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基于等电聚焦-反相HPLC的虎纹捕鸟蛛毒素组学的初步研究 被引量:4
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作者 周铁杨 周健 +1 位作者 熊继先 王贤纯 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第10期823-831,共9页
虎纹捕鸟蛛(Ornithoctonus huwena)是中国最毒的蜘蛛之一.已有研究表明,其粗毒中含有丰富的低分子量(<10kD)多肽活性成分.为分析这些成分,利用目标蛋白快速分离系统(Proteome LabPF 2D)建立了一种新的二维液相色谱分离方法.该方法包... 虎纹捕鸟蛛(Ornithoctonus huwena)是中国最毒的蜘蛛之一.已有研究表明,其粗毒中含有丰富的低分子量(<10kD)多肽活性成分.为分析这些成分,利用目标蛋白快速分离系统(Proteome LabPF 2D)建立了一种新的二维液相色谱分离方法.该方法包括一维的基于蛋白质等电点(pI)的色谱聚焦分离和二维利用无孔硅胶反相柱的基于疏水性的高效液相色谱分离.得到的反相图谱通过仪器配套的ProteoVue软件转换成与凝胶电泳图像相似的pI/UV图,以更直观地显示多肽成分的数量、分布规律及相对丰度等.洗脱的多肽自动收集后用基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱进行分析.从一维分离的11个馏分(pH4.53~8.59)中共检测到大约600个多肽条带.通过质谱分析测得130个多肽的精确分子量,同时通过Denovo测序得到26种多肽(其中包括12种已知多肽)的部分序列信息,并利用这些序列信息对未知多肽进行了生物信息学分析. 展开更多
关键词 蜘蛛 毒素组学 多肽 二维液相色谱 质谱
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尖吻蝮蛇毒素组双向电泳和二维液相色谱研究 被引量:18
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作者 黄春洪 孔毅 +2 位作者 吴杰连 刘睿 吴梧桐 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期169-173,共5页
目的:初步研究尖吻蝮蛇蛇毒的蛋白质组分及其活性。方法:利用双向电泳和二维色谱(IEX+HPLC)分析尖吻蝮蛇蛇毒蛋白质组,并制备分离样品研究蛇毒中酶和毒素活性。结果:双向电泳分离检测得到128种蛋白质,其中24种蛋白质丰度较高,73种为酸... 目的:初步研究尖吻蝮蛇蛇毒的蛋白质组分及其活性。方法:利用双向电泳和二维色谱(IEX+HPLC)分析尖吻蝮蛇蛇毒蛋白质组,并制备分离样品研究蛇毒中酶和毒素活性。结果:双向电泳分离检测得到128种蛋白质,其中24种蛋白质丰度较高,73种为酸性蛋白质,20种为碱性蛋白质。二维色谱展现58种蛋白质,其中26种蛋白质丰度较高。初步活性研究表明,尖吻蝮蛇蛇毒蛋白质多数属于丝氨酸蛋白酶、金属蛋白酶和磷脂酶A2家族,部分蛋白质可能属于去整合素家族。结论:双向电泳和二维色谱相互结合,有效分析了尖吻蝮蛇毒的蛋白质组成和生物活性。 展开更多
关键词 双向电泳 二维液相色谱 毒素组学 尖吻蝮蛇
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