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活性污泥中氧化亚氮还原酶提取和测定优化
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作者 杨睿 王刚 +4 位作者 袁林杰 于丽萍 有小龙 牛晚霞 袁林江 《环境科学与技术》 CAS CSCD 北大核心 2021年第12期99-104,共6页
污水生物脱氮过程中氧化亚氮的排放问题与活性污泥中细菌的氧化亚氮还原酶活性有着密切关系。但目前活性污泥中细菌的氧化亚氮还原酶提取和活性测定方法尚未建立。该文采用正交实验,研究了超声强度、超声次数和裂解液的添加与否等因素... 污水生物脱氮过程中氧化亚氮的排放问题与活性污泥中细菌的氧化亚氮还原酶活性有着密切关系。但目前活性污泥中细菌的氧化亚氮还原酶提取和活性测定方法尚未建立。该文采用正交实验,研究了超声强度、超声次数和裂解液的添加与否等因素对于胞内可溶性蛋白的释放与氧化亚氮还原酶催化活性的影响。根据活性污泥中氧化亚氮还原酶的催化特性以及其他实验条件,完善了氧化亚氮还原酶催化活性的测定方法。结果表明,超声法提取氧化亚氮还原酶的参数应设定为超声次数为60次,超声强度为400 W,不添加裂解液。在氧化亚氮还原酶催化活性的测定方法中,电子供体(连二亚硫酸钠)添加浓度应为150 mmol/L,氧化亚氮还原酶活性测定终点时间应为30 min。 展开更多
关键词 氧化亚氮 生物脱氮 氧化亚氮还原酶 提取 测定
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BioDeNO_x体系中N_2O还原的微生物学验证及参数研究
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作者 程鳌 陈浚 +1 位作者 郝红红 陈建孟 《环境科学与技术》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期58-62,66,共6页
氧化亚氮(N2O)是BioDeNOx脱硝过程中的主要中间产物,而N2O还原酶是影响NO进行完全反硝化的关键酶。实验以前期从同一反应体系中筛选出的一株反硝化菌Pseudomonas stutzeri ND1为出发菌株,克隆鉴定该反硝化菌是否具有N2O还原酶基因nosZ,... 氧化亚氮(N2O)是BioDeNOx脱硝过程中的主要中间产物,而N2O还原酶是影响NO进行完全反硝化的关键酶。实验以前期从同一反应体系中筛选出的一株反硝化菌Pseudomonas stutzeri ND1为出发菌株,克隆鉴定该反硝化菌是否具有N2O还原酶基因nosZ,并考察了pH、氧气、温度对该反应体系NO去除率以及N2O产生量、转化率的影响。实验证明该菌确实存在N2O还原酶nos,即从微生物学角度表明该反应体系具有N2O的生物还原能力。该反应体系的最适pH值为8.0,此时NO去除率达最大值80%,N2O产量降至0.33mg/m3,N2O转化率为0.06%;在氧气含量小于1%时,N2O产量及转化率变化不明显,NO去除率下降了不到2%,而当氧气含量达到2%时,N2O有了明显的跃升,达到1.5 mg/m3,N2O转化率为0.48%,NO去除率下降至78.6%;反应最适温度为30℃,此时NO去除率达到最大值82%,N2O产量为0.34 mg/m3,且N2O产量随着温度的增加而逐渐增多。 展开更多
关键词 BioDeNOx 反硝化菌 氧化亚氮还原酶 影响因素
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M. hydrocarbonoclasticus NY4中nosZ基因的克隆与异源表达 被引量:2
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作者 杨立志 王鹏胤 胡南 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期64-68,共5页
选取反硝化菌株Marinobacter hydrocarbonoclasticus NY4为试验对象,首先通过反硝化气态产物分析,证实了该菌株中N_2OR的存在;随后设计特异性引物并通过PCR扩增获取了nosZ的全长基因(1 896bp),该基因与来源于Geobacillus thermodenitrif... 选取反硝化菌株Marinobacter hydrocarbonoclasticus NY4为试验对象,首先通过反硝化气态产物分析,证实了该菌株中N_2OR的存在;随后设计特异性引物并通过PCR扩增获取了nosZ的全长基因(1 896bp),该基因与来源于Geobacillus thermodenitrificans的nosZ基因仅保持了46.9%的相似性;实现了nosZ基因在大肠杆菌中的异源表达,并成功检测到了N_2OR酶活,其比活力达到(0.2±0.01)U/mg。 展开更多
关键词 N2O 氧化亚氮还原酶 NOSZ 异源表达
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