制研究进展 被引量：1
4
作者 文玉敏 李平 《中国中西医结合肾病杂志》 2013年第2期172-174,I0005,共4页
嘌呤霉素氨基核苷（puromycin aminonucleoside,PAN）大鼠模型是研究微小病变肾病（minimal change nephrotic syndrome,MCNS）和局灶节段性肾小球硬化（focal segmental glomerulosclerosis,FSGS）病理损害的理想实验动物模型,该模型... 嘌呤霉素氨基核苷（puromycin aminonucleoside,PAN）大鼠模型是研究微小病变肾病（minimal change nephrotic syndrome,MCNS）和局灶节段性肾小球硬化（focal segmental glomerulosclerosis,FSGS）病理损害的理想实验动物模型,该模型最主要的临床特征为大量蛋白尿。对于PAN导致肾脏损害的机制目前尚不十分清楚,然而。 展开更多
关键词 嘌呤霉素氨基核苷 大鼠模型 氨基核苷肾病 病理机制 局灶节段性肾小球硬化 微小病变肾病 实验动物模型 大量蛋白尿
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黄葵胶囊对氨基核苷嘌呤霉素诱导的大鼠慢性肾病的作用研究 被引量：9
5
作者 董晞 罗月会 +3 位作者 赵世萍 张浩军 郭景珍 李平 《中国中西医结合肾病杂志》 2011年第9期801-803,850,共4页
目的:观察黄葵胶囊对氨基核苷嘌呤霉素(PAN)诱导的大鼠慢性肾病的作用。方法:Wistar大鼠雄性,40只,130～140g,SPF级,随机分为假手术组、模型组、蒙诺组、黄葵胶囊组。除假手术组外,各组均行颈静脉插管术缓慢推注PAN(40mg/kg体重)后,再进... 目的:观察黄葵胶囊对氨基核苷嘌呤霉素(PAN)诱导的大鼠慢性肾病的作用。方法:Wistar大鼠雄性,40只,130～140g,SPF级,随机分为假手术组、模型组、蒙诺组、黄葵胶囊组。除假手术组外,各组均行颈静脉插管术缓慢推注PAN(40mg/kg体重)后,再进行3次小剂量尾静脉追加(5mg/kg体重)诱导大鼠慢性肾病,假手术组同样行颈静脉插管术和尾静脉追加给等容积0.9%生理盐水,观察56d。颈静脉给药后第5、10、15、20、28、42、56天时检测24h尿蛋白,第57天时处死动物检测血清总蛋白(TP)、血清白蛋白(Alb)、三酰甘油(TG)、胆固醇(TC)、肌酐(Scr)和尿素氮(BUN)水平;对肾组织进行病理学观察并对损害程度进行评分;采用免疫组化法,观察黄葵胶囊对α-SMA蛋白在肾脏组织表达的影响;取脾脏、胸腺和睾丸,取脏器指数观察该药对免疫系统、生殖系统的影响。结果:黄葵胶囊对PAN诱导的尿蛋白大量排泄有降低趋势,对肾功能的损伤有所改善,对肾小球硬化有显著改善作用(P<0.01),对α-SMA蛋白在肾脏组织表达有所降低,脾脏、胸腺和睾丸指数没有变化。结论:黄葵胶囊对PAN诱导的大鼠慢性肾病有一定的治疗作用,但对免疫系统、生殖系统未见毒副作用。 展开更多
关键词 氨基核苷嘌呤霉素大鼠模型 蛋白尿 黄葵胶囊
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甘西鼠尾草总酚酸提取物对嘌呤霉素氨基核苷诱导损伤的足细胞中Toll样受体4表达的影响 被引量：3
6
作者 柳云 任红旗 +7 位作者 王增慧 杨阳 戴德淑 刘翔 胡雪晴 李向阳 刘瀛 汤仁仙 《中国中西医结合肾病杂志》 2017年第8期672-675,I0002,共5页
目的:探讨SPE及其单体对嘌呤霉素氨基核苷(PAN)诱导的损伤足细胞中Toll样受体4(TLR4)通路表达的影响。方法:足细胞与含有甘西鼠尾草总酚酸提取物(SPE)、迷迭香酸(RA)、丹酚酸B(SalB)、RA+SalB混合及他克莫司的完全培养液预先孵育30 min... 目的:探讨SPE及其单体对嘌呤霉素氨基核苷(PAN)诱导的损伤足细胞中Toll样受体4(TLR4)通路表达的影响。方法:足细胞与含有甘西鼠尾草总酚酸提取物(SPE)、迷迭香酸(RA)、丹酚酸B(SalB)、RA+SalB混合及他克莫司的完全培养液预先孵育30 min,再加入PAN(100μg/ml)继续作用24 h,观察足细胞骨架结构F-actin变化,western blot及半定量RT-PCR检测足细胞中TLR4、myd88、phosphor-NF-κB(pp65)在蛋白及mRNA水平的表达量变化。结果:(1)PAN作用24 h后,足细胞骨架蛋白F-actin明显损伤,微丝解聚、胞体回缩,少数细胞尚存排列紊乱的丝状结构,而提前给予保护药物SPE、SalB、RA、SalB+RA混合药物及他克莫司组的足细胞损伤明显减弱。(2)western blot数据显示,PAN诱导的损伤足细胞中TLR4、myd88及pp65蛋白的表达与正常组相比均有明显上调(P<0.05);保护药物组:TLR4蛋白表达较模型组有明显下降(P<0.05);My D88蛋白表达除SalB高剂量组及SalB+RA低剂量组较模型组无显著下降外,其余均能明显下调其表达量(P<0.05);pp65在保护药物组中的表达均较模型对照组低(P<0.05)。(3)半定量RT-PCR结果显示,模型对照组中TLR4、My D88及NF-κB的mRNA表达量明显高于正常对照组;保护药物组中:TLR4 mRNA表达量在各药物处理组中均明显低于PAN组(P<0.05),其中的SPE高、低剂量组,RA高、低剂量组,SalB+RA高剂量组与正常组相接近(P>0.05);My D88 mRNA表达量在SPE及其单体处理后均有明显下调(P<0.05);NF-κB mRNA表达量除SalB高剂量组中无明显下调外(P>0.05),其余各保护药物组均下调(P<0.05)。结论:SPE及其活性单体对PAN诱导损伤足细胞的保护作用机制可能部分通过抑制TLR4信号相关蛋白表达来实现;甘西鼠尾草总酚酸提取物中的单体迷迭香酸对TLR4及其下游信号分子My D88、NF-κB的抑制作用优于丹酚酸B和混合给药组。 展开更多
关键词 足细胞 嘌呤霉素氨基核苷 甘西鼠尾草总酚酸提取物 迷迭香酸 丹酚酸B TLR4
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益肾活血方对嘌呤霉素氨基核苷诱导的大鼠肾病综合征的治疗作用及其机理研究
7
作者 李建 闫静 +2 位作者 赵世萍 李平 Yuewen Gong 《中国中西医结合肾病杂志》 2007年第12期696-700,共5页
目的:探讨益肾活血方对嘌呤霉素氨基核苷(PAN)诱导的大鼠肾病综合征的治疗作用及其作用机制。方法:Wistar大鼠随机分为假手术组、PAN模型组、益肾活血方高剂量组(YHF-H)、益肾活血方中剂量组(YHF-M)、益肾活血方低剂量组(YHF-L)、蒙诺... 目的:探讨益肾活血方对嘌呤霉素氨基核苷(PAN)诱导的大鼠肾病综合征的治疗作用及其作用机制。方法:Wistar大鼠随机分为假手术组、PAN模型组、益肾活血方高剂量组(YHF-H)、益肾活血方中剂量组(YHF-M)、益肾活血方低剂量组(YHF-L)、蒙诺治疗组(FP)。采用颈静脉注射结合尾静脉加强注射PAN的方法制作肾病模型。PAN首次注射后第5、10、15、20、25和30天测定24h尿蛋白定量;31d后处死动物,做血清总蛋白、血清白蛋白、总胆固醇、三酰甘油、血清尿素氮、血清肌酐等血生化学检查、肾脏组织光学显微镜和电子显微镜检查以及逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)分析各组大鼠肾脏骨形态蛋白及其基因表达的情况。结果:益肾活血方能有效抑制由PAN所诱导的尿蛋白排泄增高、血清蛋白降低和血脂升高,减轻肾小管间质病变、抑制BMPRⅡ和Smad1在肾组织内的表达。结论:益肾活血方对PAN诱导的大鼠肾病综合征有治疗作用,其机制可能与调节骨形态蛋白表达有关。 展开更多
关键词 益肾活血方 肾病综合征 嘌呤霉素氨基核苷 骨形态蛋白
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肾炎康复片改善大鼠慢性肾损害的作用观察 被引量：15
8
作者 赵世萍 李平 +2 位作者 王彬 郭景珍 欧周罗 《中国中西医结合肾病杂志》 2008年第4期288-291,377,共5页
目的:观察肾炎康复片对氨基核苷嘌呤霉素(PAN)诱导的大鼠慢性肾病的治疗作用。方法:实验大鼠随机分为假手术组、模型组、蒙诺对照组、肾炎康复片组,利用PAN诱导大鼠肾病综合征伴局灶节段性肾小球硬化模型,观察药物对大鼠24h尿蛋白定量,... 目的:观察肾炎康复片对氨基核苷嘌呤霉素(PAN)诱导的大鼠慢性肾病的治疗作用。方法:实验大鼠随机分为假手术组、模型组、蒙诺对照组、肾炎康复片组,利用PAN诱导大鼠肾病综合征伴局灶节段性肾小球硬化模型,观察药物对大鼠24h尿蛋白定量,血清总蛋白、白蛋白、血清胆固醇、三酰甘油、血清尿素氮、血清肌酐等生化学指标的影响,对肾组织进行病理学观察并对损害程度进行评分,探讨肾炎康复片对肾病综合征、蛋白尿、肾小球硬化及肾间质纤维化的治疗作用。结果:肾炎康复片能明显抑制大鼠大量尿蛋白排泄,提升血清总蛋白和白蛋白含量,改善脂代谢紊乱,降低血清尿素氮,改善肾脏病理损伤。结论:肾炎康复片能减轻由PAN诱导的肾组织损伤,减少尿蛋白的排泄,改善肾功能障碍和脂蛋白代谢紊乱。 展开更多
关键词 肾炎康复片 氨基核苷嘌呤霉素 大鼠模型
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益气活血化湿方及其拆方对足细胞的保护作用 被引量：1
9
作者 魏丽凤 张先闻 +2 位作者 凌春燕 雍军 王琳 《中国中西医结合肾病杂志》 2021年第8期666-668,I0001,共4页
目的:本研究探讨益气活血化湿方及其拆方对嘌呤霉素氨基核苷(PAN)诱导的足细胞损伤的保护作用。方法:培养足细胞并鉴定,建立PAN诱导的足细胞损伤模型。实验分为对照组(Con)、模型组(Model)、环孢素组(CsA)、全方组(QF)、益气组(YQ)、活... 目的:本研究探讨益气活血化湿方及其拆方对嘌呤霉素氨基核苷(PAN)诱导的足细胞损伤的保护作用。方法:培养足细胞并鉴定,建立PAN诱导的足细胞损伤模型。实验分为对照组(Con)、模型组(Model)、环孢素组(CsA)、全方组(QF)、益气组(YQ)、活血组(HX)、化湿组(HS)。分别利用RT-PCR与Western Bloting分析各组细胞CD_(2)AP、α-actinin4 mRNA和蛋白表达水平。结果:(1)Synaptopodin阳性表达,确立稳定的细胞培养条件;(2)明确造模浓度及各组用药浓度;(3)与Con比较,Model组α-actinin4 mRNA与蛋白表达均升高(P<0.05),CD_(2)AP mRNA与蛋白表达均下调(P<0.05);与Model比较,各用药组均能下调α-actinin4 mRNA与蛋白表达(P<0.05),上调CD_(2)AP mRNA与蛋白表达;QF与HS均能下调α-actinin4 mRNA与蛋白表达(P<0.05),二者差异无统计学意义(P>0.05);QF与YQ均能上调CD_(2)AP mRNA与蛋白表达(P<0.05),下调α-actinin4蛋白表达(P<0.05),二者差异无统计学意义(P>0.05)。结论:益气活血化湿方及其拆方能够通过修复骨架蛋白CD_(2)AP和抑制α-actinin4表达从而发挥足细胞保护作用,其中益气方和化湿方分别在修复CD_(2)AP表达与抑制α-actinin4表达方面作用显著。 展开更多
关键词 足细胞 骨架蛋白 氨基核苷嘌呤霉素 益气活血化湿方
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