气肿疽梭菌C54-1株的制备与检定

1

作者 任小侠 冯妍 +6 位作者 马欣 刘燕 王团结 杜吉革 潘晨帆 刘世博 张一帜 《中国兽药杂志》 2024年第2期10-17,共8页

为研究气肿疽梭菌C54-1株(CVCC60001)的菌种特性,制备了1批气肿疽梭菌C54-1株,并对菌种的形态及生化特性、培养特性、血清学特性、真空度、纯粹、剩余水分、毒力及免疫原性、16S rDNA等进行检定,以及对于该菌的适宜培养基促生长能力等... 为研究气肿疽梭菌C54-1株(CVCC60001)的菌种特性,制备了1批气肿疽梭菌C54-1株,并对菌种的形态及生化特性、培养特性、血清学特性、真空度、纯粹、剩余水分、毒力及免疫原性、16S rDNA等进行检定,以及对于该菌的适宜培养基促生长能力等方面进行了比较。实验结果表明,该冻干菌种的形态及生化特性、培养特性、血清学特性、真空度、纯粹、剩余水分、毒力及免疫原性均符合《中华人民共和国兽用生物制品规程》二〇〇〇版质量标准的规定。16S rDNA鉴定为气肿疽梭菌,相似度为99.93%。在免疫原性检定中,使用致死剂量攻毒时,免疫组能够4/4被保护,证明该菌明矾苗免疫效果良好。使用商品化梭菌培养基对于该菌培养进行了比对,证实商品化培养基替代厌气肉肝汤的可能性。本研究为气肿疽梭菌的制备和检定提供参考依据,并使用不同培养基进行比对研究,为该菌的稳定培养和疫苗工艺改进提供了研究基础。 展开更多

关键词 气肿疽梭菌C54-1株 CVCC60001 毒力 免疫原性 培养基筛选 强化梭菌培养基(RCM) 苏木精-伊红染色法

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气肿疽梭菌菌体抗原分析 被引量：5

2

作者 陈莹莹 金鑫 +5 位作者 姜成国 娄安钢 姜丹丹 汪雪烨 邓文学 李香春 《安徽农业科学》 CAS 2012年第17期9267-9269,共3页

[目的]了解气肿疽梭菌的抗原特性。[方法]对气肿疽梭菌标准菌株(C54-1)的菌体抗原进行提纯过柱,通过制备小鼠免疫血清及免疫印迹技术进行了反应原性试验。[结果]气肿疽梭菌的菌体抗原有8条蛋白带,电泳图谱上分别出现了与之相对应的条带... [目的]了解气肿疽梭菌的抗原特性。[方法]对气肿疽梭菌标准菌株(C54-1)的菌体抗原进行提纯过柱,通过制备小鼠免疫血清及免疫印迹技术进行了反应原性试验。[结果]气肿疽梭菌的菌体抗原有8条蛋白带,电泳图谱上分别出现了与之相对应的条带,分子质量分别为93、72、56、46、38、26、15、11 kD,其中第2(72 kD)、5(38 kD)、6(26 kD)峰的抗原表现出明显的特异性。用酶联免疫印迹技术分析气肿疽梭菌分泌蛋白的抗原组分,气肿疽梭菌感染小鼠的血清能与抗原组分蛋白发生反应,其中72、38、26 kD蛋白带显色最深。[结论]为气肿疽梭菌的深入研究提供了理论依据。 展开更多

关键词 气肿疽梭菌 菌体抗原 SDS-PAGE 免疫印迹

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气肿疽梭菌检测方法概述 被引量：3

3

作者 张皓 任春宇 +3 位作者 车达 张永佳 李成辉 金鑫 《动物医学进展》 北大核心 2017年第9期119-121,共3页

气肿疽(Clostridium chauvoei infection)病原体为气肿疽梭菌,是一种发生于反刍动物的急性、热性、败血性传染病。常见的典型症状为发病动物肌肉丰满部位发生炎性、气性肿胀,触压有捻发音,该病的流行有一定的地方性、季节性,多发生在潮... 气肿疽(Clostridium chauvoei infection)病原体为气肿疽梭菌,是一种发生于反刍动物的急性、热性、败血性传染病。常见的典型症状为发病动物肌肉丰满部位发生炎性、气性肿胀,触压有捻发音,该病的流行有一定的地方性、季节性,多发生在潮湿的山谷、牧场,且在天气炎热的多雨季节。近几年常有暴发牛气肿疽的报道,给养殖业的发展带来了巨大的冲击和经济损失,同时也逐渐地威胁到畜牧生产和人类的安全。国内关于该病的研究多数为病例报道,对于该病的详细研究和综述却是少之又少,论文参考国内外相关文献,从方法、原理、优缺点等多个方面阐述气肿疽的检测方法,以期为该病的诊断提供参考。 展开更多

关键词 气肿疽梭菌 检测方法 免疫学 分子生物学

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气肿疽梭菌HLJ-1株分离鉴定及系统进化分析 被引量：6

4

作者 周金玲 吴丹丹 +2 位作者 周玉龙 朱战波 朴范泽 《黑龙江八一农垦大学学报》 2016年第6期83-88,共6页

2015年6月,内蒙古某牛场爆发疑似气肿疽疫病,为了有效防控该病,无菌采集炎性气肿的肌肉进行需氧和厌氧菌的分离鉴定和药敏试验,结果在厌氧条件下从患病牛肌肉内分离出无荚膜,革兰氏染色呈阳性两端钝圆的杆菌。经表型特征和生化鉴定表明... 2015年6月,内蒙古某牛场爆发疑似气肿疽疫病,为了有效防控该病,无菌采集炎性气肿的肌肉进行需氧和厌氧菌的分离鉴定和药敏试验,结果在厌氧条件下从患病牛肌肉内分离出无荚膜,革兰氏染色呈阳性两端钝圆的杆菌。经表型特征和生化鉴定表明分离菌株与气肿疽梭菌相符,进一步对16S rDNA通用引物扩增得到的基因测序结果分析表明,其与气肿疽梭菌株同源性最高达95.8%,毒素检测表明含有α毒素。以上结果证明该菌株为气肿疽梭菌。分离菌株对蒽诺沙星、环丙沙星等药物高度敏感。为该病的防制提供了理论依据和物质基础。 展开更多

关键词 牛 气肿疽梭菌 分离 鉴定

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二重PCR方法鉴别气肿疽梭菌和腐败梭菌 被引量：6

5

作者 彭小兵 李旭妮 +3 位作者 王楠 何宇 丁家波 蒋玉文 《中国兽药杂志》 2011年第3期20-22,共3页

用包含16S～23S rDNA间隔区和23S rDNA的部分序列作为气肿疽梭菌特异性标志,以α毒素部分序列作为腐败梭菌特异性标志,建立了鉴别气肿疽梭菌和腐败梭菌的二重PCR方法。结果显示:气肿疽梭菌C54-1株扩增出大小为509 bp的条带,腐败梭菌C55-... 用包含16S～23S rDNA间隔区和23S rDNA的部分序列作为气肿疽梭菌特异性标志,以α毒素部分序列作为腐败梭菌特异性标志,建立了鉴别气肿疽梭菌和腐败梭菌的二重PCR方法。结果显示:气肿疽梭菌C54-1株扩增出大小为509 bp的条带,腐败梭菌C55-1株、C55-16株均扩增出大小为148 bp的条带,均与预期吻合;而产气荚膜梭菌C57-1株、C59-37株,肉毒梭菌C62-4株,诺维梭菌C61-4株均未扩增出任何条带。扩增产物的测序结果进一步证实了本方法的特异性。菌株的生物学特性试验结果也符合相应气肿疽梭菌和腐败梭菌的特点。本研究所建立的二重PCR方法可用于气肿疽梭菌和腐败梭菌的快速鉴定。 展开更多

关键词 气肿疽梭菌 腐败梭菌 16S^23SrDNA 二重PCR

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气肿疽梭菌NanA基因核酸疫苗的免疫效果评价 被引量：2

6

作者 陈竞 张皓 +3 位作者 马玉腾 于成东 齐强 金鑫 《动物医学进展》 北大核心 2019年第12期68-73,共6页

为了检测气肿疽梭菌NanA基因核酸疫苗的免疫效果,在成功构建pVAX1-NanA真核表达重组质粒的基础上将其转染至Vero细胞,通过间接免疫荧光鉴定其表达,并将成功构建的pVAX1-NanA质粒大量提取后免疫Balb/c小鼠,设置pVAX1-NanA核酸疫苗组、pV... 为了检测气肿疽梭菌NanA基因核酸疫苗的免疫效果,在成功构建pVAX1-NanA真核表达重组质粒的基础上将其转染至Vero细胞,通过间接免疫荧光鉴定其表达,并将成功构建的pVAX1-NanA质粒大量提取后免疫Balb/c小鼠,设置pVAX1-NanA核酸疫苗组、pVAX1空载体组和PBS对照组。对小鼠采血并分离血清,用ELISA测定血清中的IgG、IgG1、IgG2a抗体水平和IFN-γ、IL-4细胞因子水平;第3次免疫2周后,用流式细胞仪测定小鼠脾脏中的CD4^+和CD8^+T细胞水平。结果表明,pVAX1-NanA核酸疫苗免疫Balb/c小鼠后,小鼠血清中IgG、IgG1、IgG2a的抗体水平极显著高于pVAX1空载体组和PBS对照组(P<0.01);IFN-γ和IL-4细胞因子水平极显著高于pVAX1空载体组和PBS对照组(P<0.01);CD4^+、CD8^+T细胞分析表明,pVAX1-NanA免疫组的CD4^+和CD8^+T细胞水平显著高于pVAX1组和PBS对照组(P<0.05),pVAX1-NanA核酸疫苗组的CD4^+/CD8^+T细胞比值高于pVAX1空载体组与PBS对照组(P<0.05),pVAX1空载体组和PBS对照组之间无显著差异(P>0.05)。试验成功制备了pVAX1-NanA核酸疫苗,且pVAX1-NanA核酸疫苗可刺激Balb/c小鼠产生体液免疫和细胞免疫。 展开更多

关键词 气肿疽梭菌 NanA基因 核酸疫苗 免疫原性

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气肿疽梭菌CctA基因的真核表达 被引量：1

7

作者 陈竞 齐强 +7 位作者 罗永仁 张皓 李成辉 任春宇 车达 姜永越 于建华 金鑫 《动物医学进展》 北大核心 2018年第12期72-75,共4页

为了控制延边地区气肿疽病的发病率,制备出有效的核酸疫苗,根据NCBI上气肿疽梭菌细胞毒素A(CctA)的基因序列设计出一对特异性引物。将PCR扩增的CctA基因克隆到pMD19-Tsimple载体,对测序正确的基因进行序列分析,再次克隆至pcDNA3.1-1真... 为了控制延边地区气肿疽病的发病率,制备出有效的核酸疫苗,根据NCBI上气肿疽梭菌细胞毒素A(CctA)的基因序列设计出一对特异性引物。将PCR扩增的CctA基因克隆到pMD19-Tsimple载体,对测序正确的基因进行序列分析,再次克隆至pcDNA3.1-1真核表达载体,并且将其转染Vero细胞。结果表明,pcDNA3.1-CctA组通过转染后的细胞存在绿色荧光的现象,同时pcDNA3.1-CctA重组质粒表达的产物大小约19ku,说明Vero细胞中的pcDNA3.1-CctA质粒成功表达了CctA蛋白。 展开更多

关键词 气肿疽梭菌 CctA基因 真核表达 载体

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利用SOE-PCR与TD-PCR技术对气肿疽梭菌FliA(C)-NanA融合基因扩增方法的构建 被引量：4

8

作者 李香春 金鑫 +2 位作者 朴春宇 金成德 朴春实 《安徽农业科学》 CAS 2013年第24期9921-9923,共3页

[目的]构建联合表达气肿疽梭菌的鞭毛蛋白与分泌蛋白神经氨酸酶的方法,用以制备气肿疽生物工程亚单位疫苗。[方法]根据已公布的气肿疽梭菌FliA(C)和NanA序列设计引物,联合使用SOE-PCR与TD-PCR技术,建立融合基因FliA(C)-NanA的扩增方法。... [目的]构建联合表达气肿疽梭菌的鞭毛蛋白与分泌蛋白神经氨酸酶的方法,用以制备气肿疽生物工程亚单位疫苗。[方法]根据已公布的气肿疽梭菌FliA(C)和NanA序列设计引物,联合使用SOE-PCR与TD-PCR技术,建立融合基因FliA(C)-NanA的扩增方法。[结果]试验成功扩增出了融合基因FliA(C)-NanA。[结论]SOE-PCR方法无需在引物设计中加入酶切位点进行连接,降低了试验成本,且2个基因间未加入其他核酸序列,避免了表达出影响免疫效果的蛋白;TD-PCR的应用节省了试验时间,避免了筛选退火温度的繁琐步骤,解决了基因丢失的问题。 展开更多

关键词 气肿疽梭菌 融合基因 SOE-PCR TD-PCR

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延边黄牛气肿疽间接ELISA诊断方法的建立 被引量：10

9

作者 车达 金鑫 +4 位作者 陈莹莹 费景春 姜丹丹 吴丹 王笑玉 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2011年第2期1042-1044,共3页

[目的]检测延边黄牛气肿疽病原体,为牛气肿疽的检测提供科学方法和依据。[方法]采用气肿疽梭菌裂解菌体为抗原,建立检测该病原菌的酶联免疫吸附检测方法,确定其最适工作条件。[结果]气肿疽梭菌菌体裂解抗原最适包被浓度为50μg/m l;待... [目的]检测延边黄牛气肿疽病原体,为牛气肿疽的检测提供科学方法和依据。[方法]采用气肿疽梭菌裂解菌体为抗原,建立检测该病原菌的酶联免疫吸附检测方法,确定其最适工作条件。[结果]气肿疽梭菌菌体裂解抗原最适包被浓度为50μg/m l;待检血清的最适稀释度为1∶200,酶标二抗的最适工作浓度为1∶2 000;对随机采集于延边地区的30份牛血清样品进行间接ELISA检测,阳性率为20%。[结论]建立的间接ELISA方法特异性和重复性好。 展开更多

关键词 延边黄牛 气肿疽梭菌 菌体抗原 间接ELISA

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家畜气肿疽的研究进展 被引量：7

10

作者 陈发喜 蔡扩军 +2 位作者 范玉娟 何克明 王清平 《草食家畜》 2015年第3期6-10,共5页

气肿疽是由气肿疽梭菌感染牛、羊和其它动物所引起的急性、败血性传染病,以肌肉丰满部位发生炎性肿胀、坏死为特征。世界上所有养牛的国家均有本病的发生并具有较高的死亡率,对全球的养殖业尤其是养牛业造成一定的经济损失。该病在我国... 气肿疽是由气肿疽梭菌感染牛、羊和其它动物所引起的急性、败血性传染病,以肌肉丰满部位发生炎性肿胀、坏死为特征。世界上所有养牛的国家均有本病的发生并具有较高的死亡率,对全球的养殖业尤其是养牛业造成一定的经济损失。该病在我国各地均有发生,影响我国养牛业的健康发展。本文对该病的病原学、流行病学、临床症状、发病机理、病理变化、诊断方法、防治措施等几个方面进行了综述,以期为该病的有效防控提供有益的参考。 展开更多

关键词 气肿疽 气肿疽梭菌 概述

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羊气肿疽的诊断与防治措施 被引量：5

11

作者 吴增辉 李慧姝 《养殖技术顾问》 2013年第5期102-102,共1页

气肿疽是由气肿疽梭菌引起羊的急性、高热性、败血性传染病。以组织坏死、产气和水肿为主要特征，又称鸣疽、气肿性炭疽、黑腿病。本病呈世界性分布，由于疫苗的应用，许多国家已控制或消灭此病。

关键词 气肿疽梭菌 防治 诊断 败血性传染病 羊 组织坏死 世界性 水肿

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环青海湖地区牦牛气肿疽的流行情况及综合防制 被引量：4

12

作者 董永鸿 李万财 许正林 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2010年第7期207-208,共2页

关键词 气肿疽梭菌 环青海湖地区 综合防制 流行情况 牦牛 败血性传染病 反刍动物 冬春季节

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牛气肿疽诊断与综合防治 被引量：4

13

作者 孙瑛 雷国云 于林洁 《中国畜禽种业》 2008年第17期59-60,共2页

气肿疽俗称黑腿病或鸣疽，是一种由气肿疽梭菌引起的反刍动物的一种急性败血性传染病。其特征是局部骨胳肌的出血坏死性炎、皮下和肌间结缔组织鳃液出血牲炎，并在其中产生气体，压之有捻发音．严重者常伴有跛行。气肿疽病主要危害黄牛... 气肿疽俗称黑腿病或鸣疽，是一种由气肿疽梭菌引起的反刍动物的一种急性败血性传染病。其特征是局部骨胳肌的出血坏死性炎、皮下和肌间结缔组织鳃液出血牲炎，并在其中产生气体，压之有捻发音．严重者常伴有跛行。气肿疽病主要危害黄牛，以黄牛的易感性最大．且多发生在3岁以下的小牛群中，其主要传染源是病牛，其次为绵羊和水牛，该病对人畜危害巨大。 展开更多

关键词 气肿疽梭菌 综合防治 黄牛 诊断 败血性传染病 反刍动物 结缔组织 气肿疽病

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牛气肿疽的发病机理和流行病学调查 被引量：3

14

作者 张师杨 《现代畜牧科技》 2015年第11期66-66,共1页

1发病机理 气肿疽梭菌是严格的厌氧性细菌，有创伤感染时，细菌必须在组织深部且在缺氧的条件下才能繁殖。有饲料和饮水经口感染时，细菌是从消化道黏膜的破损处侵入，随着血液或淋巴液进入肌肉，因而在有丰富肝糖的肌肉中大量繁殖，... 1发病机理 气肿疽梭菌是严格的厌氧性细菌，有创伤感染时，细菌必须在组织深部且在缺氧的条件下才能繁殖。有饲料和饮水经口感染时，细菌是从消化道黏膜的破损处侵入，随着血液或淋巴液进入肌肉，因而在有丰富肝糖的肌肉中大量繁殖，其结果是使受害的肌肉组织形成急性坏疽性肌炎。用强毒菌液给黄牛连续皮下注射3次，每隔3天1次，剂量各为2mL、5mL、10mL，都不发病。第四次改为肌肉注射，剂量为3mL，注射后随即发病于第三天死亡。由此可见，该病菌适宜于在肌肉组织内生长。 展开更多

关键词 气肿疽梭菌 发病机理 流行病学调查 黄牛 肌肉注射 创伤感染 组织形成 皮下注射

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牛气肿疽的治疗与预防 被引量：1

15

作者 韦绍婉 韦绍辉 《养殖技术顾问》 2011年第2期80-81,共2页

气肿疽病毒俗称＂黑腿病＂,是由气肿疽梭菌引起牛的急性、热性、败血性传染病,病原体为气肿疽杆菌,在体内、外均能形成芽孢且抵抗力很强。1999年我市龙胜、资源、永福、全州4个县,共9个乡镇、16个自然村发生过本病,病牛227头,死亡122头... 气肿疽病毒俗称＂黑腿病＂,是由气肿疽梭菌引起牛的急性、热性、败血性传染病,病原体为气肿疽杆菌,在体内、外均能形成芽孢且抵抗力很强。1999年我市龙胜、资源、永福、全州4个县,共9个乡镇、16个自然村发生过本病,病牛227头,死亡122头,死亡率达53.74%。现具体介绍如下。 展开更多

关键词 气肿疽梭菌 病牛 预防 治疗 败血性传染病 死亡率 病原体 抵抗力

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乡村牛气肿疽的调查及防治探讨 被引量：1

16

作者 陈长旺 《广西畜牧兽医》 2010年第1期35-37,共3页

关键词 综合防治 气肿疽梭菌 牛 乡村 接触性传染病 气肿疽病 反刍动物 发病原因

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浅谈牛气肿疽的诊防措施 被引量：1

17

作者 尹以凡 尹安成 +2 位作者 林国信 刘定义 和平 《中国畜禽种业》 2012年第2期110-110,共1页

气肿疽俗称黑腿病或鸣疽,是一种由气肿疽梭菌引起的反刍动物的一种急性、败血性传染病。其特征是肌肉丰满部位发生气性炎性水肿,以局部的骨胳肌发生出血坏死性炎、皮下和肌间结缔组织出血性炎,并在其中产生气体,压之有捻发者,严重者常... 气肿疽俗称黑腿病或鸣疽,是一种由气肿疽梭菌引起的反刍动物的一种急性、败血性传染病。其特征是肌肉丰满部位发生气性炎性水肿,以局部的骨胳肌发生出血坏死性炎、皮下和肌间结缔组织出血性炎,并在其中产生气体,压之有捻发者,严重者常伴有跛行。1流行特点气肿疽主要发生于牛,自然感染一般多发于黄牛、水牛、奶牛、牦牛、 展开更多

关键词 气肿疽梭菌 黄牛 败血性传染病 反刍动物 结缔组织 流行特点 自然感染 出血性

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牛气肿疽病的防控措施 被引量：1

18

作者 张绍兵 姚文静 贾敬亮 《北方牧业》 2023年第2期40-40,共1页

牛气肿疽病是由气肿疽梭菌引起的一种牛急性败血性传染性疾病,俗称黑腿病或鸣疽病。临床典型症状为病牛局部骨骼肌出血性坏死,皮下和肌间结缔组织出血,发病过程中产生大量气体,在患病牛肌肉丰满的组织器官出现臌胀,挤压有捻发音,突然发... 牛气肿疽病是由气肿疽梭菌引起的一种牛急性败血性传染性疾病,俗称黑腿病或鸣疽病。临床典型症状为病牛局部骨骼肌出血性坏死,皮下和肌间结缔组织出血,发病过程中产生大量气体,在患病牛肌肉丰满的组织器官出现臌胀,挤压有捻发音,突然发病,多伴有患病牛跛行,是土壤病之一。1流行情况牛气肿疽病的病原体在自然界中广泛存在,传染源是病畜和被病畜排泄物、分泌物或者病死牲畜尸体污染的土壤、水源及饲养设备等,但并不是由病畜直接传给易感动物。 展开更多

关键词 肌间结缔组织 气肿疽梭菌 饲养设备 性传染性疾病 易感动物 急性败血 捻发音 典型症状

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牛气肿疽的流行、鉴别与治疗

19

作者 张树合 《养殖技术顾问》 2013年第10期129-129,共1页

1流行特点该病的传染源为病畜，但并不是由病畜直接或以器物传给健康牛，主要的传染媒介是土壤。即病畜尸体中的病菌污染了土壤，芽孢可较长时间存在于土壤中。牛一般是因吃了被气肿疽梭菌芽孢所污染的饲料和饮水，通常情况下，病菌通... 1流行特点该病的传染源为病畜，但并不是由病畜直接或以器物传给健康牛，主要的传染媒介是土壤。即病畜尸体中的病菌污染了土壤，芽孢可较长时间存在于土壤中。牛一般是因吃了被气肿疽梭菌芽孢所污染的饲料和饮水，通常情况下，病菌通过消化道进人体内，可由口腔和咽喉创伤侵入组织，也可由松弛或受伤的胃肠黏膜侵入血液，也可通过去势、创伤进入动物机体内，一般以6个月至3岁期间的牛最易感。 展开更多

关键词 气肿疽梭菌 健康牛 治疗 鉴别 流行特点 传染源 病畜 土壤

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鹿气肿疽的诊断与治疗

20

作者 赵美英 《养殖技术顾问》 2014年第4期73-73,共1页

鹿气肿疽又称黑腿病或鸣疽，是由气肿疽梭菌引起的一种急性热性传染病。以在肌肉丰满部位发生气性炎性肿胀，伴有捻发音和跛行为特征。

关键词 气肿疽梭菌 治疗 诊断 鹿 热性传染病 行为特征 腿病

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