芪灯明目胶囊对氧诱导视网膜病变小鼠视网膜血管的保护作用

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作者 刘春梦 丁珊 +4 位作者 董雪雯 赵丹丹 蒲思源 裴利 张富文 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期428-435,共8页

目的研究芪灯明目胶囊对氧诱导视网膜病变(OIR)小鼠视网膜新生血管形成及重塑的影响。方法将36只出生后第7天的(P7)SPF级C57BL/6J幼鼠采用随机数字表法分为正常组、OIR组、芪灯明目胶囊组和阿帕替尼组,每组9只。正常组小鼠于正常环境下... 目的研究芪灯明目胶囊对氧诱导视网膜病变(OIR)小鼠视网膜新生血管形成及重塑的影响。方法将36只出生后第7天的(P7)SPF级C57BL/6J幼鼠采用随机数字表法分为正常组、OIR组、芪灯明目胶囊组和阿帕替尼组,每组9只。正常组小鼠于正常环境下饲养,其余小鼠均在高氧环境中[氧浓度为(75±2)%]饲养5 d(P7~P12)后再在正常环境中饲养5 d(P12~P17)建立OIR模型。芪灯明目胶囊组和阿帕替尼组从P12开始分别给予芪灯明目胶囊(900 mg/kg)与血管内皮生长因子受体2抑制剂阿帕替尼(70 mg/kg)灌胃,1次/d,连续5 d。P17时,摘取小鼠眼球,制作眼球石蜡切片并行苏木精-伊红染色,计数各组小鼠突破内界膜的血管内皮细胞数目;制作视网膜铺片并行FITC-dextran荧光染色,计算视网膜无灌注区面积比、新生血管密度与总血管密度;采用免疫荧光染色法检测视网膜血管内皮细胞标志物CD31与周细胞标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的分布和荧光强度;采用免疫组织化学染色法检测视网膜缺氧诱导因子1α(HIF-1α)与血管内皮钙黏蛋白(VE-cadherin)的表达分布。结果正常组、OIR组、芪灯明目胶囊组和阿帕替尼组突破内界膜的血管内皮细胞数目分别为(2.83±4.40)、(37.33±5.43)、(23.83±6.79)和(14.00±9.34)个,总体比较差异有统计学意义(F=28.313,P<0.001),其中OIR组突破内界膜血管内皮细胞数明显多于正常组、芪灯明目胶囊组和阿帕替尼组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。视网膜铺片结果显示,OIR组视网膜存在大片无灌注区域与新生血管芽,血管迂曲,分布紊乱,芪灯明目胶囊组和阿帕替尼组血管分布较OIR组更均匀,无灌注区面积和新生血管较OIR组减少。正常组、芪灯明目胶囊组和阿帕替尼组视网膜无灌注区面积比和新生血管密度均较OIR组降低,差异均有统计学意义(均P<0.05)。正常组、芪灯明目胶囊组和阿帕替尼组CD31免疫荧光强度和HIF-1α吸光度值明显低于OIR组,α-SMA免疫荧光强度和VE-cadherin吸光度值明显高于OIR组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论芪灯明目胶囊能够抑制OIR小鼠视网膜新生血管形成,增加血管周细胞覆盖,缓解视网膜缺氧以及增加血管完整性,对OIR小鼠视网膜血管起到保护作用。 展开更多

关键词 视网膜新生血管 氧诱导视网膜病变 小鼠 芪灯明目胶囊 阿帕替尼

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Avastin玻璃体腔注射对小鼠氧诱导视网膜病变新生血管的抑制作用 被引量：3

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作者 付浴东 周占宇 +2 位作者 万金娥 丰慧 李松涛 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期988-992,共5页

背景早产儿视网膜病变（ROP）主要源于视网膜新生血管的形成，avastin可以同血管内皮生长因子（VEGF）的所有异构体发生高亲和力结合，拮抗其生理活性。目的观察玻璃体腔注射avastin对氧诱导视网膜病变模型新生血管的作用。方法取7日龄... 背景早产儿视网膜病变（ROP）主要源于视网膜新生血管的形成，avastin可以同血管内皮生长因子（VEGF）的所有异构体发生高亲和力结合，拮抗其生理活性。目的观察玻璃体腔注射avastin对氧诱导视网膜病变模型新生血管的作用。方法取7日龄清洁级C57BL／6J小鼠90只，用随机数字表法随机分为6组：空气对照组、高氧对照组、高氧BSS组和低、中、高剂量avastin组，每组15只。空气对照组小鼠在空气中喂养，其他各组均置于体积分数75％±2％O，的高氧环境中饲养，连续5d，高氧BSS组大鼠玻璃体腔注射无菌BSS液0．5μl，3个avastin处理组小鼠分别玻璃体腔注射1．25、2．50、5．00g／Lavastin各0．5μl。17日龄时过量麻醉处死小鼠，摘除眼球制备视网膜组织切片，苏木精一伊红染色后计数突破内界膜的新生血管内皮细胞核数目；应用免疫组织化学染色法检测视网膜中CD34分子的表达；利用视网膜铺片技术观察低、中、高剂量avastin组大鼠视网膜新生血管的形态并进行比较。结果苏木精一伊红染色发现，高氧对照组小鼠视网膜突破内界膜的新生血管内皮细胞核数目明显多于空气对照组，差异有统计学意义（P〈0．01）；不同剂量的avastin组小鼠视网膜中突破内界膜的新生血管内皮细胞核数明显少于高氧BSS组和高氧对照组，差异均有统计学意义（P〈0．01）；高剂量avastin组与低剂量avastin组比较，突破内界膜的新生血管内皮细胞核数明显减少，差异有统计学意义（P〈0．05）。免疫组织化学检测显示，高氧对照组视网膜突破内界膜的内皮细胞CD34分子呈阳性表达。视网膜铺片可见空气对照组的血管自视盘向四周均匀放射，分支良好，结构清晰；高氧对照组、高氧BBS组可见大量新生血管，其结构紊乱，分布不均；各剂量avastin组随着剂量的增加，视网膜血管分布和走行接近空气对照组。结论玻璃体腔注射avastin可抑制视网膜新生血管的产生，其作用与avastin的剂量有关。 展开更多

关键词 AVASTIN 视网膜/氧诱导视网膜新生血管化 血管形成 玻璃体腔注射

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血管内皮生长因子小干扰RNA对氧诱导视网膜病变中视网膜新生血管的抑制作用 被引量：1

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作者 孔怡淳 孙蓓 +2 位作者 赵堪兴 韩梅 王玉川 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期823-828,共6页

背景特异性地抑制视网膜中血管内皮生长因子（VEGF）的过度表达，有望成为有效抑制新生血管的方法。RNA干扰（RNAi）可高效、特异地抑制体内特定基因的表达，眼局部应用小干扰RNA（siRNA）对身体其他组织基因的干扰小。目的探讨在小鼠... 背景特异性地抑制视网膜中血管内皮生长因子（VEGF）的过度表达，有望成为有效抑制新生血管的方法。RNA干扰（RNAi）可高效、特异地抑制体内特定基因的表达，眼局部应用小干扰RNA（siRNA）对身体其他组织基因的干扰小。目的探讨在小鼠氧诱导视网膜病变（OIR）模型中VEGF的siRNA对视网膜中VEGF和新生血管的抑制作用。方法设计并体外合成表达VEGFsiRNA的质粒[psi—HITM／增强型绿色荧光蛋白（EGFP）／VEGFsiRNA]。小鼠血管瘤内皮（EOMA）细胞在不含抗生素的DMEM培养液中进行培养，细胞融合达70％时分为5个组：空白对照组培养孔培养基中无任何添加物，阴性对照组培养孔板内加入1μlLipofectamine TM2000和空质粒psi—HITM／EGFP，3个siRNA组中分别在培养孔板内加入1μl Lipofeetamine TM 2000＋40、50、60nmol／L质粒psi—HJTM／EGFP／VEGFsiRNA。分别利用实时定量PCR（real—timePCR）和Westernblot法检测EOMA细胞中VEGFmRNA和蛋白的表达，以筛选最佳干扰效率的VEGFsiRNA浓度。64只出生7d的C57BL／6J小鼠采用随机数字表法随机分为正常对照组（在正常氧环境中喂养）、模型对照组（不进行玻璃体腔内注射）、空质粒组和siRNA组，其中后3个组小鼠在氧体积分数（75±2）％的氧箱内饲养5d，然后置于正常氧环境中制备OIR动物模型。空质粒组和siRNA组于出生后12d（P12）小鼠玻璃体腔内分别注射psi—HI。”／EGFP和Lipofectamine…2000各0．5斗l混合物及psi—HITM／EGFP／VEGFsiRNA（60nmol／L）和LipofectamineTM2000各0．5μl混合物，各组P17小鼠经高相对分子质量荧光素（FITC—dextran）灌注后制备视网膜铺片、视网膜切片和视网膜标本，分别观察视网膜新生血管的变化及突破内界膜新生血管内皮细胞数，应用real—timePCR和Westernblot法检测视网膜中VEGFmRNA及其蛋白的表达。结果体外细胞转染实验表明，空白对照组、阴性对照组及40、50、60nmol／LsiRNA转染组EOMA细胞中VEGFmRNA和蛋白表达的总体比较差异均有统计学意义（F=148．890，P〈0．001；F=306．960，P〈0．001），各浓度siRNA组细胞中VEGFmRNA表达均明显低于空白对照组，差异均有统计学意义（t=73．950、119．890、156．480，均P〈0．001）。各浓度siRNA组细胞中VEGF蛋白的表达明显低于空白对照组，差异均有统计学意义（t=15．452、23．344、42．119，均P〈O．001），以60nmol／LsiRNA组作用最强。动物实验结果表明，与模型对照组和空质粒组比较，siRNA组小鼠视网膜无灌注区和新生血管丛明显减少，突破内界膜血管内皮细胞的细胞核数减少。正常对照组、模型对照组、空质粒组和siRNA组小鼠视网膜中VEGFmRNA的相对表达量分别为1．23-＋0．18、4．02±0．16、3．98±O．19、1．98±0．12，总体差异有统计学意义（F=369．780，P〈0．001），其中模型对照组和空质粒组VEGFmRNA表达明显高于正常对照组，差异均有统计学意义（t=37．880、37．336，P〈0．001），而siRNA组小鼠视网膜VEGFmRNA的表达较正常对照组下降50．8％，差异有统计学意义（t=10．183，P〈0．001），siRNA组小鼠视网膜VEGF蛋白的表达量较模型对照组下调68．0％，差异有统计学意义（t=11．473，P〈0．001），但仍高于正常对照组，差异有统计学意义（t=2．422，P〈0．001）。结论VEGFsiRNA可在体外和体内有效下调视网膜中VEGF的表达，抑制视网膜新生血管的形成。 展开更多

关键词 小干扰RNA 血管内皮生长因子 视网膜 氧诱导视网膜病变 新生血管

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脯氨酸羟化酶2对氧诱导视网膜病变新生血管生成的影响 被引量：2

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作者 屈晓杰 王雨生 +1 位作者 张鹏 储昭节 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2011年第6期511-515,共5页

目的观察脯氨酸羟化酶2(proline hydroxylase2,PHD2)对氧诱导小鼠视网膜病变动物模型新生血管生成的影响。方法 40只7d龄的C57BL/6J幼鼠随机分为4组,即正常对照组、高氧组、300mg.kg-1和500mg.kg-1PHD2抑制剂处理组,每组各10只。后3组... 目的观察脯氨酸羟化酶2(proline hydroxylase2,PHD2)对氧诱导小鼠视网膜病变动物模型新生血管生成的影响。方法 40只7d龄的C57BL/6J幼鼠随机分为4组,即正常对照组、高氧组、300mg.kg-1和500mg.kg-1PHD2抑制剂处理组,每组各10只。后3组放入动物氧舱,在氧气含量为体积分数(75±2)%的高氧环境中连续饲养5d,正常对照组于正常大气环境中饲养。300mg.kg-1和500mg.kg-1PHD2抑制剂处理组在结束高浓度给氧后,腹腔注射不同剂量的PHD2抑制剂(黄芩素),高氧组和正常对照组给予腹腔注射生理盐水,每天1次,连续5d。于末次注射结束后处死小鼠,Western blotting法检测视网膜中PHD2蛋白的表达,视网膜铺片法观察视网膜血管的情况,HE染色后计数突破内界膜的内皮细胞核数,免疫组织化学法检测视网膜a-SMA和VEGF蛋白的表达。结果 Western blotting显示视网膜中存在PHD2蛋白的表达,且高氧组蛋白表达量明显高于正常对照组(P=0.002),正常对照组高于300mg.kg-1、500mg.kg-1PHD2抑制剂组(P=0.004、0.001)。视网膜铺片结果显示高氧组自视盘发出的血管扩张迂曲,中周部视网膜有大量新生血管生成,近视盘周围有明显的血管无灌注区;300mg.kg-1和500mg.kg-1PHD2抑制剂处理组较高氧组明显改善。突破视网膜内界膜的内皮细胞核数正常对照组、高氧组、300mg.kg-1和500mg.kg-1PHD2抑制剂处理组分别为(0.60±0.84)个、(39.40±5.17)个、(15.80±1.93)个和(6.30±1.57)个,4组比较差异有统计学意义(P<0.05),高氧组最多,正常对照组最少。免疫组织化学染色结果显示300mg.kg-1和500mg.kg-1PHD2抑制剂处理组a-SMA表达较高氧组明显增加;高氧组、300mg.kg-1及500mg.kg-1PHD2抑制剂处理组的VEGF表达量均较正常对照组明显升高,300mg.kg-1和500mg.kg-1PHD2抑制剂处理组与高氧组比较,VEGF表达量无明显降低。结论视网膜存在PHD2的表达,抑制其表达后能有效改善高氧所致小鼠视网膜血管的异常,提示PHD2可能在其发病机制中具有一定的作用。 展开更多

关键词 视网膜新生血管 脯氨酸羟化酶2 氧诱导视网膜病变 鼠

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玻璃体内注射索拉非尼对大鼠氧诱导视网膜病变模型新生血管的作用

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作者 田丽丽 任兵 +4 位作者 高晓唯 罗英 蔡岩 周琨 杜安杰 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2014年第2期140-143,共4页

目的探讨玻璃体内注射索拉非尼对氧诱导视网膜病变(oxygen-induced retinopathy,OIR)大鼠模型视网膜新生血管的作用。方法 7 d龄SD乳鼠144只,随机分为6组:A组:对照组;B组:ROP组;C组:ROP溶媒对照组;D组:ROP+5μg索拉非尼组;E组:ROP+20μ... 目的探讨玻璃体内注射索拉非尼对氧诱导视网膜病变(oxygen-induced retinopathy,OIR)大鼠模型视网膜新生血管的作用。方法 7 d龄SD乳鼠144只,随机分为6组:A组:对照组;B组:ROP组;C组:ROP溶媒对照组;D组:ROP+5μg索拉非尼组;E组:ROP+20μg索拉非尼组;F组:ROP+80μg索拉非尼组。除A组在正常氧环境下饲养外,其余各组乳鼠均建立OIR模型。乳鼠于生后第12天出氧箱后给予玻璃体内注射DMSO及相应剂量的索拉非尼,于生后第17天处死,做视网膜铺片,并于激光共聚焦显微镜下观察视网膜血管形态并在高倍视野下计数血管分支点数目;组织切片HE染色观察视网膜组织形态并计数突破内界膜的血管内皮细胞核数。结果视网膜铺片显示,B组和C组视网膜血管迂曲扩张并形成大量新生血管,经索拉非尼治疗后,视网膜新生血管大幅度减少,且呈剂量依赖性。A组、B组、C组、D组、E组、F组血管分支点数目分别为(16.50±3.90)个、(37.44±6.47)个、(37.08±5.10)个、(30.80±6.85)个、(26.08±5.08)个、(19.83±3.51)个;除B组与C组差异无统计学意义外,其余各组间差异均有统计学意义(均为P<0.05)。HE染色显示,B组和C组有大量突破内界膜的血管内皮细胞核,经索拉非尼治疗后,突破内界膜的血管内皮细胞核明显减少,且呈剂量依赖性。A组、B组、C组、D组、E组、F组突破视网膜内界膜的血管内皮细胞核数分别为(0.22±0.42)个、(35.66±4.70)个、(35.30±4.54)个、(27.30±4.28)个、(21.41±3.53)个、(7.41±2.87)个;除B组与C组间差异无统计学意义外,其余各组间差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论索拉非尼能够有效抑制大鼠OIR模型视网膜新生血管的生成,且抑制效果呈剂量依赖性。 展开更多

关键词 索拉非尼 氧诱导视网膜病变 新生血管 酪氨酸激酶抑制剂

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氧诱导新生小鼠视网膜病变中血管新生和氧应激相关基因表达的变化 被引量：8

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作者 余增洋 龚陈媛 +1 位作者 张国庆 季莉莉 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期1397-1401,共5页

目的建立氧诱导新生小鼠视网膜病变(oxygen-induced retinopathy,OIR)模型,观察视网膜血管新生情况,检测OIR病变过程中调控血管新生和氧应激相关基因表达的变化。方法新生小鼠出生后d 7,置75.5%高氧环境中饲养5 d,再返回正常氧环境继续... 目的建立氧诱导新生小鼠视网膜病变(oxygen-induced retinopathy,OIR)模型,观察视网膜血管新生情况,检测OIR病变过程中调控血管新生和氧应激相关基因表达的变化。方法新生小鼠出生后d 7,置75.5%高氧环境中饲养5 d,再返回正常氧环境继续饲养5 d,建立OIR模型。运用视网膜免疫荧光染色检测OIR小鼠视网膜中血管新生情况;运用Real-time PCR技术检测基因表达情况。结果视网膜免疫荧光染色结果显示,OIR小鼠视网膜在高氧诱导视网膜微血管消退的基础上,相对缺氧状态诱导出现明显的新生血管。Real-time PCR结果显示OIR模型小鼠视网膜中:血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)及其受体(VEGFR)家族中:VEGFA、VEGFD、VEGFR1、VEGFR2的基因表达分别上调1.73、1.71、1.48、1.80倍;血小板衍生生长因子(platelet-derived growth factor,PDGF)及其受体(PDGFR)家族中:PDGFA、PDGFB、PDGFRa、PDGFRb的基因表达分别上调1.29、1.71、1.42、1.42倍;基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)中的MMP2基因表达上调1.48倍;参与调控氧化应激的核转录因子Nrf2[nuclear factor(erythroid-derived 2)-like 2]及受其调控的下游基因包括谷氨酸-半胱氨酸连接酶(glutamatecysteine ligase,GCL)的催化(GCLC)和调节(GCLM)亚单位的基因表达均下调,表达量分别为正常的0.28、0.76、0.49。结论 OIR小鼠视网膜病变过程中,视网膜中促进血管新生相关基因表达上调,而抗氧化相关基因表达下调。 展开更多

关键词 氧诱导新生小鼠视网膜病变 视网膜 血管内皮细胞生长因子 血小板衍生生长因子 MMP2 Nrf2

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夜间光照对氧诱导的视网膜病变小鼠视网膜新生血管形成的影响 被引量：2

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作者 孙荣 陈长征 +3 位作者 邢怡桥 许玲 王玲丽 周霞 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期593-597,共5页

背景氧诱导的视网膜新生血管形成是多种视网膜血管性疾病的病理学基础，预防视网膜新生血管的形成可缓解视网膜病变对视网膜的损害程度。研究表明夜间睡眠时给予光照可能对早期糖尿病视网膜病变（DR）患者有利，但其对早产儿视网膜病变... 背景氧诱导的视网膜新生血管形成是多种视网膜血管性疾病的病理学基础，预防视网膜新生血管的形成可缓解视网膜病变对视网膜的损害程度。研究表明夜间睡眠时给予光照可能对早期糖尿病视网膜病变（DR）患者有利，但其对早产儿视网膜病变（ROP）患者视网膜新生血管有无影响报道较少。目的观察夜间光照对氧诱导视网膜病变（OIR）小鼠视网膜新生血管形成的影响。方法将64只SPF级新生C57BL／6J小鼠按随机数字表法随机分为正常对照组、单纯夜间光照组、OIR模型组、OIR联合夜间光照组，每组16只小鼠。正常对照组和单纯夜间光照组小鼠生长于正常空气（氧体积分数21％）；OIR模型组和OIR模型联合夜间光照组小鼠于出生后第7天置于高氧环境（75％±2％）生长，出生第12天调整氧体积分数为正常；OIR联合夜间光照组和单纯夜间光照组于出生后第12～17天给予夜间光照，光照度为100lx。各组小鼠均于出生后第17天摘除眼球，采用ADP酶法制备视网膜铺片，了解视网膜血管的改变情况；视网膜组织切片行苏木精一伊红染色并计数突破视网膜内界膜的新生血管内皮细胞核数；免疫组织化学法观察各组小鼠视网膜中血管内皮生长因子（VEGF）的表达，实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）法检测各组视网膜中VEGFmRNA的表达。实验动物的使用和喂养遵循ARVO声明。结果正常对照组和单纯夜间光照组小鼠视网膜血管形态均无明显差异。OIR模型组视网膜铺片显示视网膜中央部大片无血管区，大量结构异常的新生血管形成。与OIR模型组相比，OIR模型联合夜间光照组视网膜中央无血管区面积以及新生血管分布密度减少。在实验后第17天时，正常对照组和单纯夜间光照组视网膜新生血管内皮细胞核数分别为（0．97±0．83）个和（1．00±0．72）个，OIR模型组为（38．57±5．01）个，而OIR联合夜问光照组小鼠视网膜新生血管内皮细胞核数为（16．92±3．39）个，总体差异有统计学意义（F=78．767，P=0．000），OIR联合夜间光照组视网膜新生血管内皮细胞核数明显少于OIR模型组，差异有统计学意义（t=20．446，P〈O．01）。免疫组织化学法检测显示OIR模型联合夜间光照组中VEGF蛋白表达明显少于OIR模型组。正常对照组、单纯夜间光照组、OIR模型组和OIR联合夜间光照组小鼠视网膜VEGFmRNA相对表达量分别为1．00±0．00、0．94±0．07、2．08±0．50和1．43±0．21，各组间的总体差异有统计学意义（F=11．268，P=0．003），OIR模型联合夜间光照组表达较01R模型组下调，差异有统计学意义（t=20．163，P〈0．05）。结论夜间光照可减少OIR小鼠视网膜新生血管的形成。 展开更多

关键词 氧诱导视网膜病变 视网膜新生血管 光照

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多巴胺对氧诱导视网膜病变小鼠视网膜新生血管的影响 被引量：5

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作者 张凤一 高洪莲 +4 位作者 邱宇 崔钰莹 李童 王亚彤 张磊 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2023年第1期25-29,共5页

目的观察多巴胺(DA)及多巴胺D2受体(DRD2)在氧诱导视网膜病变(OIR)小鼠模型中对视网膜新生血管的作用。方法随机将180只小鼠分为空白组、OIR组、NaCl组、DA组、Quinpirole(DRD2激动剂)组、Spiperone(DRD2抑制剂)组,每组30只。空白组小... 目的观察多巴胺(DA)及多巴胺D2受体(DRD2)在氧诱导视网膜病变(OIR)小鼠模型中对视网膜新生血管的作用。方法随机将180只小鼠分为空白组、OIR组、NaCl组、DA组、Quinpirole(DRD2激动剂)组、Spiperone(DRD2抑制剂)组,每组30只。空白组小鼠在正常环境中饲养,其他各组小鼠在7 d龄时于高氧环境中饲养5 d,于小鼠12 d龄时返回正常环境中,OIR组不做药物干预,NaCl组、DA组、Quinpirole组分别于小鼠右眼玻璃体内注射8.5 g·L^(-1)NaCl、15 mmol·L^(-1)的DA溶液、602μmol·L^(-1)的Quinpirole溶液,Spiperone组小鼠右眼玻璃体内依次注射154μmol·L^(-1)的Spiperone溶液和15 mmol·L^(-1)的DA溶液各1μL。小鼠17 d龄时处死,摘取右侧眼球进行后续实验。采用苏木精-伊红(HE)染色和视网膜铺片检查各组小鼠视网膜新生血管情况;采用Q-PCR和Western blot检测各组小鼠视网膜中血管内皮生长因子(VEGF)mRNA和蛋白的相对表达量。结果OIR组小鼠视网膜中突破内界膜的血管内皮细胞核数、新生血管面积占比、VEGF mRNA和蛋白相对表达量均明显高于空白组(均为P<0.05);NaCl组和Spiperone组小鼠视网膜中突破内界膜的血管内皮细胞核数、新生血管面积占比、VEGF mRNA和蛋白相对表达量与OIR组相比差异均无统计学意义(均为P>0.05);与OIR组相比,DA组小鼠视网膜中突破内界膜的血管内皮细胞核数、新生血管面积占比、VEGF mRNA和蛋白相对表达量均降低(均为P<0.05);与DA组相比,Quinpirole组小鼠视网膜中突破内界膜的血管内皮细胞核数、新生血管面积占比、VEGF mRNA和VEGF蛋白相对表达量均降低(均为P<0.05)。结论DA可以通过激活DRD2途径来抑制VEGF的表达,从而减少OIR小鼠视网膜新生血管的产生。 展开更多

关键词 血管内皮生长因子 视网膜新生血管 多巴胺 氧诱导视网膜病变模型 小鼠

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α-黑素细胞刺激素抑制氧诱导视网膜病变小鼠视网膜新生血管的生成 被引量：2

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作者 杨千惠 张琰 +4 位作者 薄其玉 曹云山 杨伟 王飞 李筱荣 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期1072-1076,共5页

背景视网膜新生血管形成（RNV）可发生于多种眼病，导致视网膜出血甚至脱离，抑制病理性RNV已逐渐成为眼科疾病治疗中的重点。α-黑素细胞刺激素（α-MSH）对视网膜发育过程中的生理性血管生成有抑制作用，但其在病理性RNV方面的作用尚... 背景视网膜新生血管形成（RNV）可发生于多种眼病，导致视网膜出血甚至脱离，抑制病理性RNV已逐渐成为眼科疾病治疗中的重点。α-黑素细胞刺激素（α-MSH）对视网膜发育过程中的生理性血管生成有抑制作用，但其在病理性RNV方面的作用尚未见报道。目的以氧诱导视网膜病变（OIR）小鼠为模型，研究玻璃体腔注射不同质量浓度的α-MSH对病理性RNV的作用。方法选取健康清洁级7日龄C57BL／6J幼鼠40只，应用随机数字表法随机分为OIR＋0．33μg／μl α-MSH组、OIR＋1．67μg／μl α-MSH组、OIR＋3．30μg／μl α-MSH组、OIR组和正常对照组，每组8只。不同剂量α-MSH干预组和OIR组幼鼠在氧体积分数（75±2）％的高氧环境下饲养5d，然后在普通空气环境中饲养5d，正常对照组幼鼠则在普通空气环境中饲养10d。各组取17日龄鼠，球后静脉注射高相对分子质量异硫氰酸葡聚糖（FITC—dextran），制备视网膜铺片，观察视网膜的血管形态，计算无灌注区面积相对于整个视网膜的面积。对小鼠眼球行石蜡切片和苏木精-伊红染色，计数突破内界膜突入玻璃体腔的血管内皮细胞核数。结果视网膜铺片结果显示，正常对照组、OIR组、OIR＋0．33μg／μl α-MSH组、OIR＋1．67μg／μl α-MSH组和OIR＋3．30μg／μl α-MSH组视网膜无灌注区相对面积分别为（0．00±0．00）％、（23．01±3．39）％、（18．14±7．20）％、（15．64±7．07）％和（7．62±6．52）％，各组间视网膜无灌注区相对面积总体比较，差异有统计学意义（F=19．635，P〈0．05）；其中OIR组无灌注区相对面积显著高于OIR＋3．30μg／μl α-MSH组，差异有统计学意义（t=4．293，P〈0．01）。组织病理学检查结果显示，正常对照组、OIR组、OIR＋0．33μg／μl α-MSH组、OIR＋1．67μg／μl α-MSH组和OIR＋3．30μg／μl α-MSH组突入玻璃体腔的血管内皮细胞核数分别为（0．00±0．00）、（11．45±4．26）、（6．35±2．34）、（4．96±1．79）和（1．03±1．25）个。各组突人玻璃体腔的新生血管内皮细胞核数总体比较，差异有统计学意义（F=147．87，P〈0．05）；其中OIR组突入玻璃体腔新生血管内皮细胞核数显著高于OIR＋0．33μg／μl α-MSH组、OIR＋1．67μg／μl α-MSH组和OIR＋3．30μg／μl α-MSH组，差异均有统计学意义（均P〈0．001）。结论α-MSH可减少OIR小鼠模型视网膜中无灌注区的相对面积和视网膜新生血管核数，其对病理性RNV的抑制作用呈剂量依赖性。 展开更多

关键词 氧诱导视网膜病变 视网膜新生血管 Α-黑素细胞刺激素

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甲酰肽受体Fpr2在氧诱导视网膜病变小鼠新生血管形成中的作用及相关机制研究 被引量：1

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作者 薛盛丁 陈辉 +3 位作者 刘爽 朱蓉嵘 王诗逸 俞莹 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2021年第6期522-527,共6页

目的探讨甲酰肽受体Fpr2在氧诱导视网膜病变(OIR)小鼠中对胶质细胞改变的影响,并探讨其在新生血管形成中的作用及机制。方法将新生C57BL/6J小鼠、Fpr2^(-/-)小鼠分别诱导建立OIR模型后分为氧诱导组和Fpr2^(-/-)氧诱导组。正常对照组和Fp... 目的探讨甲酰肽受体Fpr2在氧诱导视网膜病变(OIR)小鼠中对胶质细胞改变的影响,并探讨其在新生血管形成中的作用及机制。方法将新生C57BL/6J小鼠、Fpr2^(-/-)小鼠分别诱导建立OIR模型后分为氧诱导组和Fpr2^(-/-)氧诱导组。正常对照组和Fpr2^(-/-)组小鼠正常环境饲养。收集各组小鼠视网膜组织并制作成冰冻切片,免疫荧光染色观察小鼠视网膜中波形蛋白(Vimentin)、神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和离子化钙结合适配分子1(IBA1)变化;实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测小鼠视网膜中炎症因子mRNA的表达;Western blot检测小鼠视网膜中细胞外调节蛋白激酶(ERK)和P38的蛋白磷酸化表达。免疫荧光染色法观察小鼠视网膜中新生血管和无灌注区情况。结果免疫荧光染色结果显示,与正常对照组相比,氧诱导组和Fpr2^(-/-)氧诱导组小鼠视网膜中Vimentin、GFAP、IBA1表达均明显增加,而与氧诱导组相比,Fpr2^(-/-)氧诱导组小鼠视网膜中Vimentin、GFAP、IBA1表达均降低(均为P<0.05)。RT-PCR检测结果显示,与Fpr2^(-/-)氧诱导组相比,氧诱导组小鼠视网膜中白细胞介素-1β(IL^(-1)β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)mRNA相对表达量均增加(均为P<0.05)。Western blot检测结果显示,与正常对照组相比,氧诱导组和Fpr2^(-/-)氧诱导组小鼠视网膜中p-ERK 1/2和p-P38蛋白相对表达量均增加,而与氧诱导组相比,Fpr2^(-/-)氧诱导组小鼠视网膜中p-ERK 1/2和p-P38蛋白相对表达量均减少(均为P<0.05)。与氧诱导组相比,Fpr2^(-/-)氧诱导组小鼠视网膜中新生血管形成和无灌注区面积均减少(均为P<0.05)。结论抑制Fpr2能够抑制OIR模型小鼠视网膜胶质细胞活化,下调炎症因子表达,减少视网膜新生血管形成和无灌注区面积,此过程中涉及ERK、P38信号通路的作用。 展开更多

关键词 甲酰肽受体 氧诱导视网膜病变 神经胶质细胞 视网膜新生血管

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Apelin及其受体和一氧化氮合酶在氧诱导的新生小鼠增生性视网膜病变中表达上调 被引量：5

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作者 伍蒙爱 陈婕灵 +6 位作者 王维 陈惠惠 刘园园 杨姗姗 胡良冈 范小芳 龚永生 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期1081-1085,共5页

目的:通过观察apelin及其受体APJ和一氧化氮合酶(NOS)在氧诱导的新生小鼠增生性视网膜病变中的表达,探讨apelin/APJ和一氧化氮(NO)是否参与了早产儿视网膜病变新生血管的发生。方法:36只7日龄C57BL/6J新生小鼠随机均分为高氧组和对照组... 目的:通过观察apelin及其受体APJ和一氧化氮合酶(NOS)在氧诱导的新生小鼠增生性视网膜病变中的表达,探讨apelin/APJ和一氧化氮(NO)是否参与了早产儿视网膜病变新生血管的发生。方法:36只7日龄C57BL/6J新生小鼠随机均分为高氧组和对照组。高氧组暴露在75%±2%的氧浓度下5 d后,在正常空气环境下饲养5 d;对照组小鼠在正常氧环境下饲养10 d。两组均在17日龄处死,取左眼眼球做石蜡切片,HE染色计数突破内界膜的血管内皮细胞核数,以判断造模是否成功。实时荧光定量PCR检测右眼视网膜组织apelin和APJmRNA的表达,免疫荧光组织化学法检测视网膜apelin、APJ、eNOS和iNOS蛋白的表达。结果:高氧组视网膜平均每个切面突破内界膜的血管内皮细胞核数(35.13±10.13)明显高于对照组(0.30±0.21,P<0.01),说明造模成功。高氧组apelin和APJ mRNA水平显著高于对照组,分别为对照组的32.2倍和17.6倍(均P<0.01)。组织免疫荧光结果显示高氧组apelin和APJ蛋白表达明显强于对照组,并且主要强表达于新生血管周围;高氧组eNOS和iNOS蛋白表达明显强于对照组,但主要强表达于新生血管下方视网膜组织,在突破内界膜的血管内皮细胞核周围未见表达明显增强。结论:Apelin/APJ及NOS可能与氧诱导的新生小鼠增生性视网膜病变新生血管的发生有关。 展开更多

关键词 APELIN 视网膜 新生血管形成 氧诱导的视网膜病变 早产儿视网膜病变

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高氧诱导小鼠视网膜新生血管模型中肾素(原)受体表达及意义的研究 被引量：2

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作者 程钧 董晓光 +2 位作者 谢立信 万磊 王晔 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2010年第10期918-923,共6页

目的探讨高氧诱导小鼠视网膜新生血管形成过程中肾素(原)受体[(pro)renin receptor,PRR]的表达和意义。方法将新生C57BL/6J小鼠随机分为2组:(1)对照组:正常氧环境中饲养;(2)实验组:高氧诱导小鼠缺氧性视网膜新生血管动物模型。待出生后... 目的探讨高氧诱导小鼠视网膜新生血管形成过程中肾素(原)受体[(pro)renin receptor,PRR]的表达和意义。方法将新生C57BL/6J小鼠随机分为2组:(1)对照组:正常氧环境中饲养;(2)实验组:高氧诱导小鼠缺氧性视网膜新生血管动物模型。待出生后第12天、第13天、第17天、第21天、第30天分别处死小鼠,通过视网膜血管灌注造影、铺片和HE染色观察视网膜新生血管的发生、发展及转归,通过RT-PCR和免疫印迹法检测不同时间点视网膜PRR mRNA和蛋白表达水平,并应用免疫组织化学染色检测小鼠视网膜中PRR的表达部位。结果 RT-PCR及免疫印迹法检测结果显示不同组别的PRR mRNA及蛋白表达水平差异均有显著统计学意义(F=43.324,P=0.000;F=20.235,P=0.000),不同时间点间PRR mRNA和蛋白表达差异也均有显著统计学意义(F=14.071,P=0.000;F=12.236,P=0.000)。实验组小鼠视网膜PRR的表达水平呈先升高后下降的趋势,于新生血管生长最多的第17天达高峰,第13天、第17天、第21天的PRR mRNA灰度比值分别为1.08±0.18、1.14±0.19、0.97±0.27,显著高于对照组的0.64±0.10、0.65±0.09、0.65±0.09(P=0.000、0.000、0.008);第17天、第21天、第30天的PRR蛋白灰度比值分别为1.25±0.17、1.02±0.11、0.92±0.15,显著高于对照组的0.73±0.12、0.76±0.10、0.73±0.16(P=0.000、0.003、0.031),其表达变化与视网膜新生血管的发生、发展及严重程度关系密切。免疫组织化学染色结果显示2组PRR均表达于视网膜微血管壁,实验组较对照组表达增多。结论在小鼠视网膜新生血管形成过程中,PRR发挥着重要作用,靶向抑制PRR的上调,可能是治疗威胁视力的增殖性视网膜病变的新方法。 展开更多

关键词 高氧诱导 小鼠 视网膜新生血管 肾素(原)受体 肾素-血管紧张素系统

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核转录因子-κB在氧诱导血管增殖性视网膜病变小鼠中的表达 被引量：4

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作者 刘昳 袁进 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2014年第12期1101-1104,共4页

目的探讨氧诱导血管增殖性视网膜病变小鼠视网膜中核转录因子(nuclear factor,NF)-κB蛋白的表达变化及意义。方法 72只出生后7 d的C57BL/6J小鼠随机分为实验组(36只)和对照组(36只),实验组与母鼠一起放入氧气含量为体积分数75%的饲养... 目的探讨氧诱导血管增殖性视网膜病变小鼠视网膜中核转录因子(nuclear factor,NF)-κB蛋白的表达变化及意义。方法 72只出生后7 d的C57BL/6J小鼠随机分为实验组(36只)和对照组(36只),实验组与母鼠一起放入氧气含量为体积分数75%的饲养箱中饲养,出生后12 d回到正常大气环境中;对照组小鼠始终在正常大气环境中饲养。分别于出生后12 d、14 d、17 d时处死小鼠,荧光素灌注后行视网膜铺片观察血管分布及形态,Western blot法检测视网膜中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的蛋白表达变化,免疫组织化学染色检测眼球中NF-κB的表达变化。结果视网膜铺片检查结果可见,实验组小鼠出生后14 d开始出现视网膜新生血管,面积为每眼(0.06±0.12)mm2;生后17 d达到高峰,面积为每眼(1.79±0.02)mm2(χ2=20.112,P<0.01)。Western blot检测结果显示,实验组VEGF表达不断增强,在生后17 d时表达达到高峰,为0.83±0.05。免疫组织化学染色结果显示,实验组生后12 d NF-κB阳性细胞计数为(12.32±1.04)个·mm-2,14 d时为(19.16±1.02)个·mm-2,生后17 d阳性表达较12 d和14 d时均高,为(28.60±0.52)个·mm-2(χ2=13.102,P<0.05;χ2=20.132,P<0.01)。结论 NF-κB在氧诱导血管增殖性视网膜病变小鼠视网膜中表达明显升高,其趋势与VEGF的变化相同,NF-κB参与了缺氧状态下视网膜新生血管形成的调控过程。 展开更多

关键词 核转录因子-ΚB 氧诱导 视网膜新生血管 血管内皮生长因子 鼠

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巨噬细胞在小鼠氧诱导视网膜新生血管形成中的作用 被引量：4

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作者 高翔 王雨生 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2015年第3期201-204,共4页

目的探讨巨噬细胞对小鼠氧诱导视网膜病变(oxygen-induced retinopathy,OIR)形成的影响。方法将新生C57BL/6J小鼠随机分为3组,分别为常氧对照组、OIR模型组以及清除巨噬细胞的OIR组。将后两组小鼠于生后第7天(P7)至P12置于体积分数(75&#... 目的探讨巨噬细胞对小鼠氧诱导视网膜病变(oxygen-induced retinopathy,OIR)形成的影响。方法将新生C57BL/6J小鼠随机分为3组,分别为常氧对照组、OIR模型组以及清除巨噬细胞的OIR组。将后两组小鼠于生后第7天(P7)至P12置于体积分数(75±2)%高氧氧箱中以诱导OIR。清除巨噬细胞的OIR组小鼠于P9、P11、P13和P15接受腹腔注射氯膦酸二钠脂质体4次以清除全身单核-巨噬细胞,OIR模型组小鼠则于上述4个时间点接受腹腔注射PBS脂质体。三组小鼠均于P17时取右眼行视网膜铺片和Lectin染色,观察视网膜出血及血管生长情况;取左眼行视网膜切片和HE染色,观察视网膜组织病理学变化。结果与常氧对照组相比,OIR模型组小鼠视网膜存在出血现象,清除巨噬细胞的OIR组出血有所减轻。OIR模型组小鼠视网膜血管形态呈异常增殖的团簇状,走行迂曲,而清除巨噬细胞的OIR组小鼠视网膜新生血管异常形态减轻。与OIR模型组相比,清除巨噬细胞的OIR小鼠视网膜无血管区及新生血管区面积均显著减小[(17.19±0.58)%、(10.38±0.53)%,ta=8.680,P<0.01;(4.60±0.15)%、(2.51±0.13)%,tn=10.83,P<0.01],突破内界膜新生血管内皮细胞核数目明显减少(18.50±0.85、7.17±0.48;t=11.66,P<0.01)。结论清除巨噬细胞可减轻小鼠OIR严重程度,提示巨噬细胞对视网膜新生血管形成具有促进作用。 展开更多

关键词 巨噬细胞 视网膜新生血管 氧诱导视网膜病变

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缺氧诱导因子-1α和环氧合酶-2在视网膜新生血管中的表达及意义 被引量：1

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作者 刘宁宁 孙晓楠 +1 位作者 柳力敏 陈蕾 《眼科新进展》 CAS 2006年第6期422-424,共3页

目的探讨缺氧诱导因子-1α(hypoxia-induciblefactor-1α,HIF-1α)和环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)在视网膜新生血管中的表达和意义。方法以高浓度氧诱导C57BL/6J小鼠建立视网膜新生血管模型。取对照组和给氧组幼鼠眼球作荧光素... 目的探讨缺氧诱导因子-1α(hypoxia-induciblefactor-1α,HIF-1α)和环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)在视网膜新生血管中的表达和意义。方法以高浓度氧诱导C57BL/6J小鼠建立视网膜新生血管模型。取对照组和给氧组幼鼠眼球作荧光素血管灌注、病理切片及免疫组织化学检测,分别观察视网膜血管的改变、视网膜新生血管内皮细胞数目及HIF-1α、COX-2蛋白的表达。结果给氧组视网膜可见大量新生血管形成,新生血管内皮细胞核数为(23.38±1.07)个,与对照组相比差异有极显著性(P<0.001)。HIF-1α蛋白表达在神经节细胞层和突破视网膜内界膜的新生血管,COX-2蛋白表达在内核层、神经节细胞层和突破视网膜内界膜的新生血管,二者表达呈显著正相关(r=0·363,P<0.01)。结论在视网膜新生血管形成中存在HIF-1α、COX-2的高表达,且二者表达密切相关。 展开更多

关键词 视网膜新生血管 缺氧诱导因子-1Α 环氧合酶-2

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氧诱导视网膜新生血管模型中基质细胞衍生因子1的表达及机制研究 被引量：1

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作者 袁非 陈向武 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期139-144,共6页

目的:观察基质细胞衍生因子1(SDF-1)在氧诱导视网膜新生血管(OIR)模型中的表达情况,并初步研究其在OIR模型中的促新生血管生长机制。方法:30只C57BL/6J新生小鼠随机分为2组。其中15只小鼠置于氧浓度为75%的容器内饲养5 d,再转移至正常... 目的:观察基质细胞衍生因子1(SDF-1)在氧诱导视网膜新生血管(OIR)模型中的表达情况,并初步研究其在OIR模型中的促新生血管生长机制。方法:30只C57BL/6J新生小鼠随机分为2组。其中15只小鼠置于氧浓度为75%的容器内饲养5 d,再转移至正常空气下饲养5 d,作为高氧诱导组;另15只小鼠一直在正常空气中饲养,作为正常对照组。免疫组织化学方法检测视网膜SDF-1、CD14蛋白的定位及含量,real-time PCR法检测视网膜SDF-1 mRNA的表达。结果:与正常对照组相比,高氧诱导组突破视网膜内界膜的内皮细胞核数目明显增多(P<0.01),血管分支减少,大血管扩张、迂曲。两组小鼠视网膜神经上皮均可见SDF-1和CD14阳性染色,但高氧诱导组的SDF-1和CD14含量明显高于正常对照组(均P<0.01)。并且视网膜SDF-1与CD14的蛋白含量存在正相关(r=0.898,P<0.01)。视网膜SDF-1 mRNA表达在高氧诱导组也明显高于正常对照组(P<0.01)。结论:OIR模型小鼠视网膜SDF-1表达增高,其促新生血管功能可能与CD14+细胞有关。 展开更多

关键词 模型 氧诱导视网膜新生血管 基质细胞衍生因子1 CD14

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毛花甙丙抑制氧诱导乳鼠视网膜新生血管的实验研究

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作者 张景尚 安莹 +4 位作者 王进达 李晓霞 李婧 熊瑛 万修华 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2016年第7期612-614,共3页

目的探讨毛花甙丙对乳鼠氧诱导视网膜病变模型中视网膜新生血管的抑制作用。方法将20只生后第7天的C57乳鼠经体积分数75%±1%的氧诱导5 d后,分别给予左眼玻璃体内注射0.50μg(10眼)和0.10μg(10眼)毛花甙丙注射液,右眼注射相同剂量... 目的探讨毛花甙丙对乳鼠氧诱导视网膜病变模型中视网膜新生血管的抑制作用。方法将20只生后第7天的C57乳鼠经体积分数75%±1%的氧诱导5 d后,分别给予左眼玻璃体内注射0.50μg(10眼)和0.10μg(10眼)毛花甙丙注射液,右眼注射相同剂量的磷酸盐缓冲液做对照,在生后第17天时进行视网膜铺片染色,计算视网膜新生血管面积和视网膜无灌注区面积,双眼间做配对样本t检验。结果给予0.05μg和0.10μg毛花甙丙玻璃体内注射后视网膜新生血管的面积分别为(1.09±0.32)mm^2和(0.92±0.40)mm^2,明显低于对照眼的(1.84±0.59)mm^2和(2.03±0.35)mm^2(均为P<0.05);0.05μg、0.10μg毛花甙丙注射后视网膜无灌注区面积分别为(1.40±0.44)mm^2和(1.07±0.40)mm^2,明显低于对照眼的(2.00±0.65)mm^2和(1.83±0.46)mm^2(均为P<0.05)。同时0.10μg毛花甙丙治疗效果优于0.05μg。结论毛花甙丙对氧诱导视网膜病变乳鼠模型中视网膜新生血管的生长具有抑制作用,同时还能促进视网膜无灌注区的修复。 展开更多

关键词 毛花甙丙 氧诱导视网膜病变 视网膜病新生血管 鼠

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改良的可定量氧诱导法建立视网膜新生血管小鼠模型 被引量：8

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作者 潘琪琦 周容 刘晓铃 《眼科研究》 CSCD 北大核心 2008年第7期486-489,共4页

目的建立简单的、成模效率高的可定量氧诱导视网膜新生血管C57BL/6小鼠模型。方法89只C57BL/6乳鼠随机分为3组,分别用传统法和两种改良法建立模型,12只作为正常对照组。比较各组母鼠死亡率、乳鼠存活率和成模率。随机取1只眼行视网膜石... 目的建立简单的、成模效率高的可定量氧诱导视网膜新生血管C57BL/6小鼠模型。方法89只C57BL/6乳鼠随机分为3组,分别用传统法和两种改良法建立模型,12只作为正常对照组。比较各组母鼠死亡率、乳鼠存活率和成模率。随机取1只眼行视网膜石蜡切片苏木精-伊红染色,另1只眼行ADP酶法视网膜铺片,进行染色观察和定量分析。结果与传统法相比,两种改良法母鼠死亡率低,乳鼠存活率和成模率较高。改良Ⅰ组视网膜平均每张切片突破内界膜增生细胞数和无灌注区相对面积比其他两组明显增多,差异有统计学意义(P<0.05)。改良Ⅱ组与改良Ⅰ组比较,乳鼠存活率高,细胞增生和无灌注区明显且程度适中。结论两种改良法简单、稳定且高效,均能构建典型的可定量氧诱导视网膜新生血管模型,改良法Ⅱ是适合视网膜新生血管发生机制及药物干预研究的一种方法。 展开更多

关键词 氧诱导的视网膜病变 动物模型 新生血管 视网膜

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Arresten在氧诱导小鼠视网膜新生血管形成中的抑制作用及机制 被引量：1

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作者 陈珊珊 杨中伊 +2 位作者 李姝蓉 刘桥生 付书华 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2018年第12期1105-1108,共4页

目的探讨Arresten在氧诱导小鼠视网膜新生血管形成中的抑制作用及机制。方法选取48只出生后7 d健康清洁级C57BL/6J幼鼠,随机分为氧诱导视网膜病变(oxygen induced retinopathy,OIR)组、OIR+Arresten组和常氧组,每组16只。OIR+Arresten组... 目的探讨Arresten在氧诱导小鼠视网膜新生血管形成中的抑制作用及机制。方法选取48只出生后7 d健康清洁级C57BL/6J幼鼠,随机分为氧诱导视网膜病变(oxygen induced retinopathy,OIR)组、OIR+Arresten组和常氧组,每组16只。OIR+Arresten组及OIR组幼鼠在体积分数为(75±2)%的高氧环境下饲养5 d,然后转移至正常氧气环境中饲养5 d,其中OIR+Arresten组幼鼠于高氧饲养刚结束时,给予双眼玻璃体内注射Arresten蛋白。常氧组幼鼠则在常规氧气环境中连续饲养10 d。在鼠龄17 d时,各组取6只幼鼠经股静脉注射异硫氰酸葡聚糖溶液处死并摘出眼球,视网膜铺片后观察视网膜的血管形态、计算无灌注区面积。同时对小鼠眼球视网膜行石蜡切片和HE染色,计算侵入氉玻璃体内血管内皮细胞核的数量。同时,通过细胞培养实验,利用MTT法检测Arresten蛋白对人血管内皮细胞增殖的抑制作用。结果视网膜铺片结果显示,常氧组、OIR组、OIR+Arresten组视网膜无灌注区相对面积分别为(2. 35±1. 62)%、(57. 28±9. 36)%和(20. 38±8. 69)%,三组间总体比较,差异有统计学意义(F=18.732,P <0.05),且OIR组无灌注区相对面积显著高于OIR+Arresten组,差异有统计学意义(P <0. 05)。常氧组小鼠视网膜的内界膜结构仍保持平滑完整,未发现有新生血管侵入玻璃体内。OIR组和OIR+Arresten组每张切片上血管内皮细胞核的数量分别为(15. 18±4. 83)个、(7. 33±3. 88)个,其中OIR+Arresten组侵入玻璃体内新生血管内皮细胞核的数量显著低于OIR组,差异有统计学意义(P <0.05)。Arresten蛋白对人脐静脉内皮细胞增殖的抑制率随着其浓度的升高而增加,但当Arresten蛋白浓度达到1000μg·L^(-1)时,人脐静脉内皮细胞的增殖抑制率达到顶峰,为(58. 00±0. 65)%。结论 Arresten蛋白能够抑制氧诱导的小鼠视网膜新生血管形成,通过抑制血管内皮细胞增殖来抑制新生血管形成。 展开更多

关键词 ARRESTEN 氧诱导视网膜病变 视网膜新生血管

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Dll4、Notch1在大鼠氧诱导性视网膜病变模型中的表达 被引量：2

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作者 史少阳 张媛 +2 位作者 李迅 裴存文 陈晓隆 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2013年第10期938-941,共4页

目的观察Dll4、Notch1在大鼠氧诱导性视网膜病变(oxygen induced retinopathy,OIR)模型中的表达情况,探讨其在视网膜新生血管形成过程中的作用。方法取70只出生5 d的SD大鼠随机分为实验组和对照组。实验组大鼠35只置于体积分数80%高氧环... 目的观察Dll4、Notch1在大鼠氧诱导性视网膜病变(oxygen induced retinopathy,OIR)模型中的表达情况,探讨其在视网膜新生血管形成过程中的作用。方法取70只出生5 d的SD大鼠随机分为实验组和对照组。实验组大鼠35只置于体积分数80%高氧环境7 d建立OIR模型,对照组35只大鼠置于正常空气中。两组大鼠分别于生后第12天和第17天取材,通过ADP酶视网膜铺片、HE染色视网膜切片观察实验组与对照组视网膜血管形态及新生血管生长情况,应用Western blot和RTPCR的方法检测Dll4、Notch1蛋白及其mRNA的表达水平。结果苏木精-伊红染色视网膜切片可见,实验组大鼠视网膜新生血管数量及突破内界膜的血管内皮细胞数量较对照组显著增多;对照组每眼突破内界膜的血管内皮细胞核数为0.10±0.32,实验组为32.30±4.85,两组差异有统计学意义(P=0.000)。ADP酶视网膜铺片显示,在OIR造模后12 d中,大鼠视网膜血管普遍收缩闭塞,视网膜后极部及中周部出现大片无血管区;17 d时,后极部视网膜血管扩张、迂曲,在视网膜周边部存在无血管区,在有血管区和无血管区的交界处可见新生血管簇形成。实验组Dll4、Notch1蛋白及其mRNA在造模后12 d大鼠视网膜中表达降低,而在17 d时表达增高,实验组12 d与17 d之间,以及实验组与对照组同时间点之间比较差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论 Dll4-Notch1信号途径在视网膜新生血管形成的过程中可能具有潜在功能。 展开更多

关键词 D114 NOTCH1 氧诱导性视网膜病变 视网膜新生血管 大鼠

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