毒蕈碱型胆碱能受体M3调控肝癌细胞侵袭转移的研究 被引量：6

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作者 张亮 宦宏波 +3 位作者 温旭东 杨大鹏 吴黎雳 夏锋 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期509-514,共6页

目的探讨毒蕈碱型胆碱能受体M3(muscarinic cholinergic receptors 3,ChRM3)活化对人肝癌细胞侵袭、转移能力的影响及其分子机制。方法 Western blot检测两种人肝癌细胞株Hep G2和SMMC-7721中ChRM3受体的表达;采用氯贝胆碱(Beth)及达菲... 目的探讨毒蕈碱型胆碱能受体M3(muscarinic cholinergic receptors 3,ChRM3)活化对人肝癌细胞侵袭、转移能力的影响及其分子机制。方法 Western blot检测两种人肝癌细胞株Hep G2和SMMC-7721中ChRM3受体的表达;采用氯贝胆碱(Beth)及达菲那新(UK88525)处理肝癌Hep G2和SMMC-7721细胞,分为空白对照组、Beth组、Beth+UK88525组、UK88525组,经处理48 h后,Transwell实验检测两种肝癌细胞经不同分组处理后侵袭、迁移能力的变化,Western blot检测各组细胞中上皮-间质转化(epithelial-to-mesenchymal transition,EMT)标志蛋白的表达及下游信号通路PI3K/Akt的变化;采用shRNA干扰质粒经Lipofectamine 2000TM转染肝癌细胞Hep G2以沉默ChRM3,分为空白对照组、Beth组、Beth+sh ChRM3组、sh ChRM3组,分别检测细胞的侵袭、转移能力及EMT、下游PI3K/Akt的改变。结果 Hep G2和SMMC-7721两种肝癌细胞中均有ChRM3受体的表达;Transwell实验显示:Beth单独处理组对肝癌细胞的迁移和侵袭有明显的促进作用,而UK88525能够抑制Beth对肝癌细胞迁移侵袭能力的促进作用(P<0.05);Western blot结果显示:Beth单独处理组能够上调EMT标志蛋白N-Cadherin和Vimentin,下调E-Cadherin的表达,UK88525处理后能够明显抑制Beth促进Hep G2细胞EMT的过程(解除Beth对Hep G2细胞EMT的促进过程),同时也能够抑制PI3K/Akt的活化(P<0.05);干扰质粒沉默ChRM3受体同样能够抑制Beth促肝癌细胞迁移、侵袭的作用,并且抑制Beth诱导的EMT和下游PI3K/Akt的活化(P<0.05)。结论 ChRM3活化能够通过PI3K/Akt信号通路促进肝癌细胞的侵袭和转移。 展开更多

关键词 肝细胞癌 毒蕈碱型胆碱能受体m3 侵袭 转移 上皮-间质转化

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良性前列腺增生合并膀胱过度活动症患者膀胱黏膜毒蕈碱型胆碱能受体M2、M3亚型的表达及临床意义 被引量：2

2

作者 张进生 李玮 +8 位作者 刘宁 渠渊 王立茹 冯超 吴宗山 柴军 张前 刘春林 刘良颖 《中国微创外科杂志》 CSCD 2014年第8期747-750,共4页

目的探讨良性前列腺增生（benign prostatic hyperplasia，BPH）合并膀胱过度活动症（overac tivebladder，OAB）患者膀胱黏膜毒蕈碱型胆碱能受体（muscarinic cholinergic receptor，M受体）M2、M3亚型表达水平的变化及临床意义。方法... 目的探讨良性前列腺增生（benign prostatic hyperplasia，BPH）合并膀胱过度活动症（overac tivebladder，OAB）患者膀胱黏膜毒蕈碱型胆碱能受体（muscarinic cholinergic receptor，M受体）M2、M3亚型表达水平的变化及临床意义。方法分析2012年5月～2013年3月20例BPH患者的国际前列腺症状评分（international prostate syndrome scoring，IPSS）、生活质量评分（quality oflife，QOL）、膀胱过度活动症症状评分（OAB syndrome scoring，OABSS）和尿动力学检查。根据OABSS评分结果将其分为BPH组（9例）及BPH并OAB组（11例）。2组均在膀胱镜下钳取膀胱黏膜，经逆转录聚合酶链式反应（reversetranscription-polymerase chainreaction，RT-PCR）检测M受体M2、M3亚型mRNA的表达水平。M2、M3受体mRNA表达水平采用相对于内参基因mRNA表达的相对值△Ct值表示。比较2组M2、M3受体表达水平及相关性。结果M2、M3受体表达的ACt值BPH组明显低于BPH并OAB组（M2的△Ct值：-0．1544±0．641VS．0．5624±0．762，t=-2．241，P=0．038；M3的△Ct值：2．5344±0．816VS．3．6394±1．019，t=-2．630，P=0．017），说明BPH组M2、M3表达水平均高于BPH并OAB组。2组M2；M3分别为中位数6．5206（2．35～17．33）和7．9447（2．10～23．83）（Z=-1．102，P=0．271）。同组比较，2组M3表达水平均高于M3（t=-7．776，P=0．000；t=-8．018，P=0．000）。M3表达水平与OABSS和QOL评分呈负相关（r=-0．466，P=0．039；r=-0．496，P=0．026）。结论BPH合并OAB症状的患者，其膀胱黏膜M2、M3表达水平下降，且M2：M3比例在合并OAB后有升高的趋势，在OAB发病中起一定作用。M3表达的下降，加重了OAB的程度，降低了患者的生活质量。 展开更多

关键词 良性前列腺增生 膀胱过度活动症 膀胱黏膜 毒蕈碱型胆碱能受体

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海马胆碱能神经刺激肽通过活化3型毒蕈碱受体促进INS-1细胞胰岛素释放

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作者 高飞 陈宏 +3 位作者 张桦 郭南京 徐艳花 蔡德鸿 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期580-582,共3页

目的明确海马胆碱能神经刺激肽(HCNP)对INS-1细胞胰岛素分泌影响,并对其可能作用的毒蕈碱样胆碱能受体途径进行分析。方法 INS-1细胞随机分为3组:对照组、HCNP组、HCNP+佛波酯(PMA)组。对照组给予RPMI 1640液培养,HCNP组给予人工合成HCN... 目的明确海马胆碱能神经刺激肽(HCNP)对INS-1细胞胰岛素分泌影响,并对其可能作用的毒蕈碱样胆碱能受体途径进行分析。方法 INS-1细胞随机分为3组:对照组、HCNP组、HCNP+佛波酯(PMA)组。对照组给予RPMI 1640液培养,HCNP组给予人工合成HCNP(50 pg/ml)与RPMI 1640液共培养,HCNP+PMA组予人工合成HCNP与RPMI 1640液共培养后,行胰岛素释放前18 h加入PMA(10 nmol/L);应用放射免疫方法检测各组不同浓度葡萄糖培养液中胰岛素含量。实时定量PCR检测对照组、HCNP组HCNP前体蛋白(HCNP-pp)、胆碱乙酰转移酶(choline acetyltransferase,ChAT)、3型毒蕈碱样受体(3-typemuscarinic receptor,M3R)基因水平表达情况。结果浓度为3.3 mmol/L葡萄糖,三组间胰岛素含量无明显差异。浓度为5.6mmol/L、16.7 mmol/L葡萄糖作用下,HCNP组胰岛素含量均高于对照、HCNP+PMA组,差异具有统计学意义。HCNP组INS-1细胞HCNP-pp、ChAT、M3R三者mRNA含量均高于对照组,差异具有统计学意义。结论 HCNP通过提高ChAT活性,推测影响乙酰胆碱合成,进一步活化M3R,促进胰岛素分泌,PMA可阻断此作用。 展开更多

关键词 海马胆碱能神经刺激肽 INS-1细胞 胰岛素 3型毒蕈碱受体

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毒蕈碱胆碱能受体3在小细胞肺癌增殖和迁移中的调节作用 被引量：2

4

作者 张淑香 谢灿茂 高桥和久 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期1679-1683,共5页

目的:研究毒蕈碱胆碱能受体3(M3R)在人小细胞肺癌(SCLC)中的表达及其作用。方法:体外培养人SCLC细胞株SBC3和H82,RT-PCR和Western blotting法检测M3R的表达,MTT法和Boyden chamber法分别检测胆碱受体激动剂碘化乙酰胆碱(ACh)及M3R拮抗剂... 目的:研究毒蕈碱胆碱能受体3(M3R)在人小细胞肺癌(SCLC)中的表达及其作用。方法:体外培养人SCLC细胞株SBC3和H82,RT-PCR和Western blotting法检测M3R的表达,MTT法和Boyden chamber法分别检测胆碱受体激动剂碘化乙酰胆碱(ACh)及M3R拮抗剂4-diphenylacetoxy-N-methylpiperidine methiodide(4-DAMP)对SBC3细胞增殖和迁移的影响。结果:SBC3和H82细胞均表达M3R,SBC3细胞M3R蛋白相对表达强度是H82细胞的2.65倍。ACh浓度依赖性地刺激SBC3细胞增殖,10-4和10-3mol/L ACh在48h和72h作用明显(P<0.01)。4-DAMP浓度依赖性地阻断ACh对细胞增殖的刺激作用,48h时,10-5mol/L4-DAMP阻断ACh的作用(P<0.05),至72h,10-7、10-6mol/L(P<0.05)和10-5mol/L(P<0.01)4-DAMP都能阻断ACh的作用。无外源性ACh的情况下,10-6、10-5mol/L4-DAMP在48h都能明显地抑制细胞增殖(P<0.01),在72h,10-5mol/L4-DAMP的作用(P<0.01)强于10-6mol/L4-DAMP(P<0.05)。ACh浓度依赖性地增强SBC3细胞向人纤维结合蛋白(Fn)的迁移,10-4mol/L ACh增加细胞迁移约3倍,10-6、10-5mol/L4-DAMP几乎完全阻断10-4mol/LACh刺激的SBC3细胞迁移(P<0.01)。结论:人SCLC细胞表达M3R,M3R拮抗剂抑制SCLC细胞增殖和迁移。 展开更多

关键词 毒蕈碱胆碱能受体3 肺肿瘤 细胞增殖 细胞迁移

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血清毒蕈碱乙酰胆碱受体m3自身抗体水平对甲胎蛋白阴性肝细胞癌的诊断价值 被引量：4

5

作者 亚库甫·托合提 张凯楠 +4 位作者 赵辉 吾布里塔里甫·达吾提 张蕊 林仁勇 吕国栋 《中国全科医学》 CAS 北大核心 2022年第17期2110-2114,共5页

背景肝细胞癌(HCC)是一种恶性程度较高的癌症。甲胎蛋白(AFP)是临床常用的HCC诊断标志物,但其灵敏度仅为41%~65%,漏诊率较高,因此亟须寻找新的诊断标志物和诊断方法以提升AFP阴性患者等的HCC检出率。目的评估毒蕈碱乙酰胆碱受体m3自身抗... 背景肝细胞癌(HCC)是一种恶性程度较高的癌症。甲胎蛋白(AFP)是临床常用的HCC诊断标志物,但其灵敏度仅为41%~65%,漏诊率较高,因此亟须寻找新的诊断标志物和诊断方法以提升AFP阴性患者等的HCC检出率。目的评估毒蕈碱乙酰胆碱受体m3自身抗体(m3AchR-Ab)对AFP阴性HCC患者的诊断效能,并探索m3AchR-Ab对HCC患者的诊断价值。方法选取2011年11月至2015年9月入库于新疆医科大学第一附属医院标本库的257例患者血清样本,其中90例已确诊为HCC患者的血清样本为HCC组,89例已确诊为良性肝病(肝硬化及肝血管瘤等肝病)患者的血清样本为良性肝病组,78例健康受试者的血清样本为对照组。使用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测并比较3组血清m3AchR-Ab水平,分析血清m3AchR-Ab水平与HCC患者性别、年龄、HCC肿瘤大小(最大直径)和数量、TNM分期、淋巴结转移、远处转移、乙肝表面抗原(HBsAg)的关系,采用受试者工作特征(ROC)曲线评估血清m3AchR-Ab水平对AFP阴性HCC的诊断价值。结果HCC组血清m3AchR-Ab水平高于良性肝病组和对照组血清(P<0.05)。m3AchR-Ab水平与HCC肿瘤大小、TNM分期、淋巴结转移和HBsAg相关(P<0.05)。血清m3AchR-Ab水平诊断AFP阴性HCC的ROC曲线下面积为0.69〔95%CI(0.54,0.83)〕,最佳截断值为74.00 ng/ml,灵敏度为64.00%,特异度为91.02%。血清m3AchR-Ab联合AFP水平诊断HCC的ROC曲线下面积为0.90〔95%CI(0.85,0.95)〕,灵敏度为90.00%,特异度为88.02%。结论血清m3AchR-Ab水平对AFP阴性HCC具有一定的诊断价值,且使用m3AchR-Ab和AFP联合诊断可提高HCC诊断效能,这可为未来研究新型HCC诊断标志物提供更多参考。 展开更多

关键词 肝肿瘤 甲胎蛋白类 毒蕈碱乙酰胆碱受体m3自身抗体 生物标志物 灵敏度 特异度 影响因素分析 诊断

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毒蕈碱型M5受体亚型及生物学特性 被引量：4

6

作者 王丽韫 郑建全 +1 位作者 阮金秀 刘克良 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期10-13,共4页

M5是最后一个被克隆出的乙酰胆碱毒蕈碱型受体亚型,具有G蛋白偶联受体家族的基本结构特征, 其信号转导方式既可以与G蛋白偶联,激活多种效应酶 (腺苷酸环化酶、磷脂酶C、磷脂酶A2 )产生相应的生物学效应,又可作用于离子通道来调节细胞间... M5是最后一个被克隆出的乙酰胆碱毒蕈碱型受体亚型,具有G蛋白偶联受体家族的基本结构特征, 其信号转导方式既可以与G蛋白偶联,激活多种效应酶 (腺苷酸环化酶、磷脂酶C、磷脂酶A2 )产生相应的生物学效应,又可作用于离子通道来调节细胞间的信号传递。M5生理作用主要与调节中枢NO的生成和DA的释放有关,可能为药物滥用成瘾、DA系统功能障碍性疾病、阿尔采末病、脑缺血等的药物治疗提供一个新靶标。 展开更多

关键词 毒蕈碱型m5受体亚型 信号传导途径 一氧化氮合酶 多巴胺能神经通路

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中国人HNPCC家系的临床特征及M3胆碱能受体基因(A)_8区突变检测 被引量：1

7

作者 曹文明 袁瑛 +2 位作者 宋永茂 蔡善荣 张苏展 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 2004年第5期399-402,共4页

目的 :分析中国人遗传性非息肉病性大肠癌 (HNPCC)家系的临床特征并检测这些家系中 M3胆碱能受体基因 (A) 8区的突变情况。方法 :根据 2 0 0 3年 4月杭州会议制定的中国人 HNPCC家系标准收集 HNPCC家系共15个 ,分析其临床特征 ;提取先... 目的 :分析中国人遗传性非息肉病性大肠癌 (HNPCC)家系的临床特征并检测这些家系中 M3胆碱能受体基因 (A) 8区的突变情况。方法 :根据 2 0 0 3年 4月杭州会议制定的中国人 HNPCC家系标准收集 HNPCC家系共15个 ,分析其临床特征 ;提取先证者的外周血基因组 DNA,PCR扩增 M3胆碱能受体基因第 8外显子中一段长 15 3bp,包含有微卫星位点 (A) 8的基因片段 ,直接进行 DNA测序。结果 :15个家系共有恶性肿瘤患者 5 5例 ,其中大肠癌患者 4 1例 ,平均每个家系发生大肠癌 2 .73例 ,73%的大肠癌患者发病年龄 <5 0岁 ,5 1%的病灶位于近端结肠 ,4 0 %发生在直肠肛门 ,同时和异时多原发大肠癌总发生率为 12 % ,2 /3的家系属于 Lynch 型 ,共发生肠外恶性肿瘤 14例 (18个 ) ,其中胃癌最常见。 15例先证者外周血中无 1例检测到 M3胆碱能受体基因 (A) 8区的突变。结论 :M3胆碱能受体基因与中国人群中 HPNCC的发病可能无密切关系。中国人 HNPCC家系标准应在临床工作中推广应用 。 展开更多

关键词 结直肠肿瘤 遗传性非息肉性 m3胆碱能受体 基因表达 突变

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老年早期及老年晚期大鼠脑胆碱能M型受体的改变 被引量：1

8

作者 石瑞如 何路明 +3 位作者 胡雅儿 翁世艾 曹永舒 易宁育 《河南医科大学学报》 1998年第4期39-42,共4页

采用放射自显影技术测定脑切片胆碱能Ｍ型受体，观察大鼠在老年早期和老年晚期不同脑区Ｍ型受体密度的变化。结果：所得脑切片自显影像灰度层次清晰，主要分布在皮质、海马、纹状体等部位，非特异结合灰度很低。图像分析仪分别给出不同... 采用放射自显影技术测定脑切片胆碱能Ｍ型受体，观察大鼠在老年早期和老年晚期不同脑区Ｍ型受体密度的变化。结果：所得脑切片自显影像灰度层次清晰，主要分布在皮质、海马、纹状体等部位，非特异结合灰度很低。图像分析仪分别给出不同脑区的平均灰度值，老年鼠皮质、海马、纹状体的灰度显著低于青年鼠，老年早期大鼠３个脑区分别降低２４８７％，１４１２％，１２７６％（Ｐ＜００５）；老年晚期分别降低２９４５％，２４３３％，１５３１％（Ｐ＜００５）。结论：老年大鼠大脑皮质、海马、纹状体部位胆碱能Ｍ型受体密度显著降低。 展开更多

关键词 胆碱能 m型受体 脑 衰老

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胆碱能药物和人眼组织的M_3受体

9

作者 曾淑君 李苏 +1 位作者 彭大伟 伍宇平 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期665-669,共5页

目的　检测M3受体在人眼组织中的分布 ,探讨M3受体和胆碱能药物的关系。方法　人工合成M3受体特异性胞外肽链段 ,采用杂交瘤技术 ,制备M3受体单克隆抗体 ;用ELISA试验、放射配基受体结合实验和免疫组织化学实验 ,鉴定该抗体的特异性 ;... 目的　检测M3受体在人眼组织中的分布 ,探讨M3受体和胆碱能药物的关系。方法　人工合成M3受体特异性胞外肽链段 ,采用杂交瘤技术 ,制备M3受体单克隆抗体 ;用ELISA试验、放射配基受体结合实验和免疫组织化学实验 ,鉴定该抗体的特异性 ;通过免疫组织化学技术 ,检测M3受体在人眼组织中的分布。结果　虹膜、睫状肌、睫状体非色素上皮、视网膜和小梁网组织分布有M3受体 ,其中睫状肌的纵行纤维的M3受体的分布明显多于环行纤维。结论　人眼组织中广泛分布M3受体 。 展开更多

关键词 胆碱能药物 m3受体 青光眼 m3受体单克隆抗体 抗青光眼药物 免疫组织化学 单克隆抗体

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激活α7烟碱型乙酰胆碱能受体(α7nAchR)增加小鼠海马组织M2型小胶质细胞数量并减轻脓毒症脑病 被引量：9

10

作者 黄鑫怡 郑依婷 +2 位作者 顾婷婷 王佳佳 方宗平 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期540-544,共5页

目的检测α7烟碱型乙酰胆碱能受体(α7nAchR)对M2型小胶质细胞的影响,探索其减轻脓毒症脑病(SAE)的机制。方法采用盲肠结扎穿刺术(CLP)于2月龄雄性C57BL/6小鼠构建SAE模型,比较两组小鼠学习记忆能力的改变。采用Western blot法检测海马... 目的检测α7烟碱型乙酰胆碱能受体(α7nAchR)对M2型小胶质细胞的影响,探索其减轻脓毒症脑病(SAE)的机制。方法采用盲肠结扎穿刺术(CLP)于2月龄雄性C57BL/6小鼠构建SAE模型,比较两组小鼠学习记忆能力的改变。采用Western blot法检测海马组织中α7nAchR的表达变化。给予腹腔注射α7nAchR的激动剂二甲氧基苯亚胺基假木贼碱(GTS-21),观察给予激动剂后海马组织中α7nAchR的表达变化,同时探索GTS-21是否能减轻SAE小鼠的学习记忆障碍。通过免疫荧光细胞化学染色法检测精氨酸酶1(ARG1)、离子钙结合接头蛋白1(Iba-1)的表达确定SAE小鼠M2型小胶质细胞数量的变化,以及GTS-21对M2型小胶质细胞数量的影响。结果SAE小鼠的新物体识别及恐惧记忆能力显著下降,小鼠海马组织中α7nAchR表达显著降低。GTS-21可改善SAE小鼠的学习记忆障碍,增加脑组织中α7nAchR的表达。同时,脓毒症小鼠海马组织中M2型小胶质细胞显著减少,而GTS-21可显著增加M2型小胶质细胞的数量。结论SAE小鼠海马组织中α7nAchR表达降低,使抑制炎症反应的M2型小胶质细胞减少,GTS-21可显著增加M2型小胶质细胞数量,减轻SAE小鼠的学习记忆障碍。 展开更多

关键词 脓毒症脑病(SAE) α7烟碱型乙酰胆碱能受体(α7nAchR) m2型小胶质细胞 胆碱能抗炎通路

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正常和6-羟多巴胺毁损大鼠脚桥核神经元对胆碱能M受体刺激的反应

11

作者 李小颖 向莉 +4 位作者 尤雪梅 惠艳娉 李立博 侯辰 张巧俊 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期531-535,642,共6页

目的在体水平上观察选择性胆碱能M受体激动剂氧化震颤素(Oxo-M)对正常和6-羟基多巴胺(6-OHDA)毁损大鼠脚桥核(PPN)神经元自发电活动的影响。方法采用玻璃微电极细胞外记录和PPN内注射Oxo-M,观察PPN神经元电活动的变化。结果与正常组大... 目的在体水平上观察选择性胆碱能M受体激动剂氧化震颤素(Oxo-M)对正常和6-羟基多巴胺(6-OHDA)毁损大鼠脚桥核(PPN)神经元自发电活动的影响。方法采用玻璃微电极细胞外记录和PPN内注射Oxo-M,观察PPN神经元电活动的变化。结果与正常组大鼠相比,6-OHDA毁损组大鼠PPN神经元的平均放电频率增高(P<0.01),神经元活动趋于不规则(P<0.001);PPN内注射Oxo-M对正常组和6-OHDA毁损组大鼠的PPN神经元放电频率均可产生升高、降低和无变化三种改变。然而,PPN内注射Oxo-M对正常组大鼠PPN神经元的平均放电频率无明显影响,但Oxo-M使6-OHDA毁损组大鼠PPN神经元的平均放电频率显著降低(P<0.001)。结论胆碱能M受体激动剂抑制损毁组大鼠PPN神经元的活动,其作用机制是复杂的,涉及到PPN内突触前和突触后胆碱能受体。 展开更多

关键词 脚桥核 m型胆碱能受体 氧化震颤素 帕金森病 电生理学

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膀胱平滑肌细胞乙酰胆碱M_3受体干扰RNA慢病毒载体的构建

12

作者 尚振华 贾春松 +5 位作者 颜灏 王巨昆 王旭 崔波 王琦 欧彤文 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2018年第3期398-403,共6页

目的构建膀胱平滑肌细胞(bladder smooth muscle cells,BSMCs)M_3型受体干扰RNA慢病毒载体。方法合成4条M_3受体干扰序列,构建GV118-sh-M_3慢病毒载体,测序验证序列。将GV118-sh-M_3慢病毒载体与质粒p Helper1.0、p Helper 2.0三个载体... 目的构建膀胱平滑肌细胞(bladder smooth muscle cells,BSMCs)M_3型受体干扰RNA慢病毒载体。方法合成4条M_3受体干扰序列,构建GV118-sh-M_3慢病毒载体,测序验证序列。将GV118-sh-M_3慢病毒载体与质粒p Helper1.0、p Helper 2.0三个载体共转染293T细胞,收集病毒颗粒并用荧光法检测4组病毒滴度。体外原代培养BSMCs,4组GV118-sh-M_3慢病毒(KD1、KD2、KD3和KD4)转染BSMCs,观察绿色荧光蛋白表达并通过RT-PCR、Western blotting法检测各组干扰效率。结果成功构建4个GV118-sh-M_3慢病毒载体,测序结果符合设计序列。4组GV118-sh-M_3慢病毒滴度分别为2×10~8、6×10~8、5×10~8和5×10~8TU/m L。分别转染BSMCs后,KD1组绿色荧光蛋白表达量最高且干扰效率最高。结论成功包装并筛选了GV118-sh-M_3慢病毒载体,为后续进一步研究干扰M_3受体在神经源性膀胱中的作用奠定了基础。 展开更多

关键词 神经源性膀胱 m3型乙酰胆碱受体 慢病毒载体 RNA干扰

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M3型蕈毒碱受体通过磷酸化/视紫红质抑制蛋白信号调节学习记忆功能

13

作者 别曼 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第A10期1923-1923,共1页

关键词 蕈毒碱受体 m3 视紫红质 学习记忆功能 过磷酸化 信号调节 恐惧条件反射 受体拮抗剂 胆碱能神经 行为学

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莨菪烷类化合物拮抗M_3受体、抑制中性粒细胞弹性蛋白酶活性的研究 被引量：1

14

作者 蔡玉兴 刘慧中 +4 位作者 胡优敏 张建华 金玉杰 李宁 钮因尧 《上海交通大学学报（医学版）》 CSCD 北大核心 2017年第8期1059-1063,共5页

目的·设计、合成5个新莨菪烷类化合物,测试其拮抗M3受体、抑制中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)的活性,初步分析2种活性的构效关系。方法·对莨菪烷母核的C-3α位、N原子进行结构改造,以3α-羟基莨菪烷(A0)为起始物,合成A1~A3、B1、C... 目的·设计、合成5个新莨菪烷类化合物,测试其拮抗M3受体、抑制中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)的活性,初步分析2种活性的构效关系。方法·对莨菪烷母核的C-3α位、N原子进行结构改造,以3α-羟基莨菪烷(A0)为起始物,合成A1~A3、B1、C1。选取豚鼠气道环为测试样本,通过离体组织功能实验,测试目标物对M3受体的拮抗活性。利用NE催化底物PGlu-Pro-ValPNA的水解反应,测定有色产物硝基苯胺(PNA)的吸光度值[D(405 nm)],获得目标物对NE的抑制活性。结果·5个新化合物对M3受体都具有较强的拮抗作用,其中A2的拮抗活性最大,拮抗参数pA_2(M_3)=9.004;并且A2对NE具有较明显的抑制作用(抑制率Y_(A2)=20.29%)。结论·在莨菪烷母核的C-3α位引入强吸电子基团磺酰基和大体积疏水基团时,有利于同时提高化合物拮抗M_3受体、抑制NE的活性。 展开更多

关键词 莨菪烷 毒蕈碱型胆碱能受体 m3 受体拮抗剂 中性粒细胞弹性蛋白酶 构效关系

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选择性M胆碱受体拮抗剂长托宁用于神经外科手术前准备的临床观察 被引量：1

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作者 刘海根 《中国现代神经疾病杂志》 CAS 2005年第5期340-342,共3页

目的比较选择性M胆碱受体拮抗剂盐酸戊乙奎醚(长托宁)和阿托品用于神经外科手术前准备的临床效果。方法选择符合美国麻醉医师协会(ASA)Ⅰ,Ⅱ级择期施行神经外科全身麻醉手术的脑肿瘤患者60例,其中胶质瘤30例,脑膜瘤16例,神经鞘瘤14例。... 目的比较选择性M胆碱受体拮抗剂盐酸戊乙奎醚(长托宁)和阿托品用于神经外科手术前准备的临床效果。方法选择符合美国麻醉医师协会(ASA)Ⅰ,Ⅱ级择期施行神经外科全身麻醉手术的脑肿瘤患者60例,其中胶质瘤30例,脑膜瘤16例,神经鞘瘤14例。随机分为3组,每组各20例:对照组,手术前不予M胆碱受体拮抗剂;阿托品组于麻醉诱导前30min肌内注射阿托品0.5mg;长托宁组麻醉诱导前30min肌内注射长托宁0.5mg。3组患者间年龄、性别、体质量、手术时间及肿瘤种类等各项指标比较差异无显著性意义(P>0.05)。观察记录给予M胆碱受体拮抗剂后,3组患者在麻醉诱导前口腔干燥程度,气管插管后5min、1h、2h和手术结束拔管时呼吸道分泌物量以及心率。结果(1)给药后,阿托品组和长托宁组患者均出现口腔干燥症状。(2)麻醉诱导前及气管插管后各时段,阿托品组和长托宁组患者呼吸道内分泌物量均少于对照组,差异具有显著性意义(均P<0.05),而阿托品组与长托宁组间差异无显著性意义(P>0.05);手术结束拔管时呼吸道分泌物,阿托品组多于长托宁组,差异有显著性意义(P<0.05),但阿托品组和对照组相比,差异无显著性意义(P>0.05)。(3)给药后,阿托品组患者麻醉诱导前心率比长托宁组和对照组增快,差异均有显著性意义(P<0.05);气管插管后各时段和手术结束拔管时,3组患者心率比较差异无显著性意义(P>0.05)。结论选择性新型抗胆碱药物长托宁用于神经外科手术前用药临床效果优于阿托品。 展开更多

关键词 受体 胆碱能 受体 毒蕈碱 阿托品 奎宁环类 脑肿瘤 神经外科手术 m胆碱受体拮抗剂 手术前准备 神经外科 长托宁 临床观察 呼吸道分泌物 全身麻醉手术 肿瘤患者 麻醉诱导

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M3受体遗传变异与血压钠钾反应性的关联研究 被引量：1

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作者 张玺 胡桂霖 +21 位作者 牛泽家馨 杜鸣飞 邹婷 张晓玉 王兰 褚超 廖月圆 马琼 王丹 王科科 贾昊 陈晨 严瑜 孙月 郭统帅 张婕 高卫华 闫睿晨 高可 罗文婧 牟建军 汪洋 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期46-54,共9页

目的M3毒蕈碱乙酰胆碱受体(M3受体)由CHRM3基因编码,广泛分布于心血管系统并发挥重要的心脏调节作用。本研究旨在探讨M3受体遗传变异与钠钾饮食干预后血压反应性之间的关系。方法从中国陕西省农村地区招募来自124个家庭的333名受试者,经... 目的M3毒蕈碱乙酰胆碱受体(M3受体)由CHRM3基因编码,广泛分布于心血管系统并发挥重要的心脏调节作用。本研究旨在探讨M3受体遗传变异与钠钾饮食干预后血压反应性之间的关系。方法从中国陕西省农村地区招募来自124个家庭的333名受试者,经过3 d的基线观察后,依次进行7 d低盐饮食、7 d高盐饮食、7 d高盐补钾饮食。选取13个CHRM3基因单核苷酸多态性(SNP)位点进行相关分析。结果CHRM3基因SNP位点rs10802811与低盐期及高盐期舒张压及平均动脉压反应性显著相关,而rs6429147、rs373288072、rs114677844、rs663148与高盐期收缩压及平均动脉压反应性显著相关。此外,rs6692904与高盐补钾期收缩压、舒张压及平均动脉压反应性显著相关。结论M3受体基因多态性与血压钠钾反应性相关,提示M3受体基因可能参与血压盐敏感性及钾敏感性的形成。 展开更多

关键词 m3毒蕈碱乙酰胆碱受体 基因多态性 血压 盐 钾

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α7烟碱型乙酰胆碱受体在单核/巨噬细胞介导的炎症反应与极化调控中的作用 被引量：4

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作者 陈玲 张虹 +1 位作者 郑长伟 谢凤杰 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期1561-1565,共5页

单核细胞和巨噬细胞在健康和疾病中均发挥重要作用,是固有免疫的重要组成,在其介导的炎症反应中保护宿主、清除病原体和调节免疫平衡,可通过清除细胞碎片、异物及调节炎症和愈合过程等维持内环境稳定。根据微环境和细胞激活状态,巨噬细... 单核细胞和巨噬细胞在健康和疾病中均发挥重要作用,是固有免疫的重要组成,在其介导的炎症反应中保护宿主、清除病原体和调节免疫平衡,可通过清除细胞碎片、异物及调节炎症和愈合过程等维持内环境稳定。根据微环境和细胞激活状态,巨噬细胞可通过改变不同表型影响疾病转归。近二十年人们对胆碱能抗炎通路(CAP)在炎症反应中的作用及机制研究越来越深入,尤其是该通路中的重要结构——α7烟碱型乙酰胆碱受体(α7nAChR),其本质为神经免疫系统的配体门控离子通道,且在调控单核/巨噬细胞吞噬、趋化因子和细胞因子产生、细胞存活和极化等方面发挥重要作用,相关机制涉及NLRP3炎症小体,可作为多种炎症性疾病的潜在治疗靶点。本文综述α7nAChR在炎症和免疫介导的疾病中对单核/巨噬细胞功能调控和极化的作用。 展开更多

关键词 胆碱能抗炎通路 Α7烟碱型乙酰胆碱受体 巨噬细胞 极化 NLRP3炎症小体

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血清APRIL、PLA2R-Ab及25-(OH)D_(3)水平与原发性膜性肾病病情和预后的关系

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作者 郭音 任海青 +2 位作者 郭晓阳 左江华 王婷 《实用医学杂志》 北大核心 2025年第8期1199-1204,共6页

目的探讨增殖诱导配体(APRIL)、M型磷脂酶A2受体抗体(PLA2R-Ab)、25-羟维生素D_(3)[25-(OH)D_(3)]水平变化与原发性膜性肾病(PMN)病情程度及预后的关系。方法采用前瞻性研究模式,选取邢台市人民医院确诊的PMN患者100例作为PMN组,健康体... 目的探讨增殖诱导配体(APRIL)、M型磷脂酶A2受体抗体(PLA2R-Ab)、25-羟维生素D_(3)[25-(OH)D_(3)]水平变化与原发性膜性肾病(PMN)病情程度及预后的关系。方法采用前瞻性研究模式,选取邢台市人民医院确诊的PMN患者100例作为PMN组,健康体检志愿者100例作为对照组,对比两组研究对象的血清APRIL、PLA2R-Ab及25-(OH)D_(3)水平,并按照PNM疾病分期、治疗结局进行分层对比,采用简单线性相关法分析血清APRIL、PLA2R-Ab及25-(OH)D_(3)与肾功能指标的相关性,采用多元回归模型分析上述指标与患者治疗效果预后的关系。结果PMN组的血清APRIL、PLA2R-Ab水平高于对照组,25-(OH)D_(3)水平低于对照组,两组之间差异具有统计学意义(P<0.05);100例PMN患者,Ⅰ期20例、Ⅱ期42例、Ⅲ期34例、Ⅳ期4例,Ⅲ+Ⅳ期患者的血清APRIL、PLA2R-Ab水平高于Ⅰ+Ⅱ期患者,25-(OH)D_(3)水平低于Ⅰ+Ⅱ期患者,两组之间差异具有统计学意义(P<0.05);PMN患者的血清APRIL、PLA2R-Ab水平与尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)、24小时尿蛋白呈显著正相关关系(P<0.05),APRIL、PLA2R-Ab与TP(总蛋白)、白蛋白(ALB)呈负相关关系(P<0.05),PMN患者的血清25-(OH)D_(3)水平与BUN、Scr、24小时尿蛋白呈负相关关系(P<0.05)。经过治疗,有42例患者完全缓解,有58例患者未达到缓解标准,缓解组患者在治疗前、治疗12个月后的血清APRIL、PLA2R-Ab水平均明显低于未缓解组,缓解组患者在治疗前、治疗12个月后的血清25-(OH)D_(3)水平高于未缓解组患者(P<0.05)。结论血清APRIL、PLA2R-Ab水平增高导致的免疫功能异常与PMN发病及病情严重程度有关,肾功能损伤导致血清25-(OH)D_(3)水平明显降低,并且上述三项指标反映出PMN疾病发生、病情程度及预后情况。 展开更多

关键词 增殖诱导配体 m型磷脂酶A2受体抗体 25-羟维生素D3 原发性膜性肾病 预后

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限制性内切酶策略鉴定CRISPR/Cas9介导的Chrm3基因敲除小鼠 被引量：3

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作者 高旭 马宁 +7 位作者 王大勇 张赫 张艳芬 徐亚 贺军 徐书会 霍亚丽 杜智敏 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期404-409,共6页

CRISPR/Cas9技术是近年发展起来的快速基因编辑技术。通过该技术已对多种生物的基因组进行了编辑。由此产生的基因编辑动物的建系与鉴定是随之而来较为繁琐的工作。单导向RNA(single-guide RNA,sgRNA)靶序列的设计和确定不仅影响后续靶... CRISPR/Cas9技术是近年发展起来的快速基因编辑技术。通过该技术已对多种生物的基因组进行了编辑。由此产生的基因编辑动物的建系与鉴定是随之而来较为繁琐的工作。单导向RNA(single-guide RNA,sgRNA)靶序列的设计和确定不仅影响后续靶向基因组的效率,还可作为优化鉴定、筛选方法的参考。本研究在选取sgRNA靶序列时,不仅依据软件的评分,还分析了sgRNA靶序列是否含有酶切位点,以便对后续纯合子/杂合子进行鉴定。结果显示,以特异引物扩增的野生型小鼠Chrm3基因片段可被限制性内切酶BanⅡ切为两个片段;而纯合子小鼠"丢失"该酶切位点,其PCR产物不能被切开;杂合子小鼠PCR产物被不完全切开,凝胶电泳结果可见三条带。本研究结果提示该策略可有效简化基因编辑动物建系鉴定工作,提高鉴定效率及改善阳性动物辨识效果。 展开更多

关键词 CRISPR/Cas9 毒蕈碱型乙酰胆碱受体m3亚型 遗传改变小鼠 纯合子

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M受体对H_2O_2诱导PC12细胞凋亡的保护作用及机制 被引量：1

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作者 江伟健 赵灵芝 +2 位作者 黄亦俊 邱鹏新 颜光美 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第8期930-934,共5页

目的研究毒蕈碱型胆碱受体在抗氧化应激所诱导的凋亡中不同亚型之间是否存在差异。方法用含有M1M4毒蕈碱型胆碱受体亚型的质粒pCDNA3.0转染PC12细胞,加入过氧化氢诱导凋亡,观察氨甲酰胆碱激动毒蕈碱型胆碱受体后各亚型之间抗凋亡能力是... 目的研究毒蕈碱型胆碱受体在抗氧化应激所诱导的凋亡中不同亚型之间是否存在差异。方法用含有M1M4毒蕈碱型胆碱受体亚型的质粒pCDNA3.0转染PC12细胞,加入过氧化氢诱导凋亡,观察氨甲酰胆碱激动毒蕈碱型胆碱受体后各亚型之间抗凋亡能力是否存在差异,同时应用毒蕈碱型胆碱受体抑制剂阿托品,ERK和PI3K信号通路抑制剂PD98059与LY294002观察参与保护作用的相关的信号通路。结果氨甲酰胆碱激动毒蕈碱型胆碱受体后产生抗凋亡效应,各亚型之间没有差异,PI3K信号通路参与了保护作用。结论M1M4亚型毒蕈碱型胆碱受体在对抗过氧化氢诱导的凋亡没有亚型之间的差异,PI3K信号通路参与了保护作用。 展开更多

关键词 凋亡 毒蕈碱型胆碱受体 活性氧 PC12细胞 PI3K

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