毛细管电泳-激光诱导荧光检测法测定卡托普利和N-乙酰-L-半胱氨酸 被引量：4

1

作者 曹丽伟 石依卉 +2 位作者 魏甜 谭小芳 孟建新 《分析科学学报》 CSCD 北大核心 2017年第2期217-221,共5页

建立了一种高效、快速的毛细管电泳分离-激光诱导荧光(CE-LIF)检测卡托普利(CAP)和N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)的分析方法。采用1,3,5,7-四甲基-8-溴甲基-二氟二硼-二吡咯甲川(TMMB-Br)为柱前衍生试剂,在50 mmol/L磷酸盐缓冲溶液(pH=8.5)中... 建立了一种高效、快速的毛细管电泳分离-激光诱导荧光(CE-LIF)检测卡托普利(CAP)和N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)的分析方法。采用1,3,5,7-四甲基-8-溴甲基-二氟二硼-二吡咯甲川(TMMB-Br)为柱前衍生试剂,在50 mmol/L磷酸盐缓冲溶液(pH=8.5)中,40℃下进行衍生反应10min。以荧光素为内标,25mmol/L硼酸盐缓冲溶液(pH=9.5)为电泳背景电解质,14min内达到基线分离。CAP和NAC的检出限分别为0.65nmol/L、0.76nmol/L。将该方法应用于人体尿液和血清中这两种物质的测定,回收率在97.0%~105.7%之间。 展开更多

关键词 毛细管电泳分离-激光诱导荧光检测法 卡托普利 N-乙酰-L-半胱氨酸 衍生

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毛细管电泳-激光诱导荧光检测法分离检测谷胱甘肽及其构成氨基酸 被引量：11

2

作者 王宇飞 蔡元丽 +2 位作者 林夏 晏瑾 李晖 《化学研究与应用》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期311-316,共6页

以4-氯-7-硝基苯并-2-氧杂-1,3-二唑(NBD-Cl)为柱前衍生试剂,建立了一种毛细管电泳-激光诱导荧光直接检测氧化型和还原型谷胱甘肽及其构成氨基酸(谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸)的新方法。经过实验条件的优化,采用25 mmol/L硼砂-20 mmol/L... 以4-氯-7-硝基苯并-2-氧杂-1,3-二唑(NBD-Cl)为柱前衍生试剂,建立了一种毛细管电泳-激光诱导荧光直接检测氧化型和还原型谷胱甘肽及其构成氨基酸(谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸)的新方法。经过实验条件的优化,采用25 mmol/L硼砂-20 mmol/L聚氧乙烯月桂醚(Brij-35)-5%乙腈(pH 9.5)的缓冲体系,在柱温为25°C、分离电压为20 kV的条件下,压力进样3447.5 Pa(0.5 psi)×3 s,五种物质在11 min内实现高效基线分离。在该方法下,还原型谷胱甘肽、氧化型谷胱甘肽、谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸的线性范围分别为:1～50μg/mL,1～50μg/mL,0.5～25μg/mL,1～50μg/mL,0.1～20μg/mL;检测限分别为:0.1μg/mL,0.1μg/mL,0.005μg/mL,0.1μg/mL,0.001μg/mL。以还原型谷胱甘肽钠粉针剂为样品,方法的加标回收率为99.5%～110.7%,相对标准偏差为0.26%～3.272%(n=3)。该方法准确、快速、灵敏、检测限低,有望用于样品中氧化型和还原型谷胱甘肽及其构成氨基酸的含量分析。 展开更多

关键词 胶束电动色谱-激光诱导荧光检测法 多肽 氨基酸 4-氯-7-硝基苯并-2-氧杂-1 3-二唑(NBD-Cl)

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毛细管电泳分离-激光诱导荧光检测巴氯芬和加巴喷丁 被引量：2

3

作者 曹丽伟 李聪 任东 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期485-488,共4页

采用新合成的6-氧-(N-琥珀酰亚胺乙酸酯)-9-(2'-甲氧羰基)荧光素(SAMF)作为柱前衍生试剂,用甘氨酸做内标,毛细管电泳分离-激光诱导荧光检测血清中的巴氯芬(baclofen)和加巴喷丁(gabapentin).研究表明,在磷酸盐缓冲溶液(pH=8)介质中... 采用新合成的6-氧-(N-琥珀酰亚胺乙酸酯)-9-(2'-甲氧羰基)荧光素(SAMF)作为柱前衍生试剂,用甘氨酸做内标,毛细管电泳分离-激光诱导荧光检测血清中的巴氯芬(baclofen)和加巴喷丁(gabapentin).研究表明,在磷酸盐缓冲溶液(pH=8)介质中,25℃下15 min即可完成衍生反应.以pH=5的30 mmol/L的磷酸盐缓冲溶液作为电泳介质,衍生产物在16 min内达到电泳基线分离,检出限为4×10-10 mol/L.将新建立的方法用于血清中巴氯芬、加巴喷丁的分析测定,回收率为95.5%～102.01%,结果令人满意. 展开更多

关键词 巴氯芬 加巴喷丁 毛细管电泳分离-激光诱导荧光检测 6-氧-(N-琥珀酰亚胺乙酸酯)-9-(2- 甲氧羰基)荧光素 衍生

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毛细管电泳-激光诱导荧光检测法测定抗癫痫药加巴喷丁 被引量：8

4

作者 蔡元丽 杨甲甲 +2 位作者 王宇飞 白珂珂 李晖 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期1179-1184,共6页

建立了毛细管电泳-激光诱导荧光(CE-LIF)测定抗癫痫药加巴喷丁的方法。加巴喷丁经4-氯-7-硝基苯并-2-氧杂-1,3-二唑(NBD-Cl)衍生化后,采用10mmol/L硼砂-10mmol/L十二烷基硫酸钠(pH9.75)的缓冲体系,加巴喷丁在6min内实现高效基线分离。... 建立了毛细管电泳-激光诱导荧光(CE-LIF)测定抗癫痫药加巴喷丁的方法。加巴喷丁经4-氯-7-硝基苯并-2-氧杂-1,3-二唑(NBD-Cl)衍生化后,采用10mmol/L硼砂-10mmol/L十二烷基硫酸钠(pH9.75)的缓冲体系,加巴喷丁在6min内实现高效基线分离。方法的线性范围为0.01～10mg/L(r=0.999 7),检出限为2μg/L,定量限为10μg/L。方法的平均回收率为100.2%～103.1%,相对标准偏差为0.15%～1.00%(n=3)。该方法灵敏、快速、准确和可靠,已用于加巴喷丁药物制剂的质量控制。 展开更多

关键词 毛细管电泳-激光诱导荧光检测 加巴喷丁 4-氯-7-硝基苯并-2-氧杂-1 3-二唑 抗癫痫药

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毛细管电泳-激光诱导荧光用于肌肽类生物活性肽的分离检测

5

作者 黄颖 段建平 +2 位作者 陈红青 蒋秀燕 陈国南 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2004年第z1期115-116,共2页

　　肌肽类生物活性肽是一类含组氨酸的二肽,广泛分布在脊椎动物体的骨骼肌以及神经组织中,具有抗氧化及保持生物体酸碱平衡等重要生物学功能.生物体液中这类物质的含量大小可以作为临床上诊断某些代谢疾病的依据[1,2].本文以3-(4-羰基... 　　肌肽类生物活性肽是一类含组氨酸的二肽,广泛分布在脊椎动物体的骨骼肌以及神经组织中,具有抗氧化及保持生物体酸碱平衡等重要生物学功能.生物体液中这类物质的含量大小可以作为临床上诊断某些代谢疾病的依据[1,2].本文以3-(4-羰基苯甲酰基)-喹啉-2-羰醛(CBQCA)为柱前衍生试剂,对肌肽(Car)、鹅肌肽(Ans)和高肌肽(Hcar)进行了柱前衍生,建立了高效、灵敏的毛细管电泳-激光诱导荧光检测方法.…… 展开更多

关键词 毛细管电泳-激光诱导荧光检测 生物活性肽 分离

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芯片毛细管电泳-激光诱导荧光-电荷耦合器件检测系统 被引量：3

6

作者 陈洪 曾勇 +2 位作者 刘笔锋 庞代文 程介克 《分析科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期93-96,共4页

采用自组建的芯片毛细管电泳 -激光诱导荧光 -电荷耦合器件 ( CCD)检测系统在数十秒内满意地分离了曙红和荧光素。设计了一种进样、分离电路 ,可以有效地消除进样通道的样品溶液向分离通道的渗漏。解决了由这种渗漏所引起的电泳峰变宽... 采用自组建的芯片毛细管电泳 -激光诱导荧光 -电荷耦合器件 ( CCD)检测系统在数十秒内满意地分离了曙红和荧光素。设计了一种进样、分离电路 ,可以有效地消除进样通道的样品溶液向分离通道的渗漏。解决了由这种渗漏所引起的电泳峰变宽、拖尾等问题。 展开更多

关键词 芯片毛细管电泳 激光诱导荧光 电荷耦合器件 曙红 荧光素 检测系统 电泳分离

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一种便携式毛细管电泳-激光诱导荧光检测仪的研制及性能考察 被引量：2

7

作者 余晓 袁凯松 +2 位作者 翟海云 刘振平 苏子豪 《理化检验（化学分册）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期334-338,共5页

毛细管电泳技术（CE）自1981年提出以来,得到了快速的发展。由于采用高电场,其柱效高、分离速度快、样品用量少,在生命科学、环境检测、药物分析和食品检验等领域得到了广泛应用[1-4],其常见的检测方法有紫外-可见吸收法、化学发光法、... 毛细管电泳技术（CE）自1981年提出以来,得到了快速的发展。由于采用高电场,其柱效高、分离速度快、样品用量少,在生命科学、环境检测、药物分析和食品检验等领域得到了广泛应用[1-4],其常见的检测方法有紫外-可见吸收法、化学发光法、电化学法及荧光法等[5]。在实际样品检测中,目标物的含量较低,且其检测信号还易受成分复杂的样品基质的干扰,因此,需要灵敏度高的分析方法。 展开更多

关键词 毛细管电泳 检测仪 激光诱导 荧光检测法 样品基质 食品检验 分离速度 化学发光 罗丹明 荧光法

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胶束电动色谱-激光诱导荧光检测法测定肌松弛药巴氯芬

8

作者 王宇飞 杨甲甲 +2 位作者 蔡元丽 林夏 李晖 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期1230-1235,共6页

以4-氯-7-硝基苯并-2-氧杂-1,3-二唑(NBD-Cl)为柱前衍生试剂,建立了胶束电动色谱-激光诱导荧光检测法测定肌松弛药巴氯芬(BAL)的新方法。经过实验条件的优化,采用15 mmol/L硼砂、20 mmol/L十二烷基硫酸钠、10%(v/v)乙腈、pH 9.75的缓冲... 以4-氯-7-硝基苯并-2-氧杂-1,3-二唑(NBD-Cl)为柱前衍生试剂,建立了胶束电动色谱-激光诱导荧光检测法测定肌松弛药巴氯芬(BAL)的新方法。经过实验条件的优化,采用15 mmol/L硼砂、20 mmol/L十二烷基硫酸钠、10%(v/v)乙腈、pH 9.75的缓冲体系,在分离电压为17.5 kV、柱温为25℃的条件下,压力进样3.45 kPa(0.5 psi)×3 s,巴氯芬及其内标物的衍生产物在7 min内实现较好的基线分离,线性范围为0.025～25 mg/L,相关系数为0.999 9,检出限(S/N=3)和定量限(S/N=10)分别为0.90μg/L和6.25μg/L。该方法被应用于巴氯芬制剂及加入巴氯芬对照品的尿液样品分析,回收率范围分别为101.6%～107.9%和107.0%～109.6%。该方法有望应用于巴氯芬药物制剂的质量监控以及为巴氯芬药物代谢的研究提供辅助手段。 展开更多

关键词 毛细管电泳 胶束电动色谱-激光诱导荧光检测 衍生化 巴氯芬 4-氯-7-硝基苯并-2-氧杂-1 3-二唑

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毛细管电泳-激光诱导荧光法测定细胞中谷胱甘肽 被引量：5

9

作者 门雪 吴成新 +1 位作者 陈明丽 王建华 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期87-93,共7页

谷胱甘肽(GSH)在抵抗氧化应激和重金属解毒过程中发挥着重要作用,建立灵敏、准确的GSH定量分析方法对于研究细胞重金属毒性机制具有深远意义。该研究以肝癌细胞(HepG2)为研究对象,以活性基团为芳香邻二醛的2,3-萘二甲醛(NDA)为标记试剂... 谷胱甘肽(GSH)在抵抗氧化应激和重金属解毒过程中发挥着重要作用,建立灵敏、准确的GSH定量分析方法对于研究细胞重金属毒性机制具有深远意义。该研究以肝癌细胞(HepG2)为研究对象,以活性基团为芳香邻二醛的2,3-萘二甲醛(NDA)为标记试剂,建立了一种高灵敏度的测定细胞中GSH含量的毛细管电泳-激光诱导荧光检测方法(CE-LIF)。实验考察了缓冲溶液的种类、pH、添加剂等对GSH与NDA的反应速率和NDA-GSH检测灵敏度的影响。比较了pH为7.4和9.2的三羟甲基氨基甲烷(Tris)缓冲溶液、pH为9.2的硼砂和Tris缓冲溶液中NDA-GSH的灵敏度和反应速率,结果显示在pH为9.2的硼砂缓冲溶液中NDA-GSH的灵敏度最高且反应速率最快。进一步比较了4种添加剂对NDA-GSH灵敏度的影响,结果显示以β-环糊精(β-CD)作为添加剂效果最好。在最优的实验条件下,GSH与NDA可以在5 min内达到反应平衡,3 min内检测到NDA-GSH电泳信号。采用外标法对细胞中的GSH进行定量分析,方法线性范围为0.01~20.00 mmol/L,GSH的检出限和定量限分别为0.006μmol/L和0.020μmol/L,加标回收率和标准偏差分别为95.7%~112.6%和3.8%~5.0%(n=3)。通过建立的方法对HepG2细胞中的GSH进行定量分析,并研究了As(Ⅲ)、As(Ⅴ)、Cr(Ⅲ)和Cr(Ⅵ)刺激细胞后胞内GSH的变化情况。结果表明,在研究剂量水平下,As(Ⅲ)、As(Ⅴ)和Cr(Ⅲ)不会影响HepG2细胞中GSH的含量,而高剂量Cr(Ⅵ)会导致GSH含量显著降低。结合元素毒性数据,说明HepG2细胞内GSH含量与细胞毒性相关,GSH含量会随着细胞毒性增大而降低。 展开更多

关键词 毛细管电泳-激光诱导荧光 谷胱甘肽 砷形态 铬形态 细胞毒性

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分散固相萃取结合毛细管电泳-激光诱导荧光法测定血清中甲基化精氨酸 被引量：1

10

作者 谢士杰 杨泽诚 +3 位作者 周洲 蔺亚辉 苏保满 丁永胜 《中国科学院大学学报（中英文）》 CSCD 北大核心 2020年第4期465-472,共8页

介绍一种分散固相离子交换萃取方法,结合毛细管电泳-激光诱导荧光检测法,测定血清样品中不对称二甲基精氨酸、对称二甲基精氨酸和单甲基精氨酸。将提取甲基化精氨酸的树脂粒加入到4-氯-7-硝基苯并呋喃乙腈溶液和碱性硼酸钠溶液(pH=10.5... 介绍一种分散固相离子交换萃取方法,结合毛细管电泳-激光诱导荧光检测法,测定血清样品中不对称二甲基精氨酸、对称二甲基精氨酸和单甲基精氨酸。将提取甲基化精氨酸的树脂粒加入到4-氯-7-硝基苯并呋喃乙腈溶液和碱性硼酸钠溶液(pH=10.5)的混合溶液中,于60℃水浴中衍生化。在80 mmol/L磷酸盐溶液(pH=2.0)分离电解质和20 kV分离电压条件下,这3种衍生物在熔融石英毛细管中获得基线分离。根据FDA生物分析方法验证指南,进行方法验证,结果满意。利用该方法测定了当地医院血清样品中的3种甲基化精氨酸含量。 展开更多

关键词 甲基化精氨酸 分散固相萃取 4-氯-7-硝基苯并呋喃 毛细管电泳-激光诱导荧光

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毛细管电色谱-激发诱导荧光检测动物性食品中多肽类抗生素 被引量：14

11

作者 雷霄云 宋云萍 +2 位作者 李茜诺 张冰宇 吴晓苹 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期309-316,共8页

以4-氟-7-硝基-2,1,3-苯并呋咱(NBD-F)为荧光试剂,建立了毛细管电色谱-激光诱导荧光(CEC-LIF)检测动物性食品中痕量杆菌肽、多粘菌素B和粘杆菌素等环状多肽抗生素的分析方法。在50 mmol/L的硼酸缓冲液(pH7.5)中,多肽类抗生素经60℃衍生... 以4-氟-7-硝基-2,1,3-苯并呋咱(NBD-F)为荧光试剂,建立了毛细管电色谱-激光诱导荧光(CEC-LIF)检测动物性食品中痕量杆菌肽、多粘菌素B和粘杆菌素等环状多肽抗生素的分析方法。在50 mmol/L的硼酸缓冲液(pH7.5)中,多肽类抗生素经60℃衍生反应45 min。所得衍生产物采用苯基毛细管色谱填充柱进行分离,流动相为乙腈-磷酸盐缓冲液(pH 5.0,10 mmol/L)(55∶45,v/v),辅助压力为3.8 MPa,分离电压为-10 kV,流速为0.02mL/min。结果表明,多肽类抗生素的检出限(S/N=3)为5.0~10.0 ng/mL,满足目标物最大残留限量的检测要求。方法应用于饲料和牛奶样品的分析,平均回收率为72.9%~112.4%。该方法预处理操作简单、灵敏,为动物性食品中兽药残留分离分析提供了新手段。 展开更多

关键词 毛细管电色谱 激光诱导荧光检测 荧光衍生 4-氟-7-硝基-2 1 3-苯并呋咱 多肽类抗生素

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基于二元手性选择剂协同作用的毛细管电泳拆分氨基酸对映体研究 被引量：19

12

作者 陈义 卢小宁 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2002年第5期822-824,共3页

氨基酸的手性拆分在生命的起源、发育、病变及衰老研究中均有重要的意义. 虽然已有基于色谱和毛细管电泳的拆分方法, 但由于氨基酸种类繁多, 性质各异, 因而具有广泛拆分能力的普适性拆分方法还很有限. 组合运用手性选择剂是提高手性分... 氨基酸的手性拆分在生命的起源、发育、病变及衰老研究中均有重要的意义. 虽然已有基于色谱和毛细管电泳的拆分方法, 但由于氨基酸种类繁多, 性质各异, 因而具有广泛拆分能力的普适性拆分方法还很有限. 组合运用手性选择剂是提高手性分离选择性和分离度的一种有效的方法[1～3]. 为此, 我们以毛细管电泳-激光诱导荧光检测(CE-LIF)为分析手段, 研究了手性选择剂的添加组合, 获得了一些具有一定广谱拆分性能的二元手性选择剂协同体系. 本文以β-环糊精(β-CD)和牛磺胆酸钠(STC)为拆分体系, 对20种氨基酸的异硫氰酸酯荧光素(FITC)衍生物进行手性拆分, 分离度均在1.9以上, 其中17种在3.0以上, 最高的达到14.6, 远优于文献[4～6]报道的结果. 展开更多

关键词 二元手性选择剂 毛细管电泳 氨基酸对映体 手性分离 Β-环糊精 牛磺胆酸钠 激光诱导光荧光检测

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单个CD8^+T细胞内IFN-γ含量的测定 被引量：1

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作者 王志杰 张华 +4 位作者 陈学良 金文睿 丛雅琴 韩波 谷燕 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期72-75,共4页

目的: 建立一种新的单细胞内IFN -γ的检测方法毛细管电泳免疫分析激光诱导荧光法 (CEIA- LIF)。方法:选 2例重型再障(severaplasticanemia, SAA)患者及 1例正常人, 用免疫磁珠法分离纯化外周血CD8+ T细胞。将其与毛地黄皂苷反应 15min,... 目的: 建立一种新的单细胞内IFN -γ的检测方法毛细管电泳免疫分析激光诱导荧光法 (CEIA- LIF)。方法:选 2例重型再障(severaplasticanemia, SAA)患者及 1例正常人, 用免疫磁珠法分离纯化外周血CD8+ T细胞。将其与毛地黄皂苷反应 15min, 再与FITC 抗IFN -γ单抗 (mAb)反应20min。用CEIA -LIF法进行单个细胞的连续检测, 并用倒置显微镜及激光扫描共聚焦荧光显微镜等证实本法的可行性。结果: 纯化的CD8+ T细胞内的IFN γ, 是在不溶膜的情况下得到全部检测。2例SAA患者外周血单个CD8+ T细胞内IFN -γ的含量, 分别为 ( 151. 53±28. 92 )zmol和 ( 223. 72±45. 23)zmol, 高出正常对照 ( 47. 47±17. 97 )zmol约 3 ~4倍(P<0. 01)。结论: CEIA LIF法对单个CD8+ T细胞内IFN -γ含量的测定是可行的, 有望用于临床检测。 展开更多

关键词 CD8^+T细胞 Γ-干扰素 毛细管电泳免疫分析 激光诱导荧光检测

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