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死亡相关蛋白激酶1在慢性淋巴细胞白血病中的表达 被引量:1
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作者 张关亭 刘晓静 +1 位作者 吕琳 赵飞跃 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期322-327,共6页
目的:研究死亡相关蛋白激酶1(DAPK1)在慢性淋巴细胞白血病中的表达水平。方法:用慢性淋巴细胞白血病MEC1细胞系及慢性淋巴细胞白血病患者血液标本提取的B淋巴细胞以研究DAPK1基因表达水平,应用mRNA定量检测和免疫蛋白印迹方法检测mRNA... 目的:研究死亡相关蛋白激酶1(DAPK1)在慢性淋巴细胞白血病中的表达水平。方法:用慢性淋巴细胞白血病MEC1细胞系及慢性淋巴细胞白血病患者血液标本提取的B淋巴细胞以研究DAPK1基因表达水平,应用mRNA定量检测和免疫蛋白印迹方法检测mRNA的转录和蛋白的表达情况。结果:mRNA定量和免疫蛋白印迹方法结果表明,慢性淋巴细胞白血病患者体内的DAPK1基因沉默。因此,无论细胞有或没有进行INF-γ处理,MEC1细胞系中DAPK1和自噬相关基因蛋白表达均无明显差异。结论:慢性淋巴细胞白血病中DAPK1基因沉默性表达,使得自噬行为异常。 展开更多
关键词 死亡相关蛋白激酶1 慢性淋巴细胞白血病 自噬
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DAPK1调控癫痫发作诱导的阿尔茨海默病样病变
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作者 邹玉莲 陈洲 甘陈灵 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第12期2283-2288,共6页
目的 探讨死亡相关蛋白激酶1 (death-associated protein kinase 1,DAPK1)对小鼠癫痫发作诱导阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)样病变的调控。方法 C57BL/6小鼠经腹腔注射25 mg·kg^(-1)海人藻酸(kainic acid,KA),建立颞... 目的 探讨死亡相关蛋白激酶1 (death-associated protein kinase 1,DAPK1)对小鼠癫痫发作诱导阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)样病变的调控。方法 C57BL/6小鼠经腹腔注射25 mg·kg^(-1)海人藻酸(kainic acid,KA),建立颞叶癫痫(temporal lobe epilepsy,TLE)模型,对照小鼠注射等量生理盐水,检测小鼠海马体中淀粉样代谢通路中关键蛋白的表达,可溶性β淀粉样蛋白(amyloidβ-protein,Aβ)的分泌,tau的高度磷酸化及DAPK1通路的活化;WT小鼠和Dapk1 KO小鼠经腹腔注射KA,考察DAPK1对KA诱导的AD样病变的影响。结果TLE小鼠海马体中可溶性Aβ的分泌、淀粉样代谢通路中关键蛋白的表达、tau的磷酸化水平,以及DAPK1的表达和活性均高于对照小鼠。相比WT小鼠,Dapk1 KO小鼠海马体中KA诱导的Aβ的分泌和tau的磷酸化水平均明显下降。结论 TLE诱导了小鼠AD样病变,而DAPK1敲除可缓解小鼠脑老化的特征。 展开更多
关键词 癫痫 海人藻酸 死亡相关蛋白激酶1 Β淀粉样蛋白 TAU 阿尔茨海默病
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DAPK1在弥漫性轴索损伤后大鼠脑组织中的表达及其与神经元凋亡的关系 被引量:1
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作者 黄廷钦 宋锦宁 +5 位作者 李宇 胡明军 赵雅慧 郑锋伟 郭小叶 金涛 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期767-773,共7页
目的探讨大鼠弥漫性轴索损伤(diffuse axonal injury,DAI)后神经元凋亡及死亡相关蛋白激酶1(DAPK1)表达变化,为临床治疗提供新的靶点及治疗时间窗。方法 40只SD成年雄性大鼠随机分为对照组(n=8)和DAI组(n=32)。DAI组选用大鼠头颅瞬间旋... 目的探讨大鼠弥漫性轴索损伤(diffuse axonal injury,DAI)后神经元凋亡及死亡相关蛋白激酶1(DAPK1)表达变化,为临床治疗提供新的靶点及治疗时间窗。方法 40只SD成年雄性大鼠随机分为对照组(n=8)和DAI组(n=32)。DAI组选用大鼠头颅瞬间旋转装置制备DAI模型,分为6h、24h、72h、7d组共4个亚组(n=8)。各组在造模前及处死前采用改良神经功能缺损评分(mNSS)对大鼠神经功能进行评分;同时将各组大鼠一半用于Western bolt检测大鼠胼胝体、脑干组织内DAPK1表达情况;另一半用于TUNEL检测大鼠脑组织内神经元细胞凋亡情况。结果 DAI后大鼠均出现明显体质量下降、神经功能缺失;DAI后6h组大鼠胼胝体、脑干组织可见DAPK1蛋白表达明显升高,并出现明显神经元细胞凋亡,DAI后24h组DAPK1表达及神经元细胞凋亡均到达高峰值,DAI后72h、7d组表达开始下降,仍明显高于对照组。结论 DAI后出现神经功能缺失、体质量下降,可能与损伤后DAPK1表达及神经元细胞凋亡有关,二者在损伤后24h一致性达到高峰;提示DAPK1抑制剂药物治疗时间窗为伤后24h。 展开更多
关键词 弥漫性轴索损伤 死亡相关蛋白激酶1(DAPK1) 神经元凋亡
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水杨酸钠诱导大鼠耳蜗中DAPK1表达改变 被引量:1
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作者 翟思佳 黄巧 +2 位作者 廖行伟 刘宇超 尹时华 《中华耳科学杂志》 CSCD 北大核心 2020年第3期552-558,共7页
目的探讨死亡相关蛋白激酶1(death associated protein kinase 1,DAPK1)是否参与水杨酸钠损伤听觉系统的过程。方法将听性脑干反应(ABR)反应阈小于40dB和畸变产物耳声发射(DPOAE)筛查通过的40只SD大鼠随机分为2组:对照组(control组)和... 目的探讨死亡相关蛋白激酶1(death associated protein kinase 1,DAPK1)是否参与水杨酸钠损伤听觉系统的过程。方法将听性脑干反应(ABR)反应阈小于40dB和畸变产物耳声发射(DPOAE)筛查通过的40只SD大鼠随机分为2组:对照组(control组)和水杨酸钠组(SS组)。SS组腹腔注射350mg/kg/d水杨酸钠,对照组腹腔注射等量生理盐水。造模结束后通过ABR、DPOAE等电生理方法确认听觉损害程度;通过HE染色及免疫组化等形态学方法检测耳蜗的病理生理变化和DAPK1蛋白表达分布情况;应用实时荧光定量PCR对各组大鼠耳蜗组织中DAPK1 mRNA转录表达情况进行检测。结果SS组DAPK1 m RNA和蛋白表达水平较对照组表达均减少,差异具有统计学意义,且改变主要集中于耳蜗螺旋神经节(SNG)区域。结论水杨酸钠使大鼠耳蜗尤其SNG中DAPK1的表达下调,DAPK1参与水杨酸钠损伤听觉系统的过程。 展开更多
关键词 水杨酸钠 耳蜗 死亡相关蛋白激酶1 炎性调节
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慢病毒敲减质粒pLKO.1-shDAPK1的构建及其对细胞凋亡的影响
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作者 秦坤 徐绍业 +3 位作者 韩雨 闫建国 夏春波 邵晓云 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2022年第6期715-720,共6页
目的 构建敲减死亡相关蛋白激酶1(shDAPK1)基因的慢病毒质粒及稳转神经母细胞瘤细胞系(SH-SY5Y),并检测SH-SY5Y细胞中DAPK1敲减后对细胞凋亡的影响。方法 设计并合成特异性敲减DAPK1基因的上下游引物,将引物退火后与双酶切PLKO.1载体经T... 目的 构建敲减死亡相关蛋白激酶1(shDAPK1)基因的慢病毒质粒及稳转神经母细胞瘤细胞系(SH-SY5Y),并检测SH-SY5Y细胞中DAPK1敲减后对细胞凋亡的影响。方法 设计并合成特异性敲减DAPK1基因的上下游引物,将引物退火后与双酶切PLKO.1载体经T4连接酶连接、转化、提取质粒并进行DNA测序,获得重组正确的慢病毒干扰质粒pLKO.1-shDAPK1。将该重组的质粒与辅助质粒psPAX2和pMD2.G共转染HEK293T细胞,72 h后收集慢病毒上清液,感染SH-SY5Y细胞,利用嘌呤霉素进行阳性筛选,得到稳定敲减DAPK1的SH-SY5Y细胞系。利用Western blot检测SH-SY5Y稳转细胞系中DAPK1蛋白以及用1-甲基-4-苯基-吡啶离子(MPP+)处理后的Bax、Bcl-2及Caspase-3的蛋白表达水平,并应用流式细胞术检测SH-SY5Y细胞的凋亡情况。结果 重组pLKO.1-shDAPK1质粒的测序比对结果正确,嘌呤霉素筛选后获得shDAPK1稳转SH-SY5Y细胞系(shDAPK1-SY5Y),该稳转细胞系中DAPK1蛋白表达水平与对照组相比显著下降,此外还上调了Bcl-2蛋白的表达,下调Bax、Caspase-3蛋白的表达且流式检测结果显示该细胞系凋亡发生率明显下降。结论 成功构建了慢病毒敲减质粒pLKO.1-shDAPK1,并建立了DAPK1低表达的SH-SY5Y稳定感染细胞系,明显抑制了细胞凋亡。 展开更多
关键词 死亡相关蛋白激酶1 慢病毒 质粒构建 人骨髓神经母细胞瘤细胞 细胞凋亡
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