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发芽粟米活性肽减轻铜诱导秀丽隐杆线虫氧化损伤及其分子机制
1
作者 张惠琪 陈晓 +5 位作者 金雪玲 黎晶晶 袁娟丽 高金燕 陈红兵 武涌 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2025年第1期384-393,共10页
目的:以秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans,C.elegans)为模型,探究发芽粟米活性肽(Germinated foxtail millet bioactive peptides,GRBPs)对铜诱导的体内氧化损伤的缓解作用和相关机制。方法:将野生型N2秀丽隐杆线虫随机分为对照组、... 目的:以秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans,C.elegans)为模型,探究发芽粟米活性肽(Germinated foxtail millet bioactive peptides,GRBPs)对铜诱导的体内氧化损伤的缓解作用和相关机制。方法:将野生型N2秀丽隐杆线虫随机分为对照组、GRBPs组,观察喂食GRBPs对线虫接受铜刺激后运动能力和存活率的影响;通过检测活性氧(Reactive oxygen species,ROS)、谷胱甘肽(Glutathione,GSH)、过氧化氢酶(Catalase,CAT)和超氧化物歧化酶(Superoxide disumutase,SOD)活性,评估GRBPs对铜诱导线虫氧化损伤的影响;进一步,通过基因组及转录组测序技术(RNA-seq)以及非靶向代谢组学分析,探讨GRBPs的作用机制。最后对抗氧化相关基因进行逆转录和实时定量PCR(qPCR)验证。结果:GRBPs可明显提高铜刺激后线虫的存活率和运动能力;1 mg/mL浓度的GRBPs可极显著降低丙二醛(Malondialdehyde,MDA)含量(P<0.0001),增加CAT和SOD活性,同时调节特定基因(如ctl-1、ctl-2的上调和sod-1、sod-2的下调)的表达量。在基因水平上,GRBPs对线虫的影响主要是调控编码角质层结构成分和活性以及细胞色素酶P450的相关基因表达;在代谢水平上,GRBPs对线虫的影响主要是调控植物次生代谢产物的含量。结论:发芽粟米活性肽可以有效减轻铜诱导的氧化损伤,其作用机制可能是通过提高抗氧化酶活性、降低角质层和细胞色素酶P450相关基因表达和调节植物次生代谢产物的含量来实现。 展开更多
关键词 发芽粟米活性肽 秀丽隐杆线虫 铜诱导 氧化损伤
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异丹叶大黄素缓解IPEC-J2细胞氧化损伤的效果研究
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作者 朱龙龙 蔡龙 +3 位作者 刘泽青 宋妍辰 吴秋珏 王晶 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第6期2865-2873,共9页
【目的】探究异丹叶大黄素(isorhapontigenin,ISO)对猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)氧化损伤的缓解作用,为ISO作为一种抗氧化剂在动物生产中应用提供理论参考。【方法】使用过氧化氢(H_(2)O_(2))处理IPEC-J2细胞构建氧化应激模型,通过细胞存... 【目的】探究异丹叶大黄素(isorhapontigenin,ISO)对猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)氧化损伤的缓解作用,为ISO作为一种抗氧化剂在动物生产中应用提供理论参考。【方法】使用过氧化氢(H_(2)O_(2))处理IPEC-J2细胞构建氧化应激模型,通过细胞存活率筛选出ISO缓解IPEC-J2细胞氧化损伤的最佳浓度;采用相应试剂盒测定细胞中丙二醛(MDA)、活性氧(ROS)、8-羟基脱氧鸟苷(8-OHDG)含量及过氧化氢酶(CAT)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性和总抗氧化能力(T-AOC);通过实时荧光定量PCR检测IPEC-J2细胞中抗氧化酶基因(SOD-1、CAT、GSH-Px、HO-1和NQO-1)、炎症相关基因(IL-1β、IL-12和TNF-α)及宿主防御肽基因(pBD1、pBD2和pBD3)的相对表达量。【结果】与H_(2)O_(2)组相比,用5、20、40μmol/L ISO预处理细胞24 h后细胞存活率显著或极显著提高(P<0.05;P<0.01),其中20μmol/L ISO缓解效果最好。与H_(2)O_(2)组相比,ISO预处理可显著或极显著降低IPEC-J2细胞MDA、ROS和8-OHDG水平(P<0.05;P<0.01);极显著提高GSH-Px、SOD1、CAT和NQO-1基因相对表达量及CAT活性(P<0.01)。与H_(2)O_(2)组相比,ISO预处理可降低IL-1β和IL-12基因相对表达量(P<0.05;P<0.01),提高pBD1、pBD2和pBD3基因相对表达量(P<0.05;P<0.01)。【结论】ISO可减少细胞中应激产物的生成,提高抗氧化酶基因的表达和抗氧化酶活性,并调节炎症相关基因的表达,从而缓解H_(2)O_(2)引起的IPEC-J2细胞氧化损伤。本试验条件下,推荐ISO浓度为20μmol/L。 展开更多
关键词 异丹叶大黄素 氧化损伤 抗氧化 IPEC-J2细胞
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芍药汤提取物抗氧化活性分析及对H_(2)O_(2)诱导的Caco-2细胞氧化损伤的保护作用
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作者 韩罗霞 纪鹏 +4 位作者 买占海 张亚辉 杨蓉 华永丽 魏彦明 《动物医学进展》 北大核心 2025年第4期15-21,共7页
研究芍药汤(Shaoyao decoction,SYD)的抗氧化活性以及对H_(2)O_(2)诱导的人克隆结肠腺癌(Caco-2)细胞氧化损伤的保护作用。通过DPPH、ABTS、羟自由基清除试验以及FRAP法评价SYD提取物的体外抗氧化活力;筛选SYD对Caco-2细胞的无毒范围,... 研究芍药汤(Shaoyao decoction,SYD)的抗氧化活性以及对H_(2)O_(2)诱导的人克隆结肠腺癌(Caco-2)细胞氧化损伤的保护作用。通过DPPH、ABTS、羟自由基清除试验以及FRAP法评价SYD提取物的体外抗氧化活力;筛选SYD对Caco-2细胞的无毒范围,并建立H_(2)O_(2)诱导的Caco-2细胞氧化损伤模型,检测SYD对氧化损伤细胞活力以及氧化应激指标的影响,评价SYD对Caco-2细胞氧化损伤的保护作用。结果显示,在一定范围内,SYD对DPPH、ABTS、羟自由基的清除能力以及对Fe^(3+)还原能力随浓度的升高而升高,EC_(50)分别为2.953μg/mL、1.492μg/mL和10.360μg/mL。SYD能显著提高H_(2)O_(2)诱导的氧化损伤Caco-2细胞活力,并显著抑制氧化损伤细胞NO的升高,增强SOD活力以及GSH的含量。结果表明SYD具有良好的抗氧化活性,能够有效缓解H_(2)O_(2)导致的Caco-2细胞氧化损伤。 展开更多
关键词 芍药汤 抗氧化活性 人克隆结肠腺癌细胞 氧化损伤
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丹参衍生的外泌体样纳米颗粒通过PI3K/Akt/eNOS信号通路减轻血管内皮细胞氧化损伤
4
作者 胡晓咏 杨朝颖 +4 位作者 宋乾华 吕忠英 唐瑞 王欢 李红建 《中国病理生理杂志》 北大核心 2025年第10期1892-1899,共8页
目的:本研究旨在探讨丹参衍生的外泌体样纳米颗粒(DDN)通过激活磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(PKB/Akt)/内皮型一氧化氮合酶(eNOS)信号通路减轻血管内皮细胞氧化损伤的机制。方法:通过透射电镜和动态光散射表征DDN。利用荧光显微镜... 目的:本研究旨在探讨丹参衍生的外泌体样纳米颗粒(DDN)通过激活磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(PKB/Akt)/内皮型一氧化氮合酶(eNOS)信号通路减轻血管内皮细胞氧化损伤的机制。方法:通过透射电镜和动态光散射表征DDN。利用荧光显微镜和流式细胞术观察人脐静脉内皮细胞(HUVECs)摄取DDN的能力。采用CCK8、划痕和Transwell实验分别检测HUVECs的活力、迁移能力和侵袭能力。用血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导HUVECs氧化应激,并给予DDN和LY294002(PI3K抑制剂)干预,流式细胞术检测活性氧(ROS)含量,使用试剂盒测定细胞内一氧化氮(NO)含量,并通过Western blot检测NADPH氧化酶4(NOX4)、NOX2、超氧化物歧化酶2(SOD2)、eNOS、p-eNOS、Akt和p-Akt蛋白水平。结果:(1)透射电镜和动态光散射结果显示,DDN具备较好的生物相容性和稳定性。(2)荧光显微镜观察和流式细胞术结果表明,HUVECs摄取DDN的能力极强。(3)与对照组相比,DDN显著增强HUVECs的活力、迁移和侵袭能力,且效果呈现浓度梯度依赖性。(4)与对照组相比,DDN通过激活PI3K/Akt/eNOS信号通路,显著提高内皮细胞内NO的水平,促进血管舒张功能。(5)PI3K/Akt/eNOS信号通路在DDN减轻氧化应激和改善细胞功能中发挥关键作用。结论:DDN通过激活PI3K/Akt/eNOS信号通路,显著减轻Ang Ⅱ诱导的内皮细胞氧化损伤,展现出潜在的血管保护作用。 展开更多
关键词 丹参 外泌体 纳米颗粒 血管内皮细胞 氧化损伤 PI3K/Akt/eNOS通路
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斑马鱼氧化损伤模型在农药毒性评价中的应用研究进展
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作者 吴元钊 王嘉雯 +5 位作者 夏玉美 汤开钦 徐金城 王斌杰 姚伟宣 王继业 《生态科学》 北大核心 2025年第1期288-296,共9页
斑马鱼(Danio rerio)是近年来新兴的一种模式动物,因其具有实验周期短、通量高、与人类基因高度同源性等优势,越来越受到研究者的关注。氧化损伤是指外来毒物入侵机体而产生的活性氧自由基(ROS)超出了机体自身的防御能力而对机体产生的... 斑马鱼(Danio rerio)是近年来新兴的一种模式动物,因其具有实验周期短、通量高、与人类基因高度同源性等优势,越来越受到研究者的关注。氧化损伤是指外来毒物入侵机体而产生的活性氧自由基(ROS)超出了机体自身的防御能力而对机体产生的有害损伤,通过检测生物体内的ROS、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、还原性谷胱甘肽(GSH)等酶活性以及丙二醛(MDA)和还原性谷胱甘肽(GSH)含量等指标就可以衡量机体受到氧化损伤的程度。利用斑马鱼氧化损伤模型对农药等毒物的毒性进行评价是近年来的研究热点。本文对利用斑马鱼氧化损伤模型评估有机磷类、有机氯类、拟除虫菊酯类、有机氮类以及其他类型的等农药进行毒性评估的最新研究成果进行归纳,以期为常见农药的毒理学研究以及斑马鱼氧化损伤模型在药物毒理学等领域的应用研究提供参考和借鉴。 展开更多
关键词 农药 氧化损伤 毒性评估 斑马鱼
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谷胱甘肽对镉致猪肾PK-15细胞氧化损伤及凋亡的修复作用
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作者 董志芳 张丽 朱向博 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第5期2403-2412,共10页
本研究探索了谷胱甘肽(glutathione,GSH)对镉(cadmium,Cd)所引起的PK-15细胞损伤的修复功能及其背后的作用机制。本研究主要针对猪肾PK-15细胞,利用MTT检测、光学显微镜观察、透射电镜观察、JC-1染色、彗星试验和流式细胞术等多种研究方... 本研究探索了谷胱甘肽(glutathione,GSH)对镉(cadmium,Cd)所引起的PK-15细胞损伤的修复功能及其背后的作用机制。本研究主要针对猪肾PK-15细胞,利用MTT检测、光学显微镜观察、透射电镜观察、JC-1染色、彗星试验和流式细胞术等多种研究方法,检测GSH对Cd所造成的细胞氧化损伤及细胞凋亡的修复作用。结果显示,GSH显著缓解了Cd引起的PK-15细胞活性下降,维持ROS的稳态,从而缓解DNA和线粒体损伤及细胞凋亡等现象。Western blot结果表明,GSH可能通过上调抑制凋亡蛋白Bcl-2的表达、下调促凋亡蛋白Bax的表达,进而对Cd诱导的PK-15细胞凋亡产生抑制作用。综上所述,GSH可以通过抑制氧化应激反应和减少细胞凋亡来缓解Cd诱导的PK-15细胞损伤。 展开更多
关键词 谷胱甘肽 镉 PK-15细胞 氧化损伤 细胞凋亡
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山奈酚在H_(2)O_(2)诱导的人晶状体上皮细胞氧化损伤及凋亡中的作用与机制研究 被引量：1
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作者 李亚楠 孙朝晖 +3 位作者 王海燕 左建霞 赵娴 刘明琦 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2025年第1期22-26,共5页
目的探究山奈酚在过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导的人晶状上皮细胞氧化损伤、凋亡中的作用,以及对Janus蛋白酪氨酸激酶2/信号转导与激活因子3(JAK2/STAT3)信号通路的调控作用。方法体外培养人晶状上皮细胞HLE-B3并分为:空白组(不做干预处理)... 目的探究山奈酚在过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导的人晶状上皮细胞氧化损伤、凋亡中的作用,以及对Janus蛋白酪氨酸激酶2/信号转导与激活因子3(JAK2/STAT3)信号通路的调控作用。方法体外培养人晶状上皮细胞HLE-B3并分为:空白组(不做干预处理)、模型组(400μmol·L^(-1) H_(2)O_(2))、山奈酚组(400μmol·L^(-1) H_(2)O_(2)+40μmol·L^(-1)山奈酚)、AG490组(400μmol·L^(-1) H_(2)O_(2)+50μmol·L^(-1) JAK2/STAT3信号通路抑制剂AG490)、抑制剂组(400μmol·L^(-1) H_(2)O_(2)+40μmol·L^(-1)山奈酚+50μmol·L^(-1) AG490)和激活剂组(400μmol·L^(-1) H_(2)O_(2)+40μmol·L^(-1)山奈酚+0.5μmol·L^(-1) JAK2/STAT3信号通路激活剂C-A1)。干预24 h后,采用Hoechst 33258染色法测定细胞凋亡率;丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒检测MDA、SOD水平;Western blot测定半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、JAK2、STAT3、磷酸化JAK2(p-JAK2)和磷酸化STAT3(p-STAT3)蛋白表达水平。结果与空白组相比,模型组细胞凋亡率、MDA、Caspase-3及p-JAK2、p-STAT3蛋白表达水平均升高(均为P<0.05),SOD和Bcl-2蛋白表达水平均降低(均为P<0.05)。与模型组相比,山奈酚组和AG490组细胞凋亡率、MDA、Caspase-3及p-JAK2、p-STAT3蛋白表达水平均降低(均为P<0.05),SOD和Bcl-2蛋白表达水平均升高(均为P<0.05)。与山奈酚组相比,抑制剂组细胞凋亡率、MDA、Caspase-3及p-JAK2、p-STAT3蛋白表达水平均降低,SOD和Bcl-2蛋白表达水平均升高(均为P<0.05);激活剂组细胞凋亡率、MDA、Caspase-3及p-JAK2、p-STAT3蛋白表达水平均升高,SOD和Bcl-2蛋白表达水平均降低(均为P<0.05)。结论山奈酚能够通过抑制JAK2/STAT3信号通路发挥减轻H_(2)O_(2)诱导的HLE-B3细胞氧化损伤的作用,并抑制细胞凋亡。 展开更多
关键词 白内障 晶状体上皮细胞 山奈酚 过氧化氢 JAK2/STAT3通路 氧化损伤 凋亡
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紫檀芪对玉米赤霉烯酮诱导的小鼠肝脏和肾脏氧化损伤的保护作用
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作者 张玉蝶 廖光荣 +2 位作者 沈予雁 刘辉 赵南南 《饲料工业》 北大核心 2025年第22期80-84,共5页
为探究紫檀芪(pterostilbene,PTE)对玉米赤霉烯酮(zearalenone,ZEA)中毒小鼠肝脏和肾脏的修复作用,试验将24只雄性小鼠随机分为对照组、ZEA组(10 mg/kg)、PTE低剂量组(200 mg/kg PTE+10 mg/kg ZEA)、PTE高剂量组(400 mg/kg PTE+10 mg/kg... 为探究紫檀芪(pterostilbene,PTE)对玉米赤霉烯酮(zearalenone,ZEA)中毒小鼠肝脏和肾脏的修复作用,试验将24只雄性小鼠随机分为对照组、ZEA组(10 mg/kg)、PTE低剂量组(200 mg/kg PTE+10 mg/kg ZEA)、PTE高剂量组(400 mg/kg PTE+10 mg/kg ZEA),连续饲喂35 d,采集肝脏和肾脏,H.E.染色,观察肝肾组织病理学变化,检测血清生化指标及肝肾组织中抗氧化指标。结果表明:与对照组相比,ZEA组肝肾组织出现细胞核固缩,且伴有炎性细胞浸润,血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、总胆红素(TBil)和尿素氮(BUN)含量显著升高;肝脏内还原型谷胱甘肽(GSH)含量显著下降、丙二醛(MDA)含量显著升高(P<0.05)。与ZEA组相比,紫檀芪各组肝脏和肾脏结构形态变化显著减轻,肝脏内GSH含量及MDA水平恢复。此外,在肾脏组织,ZEA组和紫檀芪组内GSH含量显著或极显著增加(P<0.05或P<0.01)。表明紫檀芪可通过调控肝脏和肾脏组织的氧化还原系统平衡,发挥对ZEA中毒小鼠的改善作用。 展开更多
关键词 紫檀芪 玉米赤霉烯酮 氧化损伤 肝脏 肾脏
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斑马鱼暴露于镉和褪黑素引起肠道组织、氧化损伤及微生物多样性变化 被引量：1
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作者 宁静 王淳 +1 位作者 卢莞玲 韦露 《生态环境学报》 北大核心 2025年第1期77-88,共12页
重金属镉(Cd)是一种全球常见的剧毒环境污染物,其可通过氧化应激威胁水生生物健康。褪黑素(Melatonin,MT)是一种已知的抗氧化剂和自由基清除剂,已被证明可有效缓解重金属引起的肠道损伤。然而,MT改善Cd诱导的水生生物肠道组织氧化损伤... 重金属镉(Cd)是一种全球常见的剧毒环境污染物,其可通过氧化应激威胁水生生物健康。褪黑素(Melatonin,MT)是一种已知的抗氧化剂和自由基清除剂,已被证明可有效缓解重金属引起的肠道损伤。然而,MT改善Cd诱导的水生生物肠道组织氧化损伤及微生物多样性的研究较少。该研究以成年斑马鱼(Daniorerio)为实验对象,采用半静态暴露方式,进行30d的暴露实验,实验分为4组:Con组、Cd组、MT组、Cd+MT组(两种物质混合液),进行肠道病理切片观察,测定肠道过氧化氢(H_(2)O_(2))和丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性,通过肠道菌群16SrDNA高通量测序分析肠道菌群Alpha、Beta多样性、肠道菌群组成、优势菌群相对丰度和各组的生物标志物。结果显示:Cd组的斑马鱼肠壁变薄、肠绒毛出现了部分磨损和脱落,绒毛尖端暴露,肠绒毛上皮间隙增大,空泡化细胞增多,细胞广泛裂解,细胞质损伤分散,同时出现了结缔组织松弛现象,而共同暴露于Cd和MT的斑马鱼肠道组织结构部分已经恢复完整,肠损伤现象明显减少;Cd导致斑马鱼肠道MDA和H_(2)O_(2)含量显著上升,GSH-PX和SOD活性显著下降,而共同处理降低了H_(2)O_(2)和MDA含量、升高了GSH-PX和SOD活性;16SrDNA测序发现Cd导致斑马鱼肠道菌群多样性改变,Shannon指数及Simpsoneven指数升高,优势菌群数目减少,而添加MT一定程度缓解Cd对肠道菌群多样性的影响及菌群失调得到部分恢复。研究表明,褪黑素能减轻镉导致的成年斑马鱼肠道氧化损伤及保护肠道菌群多样性,为开发防治镉中毒的产品提供了理论依据。 展开更多
关键词 镉 褪黑素 斑马鱼 氧化损伤 肠道菌群
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高铜对鸡肝细胞线粒体未折叠蛋白反应及氧化损伤相关蛋白表达的影响
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作者 李思婕 苏璐娜 +4 位作者 余晶凌 黄海 吴子奇 唐兆新 廖建昭 《饲料研究》 北大核心 2025年第14期51-57,共7页
试验旨在探究高铜对鸡肝细胞线粒体未折叠蛋白反应(UPRmt)及氧化应激的影响。选取240羽1日龄健康白羽肉鸡,随机分为4组,每组6个重复,每个重复10羽鸡。对照组饲喂基础饲粮(含铜11 mg/kg),高铜Ⅰ组、高铜Ⅱ组、高铜Ⅲ组分别饲喂含铜量为11... 试验旨在探究高铜对鸡肝细胞线粒体未折叠蛋白反应(UPRmt)及氧化应激的影响。选取240羽1日龄健康白羽肉鸡,随机分为4组,每组6个重复,每个重复10羽鸡。对照组饲喂基础饲粮(含铜11 mg/kg),高铜Ⅰ组、高铜Ⅱ组、高铜Ⅲ组分别饲喂含铜量为110、220、330 mg/kg的高铜饲粮。试验期42 d。结果显示,与对照组相比,高铜Ⅰ组、高铜Ⅱ组、高铜Ⅲ组中肝组织发生明显的病理损伤,高铜Ⅱ组、高铜Ⅲ组具有明显的胶原纤维沉积增多和肝小叶结构破坏等现象。与对照组相比,高铜Ⅱ组去乙酰化酶3(Sirt3)mRNA相对表达量显著增加(P<0.05);高铜Ⅲ组Sirt3的mRNA相对表达量极显著增加(P<0.01),热休克蛋白60(HSP60)的mRNA表达量显著增加(P<0.05);各试验组酪蛋白水解蛋白酶P(CLPP)mRNA表达量极显著增加(P<0.01)。与对照组相比,高铜Ⅲ组超氧化物歧化酶2(SOD2)、过氧化还原蛋白3(Prdx3)蛋白相对表达量极显著升高(P<0.01)。与对照组相比,高铜Ⅱ组、高铜Ⅲ组CLPP蛋白相对表达量显著升高(P<0.05),高铜Ⅱ组HSP60蛋白相对表达量极显著升高(P<0.01),高铜Ⅲ组热休克蛋白家族A成员9(HSPA9)蛋白相对表达量显著升高(P<0.05)。与对照组相比,各试验组中的Sirt3阳性颗粒数量显著增加,且高铜Ⅲ组中的棕黄色颗粒更加明显;高铜Ⅰ组HSP60阳性表达量极显著增加(P<0.01),高铜Ⅱ组HSP60阳性表达量显著增加(P<0.05)。研究表明,高铜可诱导鸡肝细胞发生氧化应激与UPRmt。 展开更多
关键词 铜 鸡 肝细胞 线粒体未折叠蛋白反应 氧化损伤
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硒多糖缓解马骨骼肌卫星细胞氧化损伤作用的研究
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作者 刘雨蒙 高星 +3 位作者 赵雅丽 曹迪 芒来 张心壮 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第7期3357-3367,共11页
旨在研究硒多糖预保护对H_(2)O_(2)诱导蒙古马骨骼肌卫星细胞氧化应激的缓解作用及机制,为开发缓解马的骨骼肌运动损伤抗氧化剂提供参考。利用H_(2)O_(2)诱导的蒙古马骨骼肌卫星细胞氧化损伤模型开展试验,试验共分为对照组、H_(2)O_(2)... 旨在研究硒多糖预保护对H_(2)O_(2)诱导蒙古马骨骼肌卫星细胞氧化应激的缓解作用及机制,为开发缓解马的骨骼肌运动损伤抗氧化剂提供参考。利用H_(2)O_(2)诱导的蒙古马骨骼肌卫星细胞氧化损伤模型开展试验,试验共分为对照组、H_(2)O_(2)损伤组以及硒多糖保护组(硒多糖保护组的浓度分别为50、150、250、350、450、550 nmol·L^(-1)),对细胞活力、抗氧化性能、抗氧化基因表达量和细胞线粒体功能进行检测。结果表明:随着硒多糖预保护浓度的增加,细胞存活率、总抗氧化能力(total antioxidant capacity,T-AOC)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GPX)的活性出现先增加后降低的变化,350 nmol·L^(-1)硒多糖预保护组细胞存活率显著高于H_(2)O_(2)损伤组(P<0.05),与对照组无显著差异,但抗氧化酶活性显著高于H_(2)O_(2)损伤组和对照组(P<0.05);细胞中丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量随硒多糖的增加呈先降低后增高的变化,350 nmol·L^(-1)硒多糖预保护组含量最低,显著低于对照组和H_(2)O_(2)损伤组(P<0.05);350 nmol·L^(-1)硒多糖预保护组原癌基因RELA(RELA proto-oncogene,RELA)、谷胱甘肽过氧化物酶(probable phospholipid hydroperoxide glutathione peroxidase,GPX)、硫氧还蛋白还原酶1(thioredoxin reductase 1,TRXR1)和超氧化物歧化酶1(superoxide dismutase 1,SOD1)的mRNA表达量极显著高于H_(2)O_(2)损伤组(P<0.01),RELA的mRNA表达量显著高于对照组(P<0.05),GPX、TRXR1和SOD1的mRNA表达量极显著高于对照组(P<0.01)。350 nmol·L^(-1)硒多糖预保护组核因子类红细胞2相关因子2(nuclear factor erythroid-2-related factor 2,Nrf2)的mRNA表达量显著高于其他两组(P<0.05);350 nmol·L^(-1)硒多糖组的细胞耗氧率(OCR)显著高于H_(2)O_(2)损伤组(P<0.05),基础呼吸值、ATP消耗值、质子漏、最大呼吸值分别为34.86、26.06、8.80、32.41,极显著高于H_(2)O_(2)损伤组(P<0.01),非线粒体呼吸值显著高于损伤组(P<0.05)。综上可知,硒多糖通过激活Nrf2信号通路,上调下游抗氧化基因的表达,进而提高了抗氧化酶活性,降低了MDA的含量,促进了细胞线粒体呼吸功能,提高了细胞活性,达到缓解马骨骼肌卫星细胞氧化损伤的效果,本试验条件下,350 nmol·L^(-1)硒多糖效果较好。 展开更多
关键词 硒多糖 马 骨骼肌卫星细胞 氧化损伤
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蝉花孢子油的提取工艺优化及对炎症和肠上皮细胞氧化损伤的影响
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作者 李兴阳 王贝琦 +3 位作者 郭超 操慧 于瑞莲 王琴 《食品工业科技》 北大核心 2025年第5期187-195,共9页
本研究利用溶剂提取法对人工蝉花孢子粉中的脂类成分连续回流提取,基于单因素实验结果设计响应面试验优化提取工艺,以最大限度地提高蝉花孢子油的得油率,分析其组成并通过实验探究其体外抗炎活性及其对肠上皮细胞氧化损伤修复的影响。... 本研究利用溶剂提取法对人工蝉花孢子粉中的脂类成分连续回流提取,基于单因素实验结果设计响应面试验优化提取工艺,以最大限度地提高蝉花孢子油的得油率,分析其组成并通过实验探究其体外抗炎活性及其对肠上皮细胞氧化损伤修复的影响。结果显示,在液固比为12:1、55℃的条件下连续回流提取3 h后,蝉花孢子油得油率最高,为2.626%±0.04%。气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)检测分析共得到25种成分,其中包含18种脂肪酸成分,占比为87.86%。体外实验结果表明,蝉花孢子油浓度在20~200μg/mL时能够明显提高RAW264.7细胞存活率,显著促进LPS诱导的RAW264.7细胞NO的分泌至正常生理值(P<0.001);蝉花孢子油浓度在60~200μg/mL时,能够显著促进H2O2诱导的Caco-2细胞的增殖(P<0.01);蝉花孢子油浓度在40~100μg/mL时,能够显著增强Caco-2细胞的迁移能力(P<0.05)。因此,蝉花孢子油具有潜在的促进肠上皮细胞的氧化损伤的修复作用。作为由新食品原料提取得到的成分,在开发针对炎性肠病肠黏膜损伤的特殊医学用途配方食品方面具有应用前景。 展开更多
关键词 蝉花孢子油 得油率 脂肪酸 抗炎 氧化损伤
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亚硒酸钠和硒代蛋氨酸对马骨骼肌卫星细胞氧化损伤的缓解作用及线粒体功能的影响
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作者 张心壮 刘雨蒙 +3 位作者 高星 王晓阳 尹艺旋 芒来 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第10期4603-4613,共11页
【目的】研究不同浓度亚硒酸钠和硒代蛋氨酸对H_(2)O_(2)诱导的马骨骼肌卫星细胞氧化损伤的缓解作用及线粒体功能的影响,为硒作为抗氧化剂缓解马运动氧化应激提供参考依据。【方法】本试验利用600μmol/L H_(2)O_(2)诱导马骨骼肌卫星细... 【目的】研究不同浓度亚硒酸钠和硒代蛋氨酸对H_(2)O_(2)诱导的马骨骼肌卫星细胞氧化损伤的缓解作用及线粒体功能的影响,为硒作为抗氧化剂缓解马运动氧化应激提供参考依据。【方法】本试验利用600μmol/L H_(2)O_(2)诱导马骨骼肌卫星细胞氧化应激模型,在饥饿培养基培养6 h后,换为含有不同浓度亚硒酸钠(10、20、50、100、150、200 nmol/L)和硒代蛋氨酸(10、20、50、100、150、200 nmol/L)的溶液培养24 h,再利用600μmol/L H_(2)O_(2)诱导马骨骼肌卫星细胞6 h,收集样品。使用CCK-8试剂盒检测细胞活性,用抗氧化酶试剂盒检测抗氧化酶活性指标,实时荧光定量PCR检测抗氧化基因表达量,用线粒体压力试剂盒检测骨骼肌卫星细胞线粒体能量代谢,评价不同浓度亚硒酸钠和硒代蛋氨酸对氧化损伤的缓解作用。【结果】100 nmol/L亚硒酸钠组和150 nmol/L硒代蛋氨酸组细胞相对活力显著高于损伤组(P<0.05),与对照组无显著差异(P>0.05),总抗氧化能(T-AOC)与抗氧化酶活性显著高于损伤组和对照组(P<0.05)。细胞中丙二醛(MDA)含量随亚硒酸钠浓度的增加呈先降低后增高的变化趋势,100 nmol/L亚硒酸钠组含量最低,显著低于对照组和损伤组(P<0.05);150 nmol/L硒代蛋氨酸组细胞中MDA含量显著低于对照组和损伤组(P<0.05)。100 nmol/L亚硒酸钠和150 nmol/L硒代蛋氨酸组细胞中原癌基因(RELA)、谷胱甘肽过氧化物酶1(GPX1)、超氧化物歧化酶1(SOD1)基因表达量极显著高于对照组与损伤组(P<0.01),硫氧还蛋白还原酶1(TRXR1)基因表达量极显著高于损伤组(P<0.01),150 nmol/L硒代蛋氨酸细胞中TRXR1基因表达量极显著高于对照组(P<0.01)。150 nmol/L硒代蛋氨酸组细胞中核因子E2相关因子2(Nrf2)基因表达量显著高于损伤组(P<0.05),RELA、GPX1、TRXR1和SOD1基因表达量极显著高于对照组(P<0.01),基础呼吸值、ATP氧消耗值、最大呼吸值分别为32.28、21.70和45.01 pmol/min,显著高于损伤组(P<0.05),分别增加了25.03%、30.22%和25.59%,而100 nmol/L亚硒酸钠组细胞耗氧率和线粒体功能参数与损伤组无显著差异(P>0.05)。【结论】亚硒酸钠和硒代蛋氨酸通过激活Nrf2下游信号通路,上调抗氧化基因的表达,进而提高超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)活性,减少MDA的产生,缓解氧化损伤,本试验条件下100 nmol/L亚硒酸钠和150 nmol/L硒代蛋氨酸缓解效果较好。相比无机的亚硒酸钠,有机的硒代蛋氨酸还可提高细胞的线粒体能量代谢。 展开更多
关键词 马 骨骼肌卫星细胞 亚硒酸钠 硒代蛋氨酸 氧化损伤
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桂花提取物的抗氧化活性及对t-BHP诱导HepG2细胞氧化损伤的保护作用 被引量：1
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作者 冯庆 徐思远 +5 位作者 任梦 郝思怡 袁欣 陈佳蕊 杨旭 马萍 《化学与生物工程》 北大核心 2025年第1期53-58,共6页
采用DPPH法、ABTS法、FRAP法评价了桂花水提取物、95%乙醇提取物、正丁醇提取物、乙酸乙酯提取物、石油醚提取物的抗氧化活性,并探究了桂花水提取物对叔丁基过氧化氢(t-BHP)诱导的人肝癌细胞HepG2氧化损伤的保护作用。结果表明,桂花提... 采用DPPH法、ABTS法、FRAP法评价了桂花水提取物、95%乙醇提取物、正丁醇提取物、乙酸乙酯提取物、石油醚提取物的抗氧化活性,并探究了桂花水提取物对叔丁基过氧化氢(t-BHP)诱导的人肝癌细胞HepG2氧化损伤的保护作用。结果表明,桂花提取物具有一定的抗氧化活性,但不同溶剂提取物的抗氧化活性存在差异;桂花水提取物与HepG2细胞具有良好的生物相容性,可以抑制t-BHP诱导的HepG2细胞中8-羟基-2′-脱氧鸟苷(8-OHdG)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素-1β(IL-1β)的产生,还显著降低了丙二醛(MDA)水平。 展开更多
关键词 桂花 抗氧化 HEPG2 叔丁基过氧化氢(t-BHP) 氧化损伤
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阿胶和阿胶肽对血管内皮细胞氧化损伤的作用研究
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作者 段小波 杜芬 +8 位作者 王延涛 冯晓梅 刘海滨 王长伟 顾建军 李八方 刘明浩 王梦园 刘楚怡 《安徽农业科学》 2025年第8期162-167,180,共7页
[目的]分析阿胶和阿胶肽在血管内皮细胞氧化应激损伤中的作用,以及其发挥作用的机制。[方法]建立过氧化氢(H_(2)O_(2))所致的人脐静脉内皮细胞损伤模型,利用CCK-8检测阿胶和阿胶肽对建模前后人脐静脉内皮细胞(HUVEC)存活率的影响,并研... [目的]分析阿胶和阿胶肽在血管内皮细胞氧化应激损伤中的作用,以及其发挥作用的机制。[方法]建立过氧化氢(H_(2)O_(2))所致的人脐静脉内皮细胞损伤模型,利用CCK-8检测阿胶和阿胶肽对建模前后人脐静脉内皮细胞(HUVEC)存活率的影响,并研究阿胶和阿胶肽对细胞超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-px)、乳酸脱氢酶(LDH)酶活的影响,以及对丙二醛(MDA)、血管内皮生长因子(VEGF)、白细胞介素6(IL-6)、一氧化氮(NO)含量的影响。[结果]阿胶和阿胶肽能有效促进HUVEC的增殖、迁移,并能有效对抗氧化损伤造成的增殖抑制作用,200μg/mL阿胶和阿胶肽能显著抑制MDA和LDH的过量产生,200μg/mL阿胶能够显著提高GSH-px酶活、阿胶肽能够显著提高SOD的表达水平,修复HUVEC的氧化损伤;阿胶和阿胶肽均可有效促进血管内皮细胞分泌NO,保护血管内皮功能,并促进血管内皮细胞分泌VEGF和降低IL-6浓度,促进血管新生增多,降低炎症反应。[结论]阿胶和阿胶肽降低HUVEC氧化应激机制可能与改善细胞生长增殖状态、提高细胞抗氧化酶活性、促进血管内皮生长因子表达和促进血管内皮细胞分泌NO有关。 展开更多
关键词 阿胶 阿胶肽 过氧化氢 人脐静脉内皮细胞 氧化损伤
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参杞强精颗粒对小鼠精原细胞氧化损伤的保护作用及其机制
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作者 甘典辉 夏冰雨 +3 位作者 李鑫 赖克道 宾彬 唐爱存 《医药导报》 北大核心 2025年第3期371-376,共6页
目的观察参杞强精颗粒含药血清对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导的小鼠精原细胞(GC-1spg)氧化损伤以及铁死亡的保护作用及其机制。方法将健康雄性SD大鼠30只随机分为空白组、左卡尼汀阳性组、参杞强精颗粒组,灌胃给药7 d后,采集含药血清。将... 目的观察参杞强精颗粒含药血清对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导的小鼠精原细胞(GC-1spg)氧化损伤以及铁死亡的保护作用及其机制。方法将健康雄性SD大鼠30只随机分为空白组、左卡尼汀阳性组、参杞强精颗粒组,灌胃给药7 d后,采集含药血清。将小鼠精原细胞随机分为正常对照组、模型对照组、空白血清组、左卡尼汀含药血清组、参杞强精颗粒含药血清组,除正常对照组外,其余各组制备细胞氧化应激损伤模型,各组给药干预24 h,细胞计数试剂-8(CCK-8)法检测细胞存活率,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测细胞活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)水平;铁离子比色法检测细胞内铁离子水平;比色法检测细胞内Caspase-3与Caspase-9活性;实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)法测定谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、长链酯酰辅酶A合成酶4(ACSL4)mRNA含量。结果与正常对照组比较,模型对照组细胞增殖活性显著下降,细胞内ROS、MDA和铁离子水平显著升高,CAT、GSH、SOD活性显著降低,Caspase-3和Caspase-9活性显著升高,均差异有统计学意义(P<0.05);与模型对照组比较,参杞强精颗粒含药血清组细胞增殖活性显著提高,细胞内ROS、MDA和铁离子水平降低,CAT、GSH、SOD活性升高,Caspase-3和Caspase-9活性降低,均差异有统计学意义(P<0.05);qRT-PCR结果表明,与模型对照组比较,参杞强精颗粒含药血清组GPX4 mRNA表达上调,ACSL4 mRNA表达降低,均差异有统计学意义(P<0.05)。结论参杞强精颗粒对氧化应激损伤和铁死亡的小鼠精原细胞具有显著保护作用,其机制可能与降低Caspase-3和Caspase-9活性及抑制氧化应激损伤和铁死亡有关。 展开更多
关键词 参杞强精颗粒 含药血清 小鼠精原细胞 氧化应激损伤 铁死亡
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绞股蓝多糖对热应激小鼠卵巢氧化损伤的保护作用
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作者 陈蕾晓 何欢 +3 位作者 欧阳露 牟容凤 赖鹏羽 王晓丽 《湖北农业科学》 2025年第2期144-149,共6页
为探究不同剂量绞股蓝多糖(Gynostemma pentaphyllum polysaccharides,GPP)对热应激小鼠卵巢氧化损伤的保护作用,采用酶联免疫吸附、免疫组化等研究方法,分别对空白对照组(Control)、热应激对照组(HS)、高剂量绞股蓝多糖组(GPP-H)、中... 为探究不同剂量绞股蓝多糖(Gynostemma pentaphyllum polysaccharides,GPP)对热应激小鼠卵巢氧化损伤的保护作用,采用酶联免疫吸附、免疫组化等研究方法,分别对空白对照组(Control)、热应激对照组(HS)、高剂量绞股蓝多糖组(GPP-H)、中剂量绞股蓝多糖组(GPP-M)、低剂量绞股蓝多糖组(GPP-L)中小鼠的体重和卵巢指数,卵巢中各级卵泡数量、最大直径及卵巢皮质厚度,卵巢中各类生殖激素和雌激素β型受体(Estrogen receptor β,ERβ)的表达水平,血清中抗氧化能力以及卵巢颗粒细胞凋亡率测定分析。结果表明,与HS组相比,GPP各剂量组小鼠体重显著升高(P<0.05);GPP-H组原始卵泡数显著升高(P<0.05),GPP-L、GPP-H组闭锁卵泡数显著减少(P<0.05),GPP各剂量组卵巢皮质厚度、原始卵泡、次级卵泡和黄体最大直径显著升高(P<0.05);GPP各剂量组GnRH、E_(2)和P_(4)含量均显著升高(P<0.05),GPP-H组FSH含量显著升高(P<0.05);GPP各剂量组GSH-Px酶活力显著升高(P<0.05),GPP-M组TSOD酶活力显著升高(P<0.05),GPP各剂量组MDA含量显著降低(P<0.05)。GPP可能通过发挥ER激动剂的类固醇样作用,改善垂体和卵巢内分泌功能,恢复、保护卵巢储备能力,增强酶类抗氧化系统的活力,缓解由热应激造成卵巢的氧化损伤,GPP-H组剂量效果较佳。 展开更多
关键词 卵巢 氧化损伤 热应激 绞股蓝多糖 小鼠
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NCG对长期冷暴露妊娠后期蒙古羊体增重、血液指标、胎儿发育及肝脏氧化损伤的影响
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作者 李康 智宇 +4 位作者 田婧 石璐璐 李蕴华 郝宸昉 郭天龙 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第7期3155-3164,共10页
【目的】本试验旨在研究长期冷暴露对妊娠后期母羊体重变化、血清生化指标、抗氧化指标、非特异性免疫指标、胎羊发育情况以及母羊与胎羊肝脏氧化损伤的影响及N-氨基甲酰谷氨酸(N-carbamylglutamate, NCG)的调控作用。【方法】选择24只... 【目的】本试验旨在研究长期冷暴露对妊娠后期母羊体重变化、血清生化指标、抗氧化指标、非特异性免疫指标、胎羊发育情况以及母羊与胎羊肝脏氧化损伤的影响及N-氨基甲酰谷氨酸(N-carbamylglutamate, NCG)的调控作用。【方法】选择24只3~4岁、体重相近(48.53 kg±3.64 kg)、健康的妊娠后期蒙古羊,随机分为3组,每组8个重复,每个重复1只羊。对照组(C组)饲养于暖舍(平均温度3.60℃),2个试验组(L及LN组)饲养于舍外(平均温度―12.20℃),LN组每只羊每天灌服10 mL蒸馏水+2.5 g NCG配制的悬液,C及L组每只羊每天灌服10 mL蒸馏水。试验预饲期10 d,正试期62 d。试验期间于第1、30及60天记录母羊体重;正试期开始及结束时采集母羊颈静脉血液,测定血清生化指标、抗氧化指标、免疫指标、下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴(HPA)和下丘脑-垂体-甲状腺轴(HPT)激素含量;试验结束时屠宰采样,测定胎羊体重、器官指数以及母羊与胎羊肝脏氧化损伤指标8-羟基脱氧鸟苷(8-hydroxydeoxyguanosine, 8-OHdG)、4-羟基壬烯酸(4-hydroxynonaenoic acid, 4-HNE)、晚期氧化蛋白产物(advanced oxidative protein products, AOPP)、3-硝基酪氨酸(3-nitrotyrosine, 3-NT)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性。【结果】(1)LN组母羊平均日增重(ADG)在试验后期和全期均显著高于L组(P<0.05),L与C组在试验前期、试验后期及试验全期均无显著差异(P>0.05)。L组胎羊体重显著低于C及LN组(P<0.05),LN与C组无显著差异(P>0.05)。除肺脏外,L组胎羊内脏器官重量均显著低于C和LN组(P<0.05)。(2)试验结束时,LN组母羊血清游离脂肪酸(NEFA)含量显著高于C及L组(P<0.05),L组母羊血清β-羟丁酸(β-HB)含量显著低于C及LN组(P<0.05)。(3)L组母羊血清甲状腺素(T4)含量低于C组(P<0.05),LN组介于二者之间,差异不显著(P>0.05)。(4)对于肝脏氧化损伤指标,L组母羊8-OHdG含量显著高于C组(P<0.05),LN组高于C组、低于L组(P>0.05);L组母羊SOD活性显著低于C与LN组(P<0.05),LN组低于C组(P>0.05);胎羊肝脏的氧化损伤指标组间无显著差异(P>0.05)。【结论】母羊妊娠后期冷暴露降低了母羊ADG,血清代谢出现异常,肝脏发生氧化损伤;补充NCG可以改善冷暴露对母羊及胎羊的不利影响。 展开更多
关键词 妊娠后期 NCG 长期冷暴露 氧化损伤
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过氧化物还原酶OsPrx3抑制DNA氧化损伤的功能
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作者 汪海洋 赵玉楠 +3 位作者 卢延克 黄卉 王智勇 方庆 《食品科学》 北大核心 2025年第20期162-169,共8页
目的:探究红米稻过氧化物还原酶OsPrx3基因原核细胞表达产物体外抑制DNA氧化损伤的功能。方法:分子重组构建大红谷OsPrx3基因及其定点突变体OsPrx3mC51A的原核表达载体,转化至大肠杆菌表达目的蛋白,体外鉴定其羟自由基清除活性;采用超... 目的:探究红米稻过氧化物还原酶OsPrx3基因原核细胞表达产物体外抑制DNA氧化损伤的功能。方法:分子重组构建大红谷OsPrx3基因及其定点突变体OsPrx3mC51A的原核表达载体,转化至大肠杆菌表达目的蛋白,体外鉴定其羟自由基清除活性;采用超螺旋形态(supercoiled form,SF)pMD18质粒为底物进行DNA缺刻实验,鉴定OsPrx3抑制DNA氧化损伤的功能。结果:成功在大肠杆菌细胞中表达红米稻OsPrx3;当OsPrx3质量浓度1.0mg/mL、反应2 h时对羟自由基清除率为40%;构建目的基因OsPrx3定点突变体,通过测定羟自由基清除率发现OsPrx3mC51A近100%失活,证实第51位半胱氨酸残基是该酶参与过氧化反应的关键位点;以0.06μg/μL pMD18质粒进行DNA缺刻实验,结果显示OsPrx3在相对较低质量浓度范围内(0.06~0.18μg/μL)对目标DNA氧化损伤的抑制效应具有明显的量效关系,此范围内0.18μg/μL OsPrx3的氧化损伤抑制率最高(88.9%),为最小酶质量浓度作用效应的1.7倍;OsPrx3的最适反应质量浓度为0.15μg/μL,此条件下抑制质粒DNA氧化损伤的效率为77.5%;若设定SF-DNA/缺刻形态DNA比值达1.0为氧化还原平衡点,则最适质量浓度作用下OsPrx3的较高抑制效应至少可维持180 min,并且此时体系中2种DNA比值仍达1.5。以上结果表明,红米稻过氧化物还原酶OsPrx3原核表达产物体外具有较强抑制DNA氧化损伤的功能,本研究可为发现和运用红米稻有益蛋白资源提供理论依据。 展开更多
关键词 过氧化物还原酶 氧化损伤 DNA 红米稻 衰老
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硫酸化川明参多糖对HepG2细胞氧化损伤的修复作用及其结构解析
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作者 黄凯 张舒婷 +5 位作者 轩华龙 牟腊梅 王心凌 唐华丽 邱顺丽 曹虹 《食品与发酵工业》 北大核心 2025年第21期76-84,共9页
为明确对HepG2细胞氧化损伤具有修复作用的高活性硫酸化多糖结构,采用超声辅助酶法提取川明参粗多糖(Chuanminshen violaceum polysaccharides,CVPs),浓硫酸法制备硫酸化川明参粗多糖(sulfated Chuanminshen violaceum polysaccharides,... 为明确对HepG2细胞氧化损伤具有修复作用的高活性硫酸化多糖结构,采用超声辅助酶法提取川明参粗多糖(Chuanminshen violaceum polysaccharides,CVPs),浓硫酸法制备硫酸化川明参粗多糖(sulfated Chuanminshen violaceum polysaccharides,S-CVPs),通过柱层析法制得硫酸化川明参多糖(purified sulfated Chuanminshen violaceum polysaccharide components,S-CVPs-1-G)并测定其对H_(2)O_(2)诱导的HepG2细胞氧化损伤的修复作用。采用CCK-8试剂盒检测细胞增殖率,酶联免疫吸附法检测细胞氧化应激产物和抗氧化物酶系活性,最后结合甲基化和核磁结果推测S-CVPs-1-G连接方式。结果表明,S-CVPs-1-G对H_(2)O_(2)诱导HepG2细胞造成的氧化损伤有修复作用,显著降低丙二醛水平,显著提高超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)的水平(P<0.05),高浓度的S-CVPs-1-G(相较于模型组)使得丙二醛降低了3.63 nmol/mg prot、使SOD及CAT活力分别提高了4.55、1.81 U/mg prot,且S-CVPs-1-G对H_(2)O_(2)诱导的HepG2氧化应激损伤修复能力优于CVPs,经过核磁和甲基化解析S-CVPs-1-G是以→4-Glcp-(1→4)-α-Glcp-(1→为主链,同时含有少量→4)-α-Glcp-(1→3)-β-Glcp-(1→4)-α-D-GalpA(OMe)-(1→的葡聚糖)。综上,S-CVPs-1-G是一种对H_(2)O_(2)诱导HepG2细胞氧化损伤具有修复作用的硫酸化多糖。 展开更多
关键词 川明参多糖 硫酸化 HEPG2细胞 氧化损伤 结构解析
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