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基于Nrf2信号通路探讨桃叶珊瑚苷对神经元氧糖剥夺再复氧损伤的保护作用
1
作者
杨芳
庞洋
+2 位作者
刘宝贵
孙锋
廉秋芳
《山西医科大学学报》
CAS
2023年第7期963-971,共9页
目的 探讨桃叶珊瑚苷(Aucubin,AU)对氧糖剥夺再复氧(oxygen-glucose deprivation/reoxygenation,OGD/R)诱导神经元损伤的影响和分子调控机制。方法 采用小鼠海马神经元细胞HT22构建OGD/R模型。HT22神经元细胞分为常氧组、OGD/R组、OGD/R...
目的 探讨桃叶珊瑚苷(Aucubin,AU)对氧糖剥夺再复氧(oxygen-glucose deprivation/reoxygenation,OGD/R)诱导神经元损伤的影响和分子调控机制。方法 采用小鼠海马神经元细胞HT22构建OGD/R模型。HT22神经元细胞分为常氧组、OGD/R组、OGD/R+50μmol/L AU组和OGD/R+100μmol/L AU组。采用Calcein AM细胞活性试剂盒检测神经元存活率。采用原位缺口末端标记(TdT-mediated dUTP nick-end labeling,TUNEL)实验检测神经元凋亡。采用活性氧(reactive oxygen species,ROS)试剂盒检测ROS水平。采用Western blot检测Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2-associated X protein,Bax)、B细胞淋巴瘤因子2(B-cell leukemia/lymphoma 2,Bcl-2)、核转录因子E2相关因子2(nuclear factor-erythroid 2-related factor 2,Nrf2)、醌氧化还原酶1(quinone oxidoreductase 1,Nqo-1)和血红素加氧酶1(heme oxygenase 1,Hmox-1)的蛋白表达水平。采用荧光素酶报告基因实验检测Nrf2的转录活性。采用Nrf2抑制剂ML385验证AU是否通过激活Nrf2通路减轻OGD/R神经元损伤。将HT22神经元细胞分为常氧组、OGD/R组、OGD/R+100μmol/L AU组和OGD/R+100μmol/L AU+5μmol/L ML385组,采用荧光素酶报告基因实验检测Nrf2的转录活性,采用TUNEL实验检测神经元凋亡,采用ROS试剂盒检测ROS水平。结果 与常氧组比较,OGD/R组神经元存活率显著降低,凋亡神经元数量显著增加,Bcl-2蛋白表达显著下调,Bax蛋白表达显著上调,ROS水平显著升高(均P<0.01)。与OGD/R组比较,OGD/R+50μmol/L AU组和OGD/R+100μmol/L AU组神经元存活率显著提高,凋亡神经元数量显著减少,Bcl-2蛋白表达显著上调,Bax蛋白表达显著下调,ROS水平显著降低(均P<0.05)。与常氧组比较,OGD/R组Nrf2转录活性显著提高,Nrf2、Nqo-1和Hmox-1的蛋白表达水平显著增加(均P<0.05)。与OGD/R组比较,OGD/R+50μmol/L AU组和OGD/R+100μmol/L AU组Nrf2转录活性提高,Nrf2、Nqo-1和Hmox-1的蛋白表达水平增加(均P<0.05)。与OGD/R+100μmol/L AU组比较,OGD/R+100μmol/L AU+5μmol/L ML385组Nrf2转录活性显著降低,凋亡神经元数量显著增加,ROS水平显著升高(均P<0.01)。结论 AU通过激活Nrf2信号通路减轻OGD/R诱导的神经元损伤。
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关键词
神经元
氧糖剥夺再复氧
桃叶珊瑚苷
脑缺血
再
灌注损伤
NRF2
氧
化应激
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职称材料
题名
基于Nrf2信号通路探讨桃叶珊瑚苷对神经元氧糖剥夺再复氧损伤的保护作用
1
作者
杨芳
庞洋
刘宝贵
孙锋
廉秋芳
机构
延安大学咸阳医院药学部
延安大学咸阳医院科研处
延安大学咸阳医院心内科
出处
《山西医科大学学报》
CAS
2023年第7期963-971,共9页
基金
咸阳市重点研发计划项目(L2022ZDYFSF076)
陕西省重点研发计划项目(2021SF-396)
+1 种基金
陕西省中医药科研项目(2021-ZZ-JC042)
陕西省中医药管理局市级中医医院科研能力提升项目(SZY-NLTL-2022-011)。
文摘
目的 探讨桃叶珊瑚苷(Aucubin,AU)对氧糖剥夺再复氧(oxygen-glucose deprivation/reoxygenation,OGD/R)诱导神经元损伤的影响和分子调控机制。方法 采用小鼠海马神经元细胞HT22构建OGD/R模型。HT22神经元细胞分为常氧组、OGD/R组、OGD/R+50μmol/L AU组和OGD/R+100μmol/L AU组。采用Calcein AM细胞活性试剂盒检测神经元存活率。采用原位缺口末端标记(TdT-mediated dUTP nick-end labeling,TUNEL)实验检测神经元凋亡。采用活性氧(reactive oxygen species,ROS)试剂盒检测ROS水平。采用Western blot检测Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2-associated X protein,Bax)、B细胞淋巴瘤因子2(B-cell leukemia/lymphoma 2,Bcl-2)、核转录因子E2相关因子2(nuclear factor-erythroid 2-related factor 2,Nrf2)、醌氧化还原酶1(quinone oxidoreductase 1,Nqo-1)和血红素加氧酶1(heme oxygenase 1,Hmox-1)的蛋白表达水平。采用荧光素酶报告基因实验检测Nrf2的转录活性。采用Nrf2抑制剂ML385验证AU是否通过激活Nrf2通路减轻OGD/R神经元损伤。将HT22神经元细胞分为常氧组、OGD/R组、OGD/R+100μmol/L AU组和OGD/R+100μmol/L AU+5μmol/L ML385组,采用荧光素酶报告基因实验检测Nrf2的转录活性,采用TUNEL实验检测神经元凋亡,采用ROS试剂盒检测ROS水平。结果 与常氧组比较,OGD/R组神经元存活率显著降低,凋亡神经元数量显著增加,Bcl-2蛋白表达显著下调,Bax蛋白表达显著上调,ROS水平显著升高(均P<0.01)。与OGD/R组比较,OGD/R+50μmol/L AU组和OGD/R+100μmol/L AU组神经元存活率显著提高,凋亡神经元数量显著减少,Bcl-2蛋白表达显著上调,Bax蛋白表达显著下调,ROS水平显著降低(均P<0.05)。与常氧组比较,OGD/R组Nrf2转录活性显著提高,Nrf2、Nqo-1和Hmox-1的蛋白表达水平显著增加(均P<0.05)。与OGD/R组比较,OGD/R+50μmol/L AU组和OGD/R+100μmol/L AU组Nrf2转录活性提高,Nrf2、Nqo-1和Hmox-1的蛋白表达水平增加(均P<0.05)。与OGD/R+100μmol/L AU组比较,OGD/R+100μmol/L AU+5μmol/L ML385组Nrf2转录活性显著降低,凋亡神经元数量显著增加,ROS水平显著升高(均P<0.01)。结论 AU通过激活Nrf2信号通路减轻OGD/R诱导的神经元损伤。
关键词
神经元
氧糖剥夺再复氧
桃叶珊瑚苷
脑缺血
再
灌注损伤
NRF2
氧
化应激
Keywords
neuron
oxygen-glucose deprivation/reoxygenation
Aucubin
cerebral ischemia/reperfusion injury
Nrf2
oxidative stress
分类号
R363 [医药卫生—病理学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
基于Nrf2信号通路探讨桃叶珊瑚苷对神经元氧糖剥夺再复氧损伤的保护作用
杨芳
庞洋
刘宝贵
孙锋
廉秋芳
《山西医科大学学报》
CAS
2023
0
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