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毒蕈碱型胆碱能受体M3调控肝癌细胞侵袭转移的研究 被引量：6
1
作者 张亮 宦宏波 +3 位作者 温旭东 杨大鹏 吴黎雳 夏锋 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期509-514,共6页
目的探讨毒蕈碱型胆碱能受体M3(muscarinic cholinergic receptors 3,ChRM3)活化对人肝癌细胞侵袭、转移能力的影响及其分子机制。方法 Western blot检测两种人肝癌细胞株Hep G2和SMMC-7721中ChRM3受体的表达;采用氯贝胆碱(Beth)及达菲... 目的探讨毒蕈碱型胆碱能受体M3(muscarinic cholinergic receptors 3,ChRM3)活化对人肝癌细胞侵袭、转移能力的影响及其分子机制。方法 Western blot检测两种人肝癌细胞株Hep G2和SMMC-7721中ChRM3受体的表达;采用氯贝胆碱(Beth)及达菲那新(UK88525)处理肝癌Hep G2和SMMC-7721细胞,分为空白对照组、Beth组、Beth+UK88525组、UK88525组,经处理48 h后,Transwell实验检测两种肝癌细胞经不同分组处理后侵袭、迁移能力的变化,Western blot检测各组细胞中上皮-间质转化(epithelial-to-mesenchymal transition,EMT)标志蛋白的表达及下游信号通路PI3K/Akt的变化;采用shRNA干扰质粒经Lipofectamine 2000TM转染肝癌细胞Hep G2以沉默ChRM3,分为空白对照组、Beth组、Beth+sh ChRM3组、sh ChRM3组,分别检测细胞的侵袭、转移能力及EMT、下游PI3K/Akt的改变。结果 Hep G2和SMMC-7721两种肝癌细胞中均有ChRM3受体的表达;Transwell实验显示:Beth单独处理组对肝癌细胞的迁移和侵袭有明显的促进作用,而UK88525能够抑制Beth对肝癌细胞迁移侵袭能力的促进作用(P<0.05);Western blot结果显示:Beth单独处理组能够上调EMT标志蛋白N-Cadherin和Vimentin,下调E-Cadherin的表达,UK88525处理后能够明显抑制Beth促进Hep G2细胞EMT的过程(解除Beth对Hep G2细胞EMT的促进过程),同时也能够抑制PI3K/Akt的活化(P<0.05);干扰质粒沉默ChRM3受体同样能够抑制Beth促肝癌细胞迁移、侵袭的作用,并且抑制Beth诱导的EMT和下游PI3K/Akt的活化(P<0.05)。结论 ChRM3活化能够通过PI3K/Akt信号通路促进肝癌细胞的侵袭和转移。 展开更多
关键词 肝细胞癌 毒蕈碱型胆碱能受体M3 侵袭 转移 上皮-间质转化
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良性前列腺增生合并膀胱过度活动症患者膀胱黏膜毒蕈碱型胆碱能受体M2、M3亚型的表达及临床意义 被引量：2
2
作者 张进生 李玮 +8 位作者 刘宁 渠渊 王立茹 冯超 吴宗山 柴军 张前 刘春林 刘良颖 《中国微创外科杂志》 CSCD 2014年第8期747-750,共4页
目的探讨良性前列腺增生（benign prostatic hyperplasia，BPH）合并膀胱过度活动症（overac tivebladder，OAB）患者膀胱黏膜毒蕈碱型胆碱能受体（muscarinic cholinergic receptor，M受体）M2、M3亚型表达水平的变化及临床意义。方法... 目的探讨良性前列腺增生（benign prostatic hyperplasia，BPH）合并膀胱过度活动症（overac tivebladder，OAB）患者膀胱黏膜毒蕈碱型胆碱能受体（muscarinic cholinergic receptor，M受体）M2、M3亚型表达水平的变化及临床意义。方法分析2012年5月～2013年3月20例BPH患者的国际前列腺症状评分（international prostate syndrome scoring，IPSS）、生活质量评分（quality oflife，QOL）、膀胱过度活动症症状评分（OAB syndrome scoring，OABSS）和尿动力学检查。根据OABSS评分结果将其分为BPH组（9例）及BPH并OAB组（11例）。2组均在膀胱镜下钳取膀胱黏膜，经逆转录聚合酶链式反应（reversetranscription-polymerase chainreaction，RT-PCR）检测M受体M2、M3亚型mRNA的表达水平。M2、M3受体mRNA表达水平采用相对于内参基因mRNA表达的相对值△Ct值表示。比较2组M2、M3受体表达水平及相关性。结果M2、M3受体表达的ACt值BPH组明显低于BPH并OAB组（M2的△Ct值：-0．1544±0．641VS．0．5624±0．762，t=-2．241，P=0．038；M3的△Ct值：2．5344±0．816VS．3．6394±1．019，t=-2．630，P=0．017），说明BPH组M2、M3表达水平均高于BPH并OAB组。2组M2；M3分别为中位数6．5206（2．35～17．33）和7．9447（2．10～23．83）（Z=-1．102，P=0．271）。同组比较，2组M3表达水平均高于M3（t=-7．776，P=0．000；t=-8．018，P=0．000）。M3表达水平与OABSS和QOL评分呈负相关（r=-0．466，P=0．039；r=-0．496，P=0．026）。结论BPH合并OAB症状的患者，其膀胱黏膜M2、M3表达水平下降，且M2：M3比例在合并OAB后有升高的趋势，在OAB发病中起一定作用。M3表达的下降，加重了OAB的程度，降低了患者的生活质量。 展开更多
关键词 良性前列腺增生 膀胱过度活动症 膀胱黏膜 毒蕈碱型胆碱能受体
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莨菪烷类化合物拮抗M_3受体、抑制中性粒细胞弹性蛋白酶活性的研究 被引量：1
3
作者 蔡玉兴 刘慧中 +4 位作者 胡优敏 张建华 金玉杰 李宁 钮因尧 《上海交通大学学报（医学版）》 CSCD 北大核心 2017年第8期1059-1063,共5页
目的·设计、合成5个新莨菪烷类化合物,测试其拮抗M3受体、抑制中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)的活性,初步分析2种活性的构效关系。方法·对莨菪烷母核的C-3α位、N原子进行结构改造,以3α-羟基莨菪烷(A0)为起始物,合成A1~A3、B1、C... 目的·设计、合成5个新莨菪烷类化合物,测试其拮抗M3受体、抑制中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)的活性,初步分析2种活性的构效关系。方法·对莨菪烷母核的C-3α位、N原子进行结构改造,以3α-羟基莨菪烷(A0)为起始物,合成A1~A3、B1、C1。选取豚鼠气道环为测试样本,通过离体组织功能实验,测试目标物对M3受体的拮抗活性。利用NE催化底物PGlu-Pro-ValPNA的水解反应,测定有色产物硝基苯胺(PNA)的吸光度值[D(405 nm)],获得目标物对NE的抑制活性。结果·5个新化合物对M3受体都具有较强的拮抗作用,其中A2的拮抗活性最大,拮抗参数pA_2(M_3)=9.004;并且A2对NE具有较明显的抑制作用(抑制率Y_(A2)=20.29%)。结论·在莨菪烷母核的C-3α位引入强吸电子基团磺酰基和大体积疏水基团时,有利于同时提高化合物拮抗M_3受体、抑制NE的活性。 展开更多
关键词 莨菪烷 毒蕈碱型胆碱能受体 M3 受体拮抗剂 中性粒细胞弹性蛋白酶 构效关系
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