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肉牛肌肉细胞的分离培养和鉴定及其氧化应激模型的建立 被引量:3
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作者 谭秀文 游伟 +4 位作者 刘晓牧 靳青 魏晨 万发春 张相伦 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期2369-2378,共10页
本研究采用组织块法分离培养获得肉牛肌肉细胞并进行鉴定,利用过氧化氢(H2 O2)构建氧化应激模型,为深入研究氧化应激对肉牛肌肉生长发育和肉品质的影响机制提供技术支撑。选用体重为252 kg的利鲁(利木赞×鲁西黄牛)杂交公牛背最长肌... 本研究采用组织块法分离培养获得肉牛肌肉细胞并进行鉴定,利用过氧化氢(H2 O2)构建氧化应激模型,为深入研究氧化应激对肉牛肌肉生长发育和肉品质的影响机制提供技术支撑。选用体重为252 kg的利鲁(利木赞×鲁西黄牛)杂交公牛背最长肌,利用组织块培养法分离培养肌肉细胞。通过形态学观察、免疫荧光法及流式细胞仪等手段对细胞进行鉴定。采用不同浓度(0、50、100、150、200、250、300、350、400、450μmol/L)的H2 O2处理细胞24 h,通过观察细胞形态、检测细胞存活率及氧化还原状态,筛选适宜作用浓度。然后利用该浓度H2 O2处理细胞不同时间(0、0.75、1.5、3、6、12、24 h),通过分析确定适宜作用时间。结果表明:1)分离获得的细胞长势良好,形状细长,呈纺锤体形和梭形。免疫荧光法和流式细胞仪鉴定肌肉细胞的特异性蛋白(生肌决定因子1和配对盒基因7)均得到较高表达。2)视野内细胞数量随H2 O2浓度升高逐渐减少,至450μmol/L时,细胞发生明显死亡现象。细胞存活率随H2 O2浓度的升高显著降低,与0浓度H202处理相比,300μmol/L时降至65.4%(P<0.05),450μmol/L时仅为6.7%(P<0.05)。细胞活性氧(ROS)水平先略微降低后逐渐升高(P<0.05),超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性先升高后逐渐降低(P<0.05),丙二醛(MDA)和蛋白质羰基(PC)含量逐渐升高(P<0.05),8-羟基脱氧鸟苷(8 OHdG)含量先升高后降低(P<0.05)。3)细胞存活率随300μmol/L H2O2处理时间的延长逐渐降低,与0 h相比,6 h降至61.2%(P<0.05),12 h降至47.4%(P<0.05),但在24 h时略有升高(P<0.05)。随着处理时间的延长,细胞ROS水平先升高后逐渐降低(P<0.05),SOD和CAT活性先升高后降低(P<0.05),MDA、PC和8 OHdG含量均逐渐升高(P<0.05)。综上所述,本研究通过组织块培养法分离培养获得较高纯度的肉牛肌肉细胞,并成功构建氧化应激模型,H2 O2的适宜作用浓度和时间分别为300μmol/L和6 h。 展开更多
关键词 肉牛 肌肉细胞 细胞培养 细胞鉴定 氧化 氧化应激模型
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生物细胞氧化应激模型探讨 被引量:5
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作者 叶煦亭 沙继宏 +2 位作者 汤莹 孙秀芳 吴越 《电子显微学报》 CAS CSCD 2000年第3期207-208,共2页
关键词 生物细胞 氧化应激模型 透射电镜 扫描电镜
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肉仔鸡胸肌卫星细胞氧化应激模型的优化
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作者 王成 武书庚 +3 位作者 岳洪源 翟永功 张海军 齐广海 《家畜生态学报》 2010年第2期29-34,共6页
将体外培养的肉仔鸡胸肌卫星细胞(SC)按地塞米松(DEX)处理浓度(0、0.03、0.06、0.12、0.24、0.48和0.96 mg/mL)分为7组,分别测定SC的存活率(MTT法)、丙二醛(MDA)、氧自由基(ROS)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽硫转酶(GST)含量或活性... 将体外培养的肉仔鸡胸肌卫星细胞(SC)按地塞米松(DEX)处理浓度(0、0.03、0.06、0.12、0.24、0.48和0.96 mg/mL)分为7组,分别测定SC的存活率(MTT法)、丙二醛(MDA)、氧自由基(ROS)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽硫转酶(GST)含量或活性。筛选DEX处理的最佳时间和浓度以便优化肉仔鸡胸肌SC的氧化应激模型。结果表明,随DEX浓度升高,MDA和ROS产生量升高(P<0.01),SOD与GST活性显著降低(P<0.01)。随着DEX处理时间的延长,SC的存活率及GST和SOD活性均有所下降,MDA和ROS产生量上升。使用0.12 mg/mL的DEX处理SC 24 h后,SC存活率显著降低(P<0.01)。说明DEX浓度为12 mg/mL处理24 h能使肉仔鸡骨骼肌SC产生适度的氧化应激,可以作为肉仔鸡胸肌卫星细胞的氧化应激模型。 展开更多
关键词 地塞米松 肉仔鸡 胸肌卫星细胞 氧化应激模型
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过氧化氢诱导HepG2细胞产生氧化应激细胞模型的建立 被引量:40
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作者 韩飞 周孟良 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2011年第5期55-57,共3页
不同浓度过氧化氢作用人肝癌细胞(HepG2)4h后,用单细胞凝胶电泳技术测定DNA损伤状况,分光光度法测定丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,研究过氧化氢的最佳作用浓度,构建体外氧化应激细胞模型。结... 不同浓度过氧化氢作用人肝癌细胞(HepG2)4h后,用单细胞凝胶电泳技术测定DNA损伤状况,分光光度法测定丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,研究过氧化氢的最佳作用浓度,构建体外氧化应激细胞模型。结果表明,过氧化氢的最佳作用浓度为100μmol/L,作用细胞的时间选择4h,可以成功构建以过氧化氢为氧化应激诱导剂的HepG2细胞体外氧化应激模型。 展开更多
关键词 氧化 HEPG2细胞 氧化应激模型
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氧化应激对鱼类的影响及其模型的研究进展 被引量:13
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作者 刘淑兰 翟少伟 《饲料博览》 2012年第2期48-51,共4页
文章综述了氧化应激对鱼类生理功能、行为活动和生长的影响以及氧化应激模型的研究进展,并对鱼类氧化应激模型的建立提出了一些建议。
关键词 氧化应激 鱼类 氧化应激模型
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补阳还五汤类方对氧化应激PC12模型细胞CDK5及凋亡因子的影响 被引量:12
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作者 刘芳 陈乃宏 +2 位作者 胡耀梅 胥咏薇 朱炎贞 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期1758-1764,共7页
目的观察补阳还五汤类方对氧化应激模型细胞周期素依赖性蛋白激酶5(cyclin-dependent kinase 5,CDK5)及凋亡因子的影响。方法以0.3 mmol·L^-1的H 2O 2与PC12细胞共同作用2 h,成功复制脑缺血体外氧化应激细胞模型,将PC12细胞分成正... 目的观察补阳还五汤类方对氧化应激模型细胞周期素依赖性蛋白激酶5(cyclin-dependent kinase 5,CDK5)及凋亡因子的影响。方法以0.3 mmol·L^-1的H 2O 2与PC12细胞共同作用2 h,成功复制脑缺血体外氧化应激细胞模型,将PC12细胞分成正常组、模型组、补阳还五汤组、补阳还五汤精简方组。酶联免疫法检测胞外培养液中L-LDH的含量和胞内GSH的含量,流式细胞术检测胞内活性氧(ROS)含量,细胞免疫荧光法检测胞内CDK5、Tau、Bax、Bcl-2蛋白的表达,qPCR法检测胞内凋亡因子caspase-3、Bax、Bcl-2 mRNA的表达。结果补阳还五汤类方能有效降低氧化应激模型细胞培养液中L-LDH的含量,增加胞内GSH、降低胞内ROS、抑制模型细胞内CDK5和Tau蛋白的过表达,下调凋亡因子caspase-3和Bax/Bcl-2。结论补阳还五汤类方可能通过CDK5信号转导途径有效抑制神经细胞凋亡,对脑缺血后神经细胞的损伤发挥保护作用。 展开更多
关键词 补阳还五汤类方 氧化应激细胞模型 细胞周期素依赖性蛋白激酶5 Tau Bcl-2 Bax
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过氧化氢诱导人肝癌细胞产生氧化应激最佳作用浓度的研究 被引量:3
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作者 韩飞 周孟良 《粮油食品科技》 2011年第1期62-64,共3页
不同浓度过氧化氢作用人肝癌细胞(HepG2)4 h后,用单细胞凝胶电泳技术测定DNA损伤状况,分光光度法测定MDA含量、SOD及GSH-Px活性,研究过氧化氢的最佳作用浓度,构建体外氧化应激细胞模型。实验结果表明,过氧化氢的最佳作用浓度为100μmol... 不同浓度过氧化氢作用人肝癌细胞(HepG2)4 h后,用单细胞凝胶电泳技术测定DNA损伤状况,分光光度法测定MDA含量、SOD及GSH-Px活性,研究过氧化氢的最佳作用浓度,构建体外氧化应激细胞模型。实验结果表明,过氧化氢的最佳作用浓度为100μmol/L,作用细胞的时间选择4 h,可以成功构建以过氧化氢为氧化应激诱导剂的HepG2细胞体外氧化应激模型。 展开更多
关键词 氧化 HEPG2细胞 氧化应激模型
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矢车菊素与矢车菊素-3-O-葡萄糖苷对H2O2诱导HepG-2细胞氧化应激保护作用的比较 被引量:3
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作者 张楚阳 张珂嘉 刘琴 《南京工业大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2018年第3期31-37,共7页
以人肝癌细胞HepG-2为模型,以细胞抗氧化水平为指标,比较研究一种花色苷元矢车菊素(Cy)和其对应的花色苷矢车菊素-3-O-葡萄糖苷(C3G)对H_2O_2诱导的细胞氧化应激的保护作用。采用噻唑蓝(MTT)法检测细胞的存活率,采用总抗氧化能力(T-AOC... 以人肝癌细胞HepG-2为模型,以细胞抗氧化水平为指标,比较研究一种花色苷元矢车菊素(Cy)和其对应的花色苷矢车菊素-3-O-葡萄糖苷(C3G)对H_2O_2诱导的细胞氧化应激的保护作用。采用噻唑蓝(MTT)法检测细胞的存活率,采用总抗氧化能力(T-AOC)和细胞中的超氧化物歧化酶(SOD)活力、谷胱甘肽(GSH)及丙二醛(MDA)的含量评价样品的抗氧化保护作用。结果表明:两种花青素在0~0.5 mmol/L范围内对HepG-2细胞无明显的毒性;与H_2O_2氧化应激模型组相比,在高(400μmol/L)、中(200μmol/L)、低(50μmol/L)3种浓度下两种结构的花青素处理均可显著提高细胞总抗氧化能力、超氧化物歧化酶活力和还原型谷胱甘肽含量,降低细胞内丙二醛含量,抗氧化能力与花青素浓度呈正相关性;而Cy的细胞抗氧化作用显著高于C3G。该研究结果为阐明花青素的构效关系提供了体外研究的新证据。 展开更多
关键词 矢车菊素 矢车菊素-3-O-葡萄糖苷 H2O2 氧化应激模型
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芦笋提取物的抗氧化作用的研究 被引量:4
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作者 马朝阳 马淑凤 +3 位作者 王芳 代卉 王周平 黄云祥 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2012年第22期365-368,共4页
目的:研究芦笋提取物对氧化应激小鼠抗氧化功能的影响。方法:以D-半乳糖衰老模型小鼠为研究对象,每天经口灌胃芦笋提取物和阳性对照药(VC),连续给予受试物30d后,测定其脂质过氧化水平和抗氧化酶活力。结果:芦笋提取物可以提高氧化应激... 目的:研究芦笋提取物对氧化应激小鼠抗氧化功能的影响。方法:以D-半乳糖衰老模型小鼠为研究对象,每天经口灌胃芦笋提取物和阳性对照药(VC),连续给予受试物30d后,测定其脂质过氧化水平和抗氧化酶活力。结果:芦笋提取物可以提高氧化应激小鼠血浆和肝脏中GSH、SOD、GSH-PX、T-AOC活性(p<0.05),显著降低其血浆和肝脏中MDA的含量(p<0.05)。结论:芦笋提取物有助于增强氧化应激小鼠的抗氧化能力。 展开更多
关键词 芦笋提取物 氧化 氧化应激模型 小鼠
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